一种富硒茶专用菌肥及其制备方法和应用

一种富硒茶专用菌肥及其制备方法和应用
【技术领域】
1.本发明属于肥料制备技术领域，具体涉及一种富硒茶专用菌肥及 其制备方法和应用。


背景技术：

2.硒是人体必需的微量元素之一，人体缺硒会导致多种疾病发生， 而我国许多地方土壤缺硒，大部分农作物及水中含硒量极低。为了解 决这个问题，提高食品中硒含量，研究者们进行了长期大量的努力。 使用富硒肥料是目前解决这个问题的有效方法之一。现有技术中对富 硒肥料的生产多是通过添加一定量的硒化合物来实现，如专利号为 02138001.5的中国专利所公开的技术方案。这种方式无疑会增加肥料 生产的成本。此外，现有富硒茶专用菌肥还存在着不够安全、有效的 技术问题。


技术实现要素：

3.本发明提供一种富硒茶专用菌肥及其制备方法和应用，以解决现 有富硒茶专用菌肥不够安全、有效的技术问题。
4.为解决以上技术问题，本发明采用以下技术方案：
5.一种富硒茶专用菌肥，包括以下重量份的原料：粉碎农作物秸秆 65～75份、麸皮10～15份、豆腐渣40～50份、生物炭5～10份、糖蜜 1～5份、复合微生物菌剂3～5份。
6.进一步地，所述的富硒茶专用菌肥，包括以下重量份的原料：粉 碎农作物秸秆72份、麸皮12份、豆腐渣46份、生物炭8份、糖蜜 3份、复合微生物菌剂4份。
7.进一步地，所述农作物秸秆为玉米秸秆。
8.进一步地，所述复合微生物菌剂由bacillus cereus ylb1
‑
6和 bacillus thuringiensis txb2
‑
5按质量比1.5～2.5：1混合而成，两种菌 株均保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号分别为cctcc no：m2020342和cctcc no：m 2020343，保藏日期为：2020年7月23 日。
9.进一步地，所述复合微生物菌剂由bacillus cereus ylb1
‑
6和 bacillus thuringiensis txb2
‑
5按质量比2.3：1混合而成。
10.本发明还提供一种富硒茶专用菌肥的制备方法，包括以下步骤：
11.(1)将bacillus cereus ylb1
‑
6和bacillus thuringiensis txb2
‑
5 两种微生物菌株分别在lb培养液中进行规模化发酵培养，进一步采 用冷冻干燥技术制备微生物冻干粉，然后bacillus cereus ylb1
‑
6和 bacillus thuringiensis txb2
‑
5按质量比混合获得复合微生物菌剂；
12.(2)制备粉碎农作物秸秆、麸皮、豆腐渣、生物炭、糖蜜混合 发酵料，将粉碎农作物秸秆、麸皮、豆腐渣、生物炭、糖蜜按重量份 混合发酵；
13.(3)待发酵料降温阶段加入步骤(1)中所述复合微生物菌剂继 续发酵，发酵完成，制得富硒茶专用菌肥。
14.进一步地，步骤(1)中将bacillus cereus ylb1
‑
6和bacillusthuringiensis txb2
‑
5两种微生物菌株分别在lb培养液中进行规模化 发酵培养2～3天。
15.进一步地，步骤(3)中发酵料降温阶段是温度在50℃以下进行 的。
16.进一步地，步骤(3)中待发酵料降温阶段加入步骤(1)中所述 复合微生物菌剂继续发酵，期间每24～48小时翻堆一次，至发酵物湿 度在11.6％～12.4％，发酵完成，制得富硒茶专用菌肥。
17.本发明还一种富硒茶专用菌肥在茶树品质提升栽培中的应用，包 括以下步骤：在春茶、夏茶开始开采前15～20天均匀撒施本发明富硒 茶专用菌肥150～200kg/亩至茶树根部土壤中，施后覆土。
18.本发明具有以下有益效果：
19.(1)施用本发明的富硒茶专用菌肥的茶叶处理硒含量均符合广 西富硒农产品标准db45/t1061
‑
2014中茶叶硒含量标准，说明本发明 的菌肥对于活化土壤硒，提高茶叶硒含量具有较为明显的效果。
20.(2)本发明的富硒茶专用菌肥不需要额外添加外源硒，对土壤 无硒污染风险，所生产的富硒茶为天然富硒茶，安全、有效补硒。
【附图说明】
21.图1为ylb1
‑
6菌株菌落形态特征图；
22.图2为txb2
‑
5菌株菌落形态特征图；
23.图3为ylb1
‑
6菌株在含硒培养液中的颜色变化图；
24.图4为txb2
‑
5菌株在含硒培养液中的颜色变化图；
25.图5为ylb1
‑
6和txb2
‑
5菌株的系统发育树。
【具体实施方式】
26.为便于更好地理解本发明，通过以下实例加以说明，这些实例属 于本发明的保护范围，但不限制本发明的保护范围。
27.在实施例中，菌株名称：ylb1
‑
6蜡状芽孢杆菌(bacillus cereus)、 txb2
‑
5苏云金芽孢杆菌(bacillus thuringiensis)，均保藏于中国典型培 养物保藏中心，保藏号分别为cctcc no：m 2020342和cctccno： m 2020343，保藏日期为：2020年7月23日，两菌种均具有嗜硒微 生物特征，见图1、2，可在富硒微生物肥料制备、活化土壤硒中具 有潜在的应用价值。
28.ylb1
‑
6和txb2
‑
5特征：将各菌株依次分别接入到含硒(用 na2seo3配制)5、7.5、10、12.5、15、17.5mg/l的培养基中，如图 3、4结果显示：在硒浓度5mg/l时，两细菌生长不受抑制，培养液 颜色未呈现明显红色。
29.表1菌株16s rdna序列同源性分析结果
[0030][0031]
由表1可知，16s rrna基因序列分析：从本发明所述菌株的纯 培养物中提取基因组dna，利用通用引物27f和1492r进行pcr扩 增和测序，将所得序列与genbank数据库中序列进行比对，用 mega5.0软件构建系统进化树(图5)，明确菌株的种属关系。经 鉴定，ylb1
‑
6为bacillus cereus，txb1
‑
10为sinomonas sp.，txb2
‑
5 为bacillus thuringiensis。
[0032]
实施例中的富硒茶专用菌肥是利用以上两种菌制备而成的，包括 以下重量份的原料：粉碎农作物秸秆65～75份、麸皮10～15份、豆腐 渣40～50份、生物炭5～10份、糖蜜1～5份、复合微生物菌剂3～5份。
[0033]
所述复合微生物菌剂为上述bacillus cereus ylb1
‑
6和bacillusthuringiensis txb2
‑
5按质量比1.5～2.5：1混合而成。
[0034]
所述富硒茶专用菌肥的方法，包括以下步骤：
[0035]
(1)将上述两种微生物菌株分别在lb培养液中进行规模化发 酵培养2～3天，进一步采用冷冻干燥技术制备微生物冻干粉，然后 bacillus cereus ylb1
‑
6和bacillus thuringiensis txb2
‑
5按质量比 1.5～2.5：1混合获得复合微生物菌剂；
[0036]
(2)制备粉碎农作物秸秆、麸皮、豆腐渣、生物炭、糖蜜混合 发酵料，将粉碎农作物秸秆65～75份、麸皮10～15份、豆腐渣40～50 份、生物炭5～10份、糖蜜1～5份重量份混合发酵；
[0037]
(3)待发酵料降温阶段(温度在50℃以下)加入步骤(1)中 所述复合微生物菌剂继续发酵，期间每24～48小时翻堆一次，至发酵 物湿度在11.6％～12.4％，发酵完成，制得富硒茶专用菌肥。
[0038]
下面通过更具体的实施例加以说明。
[0039]
实施例1
[0040]
一种富硒茶专用菌肥，包括以下重量份的原料：粉碎玉米秸秆 68份、麸皮10份、豆腐渣41份、生物炭5份、糖蜜2份、复合微 生物菌剂3份。
[0041]
所述复合微生物菌剂为上述bacillus cereus ylb1
‑
6和bacillusthuringiensis txb2
‑
5按质量比1.6：1混合而成。
[0042]
所述富硒茶专用菌肥的方法，包括以下步骤：
[0043]
(1)将上述两种微生物菌株分别在lb培养液中进行规模化发 酵培养2天，进一步采用冷冻干燥技术制备微生物冻干粉，然后 bacillus cereus ylb1
‑
6和bacillus thuringiensis txb2
‑
5按质量比1.6： 1混合获得复合微生物菌剂；
[0044]
(2)制备粉碎玉米秸秆、麸皮、豆腐渣、生物炭、糖蜜混合发 酵料，将粉碎玉米秸秆
68份、麸皮10份、豆腐渣41份、生物炭5 份、糖蜜2份重量份混合发酵；
[0045]
(3)待发酵料降温阶段(温度在50℃以下)加入步骤(1)中 所述复合微生物菌剂继续发酵，期间每28小时翻堆一次，至发酵物 湿度在11.8％，发酵完成，制得富硒茶专用菌肥。
[0046]
实施例2
[0047]
一种富硒茶专用菌肥，包括以下重量份的原料：粉碎玉米秸秆 72份、麸皮12份、豆腐渣46份、生物炭8份、糖蜜3份、复合微 生物菌剂4份。
[0048]
所述复合微生物菌剂为上述bacillus cereus ylb1
‑
6和bacillusthuringiensis txb2
‑
5按质量比2.3：1混合而成。
[0049]
所述富硒茶专用菌肥的方法，包括以下步骤：
[0050]
(1)将上述两种微生物菌株分别在lb培养液中进行规模化发 酵培养2天，进一步采用冷冻干燥技术制备微生物冻干粉，然后 bacillus cereus ylb1
‑
6和bacillus thuringiensis txb2
‑
5按质量比2.3： 1混合获得复合微生物菌剂；
[0051]
(2)制备粉碎玉米秸秆、麸皮、豆腐渣、生物炭、糖蜜混合发 酵料，将粉碎玉米秸秆72份、麸皮12份、豆腐渣46份、生物炭8 份、糖蜜3份重量份混合发酵；
[0052]
(3)待发酵料降温阶段(温度在48℃以下)加入步骤(1)中 所述复合微生物菌剂继续发酵，期间每36小时翻堆一次，至发酵物 湿度在12％，发酵完成，制得富硒茶专用菌肥。
[0053]
实施例3
[0054]
一种富硒茶专用菌肥，包括以下重量份的原料：粉碎玉米秸秆 74份、麸皮14份、豆腐渣49份、生物炭10份、糖蜜5份、复合微 生物菌剂4.8份。
[0055]
所述复合微生物菌剂为上述bacillus cereus ylb1
‑
6和bacillusthuringiensis txb2
‑
5按质量比2.4：1混合而成。
[0056]
所述富硒茶专用菌肥的方法，包括以下步骤：
[0057]
(1)将上述两种微生物菌株分别在lb培养液中进行规模化发 酵培养3天，进一步采用冷冻干燥技术制备微生物冻干粉，然后 bacillus cereus ylb1
‑
6和bacillus thuringiensis txb2
‑
5按质量比2.4： 1混合获得复合微生物菌剂；
[0058]
(2)制备粉碎玉米秸秆、麸皮、豆腐渣、生物炭、糖蜜混合发 酵料，将粉碎玉米秸秆74份、麸皮14份、豆腐渣49份、生物炭10 份、糖蜜5份重量份混合发酵；
[0059]
(3)待发酵料降温阶段(温度在46℃以下)加入步骤(1)中 所述复合微生物菌剂继续发酵，期间每42小时翻堆一次，至发酵物 湿度在12.3％，发酵完成，制得富硒茶专用菌肥。
[0060]
富硒茶专用菌肥的应用：茶园田间试验。
[0061]
桂平西山碧水茶园施用本发明实施例2的富硒茶专用菌肥进行 了对比试验，以不施用菌肥作为对照。在春茶、夏茶开始开采前18 天均匀撒施本发明富硒茶专用菌肥160kg/亩至茶树根部土壤中，施后 覆土。春茶、夏茶采收时同时采集土样，分析土壤有效硒占总硒比例， 结果如表2所示，菌肥处理土壤有效硒占比相较对照有所提高，提高 幅度为1.70％～1.81％；春茶、夏茶采收取一芽两叶，对照春茶硒含量 为0.12mg/kg，施用菌肥的春茶硒含量为0.34mg/kg；夏茶采收一芽两 叶，对照夏茶硒含量为0.072mg/kg，施用菌肥的夏茶硒含量为0.29 mg/kg，施用菌肥的茶叶硒含量是对照处理的2.8～4.0倍，施用菌肥的 茶叶处
理硒含量均符合广西富硒农产品标准db45/t1061
‑
2014中茶 叶硒含量标准，可见本发明的菌肥对于活化土壤硒，提高茶叶硒含量 具有较为明显的效果。另外，对春茶硒形态含量进行分析，结果如表 3所示，施用菌肥处理有机硒含量与对照相比无明显差异，均在55％ 左右，施用本发明菌肥是安全、有效的。
[0062]
表2土壤有效硒占比
[0063][0064][0065]
表3春茶形态含量(％)
[0066][0067]
注：n.d.表示未检出；secys2为硒代胱氨酸；semecys为甲基硒 代半胱氨酸；semet为硒代蛋氨酸；seo
32
‑
和seo
42
‑
分别为亚硒酸根 离子和硒酸根离子。
[0068]
此外，本发明的富硒茶专用菌肥的优点：不需要额外添加外源硒， 对土壤无硒污染风险，所生产的富硒茶为天然富硒茶，安全、有效补 硒。
[0069]
以上内容不能认定本发明具体实施只局限于这些说明，对于本发 明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思前提下， 还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明由所提交的 权利要求书确定的专利保护范围。