Pi3k/akt抑制剂化合物与her3/egfr抑制剂化合物的组合及使用方法
【专利说明】P13K/AKT抑制剂化合物与HER3/EGFR抑制剂化合物的组合 及使用方法
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本专利申请要求于2012年12月7日提交的美国申请序列号61/734, 796和2013 年10月9日提交的美国申请序列号61/888, 892的优先权的权益，所述申请以引用的方式 并入本文。
[0003] 序列表
[0004] 本申请包含已以ASCII格式电子地提交且据此以引用的方式整体并入的序列表。 于2013年12月5日创建的所述ASCII拷贝名为01000. 056W01_SL. txt且大小为8, 675字 T。 发明领域
[0005] 本发明大体涉及具有针对过度增殖性病症如癌症（例如，三阴性乳腺癌）的活性 的化合物的药物组合，所述药物组合包括抑制PI3K/AKT途径的化合物和阻断HER3/EGFR的 化合物的组合。本发明还涉及使用所述组合用于体外、原位和体内诊断或治疗哺乳动物细 胞或相关联的病理状况的方法。
[0006] 发明背景
[0007] 蛋白激酶（PK)是通过从ATP转移末端（y)磷酸酯来催化蛋白质的酪氨酸、丝 氨酸和苏氨酸残基上的羟基的磷酸化作用的酶。通过信号转导途径，这些酶取决于PK 活性以一种方式或另一种方式调节细胞生长、分化和增殖，即细胞生命的实际上所有方 面(Hardie, G.和 Hanks,S. (1995)The Protein Kinase Facts Book.I 和 II，Academic Press，San Diego, CA)。此外，已经将异常的PK活性与许多病症相关联，所述病症的范围从 相对无生命威胁的疾病如银肩病到极其致命的疾病例如恶性胶质瘤（脑癌）。蛋白激酶是 用于治疗性调节的重要目标类别（Cohen, P. (2002) Nature Rev. Drug Discovery 1:309)〇
[0008]目前，仍然需要改进的可以用于治疗过度增殖性疾病如癌症（例如三阴性乳腺 癌）的方法和组合物。
[0009] 发明概述
[0010] 已经确定通过施用⑶C-0068或⑶C-0941或其药学上可接受的盐和MEHD7945A的 组合用于过度增殖性病症的治疗性治疗，可以实现在体外和体内抑制癌细胞的生长方面的 改善效果。所述组合和方法将适用于过度增殖性病症如癌症，例如三阴性乳腺癌的治疗。在 某些实施方案中，组合的施用可以提供协同效应。
[0011] 因此，本发明的某些实施方案提供包含以下的治疗性组合：小分子ATP-竞争性 AKT抑制剂⑶C-0068 (式I)或其药学上可接受的盐（参见W0 2008/006040)，
[0012]
[0013] 或小分子ATP-竞争性pan-PI3K抑制剂⑶C-0941 (式II)、或其药学上可接受的 盐（参见 US 7, 781，433 ;US 8, 247, 397, Folkes 等，J. Med. Chem.，51，5522-5532 (2008))， 也称为 picti 1 isib，CAS 登记号：957054-30-7,命名为 4- (2- (1H-吲唑-4-基）-6- ((4-(甲 基磺酰基）哌嗪-1-基）甲基）噻吩并[3, 2-d]嘧啶-4-基）吗啉，并具有以下结构：
[0014]
[0015] 与MEHD7945A组合，MEHD7945A是包含两个相同的抗原结合结构域的双重作用 抗体，每个所述结构域特异性地结合至J1ER3和EGFR (参见W0 2010/108127(例如，图33) 和 Schaefer 等，Cancer Cell, 20, 472-486(2011)中的 DLllf);或与ERBITUX'K(西妥 昔单抗）组合，ERBITUX?是目前指定用于治疗头颈癌和结直肠癌的表皮生长因子受体 (EGFR)拮抗剂；或」jVectibixK(帕尼单抗）组合，Vectibix?是目前指定作为单一药剂用 于在氟嘧啶、奥沙利铂和伊立替康的化疗方案时或之后疾病进展情况下的转移性结直肠癌 的治疗的表皮生长因子受体拮抗剂。
[0016] 因此，本发明的某些实施方案涉及⑶C-0068或⑶C-0941或其药学上可接受的盐 和MEHD7945A的组合，所述组合用于过度增殖性病症的治疗性治疗。
[0017] 在某些实施方案中，过度增殖性病症是癌症。
[0018] 在某些实施方案中，癌症与PTEN突变相关联。
[0019] 在某些实施方案中，癌症与AKT突变、过表达或扩增相关联。
[0020] 在某些实施方案中，癌症与PI3K突变相关联。
[0021] 在某些实施方案中，癌症选自间皮瘤、子宫内膜癌、胰腺癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、 前列腺癌、黑素瘤、胃癌、结肠癌、肾癌、头颈癌，以及神经胶质瘤。
[0022] 在某些实施方案中，癌症是乳腺癌。
[0023] 在某些实施方案中，乳腺癌是三阴性乳腺癌。
[0024] 在某些实施方案中，⑶C-0068或其药学上可接受的盐与MEHD7945A组合施用。
[0025] 在某些实施方案中，⑶C-0941或其药学上可接受的盐与MEHD7945A组合施用。
[0026] 在某些实施方案中，⑶C-0068或⑶C-0941或其药学上可接受的盐与MEHD7945A同 时施用。
[0027] 在某些实施方案中，⑶C-0068或⑶C-0941或其药学上可接受的盐与MEHD7945A依 次施用。
[0028] 本发明的某些实施方案涉及⑶C-0068或⑶C-0941或其药学上可接受的盐和 MEHD7945A的组合，所述组合用于改善患有过度增殖性病症的患者的生活质量的治疗用途。
[0029] 本发明的某些实施方案涉及⑶C-0068或⑶C-0941或其药学上可接受的盐和 MEHD7945A的组合，所述组合用于治疗过度增殖性病症。
[0030] 本发明的某些实施方案涉及⑶C-0068或⑶C-0941或其药学上可接受的盐和 MEHD7945A的组合，所述组合用于治疗由AKT激酶调节的疾病或病状。
[0031] 本发明的某些实施方案涉及⑶C-0068或⑶C-0941或其药学上可接受的盐和 MEHD7945A的组合在制备用于治疗哺乳动物的过度增殖性病症的药物中的用途。
[0032] 本发明的某些实施方案涉及⑶C-0068或⑶C-0941或其药学上可接受的盐和 MEHD7945A的组合在制备用于治疗哺乳动物的由AKT激酶调节的疾病或病状的药物中的用 途。
[0033] 本发明的某些实施方案涉及包括⑶C-0068或⑶C-0941、或其药学上可接受的盐 和MEHD7945A、容器以及包装插页或标签的试剂盒，所述包装插页或标签指示⑶C-0068或 ⑶C-0941或其药学上可接受的盐和MEHD7945A用于治疗过度增殖性病症（例如癌症，如三 阴性乳腺癌）的施用。
[0034] 本发明的某些实施方案涉及包含⑶C-0068或⑶C-0941或其药学上可接受的盐和 MEHD7945A的产品，其作为组合制剂在过度增殖性病症的治疗中单独、同时或依次使用。
[0035] 本发明的某些实施方案涉及治疗哺乳动物的过度增殖性病症（例如，癌症，如三 阴性乳腺癌）的方法，其包括向哺乳动物施用⑶C-0068或⑶C-0941或其药学上可接受的 盐和MEHD7945A的组合。
[0036] 本发明的某些实施方案涉及治疗哺乳动物的由AKT激酶调节的疾病或病状的方 法，其包括向哺乳动物施用⑶C-0068或⑶C-0941或其药学上可接受的盐和MEHD7945A的 组合。
[0037] 在某些实施方案中，哺乳动物是患有三阴性乳腺癌（TNBC)的人类，其由于具有升 高的EGFR表达的TNBC而被选择进行治疗。
[0038] 在某些实施方案中，在治疗之后测量HER3的表达，其中相对升高的HER3表达指示 因缺乏完全肿瘤消退的升高的风险。
[0039] 附图简述
[0040] 图1. TNBC临床前模型中的EGFR、HER3和PI3K/Akt途径的组合抑制的治疗活性。 (A)蛋白质印迹显示所示治疗24小时后EGFR、HER3和下游信号途径的表达和活化。在 10nM下使用MEHD7945A，而⑶C-0068和⑶C-0941均为luM。（B)如所示处理的MDA-MB-468 和HCC70细胞的五天增殖分析。在10nM下使用MEHD7945A，而⑶C-0068和⑶C-0941均为 luM。（C)如所示处理的TNBC患者来源的异种移植物（PDX)的肿瘤生长曲线。每周两次给 予 10mg/Kg 的 MEHD7945A，每天给予 75mg/Kg 的 GDC-0941 和每天给予 40mg/Kg 的 GDC-0058。 (D)如所示处理的H)X中的活化的和总的EGFR和HER3的CEER分析。在最后一次药物施 用后2小时收获肿瘤。相对于总细胞角蛋白的量来标准化蛋白质以避免来自基质污染的信 号，并且由计算单位（⑶）来量化。误差条示出相对于单一试剂，组合⑶C-0068或⑶C-0941 和MEHD7945A的SEM ;*p〈0. 05, #p〈0. 01。使用双侧学生t-检验计算P-值。
[0041] 图2. MEHD7945A或西妥昔单抗与PI3K抑制组合的功效。（A)左：如所示处理的 HCC70细胞的五天增殖分析。在10nM下使用MEHD7945A和西妥昔单抗，而⑶C-0068和 ⑶C-0941均为luM。右：蛋白质印迹显示如所示处理的HCC70细胞中的pEGFR和pHER3的 表达。（B)如所示处理的HCC70异种移植物的肿瘤生长曲线。每周两次给予10mg/Kg的 MEHD7945A和西妥昔单抗，并且每天给予75mg/Kg的⑶C-0941。误差条示出相对于单一试 剂或组合⑶C-0941和西妥昔单抗，组合⑶C-0941和MEHD7945A的SEM ;*p〈0. 05。（C)如所 示处理的HCC70异种移植物中的活化的和总的EGFR和HER3的CEER分析。误差条示出针 对pEGFR的所有情况相对于对照（#p〈0. 01)，以及组合⑶C-0068和MEHD7945A相对于组合 GDC-0941和西妥昔单抗或西妥昔单抗单一试剂（*p〈0. 05)的SEM。使用双侧学生t-检验 计算P-值。
[0042] 图3. TNBC患者中的EGFR表达和对于抗EGFR治疗的应答。（A)用基于帕尼单抗疗 法治疗的40位TNBC患者中的基线EGFR表达与病理学完全应答（pCR)之间的相关性。（B) 基线与患者的残余肿瘤之间的EGFR表达的变化，所述患者在用基于帕尼单抗疗法的治疗 时未获得PCR。左条是治疗前的而右条是治疗后的。（C)代表性IHC示出相对于基线试样 (治疗前），在残余肿瘤中的减小的EGFR表达（治疗后）。
[0043] 图4. TNBC患者中的HER3表达和对于抗EGFR治疗的应答。（A)基线与在用基于帕 尼单抗疗法的治疗时未获得pCR的患者的残余肿瘤之间的HER3表达的变化。左条是治疗 前的而右条是治疗后的。（B)代表性IHC示出相对于基线试样（治疗前），在残余肿瘤中的 增大的J1ER3表达（治疗后）。
[0044] 图5?图5描绘作为双重HER3/EGFR抑制剂的MEHD7945A。
[0045] 示例性实施方案和定义的详述
[0046] 在本说明书和权利要求书中使用的词语"包含（comprise) "、"包含（comprising) " "包 括（include) "、"包括（including)"和"包括（includes)"意在指定所述特征、整数、组分或步骤 的存在，但它们并不排除一个或多个其它的特征、整数、组分、步骤或其组合的存在或加入。
[0047] 术语"治疗（treat) "和"治疗（treatment) "指治疗性治疗，其中目的是预防或减 缓（减轻）不期望的生理变化或紊乱，例如癌症的生长、发展或扩散。出于本发明的目的，有 益的或所需的临床结果包括但不限于症状的减轻、疾病程度的减小、疾病状态的稳定（即 不恶化）、疾病进程的延缓或减慢、疾病状态的改善或缓和，以及缓解（无论是部分缓解或 是全部缓解），无论是可检测或是不可检测。"治疗"还可以意指与如果没有接受治疗的预 期的存活期相比，延长存活期。需要治疗的那些包括已患有病状或病症例如患有三阴性乳 腺癌的患者。
[0048] 短语"治疗有效量"意指这样的量，其（i)治疗特定疾病、病状或病症，（ii)减弱、 改善或消除一种或多种特定疾病、病状或病症的症状，或（iii)预防或延迟一种或多种本 文所述的特定疾病、病状或病症的症状的发生。在癌症的情况下，药物的治疗有效量可以减 少癌细胞的数量；减小肿瘤的尺寸；抑制（即，在某种程度上减慢并且优选停止）癌细胞对 周边器官的浸润；抑制（即，在某种程度上减慢并并且优选停止）肿瘤转移；在某种程度上 抑制肿瘤生长；和/或在某种程度上减轻与癌症相关联的一种或多种症状。在组合可以阻 止生长和/或杀死现有的癌细胞的程度上，它可以为细胞抑制的和/或细胞毒性的。对于 癌症疗法，功效可以例如通过评估疾病发展的时间（TTP)和/或测定应答率（RR)来测量。 [0049]术语"癌症"和"癌性"是指或描述哺乳动物的特征通常在于细胞生长不受调控的 生理病状。"肿瘤"包含一种或多种癌性细胞。癌症的实例包括但不限于癌、淋巴瘤、胚细胞 瘤、肉瘤和白血病或淋巴恶性肿瘤。此类癌症的更特定实例包括鳞状细胞癌（例如上皮鳞 状细胞癌）、肺癌（包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌（"NSCLC")、肺腺癌和肺鳞状细胞癌）、 腹膜癌、肝细胞癌、胃癌（gastric)或胃癌（stomach)(包括胃肠癌）、胰腺癌、成胶质细胞 瘤、子宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝细胞瘤、乳腺癌（例如三阴性乳腺癌）、结肠癌、直肠 癌、结肠直肠癌、子宫内膜或子宫癌、唾液腺癌、肾（kidney)癌或肾（renal)癌、前列腺癌、 外阴癌、甲状腺癌、肝癌、肛门癌、阴莖癌以及头颈癌。如本文所用的胃癌，包括胃癌，其可以 发展至胃的任何部分中，并且可以延伸遍布至胃以及其它器官；特别是食道、肺、淋巴结和 肝脏。
[0050]"化疗剂"是生物学的（例如大分子）或化学的（例如小分子）化合物，可用于癌 症的治疗，而不考虑作用机理。
[0051] "铂剂"是包含铂，例如卡铂、顺铂以及奥沙利铂的化疗剂。
[0052] 术语"哺乳动物"包括但不限于，人类、小鼠、大鼠、豚鼠、猴、狗、猫、马、牛、猪、羊和 家禽。术语"患者"是指哺乳动物，并且在一个实施方案中，患者是男性人类或女性人类。<