IL-1β在制备用于治疗由金黄色葡萄球菌易感所引起的炎症的药物中的用图
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物医药领域，特别是涉及IL-1 β在制备用于治疗由金黄色葡萄球菌易感所引起的炎症的药物中的用途。
【背景技术】
[0002]尽管近年来科学家们已经研制出很多有效的抗菌方法和手段，细菌性肺炎依然在全球各国，甚至发达国家(如美国等)的致死病因中位居前列。金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种常见的人类病原菌，隶属于葡萄球菌属(Staphylococcus)，有“嗜肉菌”的别称，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染，带菌者大约有30%左右。金黄色葡萄球菌可造成各种侵染性感染，包括肺炎、感染性休克、细菌性脑膜炎、过敏性皮肤炎等。近几年金黄色葡萄球菌，尤其是其号称“超级细菌”的耐甲氧西林和多重耐药菌株几乎能抵抗人类所有的药物，屡次成为公众在健康方面所关注的焦点。所以，探索防御病原体的关键性固有免疫通路对于金黄色葡萄球菌所引起的肺炎的临床研究具有重要意义。
[0003]哺乳动物固有免疫体系所识别的病原体相关分子模式(PAMPs，pathogen-associated molecular patterns)可为许多微生物所共享,但在高等真核生物中却无法找到。作为模式识别受体家族的重要一族，Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)能够识别PAMPs并激活信号通路，在针对微生物侵袭的早期宿主防御中扮演重要作用。TLRs信号主要通过与MyD88受体蛋白，依次激活IkB激酶(IkB kinase，IKK)和促分裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)通路,从而激活转录因子核因子 kB (nuclear factor (NF)-kB)和激活蛋白-1 (activator protein(AP)-1)。TLR2涉及金黄色葡萄球菌的侦测，并有助于小鼠系统模型中对于病原体的宿主防御。可是，当暴露于金黄色葡萄球菌时，来自TLR2+JLR9+和TLR2+/TLR9+小鼠的巨噬细胞依然生成炎性细胞因子。此外，不同于金黄色葡萄球菌皮肤、全身感染模型所观察到的现象，体内试验尚未有效证明TLRs信号在金黄色葡萄球菌肺部感染中具有显著作用。以上结果显示，肯定还有其他关键的类型识别受体从某种程度上与葡萄球菌所引起的肺部感染以及宿主防御的发生有关。
[0004]金黄色葡萄球菌(S.aureus)所引起的肺炎是一个医学上非常棘手的问题，但是人们对从肺部识别和清除这种病原体的关键性固有免疫(innate immune)通路依然知之甚少。RIP2,—种 NOD 样受体(NOD-like receptors)的衔接分子(adaptor molecule)已经被发现涉及胞内菌的宿主反应，但其在肺中对于胞外菌(如金黄色葡萄球菌)的宿主防御中所起的作用在很大程度上仍是个未知数。
【发明内容】
[0005]金黄色葡萄球菌是造成社会获得性肺炎和医院获得性肺炎的主要原因，但免疫系统如何识别金黄色葡萄球菌依然不得而知。RIP2 (receptor interacting protein2),一种核苷酸结合寡聚化结构域NOD样受体(nucleotide-binding oligomerizat1ndomain (NOD) -like receptors, NLRs)的衔接分子已经被发现涉及胞内菌的宿主反应，但其在肺中对于胞外菌(如金黄色葡萄球菌)的宿主防御中所起的作用在很大程度上仍是个未知数。
[0006]鉴于以上所述现有技术，本发明第一方面提供RIP2 (AAL96436.1)在筛选用于治疗由金黄色葡萄球菌易感所引起的肺炎的药物中的用途。
[0007]优选的，所述用途为金黄色葡萄球菌易感动物模型构建中的用途，具体为RIP2缺陷所引起的金黄色葡萄球菌易感。
[0008]更优选的，所述易感动物模型为肺部易感动物模型。
[0009]进一步优选的，所述动物模型为小鼠动物模型。
[0010]所述筛选药物可理解为，将待筛选的药物分别给予构建后的金黄色葡萄球菌易感动物模型与正常动物模型，并对动物模型进行比较，从而对所述待筛选的药物进行生物活性、药理作用及药用价值的评估。
[0011]由于RIP2+小鼠对于金黄色葡萄球菌肺部易感，且RIP2+影响金黄色葡萄球菌肺部感染的早期细胞因子反应，并阻碍细菌廓清，所以RIP2的缺陷可用于构建金黄色葡萄球菌的肺部易感模型，在筛选用于治疗由金黄色葡萄球菌易感所引起的肺炎的药物中具有实际应用价值。
[0012]本发明进一步提供RIP2缺陷所引起的金黄色葡萄球菌肺部易感小鼠动物模型的构建方法，所述方法具体为:对RIP2+小鼠进行麻醉，将气管暴露后进行金黄色葡萄球菌感染，再对皮肤切口进行缝合。
[0013]所述细菌感染的具体方法为:给予3 X 17CFU的30ul PBS。
[0014]本发明证实了 RIP2对肺部金黄色葡萄球菌宿主防御中的作用，并进一步阐述了相关免疫机理。
[0015]本发明发明人发现RIP2-介导的固有免疫响应在金黄色葡萄球菌所造成的肺炎的宿主防御中不可或缺；并率先证明了在肺部胞外菌感染的宿主防御中，N0D-RIP2激酶通路有着关键性的作用。
[0016]本发明第二方面提供IL-1R (interleukin-lreceptor) (EDL14572.1)在筛选用于治疗由金黄色葡萄球菌易感所引起的肺炎的药物中的用途。
[0017]优选的，所述用途为金黄色葡萄球菌易感动物模型构建中的用途，具体为IL-1R缺陷所引起的金黄色葡萄球菌易感。
[0018]更优选的，所述易感动物模型为肺部易感动物模型。
[0019]进一步优选的，所述动物模型为小鼠动物模型。
[0020]本发明进一步提供IL-1R缺陷所引起的金黄色葡萄球菌肺部易感小鼠动物模型的构建方法，所述方法具体为:对IL-1R+小鼠进行麻醉，将气管暴露后进行金黄色葡萄球菌感染，再对皮肤切口进行缝合。
[0021]所述细菌感染的具体方法为:给予3 X 17CFU的30ul PBS。
[0022]由于IL-1R+动物展现出与RIP2+动物类似的表型，所以IL-1R的缺陷可用于构建金黄色葡萄球菌的肺部易感模型，在筛选用于治疗由金黄色葡萄球菌易感所引起的肺炎的药物中具有实际应用价值。
[0023]本发明第三方面提供IL-1 β (ΑΑΗ11437.1)在制备用于治疗由金黄色葡萄球菌易感所引起的炎症的药物中的用途。
[0024]优选的，所述炎症为RIP2或IL-1R缺陷导致的金黄色葡萄球菌易感所引起的。
[0025]优选的，所述炎症为肺炎。
[0026]更优选的，所述药物的给药方式为气管给药。
[0027]本发明进一步提供由金黄色葡萄球菌易感所引起的肺炎的治疗方法，所述方法具体为:给予有效量的重组白介素-1 β ;优选给药方式为气管给药。
[0028]本发明发明人通过气管注射rIL-lb，恢复了 RIP2+和IL-1R+小鼠对于金黄色葡萄球菌的免疫响应，验证了 IL-1 β在RIP2所介导的免疫反应的重要作用。所以我们能够证实IL-1 β在制备用于治疗由金黄色葡萄球菌易感所引起的肺炎的药物中具有实际应用价值，具体为由RIP2或IL-1R缺陷所导致的金黄色葡萄球菌易感。
[0029]本发明发明人对RIP+，IL-1R+和野生型(WT)的同窝出生仔畜进行金黄色葡萄球菌气管注射，并观察相关感染结果后发现，RIP2+小鼠对于金黄色葡萄球显著易感，其在感染24h时肺部的细菌负荷明显上升，且相对于WT小鼠，RIP+小鼠的存活率明显下降。在感染的早期阶段，我们发现在RIP2+小鼠中促炎性细胞因子(如IL-1 β，IL-6)和中性粒细胞趋化因子(如KC和MIP-2)产量衰减，并伴随着肺部髓