一种用于治疗心血管疾病的水蛭小肽有效部位组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种具有治疗屯、血管疾病的水赔小肤有效部位组合物及其制备方法， 具体地说从水赔、=屯、丹参、葛根中提取的中药有效部位组合物及其制备方法，属于中药 领域。
【背景技术】
[0002] 屯、血管疾病，又称为循环系统疾病，是一系列设及循环系统的疾病，循环系统指人 体内运送血液的器官和组织，主要包括屯、脏、血管(动脉、静脉、微血管），可W细分为急性和 慢性，一般都是与动脉硬化有关。运些疾病都有着相似的病因、病发过程及治疗方法。屯、血 管疾病目前最多的是冠屯、病、屯、绞痛，症状为胸闷、胸痛等。屯、脑血管病是全球范围造成死 亡的最主要原因，与其它任何原因相比，屯、脑血管病每年造成的死亡最多。
[0003] 西医对屯、血管疾病多采用强屯、、扩张血管及利尿等药物治疗，如硝酸甘油、消屯、 痛、巧离子括抗剂类抗屯、绞痛药(硝苯地平）、选择性冠脉扩张剂和抗病毒药(双喀达莫）、0 受体阻滞剂(塞利洛尔）、屯、可定、屯、得安，运些药物均是急症用药，且运些药物还伴有如下 弊端:①毒副作用:除胃肠反应、过敏反应、中毒表现外，对中枢神经、肝肾功能也有损害，月良 药反应症状多达恶屯、、呕吐、腹泻、胃肠道不适、食欲不振、面部潮红、屯、惇、屯、动过速、体位 低血压、头痛、眩晕、疲乏、失眠、皮肤过敏反应、皮疹甚至剥脱性皮炎、肌疫李、肌无力、肌震 颤、四肢发冷、痊痒、泪液减少、情绪抑郁、皮肤发红、皮疹、灼热感、出汗甚至虚脱、长期服用 会产生耐药性等反应。②不少人群不能服用：如有过敏史者、青光眼、冠状动脉闭塞及血栓 形成、脑出血、烦内压增高、屯、源性休克、n°或虹°房室传导阻滞、严重屯、力衰竭、窦性屯、动 过缓、支气管哮喘患者、有过敏史、糖尿病、充血性屯、力衰竭、肺气肿或非过敏性支气管炎、 肝功能不全、甲状腺功能低下、雷诺氏综合征或其它周围血管病、肾功能减退、活动性溃瘍 病或其他原因引起的消化道出血、血友病或血小板减少症等患者及孕妇、授乳妇、儿童等均 禁服。然而，患屯、血管疾病的患者往往需要长期用药，且涵盖了各类不同的人群。可喜的是， 中药治疗屯、血管疾病已显示出了其独特的优越性，中药疗效确切、持久，不良反应少，尤其 W远期疗效满意而广泛应用于临床。
[0004] 祖国医学认为，屯、血管疾病属于中医"屯、惇"、"郁病"的范畴，是由肝气郁结、情志 所伤引起五脏气机不和形成的，主要与肝、脾、屯、等脏器受累与气血失调有关。其中冠屯、病 属于中医"屯、痛"、"屯、惇"、"胸搏"的范畴，其病理机制主要为"因虚至疲，气虚血疲，脉络疲 阻"。冠屯、病的临床表现主要为:屯、律失常、屯、绞痛及屯、肌梗塞等。应用中医治疗屯、肌缺血的 药物可划分为活血化疲类、补气安神类及化疲理气类等。若按照药物的有效成分化合物分 类可分为黄酬类、酪酸类及皂巧类等。
[0005] 大量的研究结果和临床实践证明，中药W其耐受性较好、毒副作用小等特点显示 出其独特的优势，中药在运个市场占据极其重要的位置，甚至可W说是处于强势地位，其中 最主要的一个原因即在于西药在治疗屯、血管疾病方面不像抗生素类药品那样有绝对优势， 属疗效并不很显著的品种。而中药则因其具有疗效显著、稳定可靠、无毒副作用等优势，越 来越受到医学研究者和广大患者的关注。
[0006] 而现阶段的中药复方，有效成分含量较低，服用量较大，药效较差。而用有效成分 组方能源于中药高于中药，使用剂量小，有效成分可控，是一种非常理想的药物。
【发明内容】
[0007] 本发明的一个目的在于提供一种用于治疗屯、血管疾病的水赔小肤有效组物； 本发明的另一个目的在于提供上述中药组合物的制备方法和用途。
[000引本发明的第一目的：W水赔小肤、=屯总皂巧、丹参总酪酸和葛根总黄酬为原料， 加入适当药用辅料，制成相关的剂型。
[0009] 本发明药物的组合物的原料药的组成及配比为：水赔小肤3~9重量份、=屯总皂 巧2~6重量份、丹参总酪酸2~4重量份和葛根总黄酬3~7重量份。
[0010] 本发明中药药物组合物优选的组成及配比为：水赔小肤6重量份;=屯总皂巧4重 量份;丹参总酪酸3重量份;葛根总黄酬5重量份。
[0011] 上述水赔小肤有效部位中总小肤的含量不低于提取物的50%，总皂巧有效部位中 总皂巧不低于提取物的70%，总酪酸有效部位中总酪酸不低于提取物的50%，总黄酬有效部 位中总黄酬不低于提取物的80%。
[0012] 该药物组合物可W加入相应辅料，制成丸剂、片剂、颗粒剂、硬胶囊剂、软胶囊剂中 的任一种。然后可W再加入其他具有预防或治疗糖尿病及其并发症的有效部位、有效成分、 化学合成品或者半合成品，然后再加入相应辅料，制成丸剂、片剂、颗粒剂、硬胶囊剂、软胶 囊剂中的任一种。
[0013] 本发明中药组合物的制备方法包括W下步骤： ① 水赔小肤的制备:取水赔，适当粉碎，加10倍量水匀浆15min，加热煮沸15min，放冷至 室溫，采用盐酸调抑至2.0 ± 0.1，然后加入底物量10%的胃蛋白酶，在37 °C条件下酶解化，然 后采用氨氧化钢溶液调节抑至8,加入底物量10%的膜蛋白酶，在45°C条件下酶解地，时时揽 拌并调节抑在7~10范围内，酶解完毕后继续升溫煮沸15min，放冷，离屯、，收集上清液，调节 P册.5~7.0，加入1%的活性炭，揽拌均匀，滤过，滤液用截留相对分子质量为3kD的中空纤维 膜进行超滤，收集透过液，再W截留相对分子质量为300D的陶瓷膜进行纳滤，收集未透过 液，减压浓缩，干燥，得水赔小肤;其中小肤的含量不低于50%; ② =屯总皂巧的制备:取=屯粉碎成粗粉，用70%的乙醇提取，滤过，滤液减压浓缩，滤 过，过苯乙締型非极性或弱极性共聚体大孔吸附树脂柱，用水洗涂，水洗液弃去，W80%的乙 醇洗脱，洗脱液减压浓缩，脱色，精制，减压浓缩至浸膏，干燥，即得;其中=屯总皂巧含量不 低于70%; ③ 丹参总酪酸的制备:取丹参，切成小段，加水于70°C~90°C提取^3次，每次1~3小时， 合并提取液，滤过，滤液于50°C~70°C减压浓缩至相对密度为1.18~1.22(50°C)的清膏，放 冷，加乙醇使含醇量为65%~80 %，静置10~24小时，取上清液，减压回收乙醇至无醇味，得丹 参提取液，将丹参提取液加入预先处理好的HPDlOO大孔树脂中(HPD100大孔树脂量:生药量 =1:1~1:5，g/g，上样流速10~60ml/min)流出液弃去，先用4~6BV蒸馈水洗脱，弃去洗脱液，再 W6~IOBV 15%~25%乙醇洗脱，收集洗脱液，并浓缩至稠膏，干燥，即得;其中丹总酪酸的含量 不低于50%; ④葛根总黄酬的制备：取葛根药材，粉碎后，加15倍量70%乙醇回流提取3次，每次I小 时，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，得葛根提取液，将葛根提取液加入预先处理好的AB-8大 孔吸附树脂中（AB-8大孔吸附树脂量:生药量=1:3，g/g，上样时柱流速4ml/min)流出液弃 去，先用蒸馈水洗脱至流出液无色，流出液均弃去，再W70%乙醇洗脱，收集洗脱液至薄层层 析检查无巧光斑点（展开剂:氯仿-甲醇(8:2)，在365nm巧光灯下检视，不得有巧光斑点），减 压回收乙醇，干燥，得葛根总黄酬粗品；其中葛根总黄酬的含量不低于80%; 按照各有效部位的重量配比取上述四份有效部位，不加辅料或加入药剂学常规辅料， 制成药学上可W接受的剂型。
[0014]增加：各树脂的型号可W是DlOl大孔树脂、D201大孔树脂、AB-8大孔树脂，OOl X 2.5、001X7、001X15型阳离子交换树脂。
[001引总小肤、总皂巧、总酪酸、总黄酬的含量现憶方法为： 总小肤的含量测定方法为:取牛血清白蛋白对照品适量，精密称定，加水制成每毫升含 0.25mg的溶液，即得。精密量取对照品溶液0，0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml，分别置具塞试管中， 各精密加水至1.0ml，再分别精密加碱性铜试液1.0ml，摇匀，各精密加入福林酪试液[取福 林试液储备液（1 一 16) ]4. Oml，摇匀，于55 °C水浴中保溫5min，取出，置冷水浴中冷却1 Omin， 迅速测定，WO管为空白，照紫外一可见分光光度法，在65化m波长处测定吸光度。W吸光度 为纵坐标，牛血清白蛋白质量为横坐标，绘制标准曲线，并计算回归方程。精密量取提取液 1ml，别置100mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为供试品溶液;照标准曲线的制备项下自分别 精密加碱性铜试液1.0ml起，依法测定吸光度，从回归方程中计算多肤的含量。
[0016] 总皂巧含量测定方法：精密称取S屯皂巧Rl对照品适量，加甲醇制成每1ml含 0.0 lmg的溶液，既得。分别精密吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3 . Oml分别置磨口具塞试管中， 热水浴挥干溶剂，加现配置的5%香草醒-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，于60°C恒溫水浴 15min，立即置冰水浴内冷却，精密移取冰醋酸5mL，摇匀，W相应试剂为空白，分别在560nm 波长处测定A值，得回归方程。取供试品适量，按标准曲线制作方法测定，相应试剂随行空白 对照，在波长560nm处测定吸收度A，从回归方程中计算总皂巧含量。
[0017] 总酪酸含量测定方法:精密称取干燥的丹酪酸B适量，加O.lmol/L盐酸溶液成每 Iml含 12.96mg的溶液，既得。精密量取对照品溶液0.5ml、1.0ml、2. Oml、3. Oml、40ml、5. Oml， 分别置IOml栋色量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。WO. Imol/L盐酸溶液作空 白，照分