使用抗TIGIT抗体的癌症治疗方法与流程

本技术涉及特异性结合至tigit(具有ig和itim结构域的t细胞免疫受体)的抗体与抗pd1抗体组合用于治疗癌症。

背景技术：

1、tigit(t细胞免疫球蛋白和itim结构域)是i型跨膜蛋白，是cd28蛋白家族的成员，其在抑制抗肿瘤免疫中t细胞和nk细胞介导的功能活性中起重要作用(boles ks,等人,2009eur.j immunol,39:695-703；stanietsky n,等人,2009pnas106:17858-63；yu x,等人2009nat.immunol,10:48-57)。

2、在小鼠和人中克隆并表征编码tigit的基因和cdna。全长人tigit具有长度为244个氨基酸的序列(seq id no:26)，其中前21个氨基酸由信号肽组成。成熟人tigit的氨基酸序列含有223个氨基酸(aa)残基(ncbi登录号：nm_173799)。成熟人tigit的细胞外结构域(ecd)由120个氨基酸残基组成(对应于seq id no:26的氨基酸22-141)，其中具有v型ig样结构域(对应于seq id no:26的氨基酸39-127)，随后是21个aa的跨膜序列和82个aa的具有基于免疫受体酪氨酸的抑制性基序(itim)的胞质结构域(yu x,等人2009nat.immunol,10:48-57；stengel kf,等人2012pnas109:5399-04)。在ecd中，人tigit分别与小鼠和食蟹猴仅共享59％和87％的氨基酸序列同一性。

3、tigit在t细胞(包括活化t细胞、记忆t细胞、调节性t(treg)细胞和滤泡t辅助(tfh)细胞)和nk细胞上表达(boles ks,等人,2009eur j immunol,39:695-703；joller n,等人,2014immunity 40:569-81；levin sd,等人,2011eur j immunol,41:902-15；stanietsky n,等人,2009pnas106:17858-63；yu x,等人2009nat.immunol,10:48-57)。

4、迄今为止，已经鉴定了两种tigit配体：cd155(也称为脊髓灰质炎病毒受体或pvr)和cd112(也称为脊髓灰质炎病毒受体相关2，pvrl2，nectin-2)。这些配体主要在apc(诸如树突细胞和巨噬细胞)和肿瘤细胞上表达(casado jg,等人,2009cancer immunolimmunother58:1517-26；levin sd,等人,2011eur.j immunol,41:902-15；mendelsohn cl等人,1989 56:855-65；stanietsky n,等人,2009pnas 106:17858-63；yu x,等人2009nat.immunol,10:48-57)。作为免疫“检查点”分子，tigit在与其配体cd155和cd112接合时启动免疫细胞中的抑制性信号传导。tigit对cd155的结合亲和力(kd：约1nm)远高于对cd112的结合亲和力，tigit:cd112相互作用是否在介导抑制性信号方面具有功能相关性仍有待确定。共刺激受体cd226(dnam-1)以较低的亲和力结合至相同的配体(kd：约100nm)，但递送阳性信号(bottino c,等人,2003j exp med 198:557-67)。此外，cd96(tactile)，一种“tigit样”受体，也在相同途径中发挥类似的抑制性作用(chan cj,等人,2014nat.immunol15:431-8)。

5、已报道肿瘤浸润淋巴细胞(til)和外周血单核细胞(pbmc)中tigit表达的上调存在于许多类型的癌症中，例如肺癌(tassi,等人,cancer res.2017 77:851-861)、食管癌(xie j,等人,oncotarget 20167:63669-63678)、乳腺癌(gil del alcazar cr,等人2017cancer discov.)、急性髓性白血病(aml)(kong y等人,clin cancer res.2016 22:3057-66)和黑素瘤(chauvin jm,等人,j clin invest.2015 125:2046-2058)。aml中tigit的增加的表达与患者存活结果的不良预后相关(kong y等人,clin cancer res.2016 22:3057-66)。tigit信号传导的上调不仅在对癌症的免疫耐受中发挥重要作用，而且在对慢性病毒感染的免疫耐受中也发挥重要作用。在hiv感染期间，t细胞上tigit的表达显著较高，并且与病毒载量和疾病进展正相关(chew gm,等人,2016plos pathog.12:e1005349)。此外，单独或与其他阻断组合的tigit受体的阻断可在体外和体内拯救功能性“耗尽的”t细胞(chauvin jm,等人,j clin invest.2015 125:2046-2058；chew gm,等人,2016plospathog.12:e1005349；johnston rj,等人cancer cell 2014 26:923-937)。在癌症和病毒感染的情况下，tigit信号传导的活化促进免疫细胞功能障碍，导致癌症增生或延长的病毒感染。通过治疗剂抑制tigit介导的抑制性信号传导可恢复免疫细胞(包括t细胞、nk细胞和树突细胞(dc))的功能活性，并因此增强针对癌症或慢性病毒感染的免疫力。

6、因此，具有增强的效应功能的抗tigit抗体可在癌症或慢性病毒感染的治疗中诱导有效的免疫应答。

技术实现思路

1、本公开涉及施用抗tigit抗体的癌症治疗方法。

2、一种癌症治疗的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的ph依赖性抗tigit抗体或其抗原结合片段。

3、所述方法，其中所述抗tigit抗体在氨基酸组氨酸76处结合至所述tigit蛋白。

4、所述方法，其中所述抗tigit抗体在组氨酸76和亮氨酸73处结合至所述tigit蛋白。

5、所述方法，其中所述方法包括向受试者施用有效量的ph依赖性抗体或其抗原结合片段，所述ph依赖性抗体或其抗原结合片段特异性结合至人tigit并且包含：重链可变区，其包含seq id no:1的hcdr(重链互补决定区)1、seq id no:2的hcdr2和seq id no:3的hcdr3；以及轻链可变区，其包含seq id no:4的lcdr(轻链互补决定区)1、seq id no:5的lcdr2和seq id no:6的lcdr3。

6、所述方法，其中所述抗tigit抗体或其抗原结合片段包含：包含seq id no:7的重链可变区(vh)，和包含seq id no:8的轻链可变区(vl)。

7、所述方法，其中所述抗tigit抗体具有增强的抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)活性。

8、所述方法，其中所述抗tigit抗体具有降低的岩藻糖基化。

9、所述方法，其中所述抗tigit抗体在s239d和i332e(eu编号)处具有fc氨基酸改变。

10、所述方法，其中所述抗tigit抗体在s239d、i332e和a330l(eu编号)处具有fc氨基酸改变。

11、上述任一项所述的方法，其中所述抗tigit抗体对fcγriiia-v158和fcγriiia-f158具有增加的结合亲和力。

12、上述任一项所述的方法，其中所述抗tigit抗体在t-调节性(treg)细胞中具有增强的adcc。

13、上述任一项所述的方法，其中所述抗tigit抗体活化自然杀伤(nk)细胞。

14、上述任一项所述的方法，其中所述抗tigit抗体具有增加的胞啃作用(trogocytosis)。

15、上述方法，其中所述方法还包括施用抗pd1抗体，所述抗pd1抗体特异性结合人pd1并且包含：重链可变区，其包含seq id no:15的hcdr1、seq id no:16的hcdr2和seq id no:17的hcdr3；以及轻链可变区，其包含seq id no:18的lcdr1、seq id no:19的lcdr2和seqid no:20的lcdr3。

16、上述方法，其中所述抗pd1抗体或其抗原结合片段特异性结合人pd1并且包含：包含seq id no:21的氨基酸序列的重链可变区(vh)，和包含seq id no:22的氨基酸序列的轻链可变区(vl)。

17、所述方法，其中所述抗pd1抗体包含：包含seq id no:23的igg4恒定结构域。

18、所述方法，其中所述癌症选自由以下项组成的组：乳腺癌、结肠癌、胰腺癌、头颈癌、胃癌、肾癌、肝癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、食管癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、皮肤癌、间皮瘤、淋巴瘤、白血病、骨髓瘤或肉瘤。

19、所述方法，其中所述癌症是非小细胞肺癌。

20、所述方法，其中所述头颈癌是鼻咽癌。

21、所述方法，其中所述食管癌是食管鳞状细胞癌(escc)。

22、所述方法，其中所述癌症是子宫癌。

23、所述方法，其中所述胃癌是胃或胃食管连接部癌。

24、所述方法，其中所述宫颈癌是复发或转移性宫颈癌。

25、所述方法，其中所述癌症是肾癌。

26、所述方法，其还包括施用化疗。

27、所述方法，其中所述化疗是放化疗。

28、所述方法，其中所述抗pd1抗体以每三周200mg给药。