一种抗骨质疏松啤酒花提取物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药技术领域，具体地说，具体涉及一种富含黄酮类成分的啤酒花提 取物及其制备方法和在抗骨质疏松中的应用。
【背景技术】
[0002] 骨质疏松是一种以骨量减少和骨微结构破坏为特征，导致骨脆性增加和易于发生 骨折的代谢性骨病。该病多发于老人和绝经后妇女，随着老龄化社会的到来，该病发病率逐 年上升。目前，我国的骨质疏松患者约有9000万人，社会和家庭负担非常严重，骨质疏松药 物的研发是新药研发的热点之一，具有非常广阔的市场前景。迄今，已经在临床应用的骨质 疏松治疗剂包括，维生素 D类制剂、降钙素类制剂、雌激素类制剂、异丙氧黄酮类制剂、维生 素 K2制剂、促蛋白合成留类制剂，以及双磷酸盐类制剂。但这些药物的临床疗效有限，且有 一定的副作用。如雌激素有诱发子宫内膜癌及乳腺癌的危险，使其临床应用受到限制。目 前，一般认为由于植物药疗效可靠，毒副作用低，从植物或者中药中开发抗骨质疏松药物是 目前研发的重要方向。现有研究表明，骨的形成过程中，以清除受损碎片，形成骨洞为主要 作用的破骨细胞，与以沉积钙质、填充骨洞为主要作用的成骨细胞相互协调，使骨质的形成 与溶解处于一种动态平衡，维持骨质的不断更新。当此动态平衡被打破，骨溶解超过骨形成 时，即导致骨质疏松症的发生。因此，任何能够直接或间接作用于成骨细胞和或破骨细胞， 有助于保持其动态平衡的药物，均可能有助于防治骨质疏松。因此，成骨细胞、破骨细胞模 型常用于抗骨质疏松药物的筛选。
[0003] 啤酒花别名忽布、蛇麻花、香蛇麻花、酒花、野酒花，为桑科(Moraceae)薄草属植物 啤酒花Humulus lupulus L.的雌花序，原产欧洲，我国新疆有野生，东北、华北、山东等地有 栽培。人类利用啤酒花的历史已有2000多年，最初是作为助消化的药品、香料和观赏植物。 公元8世纪初，德国开始将啤酒花用十啤酒生产，能赋予啤酒特有的香味、爽快的苦味，并能 增加啤酒的防腐能力和非生物稳定性。除作为食品原料应用，啤酒花亦可作为药用，其味 苦、性平，有健胃、消食、利尿、安神、止咳化痰之功效，用于治疗食欲不振、腹胀、肺结核、胸 膜炎、失眠、癔病、浮肿、膀胱炎等。啤酒花主要含有树脂类、黄酮类及多酚类成分。特别是其 所含的黄酮类成分黄腐酚，具有抗艾滋病毒、抗癌、抗氧化、抗炎、抗菌、抑制骨质增生、抑制 甘油二酯酰基转移酶的活性，及预防动脉硬化和糖尿病和雌激素样作用，并且其食用安全 (杨小兰，食品科学，2007)。啤酒花含有的α-酸及β-酸也是重要化学成分，具有抗菌、抗肿 瘤、抗氧化作用（马永花，时珍国医国药，2007)。当然，由于植物化学成分复杂，更多可能的 有效成分还有待通过深入研究发现。
[0004] 目前，由于啤酒花中以上成分的含量有限，制备工艺复杂，成本较高，以单体成分 为主的新药开发难度较大，而以包含上述啤酒花成分的提取物，进行新药研发则具有显著 的优势。目前，已有专利技术（CN201510220128.3，CN201310024053.2，CN201310024052.8， CN201510027779.0,CN201410460743.7,CN200810037197.0,CN201410182552.9, CN201410182552.9)，多采用溶剂粗提，结合大孔树脂、聚酰胺除杂工艺设计，来制备啤酒花 提取物或其中有效成分，但存在工艺步骤多，成本高，所用试剂及树脂所含的有害杂质可能 引入到最终提取物中等方面的弊端。另有专利技术，采用超临界流体萃取技术 (〇吧00910089532.6，〇勵2815697.8)，或者膜技术（〇呢01210412183.9，〇呢01110218675.父） 进行啤酒花提取物的制备，但成本高，工艺复杂，提取效率低，是显而易见的问题。因此，克 服现有工艺技术的缺点，开发设计一种工艺简便、成本低、提取效率高的啤酒花提取物制备 工艺是十分必要的。鉴于中草药成分的高度复杂性，发明人设计本制备工艺的出发点在于， 基于简便、安全、低成本的制备工艺基础上制备得到的提取物，不片面追求单一成分的高含 量，而应该在所设定的药理作用方面，具有显著的效果，以方便作为药物、食品的应用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种抗骨质疏松的啤酒花提取物。
[0006] 本发明的再一的目的是，提供如上所述啤酒花提取物的制备方法。
[0007] 本发明的另一的目的是，提供如上所述啤酒花提取物的用途。
[0008] 为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：
[0009] -种抗骨质疏松的啤酒花提取物，所述提取物的制备方法包括如下步骤：
[0010] a)将啤酒花药材用提取溶剂提取，得提取液；
[0011] b)将上述提取液减压回收至无醇味，得浓缩液；
[0012] c)将上述浓缩液冷却、分取沉淀；
[0013] d)将上述沉淀以溶剂溶解，加入脱色剂除杂脱色，得除杂后脱色液；
[0014] e)将上述脱色液浓缩，干燥，粉碎，得提取物。
[0015] 其中浓缩方式可以采用40-KKTC减压浓缩、烘干浓缩以及其它药学上可接受的浓 缩方式。当然顾忌过高的温度可能对提取物中化学成分稳定性造成影响，选用50-75Γ温度 浓缩更为可行。
[0016] 其中干燥方式可以采用50-100°C常压烘干、真空干燥及其他可接受的干燥方式。 粉碎方式可以采用球磨机、冲击式粉碎机、流能磨粉碎以及其它可接受的粉碎方式。如将喷 雾干燥、冷冻干燥技术用于本步骤，可同时实现烘干、粉碎，应用更为方便。
[0017] 优选地，所述步骤a中所用的提取方法为回流提取，选用的提取溶剂为80-95%乙 醇或甲醇水溶液，优选为80 %的乙醇水溶液。
[0018] 优选地，所述步骤a中提取溶剂选用80 %的乙醇水溶液，分别用12、10、10倍量的提 取溶剂提取1.5小时、1小时、1小时，合并得提取液。
[0019] 优选地，所述步骤c中分取沉淀的方法为过滤或离心分离;所述离心分离的参数 为:5000rpm，离心1 -30分钟。
[0020] 优选地，所述步骤d中的溶剂为乙醇、甲醇、丙酮或其水溶液。
[0021] 优选地，所述步骤d中的溶剂为丙酮或丙酮水溶液，浓度优选大于70%浓度(V/V)， 特别优选大于90 %浓度(V/V)。
[0022]优选地，所述步骤d中的脱色剂为活性炭、活性白土或两者的混合。
[0023] 优选地，所述步骤d中的脱色剂为活性碳:活性白土 =1:100-100:1的混合物，用量 为原药材重量的100%-1000%，优选用量为原药材重量的100%。
[0024]经采用系统化学成分分离、鉴定，表明其含有黄腐酚、Ct-酸、β-酸等化学成分。
[0025] 为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：
[0026] 如上任一所述啤酒花提取物的制备方法，包括如下步骤：
[0027] a)将啤酒花药材用提取溶剂提取，得提取液；
[0028] b)将上述提取液减压回收至无醇味，得浓缩液；
[0029] c)将上述浓缩液冷却、分取沉淀；
[0030] d)将上述沉淀以溶剂溶解，加入脱色剂除杂脱色，得除杂后脱色液；
[0031 ] e)将上述脱色液浓缩，干燥，粉碎，得提取物；
[0032]所述步骤a中所用的提取方法为回流提取，选用的提取溶剂为80-95%乙醇或甲醇 水溶液，优选80 %的乙醇水溶液；
[0033]所述步骤a中分别用12、10、10倍量的提取溶剂提取1.5小时、1小时、1小时，合并得 提取液；
[0034]所述步骤d中的脱色剂为活性碳:活性白土 = 1:100-100:1的混合物，用量为原药 材重量的100 %-1000 %。
[0035] 为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：
[0036] 如上任一所述的提取物在制备抗骨质疏松的药物、医疗食品或保健品中的应用。
[0037] 为实现上述第四个目的，本发明采取的技术方案是：
[0038] -种抗骨质疏松的组合物，包括:如上任一所述的啤酒花提取物、及药学上可接受 的赋形剂;其中所述赋形剂的种类不受特别限制，只要能够使药物形成容易进行给药的剂 型即可。
[0039] 根据本发明的一些具体示例，所述赋形剂为选自：粘合剂、填料、涂膜聚合物、增塑 剂、助流剂、崩解剂和润滑剂的至少一种。所述药物呈选自胶囊剂、丸剂、片剂、颗粒剂、口服 液体、内服膏剂、气雾剂以及喷雾剂的至少一种的形式。根据本发明的一些优选实施例，所 述药物呈胶囊剂的形式。由此，易于进行给药