一种具有缓解体力疲劳功能的牛樟芝滴丸及制备工艺的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明属于保健食品技术领域，涉及一种具有缓解体力疲劳功能的牛樟芝滴丸及制备工艺。
【背景技术】
[0002]疲劳是机体的一系列复杂的生理生化变化过程，是人体的脑力和体力到达一定阶段后必然出现的生理现象，可以导致人们运动能力降低、工作效率降低、产量减少和差错事故增多。疲劳发生后如果得不到及时消除，将会逐渐积累，最终导致过劳，出现过度训练综合征和慢性疲劳综合征等，使机体发生内分泌紊乱、免疫力下降、甚至出现器质性病变，成为威胁人类身心健康的重要因素。因此，延缓疲劳的发生和促进疲劳的恢复一直是人们关注的热点。随着人们生活水平的提高，安全而有效的保健食品成为人们缓解体力疲劳的一种手段。
[0003]近年来，市场对许多药用真菌产品的需求量显著增加，而传统的药用真菌培养方式大多集中于对子实体的栽培，不能满足需求。液体发酵极大缩短培养周期，不受地理和时间的限制，且可能达到野生药用真菌具有的多项生理活性及有效成分，优势明显。
[0004]樟芝，又名牛樟芝或牛樟菇，属于担子菌纲、非褶菌目、多孔科、多年生担子菌，只生长在台湾地区的牛樟树腐朽树干的内壁。樟芝子实体味苦，具有强烈的樟树香气，外形为板状或钟状，无柄。子实体初期新鲜时呈现橘红色、橘褐色，老熟时会渐渐转变为棕褐色，之后变为黑色。从近年的研宄报告发现，牛樟芝含有许多复杂成分，如精油、多糖体，其主要化学成分为P-D-葡聚糖、三萜类化合物(如樟萜酸A、B、e、K等)、超氧歧化酶、核酸类(腺苷等物质)、麦角固醇、蛋白质(含免疫蛋白)、维生素、氨基酸、凝聚素及一些微量元素等。这些有效成分中以三萜类化合物最特别，高达200种以上(单一品系的灵芝约20-50种，不同品系灵芝总合约200多种)，含量为10%-45% (灵芝为1%_3%)，是其他菇菌无法相比的；多糖体含量为13.13% (灵芝为2%) ο
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种具有缓解体力疲劳功能的牛樟芝滴丸，具有明显的保健医疗效果。
[0006]本发明进一步提供了一种具有缓解体力疲劳功能的牛樟芝滴丸的制备工艺，适用于工业化生产。
[0007]本发明所涉及的一株牛樟芝诱变菌株，已于2015年5月3日保藏《中国典型培养物保藏中心》，命名为:牛樟芝AC09 ;Antrodia camphorata AC09，保藏号为:CCTCC N0:M2015274。
[0008]本发明所述的一种具有缓解体力疲劳功能的牛樟芝滴丸，由如下方法制备得到:将经诱变选育出的高产牛樟芝菌种AC09经发酵罐发酵，发酵液以4000?5000r/min离心5?lOmin，弃上清，收集沉淀并以_30?_50°C冻干60?72小时，得到牛樟芝发酵液冻干粉；再将牛樟芝菌粉醇提2?3次，固液质量比1:15?1:30，温度为20?40°C，第一次水提的时间为3?4小时，第2次水提的时间为I?3小时，第3次水提的时间为I?3小时，合并多次醇提液，200?300目过滤得到过滤液，将过滤液减压浓缩至相对密度1.05?1.15(40°C_55°C)，即得牛樟芝提取物。首先将F68称重后加入烧杯中，之后在磁石搅拌的状态下混合均匀；在37°C下，同时缓慢搅拌，加入固定量(液液质量比1:5?1:10)的牛樟芝浓缩物；置于均质机中搅拌均质得到均质乳化的牛樟芝提取物备用。使用PEG6000(聚乙二醇6000)当基质，称取适量PEG6000于水浴上加热(75°C-95°C)至全部熔融为液体后。加入适量(液液质量比1:5?1:10)备用的牛樟芝提取液，以熔融法混匀溶融液。放入均质机中以12000rpm搅拌5min-10min至完全均质。置入滴丸机的贮液筒内，在保温80°C_85°C的条件下，一滴滴地滴入8°C-12°C冷凝液中使之梯度冷凝，收集滴丸；沥净和用滤纸除去丸上的冷凝液；干燥24h-48h后，即得牛樟芝滴丸。
[0009]牛樟芝菌种发酵条件为:培养基组分蛋白胨10?20g/L，葡萄糖15?25g/L，酵母浸粉10?20g/L，无水硫酸镁2?4g/L，磷酸二氢钾2?4g/L，VB10.1?0.2g/L，发酵条件为:装液量为60?80L，接种量(v/v) 5?10%，发酵温度25?27°C，发酵罐转速150?300r/min，发酵时间3?5天。
[0010]经动物实验证明(详见实施例)，本发明牛樟芝水提物具有缓解体力疲劳功能，因而可以在作为保健食品方面得到应用。其主要的功效学作用如下:昆明小鼠在服用本发明的牛樟芝保健食品(即牛樟芝发酵液冻干粉)15天后，其包括负重游泳、耐力跑、疲劳转棒等的耐疲劳行为增加，并且通过自主活动实验得出本产品无精神抑制或兴奋作用。完全符合《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)中对缓解体力疲劳保健食品的评价要求。
[0011]本发明的积极效果在于:制得牛樟芝滴丸无副作用，具有显著保健功效，可长期服用，且各主要原料可通过深层液体发酵生产，降低了工业化成本、有很好的市场开发前景。
【附图说明】
[0012]图1为本发明对小鼠自主活动的影响；
图2为本发明对小鼠耐跑力竭时间的影响；
图3为本发明对小鼠负重游泳力竭时间的影响；
图4为本发明对小鼠疲劳转棒实验的影响。
[0013]具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述，但本发明不受具体实施例限制。
[0014]实施例1
将经诱变选育出的高产牛樟芝菌种(AC09)经发酵罐发酵(培养基组分:蛋白胨12g/L，葡萄糖18g/L，酵母浸粉12g/L，无水硫酸镁2g/L，磷酸二氢钾2g/L，VB10.15g/L，发酵条件为:装液量为75L，接种量(v/v)5%，发酵温度25°C，发酵罐转速175r/min，发酵时间3天)，发酵液以4000r/min，离心5?lOmin，弃上清，收集沉淀并以-30?_50°C冻干60小时，得到牛樟芝发酵液冻干粉。再将牛樟芝菌粉醇提3次，固液质量比1:15，温度为40°C，第一次水提的时间为3小时，第2次水提的时间为I小时，第3次水提的时间为I小时，合并多次醇提液，200?300目过滤得到过滤液，将过滤液减压浓缩至相对密度1.05?1.15 (40°C),即得牛樟芝提取物。首先将F68称重后加入烧杯中，之后在磁石搅拌的状态下混合均匀。在37°C下，同时缓慢搅拌，按液液质量比1:5加入牛樟芝浓缩物。置于均质机中搅拌均质得到均质乳化的牛樟芝提取物备用。使用PEG6000(聚乙二醇6000)当基质，称取适量PEG6000于水浴上加热(75°C)至全部熔融为液体后。加入适量(液液质量比1:5)备用的牛樟芝提取液，以恪融法混勾溶融液。放入均质机中以12000r/min搅拌5min-10min至完全均质。置入滴丸机的贮液筒内，在保温80°C的条件下，一滴滴地滴入12°C冷凝液中使之梯度冷凝，收集滴丸。沥净和用滤纸除去丸上的冷凝液。置入千燥箱内待干，48h后，即得牛樟芝滴丸356g。
[0015]I动物分组及饲养
本试验例用于说明本发明的牛樟芝保健食品(即牛樟芝滴丸)对小鼠体力疲劳的影响。准备健康昆明小鼠80只，雌雄各班，体重18?22g，饲养温度22±2°C，相对湿度40?70%，雌雄各随机分为4大组，每组10只，分别作为空白对照组、牛樟芝滴丸低剂量组、牛樟芝滴丸中剂量组、牛樟芝滴丸高剂量组。低、中、高剂量组分别按100、300、900mg/kg剂量灌胃给药，灌胃体积为0.2mL，空白对照组给予0.2mL的生理盐水；每天上午9时灌胃I次，连续15天。
[0016]2检测结果
2.1本发明对小鼠自主活动的影响
图1显示本发明对小鼠自主活动的影响(A:本发明对小鼠活动的影响:本发明对小鼠站立的影响)，剂量组组与空白组相比，经统计学处理，不论雌雄、活动或站立，均无显著性