复合纳米粒子及其制备方法和应用、包含复合纳米粒子的试剂盒、利用复合纳米粒子进行胰岛素示踪的方法与流程

文档序号:37770852发布日期:2024-04-25 10:57阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种复合纳米粒子,其特征在于,包括:上转换纳米粒子、胰岛素抗体和猝灭剂,

2.根据权利要求1所述的复合纳米粒子,其特征在于,所述复合纳米粒子进一步包括聚乙烯亚胺。

3.根据权利要求2所述的复合纳米粒子,其特征在于,所述聚乙烯亚胺附着于所述上转换纳米粒子的外表面,所述胰岛素抗体与所述聚乙烯亚胺共价相连。

4.根据权利要求1所述的复合纳米粒子,其特征在于,所述猝灭剂通过共价键与所述胰岛素抗体连接。

5.根据权利要求1所述的复合纳米粒子,其特征在于,所述猝灭剂能猝灭所述上转换纳米粒子发出的光。

6.根据权利要求1所述的复合纳米粒子,其特征在于,所述猝灭剂包括孟加拉红溴己酸、黑洞猝灭剂-2、tq3琥珀酰亚胺酯中的任意一种。

7.根据权利要求1所述的复合纳米粒子,其特征在于,所述上转换纳米粒子包括核层、壳层,所述壳层包裹所述核层。

8.根据权利要求7所述的复合纳米粒子,其特征在于,所述核层包括nayf4:yb3+/er3+,所述壳层包括nayf4。

9.根据权利要求8所述的复合纳米粒子,其特征在于,所述核层中y3+、yb3+、er3+的摩尔比为(78-82):(16-20):(1-2)。

10.根据权利要求8所述的复合纳米粒子,其特征在于,所述核层中y3+、yb3+、er3+的摩尔比为40:9:1。

11.根据权利要求7所述的复合纳米粒子,其特征在于,所述核层的粒径为22-28nm。

12.根据权利要求7所述的复合纳米粒子,其特征在于,所述壳层的粒径为32-38nm。

13.一种制备权利要求1-12任一项所述复合纳米粒子的方法,其特征在于,所述方法包括:

14.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,步骤2)中,活化所述胰岛素抗体的方法包括:将所述胰岛素抗体与交联剂1混合孵育。

15.根据权利要求14所述的方法,其特征在于,所述交联剂1选自1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、n-羟基琥珀酰亚胺中的至少之一。

16.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,步骤3)中,活化所述猝灭剂的方法包括:将所述猝灭剂与交联剂2混合孵育。

17.根据权利要求16所述的方法,其特征在于,所述交联剂2选自1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、n-羟基琥珀酰亚胺中的至少之一。

18.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,步骤2)中,所述胰岛素抗体与所述上转换纳米粒子-聚乙烯亚胺在所述共孵育的体系中的摩尔比为(5-8):(400-600)。

19.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,步骤2)中,所述胰岛素抗体与所述上转换纳米粒子-聚乙烯亚胺在所述共孵育的体系中的摩尔比为(6.5-7.5):(450-550)。

20.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,步骤3)中,所述猝灭剂与所述上转换纳米粒子-抗体在共孵育体系中的摩尔比为1:(7-20)。

21.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,步骤3)中,所述猝灭剂与所述上转换纳米粒子-抗体在共孵育体系中的摩尔比为1:(10-18)。

22.权利要求1-12任一项所述的复合纳米粒子在检测胰岛素和/或监测胰岛素分泌状况的试剂盒中的应用。

23.一种试剂盒,其特征在于,含有权利要求1-12任一项所述的复合纳米粒子,所述试剂盒用于检测胰岛素和/或监测胰岛素分泌状况。

24.权利要求1-12任一项所述的复合纳米粒子在检测和/或监测具有胰岛素分泌功能的类器官中的应用。

25.一种检测胰岛素的方法,其特征在于,包括:

26.根据权利要求25所述的方法,其特征在于,所述待测样本包括具有胰岛素分泌功能的类器官样本、组织样本或细胞样本。

27.根据权利要求25所述的方法,其特征在于,所述激发光的波长为950-1000nm。

28.一种监测胰岛素分泌状况的方法,其特征在于,包括:

29.根据权利要求28所述的方法,其特征在于,步骤a中,共孵育之前,用链脲佐菌素处理所述体外胰岛细胞。

30.根据权利要求28所述的方法,其特征在于,所述体外胰岛细胞源自鼠源胰岛细胞或灵长目源胰岛细胞。

31.根据权利要求28所述的方法,其特征在于,步骤c中,所述受施体包括小鼠、羊、骆驼、马、猴中的任意之一。

32.根据权利要求28所述的方法,其特征在于,步骤c中,所述补充营养物质的方法包括注射葡萄糖、喂食可代谢为糖类的食品。

33.根据权利要求28所述的方法,其特征在于,步骤d中,所述移植部位包括眼部、腹部中的任意之一。

34.根据权利要求28所述的方法,其特征在于,步骤d中,所述激发光的波长为950-1000nm。


技术总结
本发明涉及生物医学技术领域,具体涉及一种复合纳米粒子、胰岛素示踪方法及其应用。本发明构建了一种能够特异性结合胰岛素的纳米材料以及利用该纳米材料进行胰岛素示踪的方法,该纳米材料由上转换纳米粒子、猝灭剂和抗体组成。具体内容为合成能特异性结合胰岛素的纳米材料,将合成后的纳米材料与分离纯化、过夜培养后的小鼠胰岛细胞进行共孵育,将共孵育后的小鼠胰岛细胞移植入小鼠体内,以实现体内胰岛素浓度的实时监测。

技术研发人员:赵冰,代权辉,魏劲松
受保护的技术使用者:山东伯桢生物科技有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/4/24
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