CD132在治疗AML中的应用

本发明属于生物医药领域，涉及生物标志物在治疗aml中的应用。

背景技术：

1、aml(acute myeloid leukemia，aml)作为发病率最高的成人白血病，严重危害着人类的健康与生命安全。aml的治疗通常包括诱导化疗、巩固化疗和造血干细胞移植等。诱导化疗的目的是使患者达到完全缓解，即骨髓中原始细胞比例＜5％，临床症状和体征消失。常用的化疗方案包括阿糖胞苷联合蒽环类药物等。对于高危患者或复发难治患者，造血干细胞移植可能是一种有效的治疗选择。近年来，随着分子生物学和靶向治疗的发展，一些针对特定基因突变或融合基因的靶向药物也逐渐应用于aml的治疗，如flt3抑制剂、idh1/2抑制剂等。

2、aml的预后因亚型、患者年龄、一般状况、细胞遗传学和分子生物学特征等因素而异。总体来说，m3型白血病经过及时有效的治疗，预后相对较好；而具有复杂染色体异常、某些基因突变(如flt3-itd高突变等)的患者预后较差。年龄较大、合并其他疾病的患者预后也往往不佳，60岁以下aml患者的长期生存率为35-40％，而60岁及以上患者的长期生存率仅为5-15％。急性粒-单/单核细胞白血病(包括法-美-英分型，即fab分型中的m4和m5，分别占aml的29.1％和8.9％)是一种粒细胞和单核细胞两系同时发生恶性克隆性增生的急性白血病，复发率显著高于其他aml亚型，造血干细胞移植后骨髓和骨髓外复发的发生率分别为34％和50％。aml-m4/5患者3年无病生存率仅有26％左右，因此aml-m4/5是复发难治的主要人群(blood.2018jul 26；132(4):362-8.；cancer discovery.2020apr；10(4):536-51)。提高aml患者长期生存率一直是亟待解决的临床难题。

3、aml是一种复杂的疾病，尽管在诊断、治疗和预后评估方面取得了一定进展，但仍存在诸多不足。未来需要进一步深入研究，开发更准确的诊断方法、有效的治疗手段和可靠的预后评估指标，以提高患者的生存率和生活质量。

技术实现思路

1、为了弥补现有技术的不足，本发明提供了一种能够实现aml的治疗的靶标。

2、为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案:

3、本发明的第一方面提供了cd132作为靶标在制备治疗aml的药物中的应用。

4、进一步，所述药物包括cd132的抑制剂。

5、进一步，所述抑制剂包括任何可降低编码cd132的核酸的表达、降低cd132蛋白质水平或抑制cd132的活性的物质。

6、进一步，所述抑制剂包括核酸抑制物、蛋白水解酶、蛋白结合分子或其组合。

7、进一步，所述核酸抑制物包括干扰rna、核酶、反义寡核苷酸、锌指、grna。

8、进一步，所述核酸抑制物选自干扰rna。

9、进一步，所述核酸抑制物为shrna。

10、进一步，所述shrna如seq id no.1、seq id no.2所示。

11、进一步，所述核酸抑制物为grna。

12、进一步，所述grna的序列如seq id no.3所示。

13、进一步，所述核酸抑制物包括grna和cas9蛋白。

14、进一步，所述蛋白结合分子选自抗cd132的抗体。

15、进一步，所述抗cd132的抗体为regn7257。

16、进一步，所述aml包括m4和/或m5亚型。

17、进一步，所述药物抑制aml细胞的增殖、影响aml细胞的细胞周期或促进aml细胞凋亡。

18、本发明的第二方面提供了一种治疗aml的药物，所述药物包括cd132的抑制剂。

19、进一步，所述抑制剂包括任何可降低编码cd132的核酸的表达、降低cd132蛋白质水平或抑制cd132的活性的物质。

20、进一步，所述抑制剂包括核酸抑制物、蛋白水解酶、蛋白结合分子或其组合。

21、进一步，所述核酸抑制物包括干扰rna、核酶、反义寡核苷酸、锌指、grna。

22、进一步，所述核酸抑制物选自干扰rna。

23、进一步，所述核酸抑制物为shrna。

24、进一步，所述shrna如seq id no.1、seq id no.2所示。

25、进一步，所述核酸抑制物为grna。

26、进一步，所述grna的序列如seq id no.3所示。

27、进一步，所述核酸抑制物包括grna和cas9蛋白。

28、进一步，所述蛋白结合分子选自抗cd132的抗体。

29、进一步，进一步，所述抗cd132的抗体为regn7257。

30、进一步，所述药物还包括药学上可接受的辅剂。

31、进一步，所述aml包括m4和/或m5亚型。

32、本发明第三方面提供了cd132在筛选治疗aml的候选药物中的应用。

33、进一步，筛选治疗aml的候选药物的方法如下：用待筛选物质处理表达或含有cd132基因或其编码的蛋白的培养体系；和检测所述体系中cd132基因或其编码的蛋白的表达或活性；其中，当所述待筛选物质抑制cd132基因的或其编码的蛋白的表达水平或活性时，该待筛选物质是治疗aml的候选药物。

34、进一步，所述候选药物抑制aml细胞的增殖、影响aml细胞的细胞周期或促进aml细胞凋亡。

35、进一步，所述aml选自括m4和/或m5亚型。

36、本发明第四方面提供了一种筛选治疗aml的候选药物的方法，所述方法包括用待筛选物质处理表达或含有cd132基因或其编码的蛋白的培养体系；和检测所述体系中cd132基因或其编码的蛋白的表达或活性；其中，当所述待筛选物质抑制cd132基因的或其编码的蛋白的表达水平或活性时，该待筛选物质是治疗aml的候选药物。

37、进一步，所述方法还包括对候选药物的功能验证步骤，如验证候选药物对aml细胞形态、细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响。

38、进一步，所述候选药物抑制aml细胞的增殖、影响aml细胞的细胞周期或促进aml细胞凋亡。

39、进一步，所述aml选自m4和/或m5亚型。

40、本发明第五方面提供了一种基于计算机的辅助筛选治疗aml的候选药物的方法，所述方法包括：

41、获取cd132的结构域，

42、基于cd132的结构域的空间结构筛选调控cd132的物质，所述调控cd132的物质为治疗aml的候选药物。

43、进一步，所述方法还包括对候选药物的功能验证步骤，如验证候选药物对aml细胞形态、细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响。

44、进一步，所述aml选自m4和/或m5亚型。

45、本发明第六方面提供了基于本发明第四方面或第五方面所述的方法筛选的候选药物在制备治疗aml的药物中的应用。

46、本发明第七方面提供了cd132在构建aml中的应用。

47、进一步，构建aml模型的方法包括施用cd132的促进剂。

48、进一步，所述促进剂包括任何可提高编码cd132的核酸的表达、提高cd132蛋白质水平或促进cd132的活性的物质。

49、进一步，所述促进剂包括cd132过表达体系。

50、进一步，cd132过表达体系包括选择表达载体包括质粒或病毒载体或转座子载体，通过化学转染法或物理转染法或病毒感染法的方法进行构建。

51、进一步，所述质粒包括pcdna系列载体，所述病毒载体包括慢病毒载体、腺相关病毒(aav)载体或腺病毒载体，所述转座子载体包括piggybac转座子载体或sleeping beauty转座子载体。

52、进一步，所述病毒载体选自慢病毒载体。

53、进一步，所述化学转染法包括脂质体转染、阳离子聚合物转染，所述物理转染法包括电穿孔法、基因枪法。

54、进一步，所述aml包括m4和/或m5亚型。

55、本发明第八方面提供了一种aml模型的构建方法，所述方法包括施用调控cd132的试剂。

56、进一步，所述试剂包括cd132促进剂。

57、进一步，所述促进剂包括任何可提高编码cd132的核酸的表达、提高cd132蛋白质水平或促进cd132的活性的物质。

58、进一步，所述促进剂包括cd132过表达体系。

59、进一步，所述aml模型为恶性模型。

60、进一步，所述aml恶性模型包括细胞形态改变、细胞增殖能力增强、细胞周期紊乱、细胞分化障碍、细胞黏附和迁移能力改变、代谢改变和免疫表型改变中的一种或多种。

61、本发明第九方面提供了一种aml细胞模型，所述细胞过表达cd132。

62、进一步，所述aml细胞模型由本发明第八方面所述的构建方法构建而成。

63、本发明第十方面提供了本发明第九方面所述的aml细胞模型在筛选治疗aml的药物或评价药物治疗aml疗效中的应用。

64、本发明第十一方面提供了一种治疗aml的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的cd132的抑制剂。

65、本发明具有的优点和有益效果：

66、本发明首次发现的全新急性髓系白血病诊断、分型、预后评估及治疗的新靶点-cd132，本发明发现cd132在aml m4和m5亚型中显著高表达，cd132表达水平与aml m4/5亚型恶性程度以及aml m4/5亚型患者的总体生存率相关，cd132敲减能够抑制aml细胞的增殖能力，影响aml细胞的细胞周期，促进aml细胞的细胞凋亡，证实了cd132在预防、治疗和/或诊断aml中的有效性，且本靶点为膜表面蛋白，更有利于对急性髓系白血病进行靶向治疗。