茶皂素在制备肠道菌群调节产品中的应用

本发明属于天然活性成分，具体涉及茶皂素在制备肠道菌群调节产品中的应用。

背景技术：

1、茶皂素是山茶属植物(camellia l.)茶籽和茶花中存在的一类五环三萜齐墩果烷型皂苷，又名茶皂苷，是一种天然的非离子型表面活性剂，具有乳化、去污、分散、润湿、发泡等多种表面活性，被广泛用作日化用品添加剂，如公开号为cn111592578a的中国专利文献公开了山茶粕中的茶皂素提取工艺及其在氨基酸洁面皂中的应用，公开号为cn112274454a的中国专利文献公开了利用茶树花皂素来制备护肤组合物，公开号为cn111529457a的中国专利文献公开了利用茶皂素等物质制备调节菌群的含茶组方牙膏等，公开号为cn102138884a的中国专利文献公开了一种应用于洗护产品的组合物，该组合物是由茶皂素1～15份，丁香油1～2份，硼砂5～15份组成。同时，茶皂素也具有多种生物学活性，如公开号为cn111973610a的中国专利文献公开了茶皂素在制备预防或治疗抑郁症药物中的应用，公开号为cn113142101a的中国专利文献公开了茶皂素在制备夜光虫灭杀制剂中的应用，公开号为cn104068020a的中国专利文献公开了茶皂素在防治大豆孢囊线虫病害上的应用等。目前茶皂素的提取工艺已得到广泛研究，通过醇水溶液法来提取山茶粕中茶皂素的技术较为成熟，因此，有必要开发研究茶皂素的新用途以期实现其高值化利用。

2、肠道菌群是长期存在于肠道内的微生物，其种类繁多，数量庞大，各种微生物相互制约，相互依存；肠道菌群一方面可以帮助宿主消化食物，促进肠道对营养物质的吸收，另一方面与宿主的生长、发育、物质代谢、衰老等关系密切，对宿主健康起着及其重要的作用，研究表明，肠道菌群失调很可能是一些代谢疾病的直接诱因。

3、一些天然植物提取物被证明具有调节肠道菌群的作用，如公开号为cn113749256a的中国专利文献公开了大蒜多糖在调节肠道菌群功能中的应用，具体的，大蒜多糖能增加肠道益生菌阿克曼氏菌(akkermansia)的含量；公开号为cn111808207a的中国专利文献公开了天冬多糖在肠道菌群调节中的应用，天冬多糖通过调整肠道内腔的ph值，促进短链脂肪酸的产生，从而对肠道产生相应有益的影响，另外天冬多糖还能够促进有益菌群普氏菌属和巨单胞菌属的增加，抑制嗜血杆菌属，降低拟杆菌属与普氏菌属的比值；公开号为cn111135158a的中国专利文献公开了西红花酸用于调节肠道菌群失调，实验表明西红花酸可调节肠道菌群的结构，使抑郁小鼠的肠道菌群结构更接近正常组；公开号为cn113827610a的中国专利文献公开了一种来源于褐藻的肠道菌群调节剂，该肠道菌群调节剂的主要成分为提取自褐藻的岩藻多糖，经动物实验表明该肠道菌群调节剂能够改善肠道菌群紊乱，并改善高脂饮食诱导的代谢失调。

4、益生芽孢杆菌是肠道菌群中一类重要的益生菌，其具有可耐受高温和胃肠道环境、可分泌多种活性代谢产物等优势，其不仅能通过分泌抗菌代谢物拮抗病原菌在肠道的定殖，而且还能合成多种酶和活性小分子等降低肠道炎性反应。

技术实现思路

1、为了实现茶皂素的高值化利用，同时解决目前肠道菌群调节产品品种少、价格高的问题，本发明提供了茶皂素在制备肠道菌群调节产品中的应用。

2、具体采用的技术方案如下：

3、茶皂素在制备肠道菌群调节产品中的应用，所述的肠道菌群调节产品用于增加肠道内芽孢杆菌属(bacillus)和拟普雷沃菌属(alloprevotella)的丰度。

4、本发明还提供了茶皂素在制备防治肠道疾病产品中的应用，所述的肠道疾病包括肠道炎症、肠道菌群和免疫失调。

5、采用环磷酰胺诱导的小鼠免疫抑制和肠道损伤模型，灌胃给予茶皂素，结果表明其能显著保护肠黏膜，提高肠道结合蛋白occludin、以及肿瘤坏死因子α(tnf-α)、白细胞介素6(il-6)和免疫球蛋白a(iga)的蛋白表达。肠道微生物组分析表明茶皂素能够调节肠道微生物群落结构，特别是增加了芽孢杆菌属(bacillus)和拟普雷沃菌属(alloprevotella)的丰度。血清代谢组分析显示茶皂素显著上调18种代谢产物，显著下调15种代谢产物，其中有8种代谢产物与芽孢杆菌和异普雷沃氏菌显著相关。这些研究表明茶皂素可以改善环磷酰胺诱导的免疫失衡、肠道屏障破坏和肠道微生态失调，可用于调节肠道稳态。

6、本发明还提供了一种肠道菌群调节剂，包括茶皂素。

7、优选的，所述的肠道菌群调节剂还包括食品学上可接受的添加剂。

8、优选的，所述的肠道菌群调节剂在使用时，保持茶皂素的使用剂量为10～30mg/kg/d。上述使用剂量是以小鼠的剂量计，可根据使用物种的不同来进行换算。

9、本发明还提供了一种用于肠道疾病防治的制剂，包括茶皂素。

10、优选的，所述的用于肠道疾病防治的制剂还包括药学上可接受的载体、赋形剂和稀释剂中的至少一种。

11、优选的，所述的用于肠道疾病防治的制剂在使用时，保持茶皂素的使用剂量为10～30mg/kg/d。上述使用剂量是以小鼠的给药剂量计，可根据使用物种的不同来进行换算。

12、本发明还提供了一种利用茶皂素促进芽孢杆菌生长的方法，包括：将茶皂素加入到lb培养基中，添加量为lb培养基体积的0.5～5g/l，用于芽孢杆菌的培养。

13、具体的：配制培养基，在950ml去离子水中加入：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，nacl10g，摇动容器直至溶质溶解；用5mol/l naoh调ph至7.0，用去离子水定容至1l，在15psi高压下蒸汽灭菌21min后，再按0.5～5g/l的添加量加入茶皂素，进行芽孢杆菌接种培养。

14、经体外实验证明，茶皂素在培养基中的加入，一方面水解后能够为芽孢杆菌的生长提供碳源，另一方面作为表面活性剂可能改变了芽孢杆菌的渗透性，有利于养分的进入和吸收。

15、优选的，所述的茶皂素在lb培养基中的添加浓度为1～2g/l。

16、与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

17、(1)肠道稳态包括肠道屏障、肠道菌群和肠道免疫多方面的综合平衡，与人体健康以及多种疾病(如肥胖、糖尿病、肿瘤、炎症等)的发生发展密切相关，综合调节肠道稳态的天然功能因子具有广阔应用前景。本发明应用茶皂素能够有效的保护肠道屏障的结构完整性，提高绒毛高度与隐窝深度之比(v/c)，上调肠道结合蛋白occludin的表达。iga是肠道中最丰富的免疫球蛋白，是机体抵抗病原菌和外毒素的重要防线；tnf-α和il-6肠道中的重要免疫调节因子。茶皂素显著提高了iga、tnf-α和il-6的蛋白水平，表明其对肠道免疫具有显著改善作用。此外，茶皂素显著提高了肠道菌的群落结构，影响了β多样性指数，特别是显著增加芽孢杆菌属(bacillus)和拟普雷沃菌属(alloprevotella)的丰度；芽孢杆菌能够产生抗菌肽和胞外互作因子与宿主互作；拟普雷沃菌属能够产生短链脂肪酸，二者均是备受关注的肠道益生菌。因此，茶皂素在制备肠道菌群调节产品、防治肠道疾病产品方面极具潜力。

18、(2)芽孢杆菌在农业、工业、食品健康等领域具有重要的应用价值，体外实验表明茶皂素可以促进芽孢杆菌生长，因此，茶皂素不但能够作为培养基添加剂促进芽孢杆菌生长，还能够作为芽孢杆菌增效剂使用，用来提高芽孢杆菌生防菌剂的防效。