1.一种D-对氯苯丙氨酸的制备方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:
一、乙酰化D,L-对氯苯丙氨酸的合成:
D,L-对氯苯丙氨酸,溶于水,用碱调节pH到10,温度控制在0-5℃,滴加乙酸酐,反应过程用5N的氢氧化钠控制pH,反应液用茚三酮显色,直到氨基酸不再显色;加盐酸调节pH到1-2,有沉淀产物出现,过滤收晶体,酸水洗涤,烘干;
二、将乙酰化的D,L-对氯苯丙氨酸,在80℃溶解,加入纯化的L-耐高温酰化酶,反应,48小时,用液相检测拆分的程度;冷却,加入盐酸调节pH到1-2,有沉淀出现,过滤得乙酰化的D-对氯苯丙氨酸;
三、将乙酰化的D-对氯苯丙氨酸沉淀用6N盐酸水解过夜,得到D-对氯苯丙氨酸,再重结晶。
2.根据权利要求1所述的一种D-对氯苯丙氨酸的制备方法,其特征在于,所述的纯化的L-耐高温酰化酶的制备时采用基因重组的方法,在大肠杆菌里表达并纯化制备。
3.根据权利要求1所述的一种D-对氯苯丙氨酸的制备方法,其特征在于,重结晶的母液套用4次。
4.根据权利要求1-3之一所述的一种D-对氯苯丙氨酸的制备方法,其特征在于,所述L-耐高温酰化酶为耐高温L-氨基酰化酶,其在80℃、24小时还有50%的活性。