土庄绣线菊提取物及其用图
【技术领域】
[0001 ] 本发明设及一种基于养(1〇611证）的±庄绣线菊(Filipendula vulgaris)(同义 词:Filipendula hexapetala Gilib)提取物，还设及包括所述提取物的组合物和试剂盒， 用于预防和/或治疗WSTAT3转录因子的组成性激活为特征的药理症状。
【背景技术】
[0002] 近几十年来，文献中的许多证据表明属于STAT家族的转录因子在多种病理学（如 在促进肿瘤的炎症病理学及肿瘤自身）中的基本作用。STAT蛋白为胞浆转录因子，该胞浆转 录因子的憐酸化/激活(在JAK家族或化nus激酶蛋白的作用下在丝氨酸和/或酪氨酸的特定 残基上）决定了两个STAT单体的二聚化、该二聚体在细胞核中的易位、与STAT-特异性祀基 因的DNA的成分结合、W及诱导基因转录。STAT因子家族由屯个具有包括在分化、增殖、发 育、调亡和细胞炎症中发挥作用的多种生物学功能的成员（由基因 STAT1、STAT2、STAT3、 STAT4、STA巧A、STAT5B和STAT6编码)组成。由运些基因编码的蛋白质的一个特征是具有双 重作用，更具体地，在细胞质中转导信号的作用和在细胞核中转导转录因子的作用。特别 地，组成性激活STAT3和较小程度组成性激活STA^与多种新生肿瘤形成有关并伴随着一些 细胞内通路的失调，包括参与肿瘤存活和参与肿瘤细胞增殖的那些，W及参与肿瘤自身的 血管生成和转移过程的那些。
[0003] YuH等人于2009年在自然杂志上发表的综述中报道称STAT3的持续激活诱导了促 进癌症的炎症并调节对炎症和肿瘤微环境至关重要的基因。上述工作的表1和2中显示了由 STAT3激活的基因，还描述了如雪胆素乙（curcubi化cin)、白襲芦醇、肉盘菌内醋和說玉红 的天然物质中STAT3激活的一些抑制剂，然而需要指出的是运些物质发挥作用的作用机制 是未知的。
[0004] 在任何情况下，上述工作表明调控STAT3对治疗癌症来说是一种新的、更有效的和 非常有益的方法，报道称在多种肿瘤模型中敲除STAT3基因导致了肿瘤生长的抑制。
[000引据报道，在包括乳腺癌、前列腺癌、头颈部鱗状细胞癌、多发性骨髓瘤、淋己瘤和白 血病、脑肿瘤、结肠癌、尤文肉瘤、胃癌、食管癌、卵巢癌、鼻咽癌、膜腺癌(下表1)的大量肿瘤 中STAT3的组成性激活。对于许多类型的癌症，高水平的激活的STAT3已与较差的预后相关 联。STAT3的激活阻断了细胞调亡并增加了细胞增殖和细胞存活，从而促进血管生成和转移 并抑制抗肿瘤免疫应答。STAT3被组成性激活的肿瘤细胞株需要持续激活STAT3,其已被定 义为。依赖致癌基因"的表型(Johnston PA和Gandis RG，MolInterv; 11 (1); 18-26:2011)。
[0006]恶性胸膜间皮瘤(MPM)是来源于胸腔的间皮细胞的侵袭性肿瘤，尽管化疗(通常如 果使用了培美曲塞)提高了患有不可手术的MPM的患者的存活时间，但全球平均存活时间仅 为12个月。近期有报道称一种用于MPM的潜在分子治疗祀点为由存在于患有MPM的患者的胸 液中高水平的白细胞介素-6信号（比-6)激活的比-6信号通路（比-6VJAK/STAT3。比-6与其 受体的结合导致了引发JAK激活的受体的构象变化，该构象变化反过来引发STAT3转录因子 的二聚化，且STAT3二聚体在细胞核中易位，从而确定了引发多种祀基因的反式激活。
[0007] 运条通路对造血作用、免疫应答和肿瘤生成的发生是关键的。此外，还表明JAK/ STAT3系统的功能素乱参与了肿瘤的发展。
[0008] 此外，文献中还总是出现STAT3在肿瘤的发展和进展中所发挥作用的广泛性描述。 在血液肿瘤(多发性骨髓瘤、白血病、淋己瘤)和固体肿瘤(黑色素瘤、卵巢癌、前列腺癌和肾 细胞癌、膜腺癌、肺癌和脑癌）中均已观察到STAT3的组成性激活。为了更加深入，取自 l\irkson J和化ve 3,011(3〇旨6116;19(56);6613-26:2000的下表3表明许多肿瘤与51413的异 常激活直接相关。特别地，运种异常激活似乎是由转化如v-src、v-ros、v-f PS、Etk/BMX和 Lck的酪氨酸激酶的作用引起的，或由细胞因子的自分泌释放或旁分泌释放诱导的异常信 号引起的。STAT3的组成性激活导致编码细胞调亡的抑制因子(例如Bcl-xL、Mcl-l)、细胞周 期的调节因子(例如细胞周期素 Dl/D2、c Myc)和血管生成的诱导因子(例如VEGF:血管内皮 生长因子）的基因的更强表达。最后，最近已经证明除了在肿瘤生成中具有关键作用，运种 转录因子的组成性激活对抗由化疗药物诱导的死亡（Aggarwal B . B等人 .Ann.N.Y.Acad.Sci.1091；151-69:2006)O
[0009] 各种临床研究已表明体内固体肿瘤在使肿瘤自身对细胞死亡信号不敏感并对放 疗治疗和化疗治疗耐药的低水平氧气环境中生长和发展;另一方面，缺氧促进血管生成、增 殖和转移能力。在运种情况下，肿瘤的侵袭性似乎通过缺氧和通过STAT3的超活化与HIF-化 因子的激活和稳定有关。
[0010] 为此，基于祀向因子STAT3的抗癌治疗是非常可取的（Niu G.等人.Mol Cancer Res，6(7);1099-105:2008)。
[0011] 如下所示，表1是取自Aggarwal B.B.等人于2006的工作并显示了表达组成性激活 的STAT3、STAT3的活化因子、由STAT3调控的基因和STAT3的抑制因子的肿瘤的列表。
[0012] 表1
[0013]
[001引关键词：STAT，信号转导与转录激活因子;C1X，慢性淋己细胞白血病;CML，慢性粒 细胞白血病;ML，急性骨髓性白血病;SCCHN，头颈部鱗状细胞癌;HTLV，人类T细胞嗜淋己细 胞病毒;EBV，爱泼斯坦-己尔病毒:奈非那韦，HIV-I蛋白酶抑制因子;Rl 15777，法尼基转移 酶抑制因子;AG490和白皮杉醇，酪氨酸激酶抑制因子;PIAS，激活的STAT3的蛋白抑制因子； GQ-0DN，G-四寡核巧酸；SOCS，细胞因子信号转导抑制因子;GRIM,与类视黄醇-IFN-诱导的 死亡率相关的基因：EGCG，表没食子儿茶素-3-没食子酸醋；SSI ,STAT-诱导的STAWW制因 子:PTPeC，蛋白酪氨酸憐酸酶eC: DN，显性阴性;E肺-569，EGF-R抑制因子;DIF-I，分化诱导 因子-1; JAB，含有細2结构域的蛋白质；IL，白细胞介素;TNF，肿瘤坏死因子;MDA，黑色素瘤 分化抗原;MCP，单核细胞趋化蛋白；GCSF，粒细胞集落刺激因子;LIF，白血病抑制因子;OSM， 抑瘤素 M; IFN，干扰素;MIP，巨隧细胞炎性蛋白质；RANTES，受激活调节正常T细胞表达和分 泌因子;EGF，表皮生长因子;LPS，脂多糖;VEGF，血管内皮生长因子;MMP，基质金属蛋白酶； hT邸T，人端粒酶逆转录;SLF，青灰(steel)因子，HCV，丙型肝炎病毒
[0016] 表2是取自化hnston PA和GrandisRG 2011且与多种肿瘤的STAT3相关，证实STAT3 对于抗癌治疗是有效的感兴趣的祀标。
[0017] 表2 [001 引
[0019] 取自TurksonJ和JoveR 2000的表3表明与STAT3的异常激活直接有关的多种肿瘤。
[0020] 表 3
[0021]
[0023] 特别地，关于STAT3, W下已在许多出版物展示：
[0024] DSTAT3通常在许多人类癌症(如多发性骨髓瘤、淋己瘤、白血病、肺癌、前列腺癌、 头颈部鱗状细胞癌，和其他肿瘤类型)细胞中是组成性激活的(憐酸化）。
[002引 2)由生长因子（例如EGF、TGF-a、比-6、比-10、比-23、化-21、比-11、服F)、激酶致癌 因子(例如Sr C)来激活STAT3。
[0026] 3)STAT3介导增殖基因（例如c-myc、细胞周期素 D1)、细胞调亡抑制因子基因（例如 Bcl-化和存活素）、细胞因子编码基因 W及促进血管生成的基因（例如VEGF)的表达，从而当 STAT3被激活时，细胞增殖、血管生成和抑制细胞调亡增强。
[0027] 4)STAT3的激活还与化学耐药性和福射耐药性的现象有关。
[0028] 5)在STAT3的持续激活增加了各种人类癌症中的增殖、存活、血管生成和转移并抑 制了抗肿瘤免疫。
[0029] 还已知在某些器官中或在某些位点的慢性炎症促进了恶性转化，并且已知STAT3 对于导致癌症的炎症的外在和内在通路是至关重要的，事实上已知STAT3引导与慢性炎症 相关的恶性特征。
[0030] 由于STAT3在肿瘤生成中的关键作用，STAT3的抑制因子在癌症的预防和治疗中具 有巨大的潜力。也许最著名的STAT3激活抑制因子之一是抑制了 JAK2激活的AG490。STAT3的 其它抑制因子包括短肤、寡核巧酸和小分子。一些作者已经确定了阻断STAT3的憐酸化/激 活的肤，STAT3的憐酸化/激活是介导结合到DNA和基因调节的活性W及细胞转化的机制。各 种阻断STAT3的小分子包含PGJ2、销的络合物、乙醇、水杨酸钢、维甲酸、阿替莫德、PS-341和 他汀类药物。已经鉴定出许多多酪植物抑制STAT3激活的能力。运些多酪植物包含姜黄素、 白襲芦醇、葫芦素、白皮杉醇、欧巧菊、f Iazopiridol (黄酬类抗肿瘤药）、厚朴酪和表没食子 儿茶素 -3-没食子酸醋。运些分子成功抑制STAT3激活的方式并不完全清楚。例如，已经证明 了姜黄素抑制JAK2、Src、化b2和EGFR(全部参与STAT3的激活）的效果，还下调Bcl-xL、细胞 周期素 DUVEGF和TNF(Bcl-xL、细胞周期素 DUVEGF和TNF的表达受STAT3调节）的表达 (Aggarwal B.B.等人.Ann.N. Y. Acad. Sci . 1091; 151-69:2006)。
[0031] 因此存在可能干预STAT3信号通路级联的各种策略和各种机制:抑制STAT3的憐酸 化/激活、抑制设及STAT3的分子间相互作用、抑制STAT3的入核/出核、抑制由STAT3介导的 转录。除了已经提到的抑制STAT3的化疗药物，还有已经报道了不同疗效的其他化疗药物 (西妥昔单抗、吉非替尼、埃罗替尼等）：适度的疗效、耐药性的发展、骨髓抑制、胃肠水平的 毒性W及包括屯、血管毒性在内的各种不良反应(见表4)
[0032] W下取自化hnston PA和Grandis RG 2011的表4报道了对STAT3信号通路的治疗 性干预的策略和结果。
[003引 表4
[0034]
[0035] 在直接参与到肿瘤进展的细胞亚群中通过W更特异性方式抑制特异性祀标分子 的化合物进行祀向治疗的疗法代表了癌症治疗中的新观点。控制细胞增殖和死亡的分子， 如用于生长因子的受体酪氨酸激酶(RTK)，是运种类型的治疗方法的最佳目标。随着曲妥单 抗、用于治疗转移性乳腺癌的抗肥R2单克隆抗体和慢性粒细胞白血病中imatibin(BCR-A化 抑制因子)的批准开启了祀向治疗的时代。尽管对运些治疗疗效最初的热情，医生不得不立 即面对复发的问题，因为那些患有癌症的患者常由于替代通路的激活而几乎总是发展出对 药物的耐药性。由于肿瘤W经常失调的更多的机制和更多基因祀标为特征，采用联合治疗 将是有利的，其是癌症治疗的标准，因为运会导致合理的策略W增加响应和耐受性并降低 耐药性。目前对旨在使疗效最大化(通过使用较低的药物剂量来使全身毒性最小化)而联合 抗肿瘤药的兴趣正在增加。
[0036] 因此，能够阻断STAT3的组成性激活或可诱导激活的药理学上安全和有效的治疗 药物，如天然来源的分子，在癌症的治