酵母菌发酵复方组合物及其在美白保湿护肤品中的应用_2

文档序号:9675481阅读:来源:国知局
拌速度为60~250rpm,通气量为1~4VVM,发酵温度为25°C~30°C,发 酵时间为3天。
[0056] (5)将发酵后获得的初始发酵液用分离机(蝶式分离机,全速6500转/分)进行分 离,收集分离上清液,经〇. 2μπι微孔滤膜过滤,为酵母菌发酵复方组合物。该组合物外观清澈 颜色无色,气味独特兼有茉莉与玉竹的典型香味,香味丰富宜人。
[0057] 实施例2
[0058] (1)将玉竹洗净,粉碎过60目筛,加入相当于玉竹5倍质量的去离子水,60°C超声 (120W)提取60分钟,然后加热煮沸提取60分钟,8层纱布过滤,浓缩到密度1.11(于温度60°C 时测定得到),得到玉竹提取物。
[0059] (2)将干茉莉花和去离子水按质量比1:10的比例混合,于70°C浸润4h,8层纱布过 滤,得滤液。
[0060] (3)将上述玉竹提取物与茉莉花提取物按质量比5:1混合,搅拌均匀,经0.45μπι微 孔滤膜过滤,经121°C灭菌30分钟,自然冷却至室温。
[0061] (4)将预先摇床培养好的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC 2· 1接种 到酵母完全培养基(YPDA培养基)中,再加入步骤(3)得到的混合物,混合物的加入体积量相 当于酵母完全培养基体积的1/5,使酵母浓度为7 X IO6细胞/ml,进行发酵,发酵工艺参数为 pH值为4.0~7.0,搅拌速度为60~250rpm,通气量为1~4WM,发酵温度为25°C~30°C,发酵 时间为3天。
[0062] (5)将发酵后获得的初始发酵液用蝶式分离机进行分离,收集分离上清液,经0.2μ m微孔滤膜过滤,为酵母菌发酵复方组合物。
[0063] 实施例3
[0064] (1)将玉竹洗净,粉碎过60目筛,加入相当于玉竹8倍质量的去离子水,50°C超声 (200W)提取30分钟,然后加热煮沸提取90分钟,8层纱布过滤,浓缩到密度1.15(于温度60°C 时测定得到),得到玉竹提取物。
[0065] (2)将干茉莉花和去离子水按质量比1:8的比例混合,于90°C浸润3h,8层纱布过 滤,得滤液。
[0066] (3)将上述玉竹提取物与茉莉花提取物按质量比10:1混合,搅拌均匀,经0.45μπι微 孔滤膜过滤,经115°c灭菌15分钟,自然冷却至室温。
[0067] (4)将预先摇床培养好的郎必可假丝酵母(〇311乜(^1311113化3)0610: 2.1763接种 到酵母完全培养基(YPDA培养基)中,再加入步骤(3)得到的混合物,混合物的加入体积量相 当于酵母完全培养基体积的15 %,使酵母浓度为8 X IO6细胞/ml,进行发酵,发酵工艺参数 为pH值为4.0~7.0,搅拌速度为60~250rpm,通气量为1~4VVM,发酵温度为25°C~30°C,发 酵时间为2天。
[0068] (5)将发酵后获得的初始发酵液用蝶式分离机进行分离,收集分离上清液,经0.2μ m微孔滤膜过滤,得酵母菌发酵复方组合物。
[0069] 实施例4
[0070] (I)将玉竹洗净,粉碎过60目筛,加入相当于玉竹6倍质量的去离子水,60°C超声 (200W)提取60分钟,然后加热煮沸提取90分钟,8层纱布过滤,浓缩到密度1.10(于温度60°C 时测定得到),得到玉竹提取物。
[0071] (2)将干茉莉花和去离子水按质量比1:10的比例混合,于70°C浸润4h,8层纱布过 滤,得滤液。
[0072] (3)将上述玉竹提取物与茉莉花提取物按质量比15:1混合,搅拌均匀,经0.45μπι微 孔滤膜过滤,经121°C灭菌20分钟,自然冷却至室温。
[0073] (4)将预先摇床培养好的郎必可假丝酵母(〇311乜(^1311113化3)0610: 2.1763接种 到酵母完全培养基(YPDA培养基)中,再加入步骤(3)得到的混合物,混合物的加入体积量相 当于酵母完全培养基体积的1/5,使酵母浓度为8 X IO6细胞/ml,进行发酵,发酵工艺参数为 pH值为4.0~7.0,搅拌速度为60~250rpm,通气量为1~4WM,发酵温度为25°C~30°C,发酵 时间为4天。
[0074] (5)将发酵后获得的初始发酵液用蝶式分离机进行分离,收集分离上清液,经0.2μ m微孔滤膜过滤,得酵母菌发酵复方组合物。
[0075] 实施例5
[0076] (1)将玉竹洗净,粉碎过60目筛,加入相当于玉竹6倍质量的去离子水,60°C超声 (300W)提取30分钟,然后加热煮沸提取30分钟,8层纱布过滤,浓缩到密度1.08(于温度60°C 时测定得到),得到玉竹提取物。
[0077] (2)将干茉莉花和去离子水按质量比1:8的比例混合,于80°C浸润2h,8层纱布过 滤,得滤液。
[0078] (3)将上述玉竹提取物与茉莉花提取物按质量比20:1混合,搅拌均匀,经0.45μπι微 孔滤膜过滤,经115°C灭菌10分钟,自然冷却至室温。
[0079] (4)将预先摇床培养好的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC 2· 1接种 到酵母完全培养基(YPDA培养基)中,再加入步骤(3)得到的混合物,混合物的加入体积量相 当于酵母完全培养基体积的30 %,使酵母浓度为6 X IO6细胞/ml,进行发酵,发酵工艺参数 为pH值为4.0~7.0,搅拌速度为60~250rpm,通气量为1~4VVM,发酵温度为25°C~30°C,发 酵时间为2天。
[0080] (5)将发酵后获得的初始发酵液用蝶式分离机进行分离,收集分离上清液,经0.2μ m微孔滤膜过滤,得酵母菌发酵复方组合物。
[0081 ] 对照例1
[0082] (1)将干茉莉花和去离子水按质量比1:10的比例于80°C浸润2h,8层纱布过滤,得 滤液。
[0083] (2)将预先摇床培养好的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC 2· 1接种 到酵母完全培养基中,再加入步骤(3)得到的混合物,混合物的加入体积量相当于酵母完全 培养基体积的1/10,使酵母浓度为6 X IO6细胞/ml,进行发酵,发酵工艺参数为PH值为4.0~ 7.0,搅拌速度为60~250rpm,通气量为1~4VVM,发酵温度为25°C~30°C,发酵时间为2天。
[0084] (3)将发酵后获得的初始发酵液用分离机进行分离,收集分离上清液,经0.2μπι微 孔滤膜过滤,得酵母菌发酵复方组合物。
[0085] 对照例2
[0086] (1)将预先摇床培养好的郎必可假丝酵母(〇311乜(^1311113化3)0610: 2.1763接种 到酵母完全培养基中,使酵母浓度为6 X IO6细胞/ml,进行发酵,发酵工艺参数为PH值为4.0 ~7.0,搅拌速度为60~250rpm,通气量为1~4VVM,发酵温度为25°C~30°C,发酵时间为2 天。
[0087] (2)将发酵后获得的初始发酵液用分离机进行分离,收集分离上清液,经0.2μπι微 孔滤膜过滤,得到酵母菌发酵液。
[0088] 对照例3
[0089] (1)将玉竹洗净,粉碎过60目筛,加入相当于玉竹5倍质量的去离子水,50°C超声 (120W)提取30分钟,然后加热煮沸提取60分钟,8层纱布过滤,浓缩到密度1.08(于温度60°C 时测定得到),得到玉竹提取物。
[0090] (2)将干茉莉花和去离子水按质量比1:8的比例混合,于80°C浸润提取2h,8层纱布 过滤,得滤液。
[0091] (3)将上述玉竹提取物与茉莉花提取物按质量比1:1混合,搅拌均匀,经0.45μπι微 孔滤膜过滤,经121°C灭菌20分钟,自然冷却至室温,得玉竹提取物与茉莉花提取物混合液。
[0092] (4)将预先摇床培养好的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC 2· 1接种 到酵母完全培养基(YPDA培养基)中,使酵母浓度为8X IO6细胞/ml,进行发酵,发酵工艺参 数为pH值为4.0~7.0,搅拌速度为60~250rpm,通气量为1~4VVM,发酵温度为25°C~30°C, 发酵时间为3天。
[0093] (5)将发酵后获得的初始发酵液用分离机进行分离,收集分离上清液,经0.2μπι微 孔滤膜过滤,得到发酵液原液。
[0094] (6)将步骤(3)中玉竹提取物与茉莉花提取物混合液,再加入步骤(5)得到的发酵 原液中,步骤(3)中混合液的加入体积量相当于步骤(5)得到的发酵原液体积的1/10,得到 酵母液复方组合物。
[0095]效果实施例:
[0096] (1)美白效果的检测:酪氨酸酶活性抑制实验:测试原理:酪氨酸酶对多巴进行催 化反应,可生成多巴醌,多巴醌最大吸收波长在475nm,通过测量475nm波长的吸光率,可以 反应出生成多巴醌的浓度的大小。当酪氨酸酶与美白活性成分同时存在溶液中时,酪氨酸 酶的催化活性会受到一定程度的抑制,从而减少多巴醌的生成。根据前后吸光度对比,可判 定美白活性成分对酪氨酸酶活性的抑制程度,从而评估该种美白成分在体外的美白功效。 [0097] 试剂:试剂I: PBS (磷酸盐标准缓冲溶液,分别称取在110°C~130°C干燥2~3h后的 磷酸二氢钾(KH2P〇4)3.388g和磷酸氢二钠(Na 2HP〇4)3.533g溶于水并在容量瓶中稀释至 1L),pH值6.86;试剂2:多巴溶液(用PBS配制,质量分数为0.03% );试剂3:酪氨酸酶溶液(用 PBS配制,浓度200μg/ml);试剂4:酵母菌发酵复方组合物样品溶液(实施例及对照例,相同 稀释倍数)。
[0098] 实验方法:A测试样:3ml PBS+0.5ml酪氨酸酶溶液;B测试样:PBS; C测试样:Iml样 品溶液+2ml PBS+0.5ml酪氨酸酶溶液;D测试样:Iml酵母菌发酵复方组合物样品溶液+ 2.5ml PBS。A、B、C、D测试样品液同时配制
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