一种具有抗衰功效的环肽组合物的制作方法

本发明属于医药和化妆品领域，具体涉及一种具有抗衰功效的环肽组合物。

背景技术：

0、技术背景

1、皮肤老化是一个与皮肤生理功能耗竭有关的持续过程。随着时间的推移，自然因素和非自然因素都会使人和动物的不同器官发生生理变化。皮肤老化是一种多因素活动，依赖于内在因素(遗传、激素和代谢)和外在因素(常年暴露于紫外线、吸烟、空气污染、化学物质和营养不良)。虽然多种内在过程会影响衰老过程，但日晒、液体摄入、生活方式、污染等因素会加剧衰老过程。此外，由于胶原蛋白减少，真皮厚度随着时间的推移而减少，皮肤皱纹也随之发生[1]。衰老会对皮肤中的结缔组织产生不利影响，导致弹性蛋白和胶原纤维减少，从而产生细纹和皱纹；此外，衰老会减少皮肤和软骨中蛋白聚糖和糖胺聚糖(如透明质酸)的产生，这些会使得皮肤组织变弱，失去完整性，皮肤变得干燥，无法保持足够的水分。

2、胶原蛋白是一种重要的支架蛋白，可以使皮肤光滑和有弹性，但它的产量会随着年龄的增长而下降[2]。胶原蛋白被认为对皮肤健康至关重要，因为光老化和内在衰老都会减少其在体内的存在[1]，这反过来又导致皮肤厚度的减少，以及弹性和灵活性的丧失。因此，提升胶原是皮肤抗衰的一种重要途径。大多数胶原蛋白补充剂都富含含脯氨酸、甘氨酸和羟脯氨酸氨基酸的肽，这些氨基酸被认为是胶原蛋白的必需成分，因此其体内的存在有助于维持皮肤中胶原蛋白的数量；此外，还可以通过增加皮肤成纤维细胞中透明质酸肽的产生，来诱导成纤维细胞迁移，增强胶原蛋白，从而提高角质层的水分。

3、多肽和蛋白质是氨基酸的聚合物，多肽是短的氨基酸链。天然存在的人多肽起着信号分子的作用，例如调控细胞增殖、细胞迁移、炎症、血管生成和黑色素生成等过程；也介导各种生理过程，包括防御、免疫、应激、生长、稳态和繁殖。随着人们对天然多肽的不断了解和合成多肽技术的不断成熟，不同的合成多肽被开发出来：甘氨酸-组氨酸-赖氨酸铜(cu-ghk)是1973年由loren pickard发明；80年代末，第一个铜肽被加入到护肤品中；2000年初，棕榈酰五肽-4被利用；从那时起，研究和工业已经开发出许多短的、稳定的和人工合成的肽，它们不仅可以在细胞外基质合成、色素沉着、先天免疫和炎症中发挥作用，也可以用于刺激胶原蛋白的产生、伤口愈合和“肉毒杆菌样”平滑皱纹，以达到抗氧化、抗菌和美白的效果[3]。

4、外用化妆品肽可分为信号肽、载体肽、神经递质抑制剂肽和酶抑制剂肽。近年来，环肽在化妆品领域的开发利用也渐渐流行起来，可按作用原理将其归为信号肽、酶抑制剂肽等[3]。环肽(或环状肽)，属于多肽类别中的一种，如最简单的环肽为两个末端基团一起反应形成肽键而封闭了肽主链；还有一些环肽，在其末端胺和侧链之间或在末端羧基和侧链之间或两个侧链之间产生共价键，从而使肽分子内部产生环状结构。相对于常规肽，环肽具有许多优点，如它们对外肽酶不敏感，比其线性对应物更稳定；环状肽由于其骨架的弯曲和较小的自由度，许多键的旋转被阻断，具有更可用于与外部靶标相互作用的侧链，与它们的靶标相互作用的强度增大，相邻的氨基酸不干扰分子相互作用。与线性肽相比，环状肽具有强的生物利用度，被广泛应用在医学和生物学领域。近年来，科学家证实环肽具有体内半衰期长、结构较稳定和渗透性强等特点，且外用含环肽产品能够起到一定的护理和防御、减缓衰老的效果，因此开发应用于美容护肤领域的环肽具备一定的创新性及实用性。除此之外，作为一种独特的护肤成分，属于神经递质抑制剂肽的类蛇毒肽近年来也在美容领域引起了广泛关注，其并非直接从蛇毒中提取而来，而是通过科学的方法模拟蛇毒中的某些活性成分，从而实现抗炎、促进伤口愈合、改善血液循环、抗皱抗衰的效果。胶原蛋白肽属于信号肽，通常可以起到抗衰老、除皱、美白肌肤等多种的功效与作用，有利于改善面部肌肤问题。除了不断研发新的具有抗衰老功效的多肽，将不同类型的化妆品与可用肽进行组合，如环肽、神经递质抑制剂肽、信号肽等，是从不同维度解决皮肤抗衰的一种策略。

5、已有相关专利和文献展现了环肽的抗衰能力，但检验环肽、神经递质抑制剂肽和胶原蛋白肽的组合是否具有更优的抗衰能力的研究较少，即不同类型的肽的组合是否能起到协同增效的效果，尚不得知。

技术实现思路

1、针对上述问题，本发明提供了一种具有抗衰功效的环肽组合物，属于医药和化妆品领域。所述环肽组合物的多肽组分有环肽、类蛇毒肽和胶原蛋白肽，所述多肽组分的浓度为0.00001ppm～20％(w/w)，所述环肽组合物包含两两多肽组合和三肽组合。与单一多肽组对比，多肽组合物更能有效促进离体皮肤中胶原蛋白的生成和抑制神经元乙酰胆碱生成，其中，环肽+类蛇毒肽+胶原蛋白肽组合的效果最优，环肽+类蛇毒肽的次之，表明环肽、类蛇毒肽和胶原蛋白肽的组合具有协同增效的作用。因此，所述环肽组合物可以添加到精华液、面霜、防晒霜、化妆水、乳液、眼霜、面膜、洗面奶、洁颜蜜、啫喱、喷雾等多类产品中，以提高产品的抗皱和紧致功效。

2、为了达到上述目的，本发明采用以下方案实现：

3、一方面，本发明提供了一种具有抗衰功效的环肽组合物，其特征在于，所述环肽组合物包含环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽的任意一种或多种。

4、皮肤衰老的主要是由于年龄增长、不良生活方式、紫外线照射、喜好甜食、内分泌失调等原因引起。随着年龄增长，皮肤的胶原蛋白和水分会流失，皮肤弹性会下降，在长时间的面部表情影响下出现皱纹、皮松，还会出现色素沉淀，形成斑点。针对上述皮肤衰老的特点可以使用添加了环肽或神经递质抑制剂肽或胶原蛋白肽、具有抗衰功效的护肤品进行护理，以延缓皮肤衰老，但目前尚未报道过环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽之间的组合物具有协同增效的效果，因此，本发明对此进行了探究，并证实了包含环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽中任意两种或三种的组合物具有协同增效的作用，进一步地，环肽的增效作用最显著；且发现所述组合物主要通过增加皮肤中不同胶原蛋白的含量和抑制神经元细胞中乙酰胆碱的生成来防止皮肤衰老。

5、进一步地，所述环肽包含环六肽-9、环棕榈酰五肽-4、环肉豆蔻酰五肽-4、环棕榈酰三肽-5中的任意一种或多种。所述的4种多肽的结构特征和制备方法请详见中国专利cn116162135b，且本发明中的环六肽-9、环棕榈酰五肽-4、环肉豆蔻酰五肽-4、环棕榈酰三肽-5分别对应《专利cn116162135b》中的六肽-9环肽、棕榈酰五肽-4环肽、肉豆蔻酰五肽-4环肽和棕榈酰三肽-5环肽。

6、进一步地，所述神经递质抑制剂肽包含类蛇毒肽、乙酰基六肽-8、芋螺肽中的任意一种或多种。

7、进一步地，所述胶原蛋白肽包含所述胶原蛋白肽包含重组i型胶原蛋白肽、重组iii型胶原蛋白肽、重组iv型胶原蛋白肽、重组v型胶原蛋白肽、重组vii型胶原蛋白肽、重组xvii型胶原蛋白肽的任意一种或多种，这六种蛋白肽分别由特定的胶原蛋白酶水解对应的胶原蛋白制备而成。

8、可以理解的是，已知的环肽、神经递质抑制剂肽和胶原蛋白肽的种类都很多，这3类多肽之间的组合更是无法穷尽，因此为了探究这些多肽的组合是否具有协同增效作用，在一些具体的实施方案中，环肽为环六肽-9(详见中国专利cn116162135b的六肽-9环肽)；神经递质抑制剂肽为类蛇毒肽，具体化学名称为二肽二氨基丁酰苄基酰胺二乙酸盐；胶原蛋白肽是胶原蛋白酶消化具有如序列表seq id no:1所示氨基酸序列的重组iii型人源化胶原蛋白而生成的产物(详见中国专利2024108845669和2024108904525)，胶原蛋白肽的分子量为2-10kda，优选2.8-3kda。

9、具体地，所述环肽组合物为环肽+神经递质抑制剂肽+胶原蛋白肽组合，或环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽之间的两两组合。

10、进一步地，所述环肽组合物优选环肽+神经递质抑制剂肽+胶原蛋白肽组合，具体为环肽+类蛇毒肽+重组iii型胶原蛋白肽组合；环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽之间的两两组合中，抗衰功效最优的是环肽+神经递质抑制剂肽组合，具体为环六肽-9+类蛇毒肽组合。

11、进一步地，所述环肽组合物中各多肽成分的浓度为0.00001ppm～20％(w/w)。

12、ppm，分率，定义为百万分之一，1ppm即是一百万分之一。

13、另一方面，本发明提供了一种组合物用于制备协同提高抗皱功效或/和紧致功效的试剂的用途，所述环肽组合物包含环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽的任意一种或多种。

14、具体地，所述环肽组合物为环肽+神经递质抑制剂肽+胶原蛋白肽组合，或环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽之间的两两组合。

15、优选地，所述环肽组合物优选环肽+神经递质抑制剂肽+胶原蛋白肽组合，具体为环六肽-9+类蛇毒肽+重组iii型胶原蛋白肽组合；环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽之间的两两组合中，抗衰功效最优的是环肽+神经递质抑制剂肽组合，具体为环六肽-9+类蛇毒肽组合。

16、另一方面，本发明提供了一种组合物用于制备协同促进皮肤中胶原生成的试剂的用途，所述环肽组合物包含环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽的任意一种或多种。

17、具体地，所述环肽组合物为环肽+神经递质抑制剂肽+胶原蛋白肽组合，或环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽之间的两两组合。

18、进一步地，所述环肽组合物优选环肽+神经递质抑制剂肽+胶原蛋白肽组合，具体为环六肽-9+类蛇毒肽+重组iii型胶原蛋白肽组合；环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽之间的两两组合中，抗衰功效最优的是环肽+神经递质抑制剂肽组合，具体为环六肽-9+类蛇毒肽组合。

19、另一方面，本发明提供了一种组合物用于抑制神经元细胞中乙酰胆碱生成的试剂的用途，所述环肽组合物包含环肽、类蛇毒肽、胶原蛋白肽的任意一种或多种。

20、具体地，所述环肽组合物为环肽+神经递质抑制剂肽+胶原蛋白肽组合，或环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽之间的两两组合。

21、进一步地，所述环肽组合物优选环肽+神经递质抑制剂肽+胶原蛋白肽组合，具体为环六肽-9+类蛇毒肽+重组iii型胶原蛋白肽组合；环肽、神经递质抑制剂肽、胶原蛋白肽之间的两两组合中，抗衰功效最优的是环肽+神经递质抑制剂肽组合，具体为环六肽-9+类蛇毒肽组合。

22、本发明的有益效果包括：

23、1.本发明提供了一种具有抗衰功效的环肽组合物，所述组合物生物相容性高且对人体安全无刺激，可以应用于美容护肤领域；

24、2.本发明证实了与单一多肽组相比，环肽组合物(两两多肽组合、三肽组合)能够同时显著地提高经紫外线辐射后离体皮肤模型中多种胶原蛋白的含量，说明上述环肽组合物具有优越的抗皱和紧致功效和协同增效的作用；且三肽组合的抗衰效果也优于两两多肽组合、单一组分的，进一步证实了环肽、类蛇毒肽、胶原蛋白肽的组合具有协同增效的效果；

25、3.本发明证实了与单一多肽组相比，上述环肽组合物(两两多肽组合、三肽组合)能显著降低神经元中的乙酰胆碱的含量，说明上述环肽组合物具有抗皱功效且各多肽组分的组合具有协同增效的效果；且三肽组合的抗皱效果最佳，进一步证实了环肽、类蛇毒肽、胶原蛋白肽的组合具有协同增效的效果；

26、4.通过对上述环肽组合物(两两多肽组合、三肽组合)的紧致和抗皱性能的进行比较，发现所述两种类型的多肽组合物的紧致功效都要优于其抗皱功效。

27、5.本发明通过对多肽组分的增效作用进行比较，发现环肽的增效效果最佳，即含环肽的组合物抗衰功效优于不含环肽的。