一种提高细胞疗法再生的药物组合物及其应用的制作方法

本发明实施例涉及生物医药，具体涉及一种提高细胞疗法再生的药物组合物及其应用。

背景技术：

1、在脱发治疗领域，现有方法主要包括药物治疗、植发手术和其他辅助治疗手段。药物治疗如米诺地尔和非那雄胺，虽然常用于治疗男性型脱发，能够促进头发生长或减缓头发脱落，但米诺地尔需要长期使用，停药后效果可能消失；非那雄胺虽有效，但可能引起副作用。联合使用这两种药物可能增强治疗效果，但适用人群通常限于早期脱发患者。植发手术，如毛囊移植，能够恢复头发生长，效果明显且持久，但成本高且手术复杂，适用于脱发面积较大或药物治疗效果不佳的患者。其他辅助治疗方法如激光治疗、头皮按摩和草药治疗，虽然各有优势，如激光治疗非侵入性但效果因人而异，头皮按摩简单易行但效果有限，草药治疗天然无副作用但效果需长期观察。

2、细胞疗法利用细胞自身的再生能力，可以促进头发生长，而不是仅仅抑制脱发过程。细胞疗法模拟了自然组织修复过程，通过引入健康的细胞来修复受损的毛囊，而不是依赖外部药物或化学物质。与一些可能产生依赖性的传统疗法不同，细胞疗法有潜力提供长期的解决方案，因为它是基于细胞自身的功能和再生能力。细胞疗法可以根据患者的具体情况进行个性化定制，以提高治疗效果。由于细胞疗法使用的是患者自身的或同种异体的细胞，因此相比一些传统疗法，其副作用更小。但是细胞疗法的成功最终取决于到达目标组织的细胞数量、活力及其对组织再生的促进作用。这一关键因素决定了细胞疗法在再生医学中的有效性和持久性。

3、足够的细胞数量可以确保有足够的细胞在毛囊中定居并开始生长新的头发。如果细胞数量不足，可能无法覆盖所有受损的毛囊区域，从而影响整体的治疗效果。高活力的细胞能够更好地适应毛囊环境，进行必要的代谢活动，分泌生长因子，并促进毛囊的恢复和头发的生长。细胞通过分泌生长因子和细胞外基质成分，可以激活和促进毛囊的再生过程。这些因子能够刺激毛囊从休止期进入生长期，从而促进头发的生长。

4、因此，细胞疗法在治疗脱发时，细胞数量、活力和对组织再生的促进作用是确保治疗效果的关键因素。只有当这些条件得到满足时，细胞疗法才能有效地促进头发生长，实现脱发的治疗目标。

技术实现思路

1、为此，本发明实施例提供一种提高细胞疗法再生的药物组合物及其应用。

2、为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：

3、根据本发明实施例的第一方面，本发明提供一种提高细胞疗法再生的药物组合物，所述药物组合物包括：5-15ng/ml转化生长因子β、0.02-0.06μm雷公藤甲素、8-12ng/ml血管内皮生长因子、0.1-1μg/ml葡萄籽提取物、0.8-1.6mg/ml微量元素溶液、0.5-2%透明质酸、0.05-0.15μm环孢素、15-25mm hepes缓冲液。

4、转化生长因子β：tgf-β是一类重要的细胞因子，在细胞生长、分化、凋亡、细胞外基质合成等生物学过程中发挥重要作用。tgf-β和毛囊源间充质干细胞联合使用，可以通过tgf-β的促进作用增强毛囊源间充质干细胞的生长和分化能力，从而加速新毛发的生长和提高治疗效果。本发明实施例使用的转化生长因子β来自欧凯生物（货号：p1230）。

5、雷公藤甲素（cas号：38748-32-2）是一种从中药雷公藤根中提取的二萜内酯化合物，具有显著的免疫抑制、抗炎、抗肿瘤等活性作用。越来越多的研究表明雷公藤甲素在治疗包括类风湿性关节炎系统性红斑狼疮、银屑病性关节炎和肾炎在内的炎性和自身免疫性疾病中有显著作用。雷公藤的抗炎作用机制主要通过调控mapk、pi3k、jak2、bc1-2/bax8、jnk-1/2、mpk1、erk-1/2、nf-kb、活性ros和caspase 8四等炎症信号通路上关键蛋白的活性，从而抑制no的产生、cox-2表达和下调炎性细胞因子如tnf-α、il-1β和il-6的表达水平。

6、血管内皮生长因子（vegf）（cas号：127464-60-2）：又称血管通透性因子；促血管因子(vas)或血管调理素。是从垂体星形滤泡细胞和各种啮齿类动物的卵巢细胞培养液提纯而来的一种特异性的与血管生长有关的生长因子，并有促进血管通透性的作用。vegf能与存在于内皮细胞表面的特异性受体(flt-1、flk-1/kdr)结合，促进血管内皮细胞增殖，刺激体内新生血管生成。此外，vegf作为一种局部内生性调节剂还起着维持血管的正常状态和完整性的作用。

7、葡萄籽提取物：富含多酚类化合物，如原花青素和白藜芦醇，这些成分具有强大的抗氧化能力。它们可以清除体内的自由基，减轻细胞的氧化损伤，从而保护心脑血管。本发明实施例使用的葡萄籽提取物来自陕西帕尼尔生物科技有限公司（货号：pb20211217）。

8、微量元素在脱发中扮演着重要的角色，它们对头发生长和健康起着至关重要的作用。微量元素在脱发中的作用主要是维持头发的生长环境、促进头发的健康生长和预防脱发。保持适当的微量元素水平对于预防和治疗脱发至关重要。本发明实施例使用的微量元素溶液来自上海沪震实业有限公司（货号：hz1941-50l），组成为：50μg cuso4、16μg mnso4、30μg znso4、220μg cocl2 6h2o、45μg feso4加水至100ml。

9、透明质酸（cas号：9004-61-9）：是构成人体细胞间质、眼玻璃体、关节滑液等结缔组织的主要成分，在体内发挥保水、维持细胞外空间、调节渗透压、润滑、促进细胞修复的重要生理功能。透明质酸作为细胞间基质的主要成分，直接参与细胞内外电解质交流的调控，发挥物理和分子信息的过滤器作用。本发明实施例使用的透明质酸来自桐晖药业。

10、环孢素（cas号：59865-13-3）：是一种免疫抑制剂，常用于预防器官移植后的排斥反应，也可用于治疗一些自身免疫性疾病。使用目的是减少排斥反应并帮助新植入的毛囊稳定生长。

11、hepes缓冲液（cas号：7365-45-9）：头部最适合的ph值通常在4.5到5.5之间。这个范围的ph值有助于维持头皮的天然保护屏障，保持头皮的健康状态。头皮的酸性环境有助于阻止细菌和真菌的生长，减少头皮屑和头发问题的发生。

12、进一步地，所述药物组合物包括：10ng/ml转化生长因子β、0.04μm雷公藤甲素、10ng/ml血管内皮生长因子、0.5μg/ml葡萄籽提取物、1mg/ml微量元素溶液、1%透明质酸、0.1μm环孢素、20mm hepes缓冲液。

13、根据本发明实施例的第二方面，本发明提供如上任一项所述的提高细胞疗法再生的药物组合物的制备方法，将转化生长因子β、雷公藤甲素、血管内皮生长因子、葡萄籽提取物、微量元素溶液、透明质酸、环孢素和hepes缓冲液溶解于dmem/f12中，混匀，得到所述提高细胞疗法再生的药物组合物。

14、根据本发明实施例的第三方面，本发明提供一种提高细胞疗法再生的方法，所述方法包括：采用如上任一项所述的药物组合物对毛囊源间充质干细胞进行培养。

15、进一步地，所述方法包括：

16、（1）对毛囊组织进行培养，细胞达到80%-90%的汇合度时进行传代培养，之后经消化、吹打与接种、培养观察和鉴定，获得毛囊源性间充质干细胞；

17、（2）当毛囊源性间充质干细胞传至第3-5代，且细胞达到80%-90%的汇合度时，加入所述药物组合物，在37℃、1%o2、5%co2、94%n2的细胞培养箱中培养72h。

18、进一步地，步骤（1）中，所述培养及传代培养的条件为：37℃、5%co2和95%空气，培养基为含10v/v%胎牛血清的dmem/f12。

19、根据本发明实施例的第四方面，本发明提供如上任一项所述的药物组合物在制备防治脱发产品中的用途。

20、根据本发明实施例的第五方面，本发明提供如上任一项所述的方法在制备防治脱发产品中的用途。

21、本发明实施例具有如下优点：

22、解决现有药物治疗手段用药时间长、效果差等问题；

23、解决现有药物治疗手段药物治疗存在诸多副作用等问题；

24、解决现有手术治疗手段手术费昂贵、只能自体移植，术后恢复缓慢，并发症多等问题；

25、解决现有治疗手段适用人群单一，无法对各种脱发患者进行有效治疗；

26、解决细胞移植后，细胞在短时间内因受体部位的营养和氧气缺乏以及宿主炎症反应导致大量细胞死亡的问题。