本发明涉及一种抗肿瘤药物的制备工艺。尤其涉及一种由银纳米粒子-银纳米簇所构成的单金属纳米杂合体抗肿瘤药物的制备工艺。所述的纳米杂合体能同时实现细胞成像及癌症细胞的靶向诊疗。
背景技术:
银纳米材料已广泛应用于生物医学工程。其中,银纳米粒子能诱导癌症细胞凋亡,但该材料本身不发荧光,所以需要在其表面修饰荧光探针才能实现细胞成像。银纳米簇作为一种荧光探针可用于杀菌及肿瘤细胞成像,但由于其荧光特性易受周围环境的影响,银米纳簇难以同时实现癌症细胞的成像和诊疗。
目前,贵金属纳米杂合体多为多金属纳米杂合体,通常尺寸较大,抗肿瘤活性较低。单金属纳米杂合体作为抗肿瘤药物来实现癌症细胞成像和诊疗的报道相对较少。
技术实现要素:
1、本发明公开了一种单金属纳米杂合体抗肿瘤药物的制备工艺,其特征在于,包括以下步骤:硫醇修饰的DNA(包含合成银纳米簇的模板序列及特定的适配体序列)与银纳米粒子在4~37℃下共孵育2~12h,随即加入硝酸银并继续孵育0.2~1h。最后,加入新配制的硼氢化钠溶液,震荡2~4h后即可得到适配体修饰的纳米杂合体。癌症细胞与含有适配体修饰的纳米杂化体的培养基共培养0.5~24h,观察细胞成像及细胞凋亡情况。
进一步,所制备的单金属纳米杂合体抗肿瘤药物,其特征在于,该抗肿瘤药物是一种由银纳米粒子-银纳米簇所构成的单金属纳米杂合体。
进一步,所制备的单金属纳米杂合体抗肿瘤药物,其特征在于,该抗肿瘤药物可同时用于细胞成像及癌症细胞的靶向诊疗。
具体实施方式
为了方便本领域的生产人员便于理解,本发明提供了一种单金属纳米杂合体抗肿瘤药物的制备工艺及其在生物医学方面应用的具体实施方式。
实施例1、
500μM柠檬酸稳定的银纳米粒子与硫醇修饰的DNA(100μM,序列为5′-5-TAC TGA ATC AGC TGC TGC ATCC GG CCC CCC CCC CCC-(CH2)6-SH-3′)室温共孵育12h,加入600μM AgNO3溶液,快速混合后避光震荡30min。随后快速加入600μM NaBH4的冰水混合物,共孵育2h后,即可得到适配体修饰的单金属纳米杂合体抗肿瘤药物。HeLa细胞与含有40μM适配体修饰的抗肿瘤药物的培养基培养1h后,在荧光倒置显微镜下进行细胞成像实验。通过MTT实验估算细胞的存活率。