甘油发酵为有机酸的制作方法

技术特征：

1.经遗传改造用于在基础培养基中从作为碳源的甘油产生滴度至少20g/L的琥珀酸，小于48小时内产量至少为0.6的大肠杆菌细菌，其中所述大肠杆菌细菌包含glpK基因编码的反馈抗性甘油激酶、glpR基因中的缺失以及失活由靶基因ldhA、ack、adhE，和focA-pflB编码的多肽的酶促活性的遗传修饰，其中所述glpK基因包含选自以下的至少一个点突变：Gln28Pro、Trp54Gly、Ala55Thr、Val62Leu、Asp73Ala、Asp73Val、Arg157His和Gly231Asp，所述glpR基因中的缺失导致负向调节选自glpFKX操纵子、glpABC操纵子和glpD基因的甘油利用基因的表达的阻遏物的活性降低。

2.权利要求1的大肠杆菌细菌，其中glpK基因中的点突变是Ala55Thr和Arg157His。

3.权利要求1的大肠杆菌细菌，其中由所述glpK基因编码的所述甘油激酶抵抗果糖-1,6-二磷酸的抑制。

4.权利要求1的大肠杆菌细菌，其中由所述glpK基因编码的甘油激酶抵抗磷酸转移酶系统的非磷酸化的酶IIA^Glc的抑制。

5.权利要求1的大肠杆菌细菌，其中由glpK基因编码的所述甘油激酶抵抗果糖-1,6-二磷酸和磷酸转移酶系统的非磷酸化的酶IIA^Glc的抑制。

6.权利要求1的大肠杆菌细菌，其进一步包含突变，所述突变是用组成型活性启动子替换天然启动子，所述天然启动子是选自glpD、glpFKX和glpABC的一种或多种基因或操纵子的天然启动子。

7.用于在基础培养基中产生滴度至少20g/L的琥珀酸的方法，其中所述方法包括在甘油是碳源的发酵罐中生长权利要求1的大肠杆菌细菌，和从所述发酵罐中收获所述琥珀酸。

8.权利要求7的方法，其中曝气速度提供少于每升肉汤每分钟0.15升的氧气。

9.权利要求7的方法，其中曝气速度提供多于每升肉汤每小时20mg的氧气。

10.权利要求7的方法，其中曝气速度提供少于每升肉汤每分钟0.15升的氧气，但多于每升肉汤每小时20mg的氧气。

11.权利要求7的方法，其中甘油源自来自生物柴油生产过程的副产品。

12.权利要求11的方法，其中源自生物柴油生产过程的甘油在发酵中使用之前除去实质性量的一种或多种污染化合物。

13.权利要求11的方法，其中源自生物柴油生产过程的甘油实质上不含甲醇或乙醇。

14.权利要求11的方法，其中源自生物柴油生产过程的甘油实质上不含污染离子。

15.权利要求11的方法，其中源自生物柴油生产过程的甘油实质上不含钠、钾、钙、镁、铵、氯、硫酸盐和磷酸盐离子。