一种银杏内酯k、n复方氯化钠注射液及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种银杏内酯K、N复方氯化钠注射液及其制备和应用，所述一种银杏 内酯K、N复方氯化钠注射液是以银杏内酯K、银杏内酯N为主药，属于药物制剂领域。
【背景技术】
[0002] 银杏和银杏叶是治疗心脑血管疾病常用中药，其主要活性成分银杏内酯类化 合物已证为强血小板活化因子（plateletacllvafactor，PAF)受体抑制剂。银杏内酯 B (ginkgo-ide B，GB)是目前发现的活性最强的天然PAF受体特异拮抗剂，但GB自然界含 量较低，价格昂贵、工业成本较高。银杏内酯N(GN)是从银杏叶中分离得到的新化合物，可 通过合成反应制得，其药理活性与GB类似，明显降低了原料成本。
[0003] 专利CN1919848公开了银杏内酯K(GK)及其复合物及其制备方法与用途，将银杏 内酯K与碱性物质反应生成复合物，以增加其溶解性；专利CN1513449公开了 GB溶于非水 溶剂制备银杏内酯针剂，专利CN101249085公开了一种银杏内酯A、B复方注射剂及其制备 方法和应用，以银杏内酯A、B为主药，使用PEG、、丙二醇、丙三醇、普洛沙姆、吐温-80中的 一种或两种以上为潜溶剂制备注射剂。上述注射液均由于主药溶解度差，采用各种手段增 加其溶解度，并制备成针剂，在临床稀释后用于静脉滴注。
[0004] 专利CN103169744公开了银杏内酯N、黄芩苷、防风组成的组合物治疗脑缺血、脑 梗塞，其中银杏内酯N的复方组合物能够穿过血脑屏障，抑制P-糖蛋白促进银杏内酯病灶 处的暴露浓度。
[0005] 本发明在上述基础上，使用水溶性较好的银杏内酯N与银杏内酯K混合，制备大容 量氯化钠注射液，降低辅料用量，降低安全隐患；同时发现，二者在药理活性上有协同作用。
【发明内容】
[0006] 本发明提供一种银杏内酯K、N复方氯化钠注射液，由主药和药学上可接受的注射 用辅料组成，其特征在于所述主药为银杏内酯N和银杏内酯K.
[0007] 其中，银杏内酯N和银杏内酯K药理活性有协同作用，二者比例没有特别限制，由 于银杏内酯N水溶性较好，为银杏内酯K助溶剂，作为优选，其中所述每单位制剂中含主药 IOmg~50mg，银杏内酯N和银杏内酯K的重量比为1~9 : 9~1，进一步优选为5 : 1.
[0008] 银杏内酯N水溶性较好，可以减少辅料的应用，降低溶血风险；并且，本发明为氯 化钠注射液，临床用于静脉滴注。其中所述的注射用辅料，可以选用药学上可接受的注射 制剂用辅料，考虑到氯化钠注射液的安全性，选用常用的丙二醇和乙醇促进溶解，其中丙二 醇：乙醇为I : 1~5,优选为1 : 3。其中氯化钠用于调节渗透压。
[0009] 本发明上述所述的一种银杏内酯K、N复方氯化钠注射液，其中所述的主药银杏内 酯N和银杏内酯K，来源和获得方式没有特别限制，可以分别是纯的银杏内酯N和银杏内酯 K混合而成，银杏内酯N和银杏内酯K可以分别由植物内提取单体获得，也可以是化学合成 制备获得。
[0010] 作为本发明【具体实施方式】之一，上述所述的一种银杏内酯K、N复方氯化钠注射 液，由主药和药学上可接受的辅料组成，其中每单位制剂中含主药IOmg~50mg，其中银杏 内酯N和银杏内酯K的重量比为1~9 : 9~1，优选为5 : 1，所述辅料丙二醇：乙醇为 I : 1~5,优选为1 : 3。其氯化钠调节渗透压，注射用水稀释至100mL/瓶。
[0011] 本发明还提供了一种制备上述一种银杏内酯K、N复方氯化钠注射液的制备方法， 其特征在于包括以下步骤：
[0012] (1)主药加入丙二醇、乙醇和适量注射用水在60°C下完全溶解
[0013] (2)向步骤⑴中加入氯化钠，加入活性炭、注射用水，保温（60°C )搅拌15分钟
[0014] (3)将步骤（2)趁热过滤，滤液放置至40°C，加入剩余量注射用水。滤过，灌装， 115 °C灭菌30分钟，灯检，贴签，包装，即得。
[0015] 本发明通过试验发现，银杏内酯K和银杏内酯N混合作为制剂主药，银杏内酯N为 银杏内酯K的助溶剂，增强了银杏内酯K的溶解度。本发明在少量使用有机溶剂的基础上 制备获得氯化钠注射液，改变了目前银杏内酯类注射剂必须采用大量有机溶剂溶解，临床 使用前稀释制备的现状。同时，本发明复方氯化钠注射液稳定性良好，在各种保存环境下均 保证了药品有效期内的安全性和有效性。同时，银杏内酯N为银杏内酯K在用于缺血性脑 血管疾病预防和治疗上具有协同的药理活性。
[0016] 以下试验用于证明本发明的技术效果，但不仅限于以下试验。
[0017] 试验 1
[0018]
[0019] 配制：取银杏内酯K、银杏内酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化钠，搅拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0020] 试验 2
[0021]
[0023] 配制：取银杏内酯K、银杏内酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化钠，搅拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0024] 试验 3
[0025]
[0026] 配制：取银杏内酯K、银杏内酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化钠，搅拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0027] 试验 4
[0028]
[0029] 配制：取银杏内酯K、银杏内酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 搅拌，全部溶解后加入注射用水至l〇〇ml，加入氯化钠调节渗透压。
[0030] 试验 5
[0031]
[0032] 配制：取银杏内酯K、银杏内酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化钠，搅拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0033] 试验 6
[0034]
[0035] 配制：取银杏内酯K、银杏内酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化钠，搅拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0036] 试验 7
[0037]
[0038] 配制：取银杏内酯K加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解，加入氯化钠， 搅拌，全部溶解后加入注射用水至l〇〇ml。
[0039] 试验 8
[0040]
[0041] 配制：取银杏内酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解，加入氯化钠， 搅拌，全部溶解后加入注射用水至l〇〇ml。
[0042]试验 9
[0045] 配制：取银杏内酯K、银杏内酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化钠，搅拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0046] 试验 10
[0047]
[0048] 配制：取银杏内酯K、银杏内酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化钠，搅拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0049] 试验 11
[0050]
[0051] 配制：取银杏内酯K、银杏内酯N加入乙醇、少量注射用水在60°C下溶解，加入氯化 钠，搅拌，全部溶解后加入注射用水至l〇〇ml。
[0052] 按上述试验1~试验9配置银杏内酯N、银杏内酯K复方氯化钠注射液，考察二者 在-30°C、-20°C、-10°C、0°C、5°C、25°C温度下，0天、10天、30天、90天的稳定性，结果见下 表。
[0053] 不同温度贮藏0天结果
[0063] 一种银杏内酯K、N复方氯化钠注射液对局灶性缺血性脑损伤大鼠的保护作用
[0064] 1 ?试验材料
[0065] (1)受试药品及与给药
[0066] 一种银杏内酯K、N复方氯化钠注射液，按上述试验1、试验6方法进行自制；同时 按照试验方法自制银杏内酯N氯化钠注射液（2mg/ml)和银杏内酯K氯化钠注射液（0. 2mg/ ml);银杏内酯B氯化钠注射液（自制，使用PEG助溶）；0. 9%氯化钠注射液（山东华鲁制 药有限公司，批号：C1303130)。
[0067] (2)试剂与试验仪器
[0068] 超氧化歧化酶（SOD)试剂盒；丙二醛（MDA)试剂盒；一氧化氮（NO)试剂盒；一氧 化氮合酶（NOS)试剂盒（均由南京建成生物工程研究所提供）。
[0069] 仪器UV-2201紫外可见分光光度计（岛津公司）；MPF_4荧光分光光度计（岛津公 司）；31TDL-5型台式低速大容量离心机（上海隆拓仪器）；DG5033A酶标仪（华东电子科 技）。
[0070] (3)试验动物
[0071] 健康SD大鼠180只，体质量（220±30) g，由广州中医药大学实验动物中心提供。 室温19~26°C，湿度40%~70%，昼夜明暗交替时间12h/12h。饲料笼具两周更换1次， 料盒和水瓶每周更换1次，更换的笼具、料盒、水瓶进行消毒处理。所有对大鼠的实验程序 经动物伦理委员会批准。
[0072] 2?试验方法与结果
[0073] 按性别、体质量将大鼠随机分为11组，每组20只，分