含有降血糖活性成分的长效控释脂质体凝胶组合物及其制备方法【
技术领域：
】[0001]本发明涉及含有胰岛素或艾塞那肽等降血糖活性成分的长效控释脂质体凝胶组合物及其制备方法。【
背景技术：
】[0002]胰岛素临床应用于治疗糖尿病数十年，其是由胰脏内的胰岛β细胞分泌的一种蛋白质激素胰岛素；并参与调节糖代谢，控制血糖平衡。第一代动物胰岛素的抗原性较强，哺乳动物的胰岛素分子的氨基酸序列和结构稍有差异，而猪胰岛素与人最相似[Baker,EN,Blundell,TL,etal.ThestructureofZn2+piginsulincrystalsatl.5Aresolution.Philos.Trans.R.Soc.Lond.BBiol.Sci.1988.319:369-456】。第二代人膜岛素分子量为5,808道尔顿，注射量可减少约30%;人胰岛素比较稳定，其在常温25°C左右可保存约一个月，并且据报道注射需在餐前30分钟进行。胰岛素类似物是第三代胰岛素，模拟人体生理降糖模式，可紧临餐使用，也称为餐时胰岛素或速效胰岛素。[0003]激动胰岛β细胞先分泌由84个氨基酸组成的胰岛素原（Proinsulin)，并且在胰岛素原转化酶（PC1和PC2)和羧肽酶E的作用下，胰岛素原C链被切割，使得胰岛素原的羧基端A链和氨基端B链通过二硫键结合在一起形成胰岛素。胰岛素储存在胰岛β细胞内的分泌囊泡中，并与锌离子配位成六聚体。在葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等刺激下胰岛素从分泌囊泡释放至血液中，并发挥其生理作用。维持空腹血糖正常的胰岛素称为基础胰岛素，而降低餐后血糖以维持餐后血糖正常的胰岛素称为餐时胰岛素。餐时胰岛素抑制肝内源性葡萄糖的生成而控制餐后血糖升高的幅度和时间【MitrakouA，KelleyD,VenemanT,etal.ContributionofabnormalmuscleandliverglucosemetabolismtopostprandialhyperglycemiainNIDDM.Diabetesl990;39:1381-90】。这样，血糖在任何时间都被控制在接近空腹状态的水平；并且餐后血糖水平高于5.5mmol/L的时间不超过30分钟【BoehmB,HomeP,BehrendC，etal.Premixedinsulinaspart30vs.premixedhumaninsulin30/70twicedaily:arandomizedtrialintypelandtype2diabeticpatients.DiabetMed2002;19:393-399】。I型糖尿病患者胰岛β细胞发生自身免疫性破坏，导致餐时和基础胰岛素分泌均减少。II型糖尿病患者胰岛β细胞功能异常低效，胰岛素分泌减少【BellDS.Importanceofpostprandialglucosecontrol.SouthMedJ2001;94:804_9】，且有胰岛素抵抗现象，因而空腹血糖正常而餐后血糖升高持续数小时至下一餐前[PolonskyKS,GivenBD,HirschLJ,etal.Abnormalpatternsofinsulinsecretioninnon-insulindependentdiabetesmellitus.NEnglJMedl988;318:1231-9】。目前治疗II型糖尿病的胰岛素及其类似物制剂有诺和灵N、诺和锐等。I型糖尿病的治疗多用持续脉冲式胰岛素泵释放的胰岛素制剂维持空腹血糖的正常。在生活方式和口服糖尿病治疗后，血糖仍不能有效控制，大多很快转向选择基础胰岛素类似物地特胰岛素治疗。[0004]艾塞那肽（Byetta/Exenatide)是一种强效促胰岛素分泌药，用于II型糖尿病(T2DM)的血糖控制，尤其是用于二甲双胍、磺酰脲类及二甲双胍合用磺酰脲类都难以控制血糖的患者。艾塞那肽较能抵抗蛋白水解酶IV(二肽酰胺酶IV)的降解，半衰期约为2分钟，较哺乳动物胰高血糖素样多肽-I(GLP-I)*【Pridal，etal.，Eur.J.Drug.Metab.Pharmacokinet.，21:51-59,1996;Deacon,etal.，Diabetes,47:764-769,1998】；氛基酸序列与GLP-I的相似性达53%【Goke,etal.，J.Biol.Chem.，268:19650-19655,1993】；能够激动GLP-I受体，抗糖尿病作用与GLP-I受体结合有关，且作用与GLP-I类似。艾塞那肽还能增强葡萄糖依赖性的胰岛素的分泌和抑制葡萄糖依赖性的异常增高的胰高血糖素的分泌、减慢胃排空【Schira，etaL，J.Clin.Invest·，97:92-103,1996】、减少食物摄入、促进β_细胞增殖和再生、减少脂肪堆积及胰岛素增敏作用（动物模型）。吉拉毒蜥的艾塞那肽-4具有长时间降低血糖的效果【Greigetal.，Diabetologia42:45-50，1999】。当它以0.2μg/kg或更高剂量皮下注射时，会产生呕吐、恶心和头痛等副作用【DrugDevelopmentResearch,53:260-267,2001]〇[0005]控制初始血药浓度、限制初始释放是研发艾塞那肽控释制剂的一大屏障之一。美国专利US7,164,005和US2005/0271702以及中国专利申请CN101646424A公开了使用聚(乳酸-共-乙醇酸）共聚物（PLGA)通过相分离法制备含有艾塞那肽的脂质凝胶纳米囊。其制备方法包括相分离法、喷雾干燥法等。除此以外，中国专利申请CN102274182A公开了使用复乳溶剂蒸发法制备艾塞那肽多囊脂质体，此方法虽然皮下一次注射艾塞那肽多囊脂质体剂量可控制大鼠血糖水平达七天，但该方法不但引入有机溶剂且处方复杂，可能会对皮肤产生刺激性，更重要的是该专利多囊脂质体粒径为5~50μm。J.Senior等【J.Senior,M.Radomsky,Sustained-ReleaseInjectableProducts,1sted.,Interpharm/CRC，NewYork，2000】指出，如果脂质体的粒径越大，其皮下释放就越缓慢。但已有文献【陈亭亭、陆伟根，多囊脂质体的应用现状。临床用药；2007(28)170-173】指出多囊脂质体粒径大，不能静脉给药，其在贮存过程出现的沉降和聚集尚未得到解决，可能影响制剂的稳定性，且目前开发的多囊脂质体产品为混悬液，不便于保存和运输；此外，多囊脂质体的制备对生产条件要求比较苛刻，不易扩大生产，这也使其发展受到一定的限制。美国食品药品监督管理局（FDA)于2012年1月27日批准每周一次注射的艾塞那肽缓释型注射液上市(Bydureon/Exenatide)，每周注射一次用于II型糖尿病的辅助治疗。然而，美国FDA要求制药公司（Amylin)建立一个严重低血糖风险以及甲状腺髓样癌（MTC)和急性胰腺炎病例连续注册系统，检测美国由此引发癌症的年发生率至少15年，并制订一套危险评估和减轻策略（RHMS)。[0006]除胰岛素计算器控制泵外，胰岛素泵还需要胰岛素储存器、接管、特殊注射针和粘贴材料等，且针头和接管需经常更换，以防感染和堵塞；其价格昂贵从而未纳入医疗保险，多为患者自费。在胰岛素泵中使用的胰岛素浓度是100单位/毫升，其与人胰岛素笔芯的浓度相同。采用胰岛素泵注射胰岛素及其类似物到皮下组织后，其吸收速度和曲线与一般注射器皮下注射胰岛素类似。溶液中胰岛素六聚体分解成单体较慢，超短效胰岛素类似物双聚体分解成单体迅速，胰岛素泵需要分别注入基础胰岛素24小时分布剂量和餐前追加胰岛素剂量，需要随时调整注入量，以免低血糖；也需要根据进食量和时间调整胰岛素追加剂量；也一样需要经常请内分泌医生或售后服务点的专业医生检查胰岛素泵的情况，调节膜岛素剂量。JoseMB.等【JoseMB.,MarikoM·，KozoT.etal.AbsorptionofinsulinfromPluronicF_127gelsfollowingsubcutaneousadministrationinrats.Int.J.Pharmaceutics.1999(184):189-198】利用泊洛沙姆水凝胶（Pluronichybridhydrogels)PF127制备了皮下注射的胰岛素缓释剂，但该剂型在大鼠体内的血药浓度和血糖浓度只维持了12小时，并没有达到良好的缓释效果；但若仅仅通过将PF127浓度增大来提高缓释效果，则会增加皮肤的刺激性。[0007]如上所述，对于胰岛素依赖型糖尿病患者而言，为了治疗的安全、有效和依从性，急需开发一种价格合适、稳定、对皮肤低刺激性且易于大规模生产的长效控释制剂。【
发明内容】[0008]为满足上述大量需求中的一个或多个，本发明提供了一种含有胰岛素或艾塞那肽等降血糖活性成分的生物兼容性长效控释脂质体凝胶组合物，当前第1页1 2 3 4