一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物及其制备方法和应用与流程

本发明属于药物制剂，具体涉及一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素a组合物及其制备方法和应用；尤其涉及一种羟基红花黄色素a(hsya)舌下片及其制备方法，以及所述舌下片在急性脑卒中患者中的应用。

背景技术：

1、口腔黏膜给药系统是指制剂作用于口腔部位发挥局部治疗或通过口腔黏膜直接吸收进入体循环发挥全身治疗的一种新型给药系统，已被视为常规口服和注射给药的一种有效替代给药途径，特别适用于首过效应明显和口服生物利用度低的药物，对酸、酶敏感的蛋白质、多肽和核酸类药物给药。口腔生理环境温和，ph值近中性且酶活性较低，药物黏膜吸收无肝脏首过代谢，具有给药方便、易于去除、患者依从性高的特点。口腔黏膜的主要给药部位为舌下和颊部，其中舌下黏膜薄且非角质化，渗透性强于颊黏膜是速效药的首选给药部位。药物经口腔黏膜吸收快速，可用于急症治疗。目前国内外已有多个口腔黏膜制剂上市，包括盐酸丁丙诺啡舌下片、盐酸纳洛酮舌下片、枸橼酸芬太尼口腔贴片、复方庆大霉素膜和复方氯己定地塞米松膜等。理想的适于口腔黏膜递送的药物应具备以下理化性质：分子质量<800da，溶解度>1mg/ml，logp值(辛醇/水)>2.0，有效剂量<10mg/d，饱和水溶液的ph值为5～9，对黏膜无刺激性。

2、羟基红花黄色素a(hsya)为黄色粉末，分子式为c27h32o16，相对分子质量为612.5。分子结构中含有多个羟基，极性大，极易溶于水，溶解于甲醇，微溶于乙醇。脂溶性虽然差，但在25℃时logp为2.98，表明其已经具有一定的膜通透性。溶解度高、透膜性差，在生物药剂学分类系统(biopharmaceutics classification system，bcs)中属于ⅲ类。目前仅有注射剂型上市，用于治疗急性缺血性脑卒中患者，给药剂型和给药途径较为单一，严重制约了其临床应用。由于其水溶性强、脂溶性差的特点，胃肠道给药生物利用度极低，急需开发一种给药方便的新型给药途径。

3、hsya的吸收属于被动扩散，包括经细胞途径和细胞旁路途径两种方式。增加跨膜吸收主要途径包括①采用吸收促进剂，促进经细胞途径或细胞旁路途径的被动扩散；②与亲脂性物质形成脂质复合物，提高脂溶性以促进吸收。

4、根据上述特点，本发明提供了一种新的剂型或新的给药方式。hsya舌下片味道清淡，不含特殊防腐剂且对口腔黏膜几乎无刺激作用，临床给药简单，患者顺应性较高，起效迅速，适合作为治疗急性缺血性脑卒中患者经口腔黏膜给药的药物。

技术实现思路

1、本发明主要提供了一种hsya的新的给药方式，解决了以往剂型存在的生物利用率低，或者使用不方便的缺点，建立了经口腔黏膜给药的hsya组合物。

2、本发明提供的hsya组合物，具体的为羟基红花黄色素a-十二烷基麦芽糖苷-硫醇化壳聚糖的组合物。

3、本发明提供的hsya组合物，hsya为高水溶性物质，吸收过程主要为被动转运，十二烷基麦芽糖苷是一种表面活性剂，通过作用于黏膜，增加黏膜中细胞间隙，从而提高hsya的被动转运，且对于细胞膜的作用是可逆的。

4、本发明提供的hsya组合物，hsya为高水溶性物质，吸收过程主要为被动转运，硫醇化壳聚糖(cs-sh/tcs)是一种黏膜黏附聚合物，通过作用于黏膜，增加黏膜中细胞间隙，从而提高hsya的被动转运，并且通过将药物包裹并吸附在吸收部位，增加药物在吸收部位的驻留时间，从而减慢在血液中的代谢，延长作用时间。

5、本发明提供的组合物中表面活性剂和黏膜吸附聚合物为黏膜吸收促进剂，常见的黏膜吸收促进剂及其作用机制和代表性化合物如下。

6、文献：吸收促进剂的作用机制及其在鼻腔给药中的研究进展(张婷，李蒙等，《中国医院药学杂志》2022年)报道了各种黏膜吸收促进剂，作用机制和代表性化合物见下表：

7、

8、

9、文献中环糊精类吸收促进剂适用于缓控释制剂，不满足口腔黏膜给药的质量要求(迅速崩解)，醇类、亚砜类、螯合剂、水杨酸类较适合液体给药途径，可能经舌下吸收，具有一定的副作用。

10、羟基红花黄色素a具有溶解度高、透膜性差的特点，在生物药剂学分类系统中属于bcsⅲ类。hsya的吸收属于被动扩散，包括经细胞途径和细胞旁路途径两种方式，经口腔黏膜给药时，增加跨膜吸收主要途径为采用吸收促进剂，促进经细胞途径或细胞旁路途径的被动扩散。

11、因此通过添加烷基糖苷类、表面活性剂类、胆酸盐类吸收促进剂促进羟基红花黄色素a经细胞途径或细胞旁路途径的被动扩散，并通过添加黏膜黏附聚合物类吸收促进剂增加羟基红花黄色素a在黏膜中的黏附作用，从而延长药物在黏膜中的停留时间。

12、本公开提供一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素a组合物，包括药物活性成分和功能性非活性成分；

13、所述药物活性成分包括羟基红花黄色素a(hsya)；

14、所述功能性非活性成分包括表面活性剂和/或黏膜黏附聚合物。

15、在一些优选地实施方案中，所述表面活性剂选自以下中的任意一种或多种：十二烷基麦芽糖苷(ddm)、脱氧甘胆酸钠(sdgc)、n-[8-(2-羟基苯甲酰基)氨基]辛酸钠(snac)、十二烷基硫酸钠(sds)、聚山梨酯80(tw80)；

16、在一些更优选地实施方案中，所述表面活性剂为十二烷基麦芽糖苷(ddm)。

17、在一些优选地实施方案中，所述黏膜黏附聚合物选自以下中的任意一种或多种：硫醇化壳聚糖(cs-sh/tcs)、氨基葡聚糖(dextran-nh2)、聚赖氨酸(pll)、海藻酸钠(sa，cr8133)；

18、在一些更优选地实施方案中，所述黏膜黏附聚合物为硫醇化壳聚糖(cs-sh/tcs)。

19、在一些优选地实施方案中，所述药物活性成分、表面活性剂、黏膜黏附聚合物的质量份为(18～22份)：(0.2～0.3份)：(8～12份)；

20、在一些更优选地实施方案中，所述药物活性成分、表面活性剂、黏膜黏附聚合物的质量份为20份：0.3份：10份。

21、在一些优选地实施方案中，所述的一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素a组合物，其中，包括羟基红花黄色素a、十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖；按质量份计，三者用量比为，羟基红花黄色素a：十二烷基麦芽糖苷：硫醇化壳聚糖＝(18～22份)：(0.2～0.3份)：(8～12份)。

22、在一些更优选地实施方案中，所述的一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素a组合物，其中，包括羟基红花黄色素a、十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖；按质量份计，三者用量比为，羟基红花黄色素a：十二烷基麦芽糖苷：硫醇化壳聚糖＝20份：0.3份：10份。

23、本公开还一种包含前述组合物的药物制剂，(羟基红花黄色素a-十二烷基麦芽糖苷-硫醇化壳聚糖)，提高了有效成分羟基红花黄色素a的黏膜渗透性，可制成多种药物制剂，包括片剂、缓释微丸、固体分散体、囊泡、软胶囊、自微乳、半固体胶囊，优选为舌下片剂。

24、片剂是药物与辅料均匀混合后压制而成的片状或异形片状的固体制剂。片剂以口服普通片为主，也有含片、舌下片、口腔贴片、咀嚼片、分散片、泡腾片、阴道片、速释或缓释或控释片与肠溶片等。

25、微丸pellets是直径0.5～1.0mm范围内的球形或类球形固体剂型，也可装入胶囊、压制成片剂，或制成其他制剂；通过加入缓释材料得到缓释微丸，达到缓释的效果。

26、固体分散体是指将药物以分子、无定型、微晶态等高度分散状态均匀分散在载体中形成的一种以固体形式存在的分散系统。作为一种药物制剂的中间体，固体分散体可以增加药物的溶出度和提高生物利用度、延缓药物释放、增加药物稳定性和液体药物固体化等用途。

27、软胶囊系指将液体药物直接包封，或将固体药物溶解或分散在适宜的赋形剂中制成溶液、混悬液、乳液或半固体，密封于球形或椭圆形的软质囊材中的胶囊剂。

28、本公开提供一种的舌下片剂，其包括前述的经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素a组合物，还包括填充剂和/或润滑剂。

29、填充剂的主要作用是用来填充片剂的重量或体积，从而便于压片。常用的填充剂有淀粉类、糖类、纤维素类和无机盐类等。

30、在一些优选地实施方案中，所述填充剂选自以下中的任意一种或多种：甘露醇、山梨醇、赤藓糖醇、乳糖、蔗糖；优选为甘露醇。

31、在一些优选地实施方案中，所述甘露醇的用量为55～75质量份，优选为65质量份。

32、润滑剂，用于使片剂中的各种成分易于加工，并减少片剂在制剂过程中的粘附和损伤。常见的润滑剂包括二氧化硅、镁硬脂酸等。

33、在一些优选地实施方案中，所述润滑剂选自以下中的任意一种或多种：硬脂酸镁、山嵛酸甘油酯、二氧化硅、硬脂富马酸钠；优选为硬脂酸镁。

34、在一些优选地实施方案中，所述的润滑剂用量为0.2～2质量份，优选为0.6质量份。

35、本公开提供一种舌下片剂的制备方法，包括以下步骤：

36、(1)将硫醇化壳聚糖溶解于水中，搅拌溶解；

37、(2)将羟基红花黄色素a和十二烷基麦芽糖苷溶解于步骤(1)的溶液中，保温搅拌3h；

38、(3)将步骤(2)溶液进行喷雾干燥制粒，干燥至颗粒水分≤3.0％，得到组合物；

39、(4)将组合物与甘露醇、硬脂酸镁混合均匀，压片。

40、在一些优选地实施方案中，所述步骤(1)和/或(2)的搅拌温度为30～40℃。

41、在一些优选地实施方案中，所述步骤(3)的干燥温度为85～95℃。

42、在一些优选地实施方案中，所述步骤(3)的喷液速度为10l/h。

43、在一些优选地实施方案中，所述步骤(3)制得颗粒的粒度过30目筛。

44、本公开所取得的有益效果至少如下：

45、一、添加表面活性剂十二烷基麦芽糖苷和黏膜黏附聚合物硫醇化壳聚糖二者发挥协同作用，与hsya制成组合物能够促进药物通过口腔黏膜的药效发挥，显著提高黏膜渗透性，具体表现为：

46、i.同时添加表面活性剂和黏膜黏附聚合物(例如实施例1)与羟基红花黄色素a制备组合物，所得组合物的药物渗透量为90％，说明所得组合物大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好，能发挥良好的协同作用；

47、ii.当同时添加十二烷基麦芽糖苷(ddm)和硫醇化壳聚糖(cs-sh/tcs)、单独添加十二烷基麦芽糖苷、单独添加硫醇化壳聚糖，所得组合物的药物渗透量分别为90％、46％、23％，c(90％)＞a+b(46％+23％)，说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对羟基红花黄色素a的黏膜渗透性起协同作用，且协同作用最显著；

48、iii.单独添加表面活性剂(例如，实施例6的ddm)与hsya制成组合物，所得组合物的药物渗透量较低，范围为46％，说明所得组合物中只有较少药物能够通过口腔黏膜，所得组合物的黏膜渗透性较同时添加差，但是较hsya单体(二者均不添加)提高38％，无法发挥协同作用；

49、iv.单独添加黏膜黏附聚合物(例如，实施例7的cs-sh/tcs)与hsya制成组合物，所得组合物的药物渗透量较低，范围为23％，说明所得组合物中只有较少药物能够通过口腔黏膜，所得组合物的黏膜渗透性较同时添加差，但是较hsya单体(二者均不添加)提高15％，无法发挥协同作用；

50、v.hsya单体(二者均不添加)的药物渗透量较低，仅为8％，说明hsya单体中只有及少量药物能够通过口腔黏膜，进一步说明所得组合物的黏膜渗透性较差。

51、二、组合物中表面活性剂的用量，影响表面活性剂十二烷基麦芽糖苷和黏膜黏附聚合物硫醇化壳聚糖对羟基红花黄色素a的黏膜渗透性的协同作用；具体表现为：

52、i.当表面活性剂的用量为0.2～0.3质量份(例如实施例4中的十二烷基麦芽糖苷0.2、0.25质量份和实施例1中的0.3质量份)，与硫醇化壳聚糖和hsya制成组合物，所得组合物中药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，药物渗透量c(72％～90％)＞a+b(46％+23％)说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对hsya的黏膜渗透性的协同作用良好；

53、ii.十二烷基麦芽糖苷的用量为0.3质量份时，所得组合物的药物渗透量为90％，远大于单独添加ddm的药物渗透量46％，也远大于单独添加

54、cs-sh/tcs的23％，且药物渗透量c(90％)＞a+b(46％+23％)，说明合用cs-sh/tcs和ddm对提高羟基红花黄色素a的黏膜渗透性具有协同作用，且协同作用最显著；

55、iii.反之，采用其他的表面活性剂用量，当十二烷基麦芽糖苷的用量为0.1质量份时，所得组合物的药物渗透量分别为38％，远小于用量为0.3质量份时的90％，说明降低十二烷基麦芽糖苷的用量至0.1质量份时，会显著降低组合物的药物渗透量，显著降低cs-sh/tcs和ddm对提高羟基红花黄色素a的黏膜渗透性的协同作用；当十二烷基麦芽糖苷的用量为0.4～0.5质量份时，所得组合物在黏膜上作用2h后，黏膜活性为+，黏膜活性部分或基本失活，说明此时不具有协同作用。

56、三、组合物中黏膜黏附聚合物的用量，影响表面活性剂十二烷基麦芽糖苷和黏膜黏附聚合物硫醇化壳聚糖对羟基红花黄色素a的黏膜渗透性的协同作用；具体表现为：

57、i.黏膜黏附聚合物硫醇化壳聚糖的用量为8～12质量份(实施例1为10质量份，实施例5-2和5-3分别为8和12质量份)，所得组合物的药物渗透量分别为82～90％，c(82％～90％)＞a+b(46％+23％)，说明硫醇化壳聚糖的用量为8～12质量份时，cs-sh/tcs和ddm对提高羟基红花黄色素a的黏膜渗透性仍具有较高协同作用；

58、ii.当黏膜黏附聚合物硫醇化壳聚糖的用量为10质量份时，所得组合物的药物渗透量为90％，远大于单独添加ddm的药物渗透量46％，也远大于单独添加cs-sh/tcs的23％，且c(90％)＞a+b(46％+23％)，说明合用cs-sh/tcs和ddm对提高羟基红花黄色素a的黏膜渗透性具有协同作用，且协同作用显著；

59、iii.反之，当硫醇化壳聚糖采用其他用量时，例如为5、和20质量份时，所得组合物的药物渗透量为62～68％，远小于用量为10质量份时的90％，说明减少硫醇化壳聚糖的用量至5质量份或增加至15～20质量份时，会显著降低组合物的药物渗透量，显著降低cs-sh/tcs和ddm对提高羟基红花黄色素a的黏膜渗透性的协同作用。

60、四、改变组合物中表面活性剂的种类，将十二烷基麦芽糖苷改为其他表面活性剂(例如实施例2中的sdgc、snac、sds、tw80)，与cs-sh/tcs和hsya制备成组合物，影响二者对提高羟基红花黄色素a的黏膜渗透性的协同作用；其中，当表面活性剂为十二烷基麦芽糖苷(ddm)时，二者协同作用最好，所得组合物的黏膜渗透性最优，且黏膜渗透性明显优于其他表面活性剂，具体表现为：

61、i.当表面活性剂为十二烷基麦芽糖苷(ddm)时，所得组合物的药物渗透量最高，为90％；说明所得组合物中有大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好，进一步说明十二烷基麦芽糖苷和cs-sh/tcs的协同作用最好；

62、ii.添加其他种类的表面活性剂(例如，实施例2的sdgc、snac、sds、tw80)与hsya制成组合物，所得组合物的药物渗透量较低，范围为

63、31～42％，远低于十二烷基麦芽糖苷的90％，进一步说明其他表面活性剂和cs-sh/tcs的协同作用较差或无协同作用。

64、五、改变组合物中黏膜黏附聚合物的种类，将硫醇化壳聚糖改为其他黏附聚合物(例如实施例3中的dextran-nh2、pll、sa)，与ddm和hsya制备成组合物，影响二者对提高羟基红花黄色素a的黏膜渗透性的协同作用；其中，当黏膜黏附聚合物为硫醇化壳聚糖时，二者协同作用最好，具有较好的黏膜渗透性，且黏膜渗透性明显优于其他黏膜黏附聚合物，具体表现为：

65、i.当黏膜黏附聚合物为硫醇化壳聚糖时，所得组合物的药物渗透量最高，为90％；说明所得组合物中有大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性最优，进一步说明二者协同作用最好；

66、ii.添加其他黏膜黏附聚合物(例如，实施例3的dextran-nh2、pll、sa)和十二烷基麦芽糖苷与hsya制成组合物，所得组合物的药物渗透量较低，范围为51～62％，说明所得组合物中只有部分药物能够通过口腔黏膜，所得组合物的黏膜渗透性较差，进一步说明其他黏膜黏附聚合物与十二烷基麦芽糖苷对提高提高羟基红花黄色素a的黏膜渗透性不具有协同作用。

67、六、填充剂的种类影响，所得舌下片的黏膜渗透性；其中，采用甘露醇(200sd)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片质量良好，黏膜渗透性良好，具体表现在：

68、i.所得舌下片的硬度和脆碎度分别为62n和0.11％，脆碎度远小于1％；崩解时限和溶出度分别为30s和98％，崩解时限远小于5min，溶出度接近100％；药物渗透量较高，为86％，说明所得舌下片中有足够的药物能够被吸收，说明所得舌下片的黏膜渗透性良好；

69、ii.采用其他常用填充剂(例如实施例9中的乳糖复合物、微晶纤维素复合物、山梨醇、赤藓糖醇)制备舌下片，所得舌下片的黏膜渗透性较差，崩解时限和溶出度的范围分别为2～9min和31～65％，崩解时限较长，溶出度较小，说明所得舌下片不能够迅速崩解并释放药物；药物渗透量较低，范围为21～45％，说明所得舌下片中有少量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差。

70、七、填充剂的用量影响，所得舌下片的黏膜渗透性；其中，用量为55～75质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片质量良好，黏膜渗透性良好；用量为65质量份时，效果最优；具体表现在：

71、用量为65质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片质量良好，黏膜渗透性良好，

72、i.用量为65质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为62n和0.11％，脆碎度远小于1％；崩解时限和溶出度分别为30s和98％，崩解时限远小于5min，溶出度接近100％；药物渗透量最高，为86％，说明所得舌下片中有足够的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性良好；

73、ii.用量为55～75质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片硬度和脆碎度的范围分别为63～80n和0.11～0.20％，脆碎度小于1％；崩解时限和溶出度的范围分别为30～72s和91～98％，崩解时限远小于5min，溶出度接近100％，说明所得舌下片能够迅速崩解并释放药物；药物渗透量较高，范围为71～86％，说明所得舌下片中有大部分的药物能够被吸收，说明所得舌下片的黏膜渗透性良好；

74、iii.采用其他填充剂用量(例如50和85质量份)，所得舌下片黏膜渗透性较差仅为21～45％，说明所得舌下片中有少量的药物能够被吸收。