，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，置冰箱保存，实验时以常水配成所需浓度。
[0025] (3)对比中药组合物乙：取干燥的乌苏里瓦韦333. 3g，五叶薯333. 3g，花楸果 333. 3g，加水煎煮2次，第一次加水I 1000 mL,浸泡lh，煎煮lh，第二次加水4000mL，煎煮lh， 合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，置冰箱保存，实验时以常水配成所需浓度。
[0026] (4)对比中药组合物丙：五叶薯333. 3g，花楸果333. 3g，大活333. 3g，加水煎煮2 次，第一次加水11〇〇〇11^，浸泡111，煎煮111，第二次加水400〇1^，煎煮111，合并煎液，滤过，滤 液浓缩，干燥，粉碎成细粉，置冰箱保存，实验时以常水配成所需浓度。
[0027] (5)对比中药组合物丁：花楸果333. 3g，大活333. 3g，乌苏里瓦韦333. 3g，加水煎 煮2次，第一次加水110001^，浸泡111，煎煮111，第二次加水40001^，煎煮111，合并煎液，滤 过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，置冰箱保存，实验时以常水配成所需浓度。
[0028] 1. 2 动物 健康SD大鼠，雄性，体重180~200g，健康ICR小鼠，雌雄不限，体重18~22g，黑龙江 中医药大学实验动物中心提供。
[0029] L 3药品及试剂 盐酸文拉法辛缓释胶囊，北京万生药业有限责任公司，国药准字H20143052,给药剂量 6. 25mg/Kg，为人临床用量I. 25mg/Kg的5倍；利血平片，哈尔滨泰华药业股份有限公司，国 药准字 H23021360。
[0030] 1. 4 仪器 有机玻璃游泳槽，高40cm，长60cm，宽30cm，黑龙江中医药大学实验动物中心提供； XZ-4小鼠自主活动计数器，黑龙江中医药大学实验动物中心提供。
[0031] 1.5 方法 1. 5. 1大鼠强迫游泳实验：健康SD大鼠70只，雄性，按体重随机分成7组，每组10只， 即模型对照组，阳性对照盐酸文拉法辛缓释胶囊6. 25mg/Kg剂量组及本发明中药组合物 20. 00生药/Kg剂量组，对比中药组合物甲20. 00生药/Kg剂量组，对比中药组合物乙20. 00 生药/Kg剂量组，对比中药组合物丙20. 00生药/Kg剂量组，对比中药组合物丁 20. 00生药 /Kg剂量组，模型对照组给予同体积去离子水。大鼠灌胃给药，给药1次/天，连续10天。 第9天，于给药后30min将大鼠单个放入有机玻璃游泳槽中，水深为15cm，水温25°C，强迫 其游泳，15min后取出动物，晒干，然后放回笼中。于末次给药30min后，将大鼠放入游泳槽 中，记录5min内大鼠保持不动状态的时间，即大鼠微蜷躯体，但保持垂直姿势，鼻孔露出水 面的时间。
[0032] 1. 5. 2小鼠尾悬挂实验：健康ICR小鼠70只，雌、雄各半，按体重随机分成7组，每 组10只，即模型对照组、阳性对照盐酸文拉法辛缓释胶囊6. 25mg/Kg剂量组及本发明中药 组合物20. 00生药/Kg剂量组，对比中药组合物甲20. 00生药/Kg剂量组，对比中药组合物 乙20.00生药/Kg剂量组，对比中药组合物丙20. 00生药/Kg剂量组，对比中药组合物丁 20. 00生药/Kg剂量组，模型对照组给予同体积去离子水。小鼠灌胃给药，每日1次，连续10 天。于末次给药30min后，将小鼠尾(距尾尖Icm处)用胶布粘在高出桌面3cm的木条上，记 录5min内动物的不动时间。
[0033] 1. 5. 3利血平拮抗实验：健康小鼠140只，雌、雄各半，按体重随机分成7组，每组 20只，分组及剂量同上，于末次给药30min后，小鼠尾静脉注射利血平2mg/Kg，于注射Ih后 观察小鼠眼睑下垂的动物数、身体僵直保持肌挛状态不动的动物数，并计算其发生率，观察 并记录注射利血平前后体温变化。
[0034] 1. 5. 4自主活动实验：健康小鼠70只，雌雄各半，按体重随机分成7组，每组10只， 即模型对照组、盐酸文拉法辛缓释胶囊组及本发明中药组合物组，对比中药组合物甲组，对 比中药组合物乙组，对比中药组合物丙组，对比中药组合物丁组，给药剂量同前。小鼠灌胃 给药，每日1次，连续10天。于末次给药后30min，以XZ-4小鼠自主活动计数器记录各组小 鼠的自主活动情况，记录5min，测定2次，取其平均值。
[0035] 1. 6统计学方法 应用SPSS10.0统计软件进行数据处理，所有计量资料以均数土标准（土S)差表示，组 间比较采用t检验，计数资料采用X 2检验。
[0036] 2 结果 2. 1大鼠强迫游泳实验 强迫游泳模型中出现的不动状态也反映了动物的绝望行为，可以模拟人类的抑郁 状态。与模型对照组比较，本发明中药组合物组可明显对抗"失望"，缩短游泳不动时间 (P〈0. 05)，而对比中药组合物甲组至对比中药组合物丁组的作用效果则不明显。见表1。
[0037] 表1本发明中药组合物对大鼠强迫游泳实验的影响（土s)
【主权项】
1. 一种治疗抑郁症的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由以下重量份的原料 制成的：大活1~2重量份，乌苏里瓦韦1~2重量份，五叶薯1~2重量份，花楸果1~2 重量份。
2. 如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由以下重量份的原 料制成的：大活1重量份，乌苏里瓦韦2重量份，五叶薯1重量份，花楸果2重量份。
3. 如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由以下重量份的原 料制成的：大活2重量份，乌苏里瓦韦1重量份，五叶薯2重量份，花楸果1重量份。
4. 如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由以下重量份的原 料制成的：大活1重量份，乌苏里瓦韦1重量份，五叶薯1重量份，花楸果1重量份。
5. 如权利要求1~4任意一项所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物采用如下 方法制备：取干燥的大活、乌苏里瓦韦、五叶薯、花楸果，加水煎煮1~3次，加水4~15倍 量，浸泡0. 5~2h，煎煮0. 5~2h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成干膏粉，加入辅 料，采用中药学中常规的制药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、口服液、 散剂。
6. 如权利要求5所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物采用如下方法制备：取 干燥的大活、乌苏里瓦韦、五叶薯、花楸果，加水煎煮2次，第一次加水11倍量，浸泡lh，煎 煮lh，第二次加水4倍量，煎煮lh，合并两次煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成干膏粉，加 入比例为1:1的糊精和可溶性淀粉作为辅料，干膏粉与辅料比例为4:1，混匀，制粒，装入硬 胶囊，即得。
7. 如权利要求1~4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物的含量测 定方法为：采用高效液相色谱指纹图谱测定： (1) 色谱条件：色谱柱为C18柱，流动相为比例为17:84的乙腈：水，流速0. 8mL min 检测波长230nm，柱温30°C，理论板数按伞形花内酯峰计不低于3000 ; (2) 供试品溶液：取装量差异符合规定的本品内容物，研细，50°C烘干至恒重，取lg，精 密称量；置具塞20mL容量瓶中，加入80%乙醇至刻度，室温下超声处理2次，0. 5h/次；摇匀， 滤过，取续滤液，用80%乙醇调至20mL，作为供试品溶液； (3) 对照品溶液制备：精密称取伞形花内酯对照品4. 21mg，置IOOmL量瓶中，加80%乙 醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液贮备液；精密吸取上述溶液1.0 mL置IOmL量瓶中，用80% 乙醇稀释至刻度，作为对照品溶液； (4) 测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各20 μ L，注入高效液相色谱仪， 进行检测。
8. 如权利要求1~4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物的高效液 相色谱指纹图谱的检测方法为： (1)色谱条件：色谱柱：Kromasil (：18色谱柱；流动相：乙腈-0. 6%磷酸水溶液，梯度洗 脱：0min~30min，乙腈从10%线性上升至25%，0. 6%磷酸水溶液从90%线性下降至75%， 30min~60min，乙腈从25%线性上升至60%，0. 6%磷酸水溶液从75%线性下降至40%， 60min~65min，乙腈从60%线性上升至67%，0. 6%磷酸水溶液从40%线性下降至33%， 65min~75min，乙腈保持67%，0. 6%磷酸水溶液保持33%，75min~95min，乙腈从67%线性 上升至100%，0. 6%磷酸水溶液从33%线性下降至0 ;体积流量：0. 8ml/min ;柱温：30°C ;检 测波长：322nm ; (2) 参比物溶液的配制：精密称取紫花前胡苷对照品适量，加流动相制成质量浓度为 lOOPg/ml的溶液，摇匀，即得； (3) 供试品溶液的制备：取10粒本发明中药组合物的内容物，混匀，称取1.0 g，精密称 定，置于50ml量瓶中，加80%甲醇适量，超声30min，放凉，加80%甲醇至刻度，经0. 45Mm滤 膜滤过，滤液作为供试品溶液； (4) 测定：分别精密量取上述供试品溶液、参比物溶液溶液各20 μ L，注入高效液相色 谱仪，进行检测。
9. 如权利要求1~4任意一项所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物在制备治 疗失眠症药物中的应用。
10. 如权利要求1~4任意一项所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物在制备 治疗健忘症药物中的应用。
【专利摘要】本发明属于中药领域，名称为一种治疗抑郁症的中药胶囊及制备工艺与检测分析方法，该中药组合物是由以下重量份的原料制成的：大活1～2重量份，乌苏里瓦韦1～2重量份，五叶薯1～2重量份，花楸果1～2重量份。其制备工艺为：取干燥的大活、乌苏里瓦韦、五叶薯、花楸果，加水煎煮1～3次，加水4～15倍量，浸泡0.5～2h，煎煮0.5～2h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成干膏粉，加入辅料，采用中药学中常规的制药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂。本发明还提供该中药的含量测定方法及指纹图谱检测方法，该方法具有较高准确度、稳定性和重复性。该中药组合物可用于制备治疗失眠症、健忘症的药物。
【IPC分类】G01N30-02, G01N30-36, A61P25-00, A61K36-8945, A61P25-24
【公开号】CN104666771
【申请号】CN201510136638
【发明人】齐乐辉, 杨大宇, 韩淼
【申请人】黑龙江中医药大学
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2015年3月27日