一种避孕及杀微生物双功能阴道复合温敏水凝胶制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种复合温敏水凝胶，具体地说，涉及一种避孕及杀微生物双功能阴 道复合温敏水凝胶制剂及其制备方法，属于医药卫生领域。
【背景技术】
[0002] 人口爆炸已成为全球重大问题，每年有超过1. 2亿对配偶的避孕需求无法得到满 足，导致了全世界有4600万的流产发生。同时，全球有超过4000万人正感染HIV，每天约有 18000例新发感染。性传播疾病的感染率也在急速上升，每年约有3. 4亿例新发感染，造成 了沉重的社会公共卫生负担。近年来，研制双功能的外用避孕药已成为国际发展趋势和热 点，世界卫生组织（WHO)，联合国艾滋病规划署（UNAIDS)将其定为全球优先发展战略。美 国专门成立了多功能预防技术机构，致力于倡导和研发多功能的新药物、药具和疫苗产品。 同时，稳定低生育水平和控制性传播疾病（特别是艾滋病）感染疫情是保障当前我国人口 安全所面临的主要挑战，研制同时具有避孕和预防HIV / STDs双重功能的外用避孕药特别 适合我国国情。为此，《国家中长期（2006~2020年）科学和技术发展规划纲要》中，确定了 "人口与健康"重点领域以及"安全避孕节育和出生缺陷防治"优先主题，明确提出重点开发 安全、有效避孕节育新技术和产品以及兼顾预防性传播疾病的节育新技术，"以期为人口和 计划生育工作提供有力的科技支撑"。
[0003] 现今常用的避孕方法有：（1)短效口服避孕药和紧急避孕药，多以激素类为主，副 作用大，在服药后药物作用于丘脑下部脑下体和卵巢，抑制了脑垂体分泌或释放促卵泡激 素和黄体生成激素，使体内的激素水平高于或低于自身常量，出现恶心、呕吐、困倦、头晕、 食欲减退、精神压抑、头痛、疲乏、体重增力P、面部色素沉着、不规则阴道出血等各种症状，口 服避孕药在各单项避孕药具的不良反应发生率中最多见，且漏服是口服避孕药失败的主要 原因。（2)宫内节育器，由于其操作需精心，必须确保置入的IUD准确立于子宫上段，双臂 充分展开伸向宫角，发生脱落会导致怀孕，而出现"带环怀孕"。并且节育器对某些妇女有一 定的副作用，如月经过多、经期延长、阴道流血等，而导致某些妇女不适合用节育器来避孕。 节育器只能避免宫腔内避孕，不能避免宫外孕。这些已成为少部分已婚育龄妇女放弃此方 法的原因。（3)天然乳胶橡胶避孕套，副作用虽小但使用时感官性较差，有对避孕套乳胶过 敏者，且其材料天然橡胶本身存在自然裂缝，直径约为5000至70000纳米，大部分病菌可以 轻易通过，比如，艾滋病毒120纳米，疱瘆病毒180纳米，故不能预防某些性传播疾病，且使 用方法不当会导致避孕失败。（4)男性输精管结扎或女性输卵管结扎绝育术，属于不可逆的 避孕。（5)外用避孕药，外用避孕药具有可由妇女自主使用，阴道内局部给药的特点，并可 通过添加相应药物而达到避孕外的其它健康益处，以具有较强杀精子作用的避孕药壬苯醇 酿-9 (Nonoxynol-9, N-9)为主制成，经常使用N-9会损伤阴道黏膜，增加生殖器官溃疡的 产生，甚至可能增加 HIV感染可能性，因而急需研发新的外用避孕新药。
[0004] 传统中草药或植物提取物是研宄新型杀精剂的重要来源。山东省计划生育科学技 术研宄所的前期研宄从512味单味中药中已发现桔梗、远志、公丁香具有快速体外杀精子 活性，研宄提示桔梗皂苷D (Platycodin D，PD)是桔梗有效杀精子成分。桔梗是一种常见 于亚洲各国的天然药材，ro是桔梗科的根茎，具有祛痰镇咳、抗肿瘤，抗氧化，抗炎，增强免 疫作用、杀精活性。替诺福韦（Ten 〇f〇vir，TFV)，是美国食品药品管理局2012年7月16日 批准的首个处于HIV高危感染但未感染的个体以及可能与艾滋病感染者发生性行为的个 体的治疗药物，以降低这些人群感染HIV的风险。高危成年患者每日服用TFV，在相对安全 的性行为下用于暴露前预防（Pre-exposure prophylaxis，PrEP)，以减低性获得HIV感染 的风险。白发多糖（Bletilla striata polysaccharide，BSP)作为一种中药多糖，有抗菌、 抗真菌，白色念珠菌，抗病毒，预防和治疗宫颈糜烂症，预防和治疗宫颈癌，对非特异性免疫 和特异性免疫反应均有促进作用，而且具有黏附性、功能缓释性，是安全高效的医药原料、 性能卓越的药用辅料和相当有发展前景的生物医学材料。
[0005] 兼具避孕和预防生殖道感染双重功能的产品称为双功能外用避孕药。载PD和TFV 的双功能阴道复合温敏水凝胶具有避孕、润滑、可逆，兼具预防生殖道感染、副作用小等特 性，尤其适用于未婚人群、更年期妇女以及生殖道感染及易感人群。随着近年来我国城市化 的推进和人民生活水平的日益提高，人们对外用避孕药具的需求正在大幅增长，所以开发 一种缓释的避孕及消炎、抗病毒双功能阴道复合温敏水凝胶具有极大的前景。
【发明内容】
[0006] 本发明要解决的技术问题是针对以上不足，提供一种避孕及杀微生物双功能阴道 复合温敏水凝胶制剂及其制备方法，实现以下发明目的：作用时间较长，有粘膜粘附性、局 部滞留性、自身降解性以及对阴道粘膜无刺激性，避孕效果较好，同时具有消炎、抗病毒作 用的复合温敏水凝胶，克服了现有避孕方法中副作用较大，使用不方便的缺陷。
[0007] 本发明的另一个发明目的是提供一种壳聚糖/白芨多糖/替诺福韦微球的制备方 法。
[0008] 为解决上述技术问题，采用以下技术方案： 一种避孕及杀微生物双功能阴道复合温敏水凝胶制剂的制备方法，包括以下步骤：微 球的制备、微球的溶解、桔梗皂苷D溶解、替诺福韦配制壳聚糖溶液、配制α，β-磷酸甘油 钠溶液、壳聚糖溶液和α，β-磷酸甘油钠溶液混合、加入微球溶液、加入CaCl 2溶液、加入 海藻酸钠溶液、恒温保存。
[0009] 以下是对上述技术方案的进一步改进： 所述微球的制备步骤，精密称取室温下真空干燥至恒重的壳聚糖、白芨多糖、替诺福韦 适量，溶于1000 mL 0. 5%的乙酸溶液中，0. 45 μ m微孔滤膜过滤，续滤液经蠕动泵导入喷雾 干燥器的双流向螺旋式喷嘴，喷雾干燥制得微球粉末。
[0010] 所述微球的溶解步骤，精密称取壳聚糖/白芨多糖/替诺福韦微球适量，溶解于 蒸馏水中，作为A液。
[0011] 所述壳聚糖溶液和α，β-磷酸甘油钠溶液混合步骤，取已配好的壳聚糖溶液， α，β -磷酸甘油钠溶液，4°C预冷，将α，β -磷酸甘油钠溶液逐滴加入壳聚糖溶液中，在 4°C下搅拌，作为C液。
[0012] 所述桔梗皂苷D溶解步骤，精密称取桔梗皂苷D，溶于二甲基亚砜中，作为B液。
[0013] 所述加入微球溶液步骤，将A、B溶液缓慢加入C液，朝同一方向快速搅拌，搅拌均 匀，作为D液。
[0014] 所述加入0&(：12溶液步骤，将质量浓度为1%的CaCl 2溶液逐滴加入溶液D中； 所述加入海藻酸钠溶液步骤，将质量浓度〇. 5%海藻酸钠溶液预冷，逐滴加入D液中，磁 力搅拌均匀。
[0015] 所述加入的壳聚糖：白芨多糖：替诺福韦质量比为5:5-20:1 ;所述进口温度为 110-150°C，进料速度 I. 5-6. 5 mL/min，空气流量为 300-500 L/h。
[0016] -种避孕及杀微生物双功能阴道复合温敏水凝胶制剂，其特征在于：按重量份计， 包括： 桔梗皂苷D 32. 21-58. 57份 替诺福韦 2. 04份 白芨多糖 10. 2-40. 8份 壳聚糖 11. 51份 α，β -磷酸甘油钠 13-17份 海藻酸钠 0. 04-0. 08份 CaCl2 0· 40-0. 60 份。
[0017] 优选的一种避孕及杀微生物双功能阴道复合温敏水凝胶制剂，其特征在于：按重 量份计，包括： 桔梗皂苷D 50. 09份 替诺福韦 2. 04份 白芨多糖 20. 45份 壳聚糖 11. 51份 α，β -磷酸甘油钠 15. 33份 海藻酸钠 0. 06份 CaCl2 0· 52 份。
[0018] 本发明与现有技术相比，具有以下有益效果： 1、载桔梗皂苷D和替诺福韦的复合温敏水凝胶，同时具有避孕和HIV的暴露前预防功 能。
[0019] 2、桔梗皂苷D作为中药制剂对阴道粘膜无刺激性，且杀精效果好。
[0020] 3、凝胶中的药物以微球的形式存在于体内，可延长药物在治疗部位的滞留时间， 提高药物的生物利用度和治疗效果。
[0021] 4、温敏凝胶在常温下是液体状态，在人体环境的温度中却为固体，使用方便，且对 精子起一定的屏障作用，增强避孕效果。
【具体实施方式】
[0022] 实施例1 微球的制备，包括以下步骤： a、原料溶液的配制 精密称取室温下真空干燥至恒重的壳聚糖、白芨多糖各5g，替诺福韦lg，溶于1000 mL 0. 5%的乙酸溶液中； b、 过滤、喷雾干燥 经0. 45 μ m微孔滤膜过滤，续滤液经蠕动泵导入Bilchi290小型喷雾干燥器的双流向 螺旋式喷嘴，控制进口温度为110 °C，进料速，度为1.5 mL/min，空气流量为300 L/h，壳聚 糖/白芨多糖/替诺福韦的质量比为5:5:1 ; c、微球粉末的制备 喷雾干燥"一步"制得HVTFV/CTS/BSP微球粉末，收集微球粉末于干燥器中，备用。
[0023] 实施例2 微球的制备，包括以下步骤： a、 原料溶液的配制 精密称取室温下真空干燥至恒重的壳聚糖5g，白芨多糖10g，替诺福韦lg，溶于1000 mL 0. 5%的乙酸溶液中； b、 过滤、喷雾干燥 经0. 45 μ m微孔滤膜过滤，续滤液经蠕动泵导入Bilchi290小型喷雾干燥器的双流向 螺旋式喷嘴，控制进口温度为ll〇°C，进料速度为4 mL/min，空气流量为400 L/h，壳聚糖 /白芨多糖/替诺福韦的质量比为5:10:1 ; c、 微球粉末的制备 喷雾干燥"一步"制得HVTFV/CTS/BSP微球粉末，收集微球粉末于干燥器中，备用。
[0024] 实施例3 微球的制备，包括以下步骤： a、原料溶液的配制 精密称取室温下真空干燥至恒重的壳聚糖5g，白芨多糖20g，替诺福韦lg，溶于1000 mL 0.5%的乙酸溶液中。
[0025] b、过滤、喷雾干燥 经0. 45 μ m微孔滤膜过滤，续滤液经蠕动泵导入Bilchi290小型喷雾干燥器的双流向