抗TROP2抗体－药物偶联物的制作方法与工艺

技术领域本发明涉及作为抗肿瘤药有用的抗体－药物偶联物，其是将抗TROP2抗体与抗肿瘤性药物介由接头结构部分连接而成的。

背景技术：
向与在癌细胞表面表达并且能向细胞内化的抗原结合的抗体上连接具有细胞毒性的药物而得到的抗体－药物偶联物(Antibody－DrugConjugate；ADC)能够选择性地向癌细胞输送药物，从而可预计其能使药物在癌细胞内蓄积，并杀死癌细胞(参照非专利文献1～3)。作为ADC，例如，于抗CD33抗体连接卡奇霉素(calicheamicin)而成的Mylotarg(注册商标；吉妥单抗(Gemtuzumabozogamicin))作为急性髓细胞性白血病的治疗药已获得承认。另外，最近，于抗CD30抗体连接耳他汀E而成的Adcetris(注册商标；Brentuximabvedotin)作为霍奇金淋巴瘤和未分化大细胞淋巴瘤的治疗药获得了承认(参照非专利文献4)。迄今为止被承认的ADC中含有的药物将DNA或微管蛋白作为靶标。作为抗肿瘤性的低分子化合物，已知作为抑制拓扑异构酶I而呈现抗肿瘤作用的化合物的喜树碱衍生物。其中，下式表示的抗肿瘤性化合物(依沙替康，化学名：(1S,9S)－1－氨基－9－乙基－5－氟－2,3－二氢－9－羟基－4－甲基－1H,12H－苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲哚嗪并[1,2－b]喹啉－10,13(9H,15H)－二酮)是水溶性的喜树碱衍生物(专利文献1、2)。该化合物与目前临床中使用的伊立替康不同，呈现抗肿瘤效果不需要通过利用酶活化。另外，与作为伊立替康的药效本体的SN－38、同在临床中使用的拓扑替康相比，拓扑异构酶I抑制活性更强，在体外(invitro)针对多种癌细胞具有更强的杀细胞活性。尤其是，对于通过P－糖蛋白的表达而对SN－38等显示耐性的癌细胞也显示了效果。另外，在小鼠的人肿瘤皮下移植模型中，也显示了强抗肿瘤效果，虽然进行了临床试验，但没有市售(参照非专利文献5～10)。尚不清楚依沙替康形成ADC是否能有效发挥作用。DE－310是介由GGFG肽间隔物(peptidespacer)将依沙替康连接于生物分解性的羧甲基葡聚糖多元醇聚合物而成的复合体(专利文献3)。通过将依沙替康形成高分子前体药物，从而保持较高的血中滞留性，进而利用相对于肿瘤新生血管的透过性的亢进和肿瘤组织滞留性，从而提高了被动地指向肿瘤部位的指向性。通过利用酶将肽间隔物切断，DE－310被持续地游离出作为活性本体的依沙替康、及甘氨酸连接于氨基的依沙替康，结果，药物动力学得以改善。在非临床试验中的各种肿瘤的评价模型中，对于DE－310而言，尽管其中包含的依沙替康的总量少于给予依沙替康单一药剂时的量，但与给予单一药剂时相比，显示更高的有效性。关于DE－310，报道了实施临床试验，也确认了有效例，确认了相较于正常组织，活性本体更多地蓄积于肿瘤，但另一方面，也报道了DE－310及活性本体在人的肿瘤中的蓄积与在正常组织中的蓄积并无明显不同，并未在人体中发现被动靶位(参照非专利文献11～14)。结果，DE－310也未市售，尚不清楚依沙替康作为这种指向靶位的药物是否能有效发挥功能。作为DE－310的相关化合物，还已知将－NH－(CH2)4－C(＝O)－表示的结构部分插入－GGFG－间隔物与依沙替康之间、以－GGFG－NH－(CH2)4－C(＝O)－为间隔物结构的复合体(专利文献4)，但完全不清楚该复合体的抗肿瘤效果。人TROP2(TACSTD2：tumor－associatedcalciumsignaltransducer2，肿瘤相关钙信号转导蛋白2，GA733－1，EGP－1，M1S1；以下表示为hTROP2)为包含323个氨基酸残基的单次跨膜型的1型细胞膜蛋白。一直以来，暗示了存在人滋养层细胞(trophoblasts)与癌细胞共有的、参与免疫抵抗性的细胞膜蛋白(非专利文献15)，特别指出了通过针对人绒毛癌细胞株的细胞膜蛋白的单克隆抗体(162－25.3，162－46.2)而被识别的抗原分子，作为在人滋养层细胞中表达的分子之一，将其命名为TROP2(非专利文献16)。随后，该分子被其他研究者发现，虽然也被称为被将胃癌细胞株免疫而得到的小鼠单克隆抗体GA733识别的肿瘤抗原GA733－1(非专利文献17)、被通过非小细胞肺癌细胞免疫而得到的小鼠单克隆抗体RS7－3G11识别的表皮糖蛋白(EGP－1；非专利文献18)，但在1995年，TROP2基因被克隆，确认了它们为相同的分子(非专利文献19)。hTROP2的DNA序列及氨基酸序列已在公开数据库上公开，例如可通过NM＿002353，NP＿002344(NCBI)等登录号参考。hTROP2基因与具有约50％的同源性的人Trop－1(EpCAM，EGP－2，TACSTD1)共同构成TACSTD基因家族(非专利文献21)。hTROP2蛋白由包含N末端的26个氨基酸残基的信号序列、包含248个氨基酸残基的胞外结构域、包含23个氨基酸残基的跨膜结构域、包含26个氨基酸残基的胞内结构域构成。已知在胞外结构域具有4个N连接型糖基化部位，表观分子量比理论计算值35千道尔顿增加10千道尔顿左右(非专利文献19)。在此之前，并未鉴定hTROP2的生理学的配体，分子功能尚不明确，但公开了其在肿瘤细胞中传导钙信号(非专利文献20)，另外，通过作为Ca2+依赖性激酶的蛋白激酶C而将细胞内丝氨酸303残基磷酸化(非专利文献18)，在胞内结构域具有PIP2结合序列，因此，暗示了其在肿瘤细胞中的信号传导功能(非专利文献22)。通过使用临床标本进行的免疫组织化学分析表明，hTROP2在多种上皮细胞癌症种类中过量表达，并且，在正常组织中限于在某些组织的上皮细胞中表达，其表达量也比肿瘤组织更低(非专利文献23～27)。另外，还报道了hTrop2的表达与大肠癌(非专利文献23)、胃癌(非专利文献24)、胰腺癌(非专利文献25)、口腔癌(非专利文献26)、胶质瘤(glioma)(非专利文献27)中预后不良相关。此外，报道了在利用了大肠癌细胞的模型中，hTROP2的表达参与肿瘤细胞的不依赖支持物的(anchorage－independent)细胞增殖及免疫缺陷小鼠中的肿瘤形成(非专利文献28)。根据上述的暗示与癌的相关性的信息，以前建立了多种抗hTROP2抗体，并研究了其抗肿瘤效果。其中，公开了利用未经偶联化的单独的抗体而在裸鼠异种移植模型中显示抗肿瘤活性的抗hTROP2抗体(专利文献5～8)，并且公开了作为抗体与抗细胞药剂的ADC而显示抗肿瘤活性的抗hTROP2抗体(专利文献9～12)等等。然而，它们的活性的强度、适用范围仍不充分，存在以hTROP2为治疗靶标的尚未被满足的医疗需求。现有技术文献专利文献专利文献1:日本特开平5－59061号公报专利文献2:日本特开平8－337584号公报专利文献3:国际公开第1997/46260号专利文献4:国际公开第2000/25825号专利文献5:国际公开第2008/144891号专利文献6:国际公开第2011/145744号专利文献7:国际公开第2011/155579号专利文献8:国际公开第2013/077458号专利文献9:国际公开第2003/074566号专利文献10:国际公开第2011/068845号专利文献11:国际公开第2013/068946号专利文献12:美国专利第7999083号说明书非专利文献非专利文献1:Ducry,L.,等,BioconjugateChem.(2010)21,5－13.非专利文献2:Alley,S.C.,等,CurrentOpinioninChemicalBiology(2010)14,529－537.非专利文献3:DamleN.K.,ExpertOpin.Biol.Ther.(2004)4,1445－1452.非专利文献4:SenterP.D.,等,NatureBiotechnology(2012)30,631－637.非专利文献5:Kumazawa,E.,Tohgo,A.,Exp.Opin.Invest.Drugs(1998)7,625－632.非专利文献6:Mitsui,I.,等,JpnJ.CancerRes.(1995)86,776－786.非专利文献7:Takiguchi,S.,等,JpnJ.CancerRes.(1997)88,760－769.非专利文献8:Joto,N.等,IntJCancer(1997)72,680－686.非专利文献9:Kumazawa,E.等,CancerChemother.Pharmacol.(1998)42,210－220.非专利文献10:DeJager,R.,等,AnnNYAcadSci(2000)922,260－273.非专利文献11:Inoue,K.等,PolymerDrugsintheClinicalStage,EditedbyMaeda等(2003)145－153.非专利文献12:Kumazawa,E.等,CancerSci(2004)95,168－175.非专利文献13:Soepenberg,O.等,ClinicalCancerResearch,(2005)11,703－711.非专利文献14:WenteM.N.等,InvestigationalNewDrugs(2005)23,339－347.非专利文献15:FaulkWP,等,Proc.Natl.Acad.Sci.75(4),1947－1951(1978).非专利文献16:LipinskiM,等,Proc.Natl.Acad.Sci.78(8),5147－5150(1981).非专利文献17:LinnenbachAJ,等,Proc.Natl.Acad.Sci.86(1),27－31(1989).非专利文献18:BasuA,等,Int.J.Cancer,62(4),472－479(1995).非专利文献19:FornaroM,等,Int.J.Cancer,62(5),610－618(1995).非专利文献20:RipaniE,等,Int.J.Cancer,76(5),671－676(1998).非专利文献21:CalabreseG,等,CellGenet.,92(1－2),164－165(2001).非专利文献22:ElSewedyT,等,Int.J.Cancer,75(2),324－330(1998).非专利文献23:OhmachiT,等,Clin.CancerRes.,12(10),3057－3063(2006).非专利文献24:MuhlmannG,等,J.Clin.Pathol.,62(2),152－158(2009).非专利文献25:FongD,等,Br.J.Cancer,99(8),1290－1295(2008).非专利文献26:FongD,等,Mod.Pathol.,21(2),186－191(2008).非专利文献27:NingS,等,Neurol.Sci.,34(10),1745－1750(2013).非专利文献28:WangJ,等,Mol.CancerTher.,7(2),280－285(2008).

技术实现要素：
发明所要解决的技术问题在利用抗体进行的肿瘤治疗中，即使抗体识别抗原并与肿瘤细胞结合，有时也观察到抗肿瘤效果不充分的情况，有时需要效果更好的抗肿瘤抗体。另外，在抗肿瘤性的低分子化合物中，有很多虽然抗肿瘤效果优异、但存在副作用、毒性方面等安全性上的问题的化合物，进一步提高安全性、获得更优异的治疗效果成为课题。即，本发明的课题在于获得并提供抗肿瘤效果和安全性方面优异的、具有优异的治疗效果的抗肿瘤药。用于解决技术问题的手段本申请的发明人认为，由于抗TROP2抗体为能以肿瘤细胞为靶标的抗体，即，为具有能识别肿瘤细胞的特性、能与肿瘤细胞结合的特性、或能向肿瘤细胞内化的特性等的抗体，因此，通过将作为抗肿瘤性化合物的依沙替康转化为介由接头结构部分连接于该抗体而成的抗体－药物偶联物，能够实现以下效果：可获得利用了该抗体的细胞毒性，进而，能更可靠地将抗肿瘤性化合物转移至肿瘤细胞，在肿瘤细胞内特异性地发挥该化合物的抗肿瘤效果，从而在可靠地发挥抗肿瘤效果的同时，能比给予抗肿瘤性化合物单体的情况进一步减少该化合物的给予量，进而，通过上述效果，能缓和抗肿瘤性化合物对正常细胞的影响，即，通过上述效果，能实现更高的安全性。因此，本申请的发明人发明了特定结构的接头，成功地获得了介由该接头将抗TROP2抗体与依沙替康连接而得到的抗体－药物偶联物，发现该偶联物能发挥优异的抗肿瘤效果，从而完成了本发明。即，本申请发明涉及以下方案：[1]抗体－药物偶联物，其特征在于，其是将下式表示的抗肿瘤性化合物与抗TROP2抗体介由下式：－L1－L2－LP－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－表示的结构的接头、通过在存在于抗TROP2抗体的铰链部的二硫键部分中形成的硫醚键连接而成的。其中，抗TROP2抗体连接于L1的末端，抗肿瘤性化合物以1位的氨基的氮原子为连接部位、连接于－(CH2)n2－C(＝O)－部分的羰基。式中，n1表示0～6的整数，n2表示0～5的整数，L1表示－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－(CH2)n3－C(＝O)－，其中，n3表示2～8的整数，L2表示－NH－(CH2CH2－O)n4－CH2CH2－C(＝O)－或单键，其中，n4表示1～6的整数，LP表示由2～7个氨基酸构成的肽残基，La表示－O－或单键，－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－为下式：表示的结构，以该结构的3位与抗TROP2抗体连接，在1位的氮原子上与包含该结构的接头结构内的亚甲基连接。此外，本申请发明涉及以下的各方案。[2]如[1]所述的抗体－药物偶联物，其中，LP的肽残基为由选自苯丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸、赖氨酸、瓜氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸中的氨基酸形成的肽残基。[3]如[1]或[2]所述的抗体－药物偶联物，其中，LP为选自以下的组中的肽残基：－GGF－、－DGGF－、－(D－)D－GGF－、－EGGF－、－GGFG－、－SGGF－、－KGGF－、－DGGFG－、－GGFGG－、－DDGGFG－、－KDGGFG－、及－GGFGGGF－；其中，“(D－)D”表示D－天冬氨酸。[4]如[1]或[2]所述的抗体－药物偶联物，其中，LP为由4个氨基酸构成的肽残基。[5]如[1]～[4]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，LP为四肽残基－GGFG－。[6]如[1]～[5]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，n3为2～5的整数，L2为单键。[7]如[1]～[5]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，n3为2～5的整数，L2为－NH－(CH2CH2－O)n4－CH2CH2－C(＝O)－，n4为2或4。[8]如[1]～[7]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－为具有4～7个原子的链长的部分结构。[9]如[1]～[7]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－为具有5或6个原子的链长的部分结构。[10]如[1]～[9]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－为－NH－CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－、或－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－。[11]如[1]～[9]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－为－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－、或－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－。[12]如[1]～[9]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，使药物连接于－L1－L2－LP－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－而得到的药物－接头结构部分为选自下述组中的1种药物－接头结构：－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)。其中，－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－为下式：表示的结构，以该结构的3位与抗TROP2抗体连接，在1位的氮原子上与包含该结构的接头结构内的亚甲基连接。－(NH－DX)表示下式：表示的、1位的氨基的氮原子成为连接部位的基团。－GGFG－表示－Gly－Gly－Phe－Gly－的四肽残基。[13]如[1]～[9]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，使药物连接于－L1－L2－LP－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－而得到的药物－接头结构部分为选自下述组中的1种药物－接头结构：－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)。其中，－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－、－(NH－DX)、及－GGFG－如上所述。[14]如抗体－药物偶联物，其特征在于，其是将下式表示的抗肿瘤性化合物与抗TROP2抗体介由下式：－L1－L2－LP－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－表示的结构的接头、通过在存在于抗TROP2抗体的铰链部的二硫键部分中形成的硫醚键连接而成的。其中，抗TROP2抗体连接于L1的末端，抗肿瘤性化合物连接于－(CH2)n2－C(＝O)－部分的羰基。式中，n1表示0～6的整数，n2表示0～5的整数，L1表示－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－(CH2)n3－C(＝O)－，其中，n3表示2～8的整数，L2表示－NH－(CH2CH2－O)n4－CH2CH2－C(＝O)－或单键，其中，n4表示1～6的整数，LP表示－GGFG－的四肽残基，La表示－O－或单键，－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－为下式：表示的结构，以该结构的3位与抗TROP2抗体连接，在1位的氮原子上与包含该结构的接头结构内的亚甲基连接。[15]如[14]所述的抗体－药物偶联物，其中，n1为3，n2为0，n3为2，L2为－NH－(CH2CH2－O)n4－CH2CH2－C(＝O)－，n4为2，La为单键，或n1为1，n2为1，n3为5，L2为单键，La为－O－，或n1为2，n2为1，n3为5，L2为单键，La为－O－。[16]如[14]或[15]所述的抗体－药物偶联物，其中，n3为2或5，L2为单键。[17]如[14]或[15]所述的抗体－药物偶联物，其中，n3为2或5，L2为－NH－(CH2CH2－O)n4－CH2CH2－C(＝O)－，n4为2或4。[18]如[14]～[17]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－为－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－、或－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－。[19]如[14]～[18]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，使药物连接于－L1－L2－LP－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－而得到的药物－接头结构部分为选自下述组中的1种药物－接头结构：－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)；其中，－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－为下式：表示的结构，以该结构的3位与抗TROP2抗体连接，在1位的氮原子上与包含该结构的接头结构内的亚甲基连接。－(NH－DX)表示下式：表示的、1位的氨基的氮原子成为连接部位的基团。－GGFG－表示－Gly－Gly－Phe－Gly－的四肽残基。[20]如[14]～[18]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，使药物连接于－L1－L2－LP－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－而得到的药物－接头结构部分为选自下述组中的1种药物－接头结构：－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)。其中，－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－、－(NH－DX)及－GGFG－如上所述。[21]如[1]～[20]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，选择的1种药物－接头结构相对于1抗体而言的平均连接数在1～10个的范围内。[22]如[1]～[20]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，选择的1种药物－接头结构相对于1抗体而言的平均连接数在2～8个的范围内。[23]如[1]～[20]中任一项所述的抗体－药物偶联物，其中，选择的1种药物－接头结构相对于1抗体而言的平均连接数在3～8个的范围内。[24]医药，含有[1]～[23]中任一项所述的抗体－药物偶联物、其盐、或它们的水合物。[25]抗肿瘤药及/或抗癌药，含有[1]～[23]中任一项所述的抗体－药物偶联物、其盐、或它们的水合物。[26]如[25]所述的抗肿瘤药及/或抗癌药，其用于应用于肺癌、肾癌、尿路上皮癌(urothelialcancer)、大肠癌、前列腺癌、多形性成胶质细胞瘤(glioblastomamultiforme)、卵巢癌、胰腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、肝癌、膀胱癌、胃癌、宫颈癌、头颈部癌、或食道癌。[27]医药组合物，含有[1]～[23]中任一项所述的抗体－药物偶联物、其盐、或它们的水合物作为活性成分，且含有药学上可接受的制剂成分。[28]如[27]所述的医药组合物，其用于应用于肺癌、肾癌、尿路上皮癌、大肠癌、前列腺癌、多形性成胶质细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、肝癌、膀胱癌、胃癌、宫颈癌、头颈部癌、或食道癌。[29]肿瘤及/或癌的治疗方法，其特征在于，给予[1]～[23]中任一项所述的抗体－药物偶联物、其盐、或它们的水合物。[30]抗体－药物偶联物的制造方法，其特征在于，利用下述方法，将药物－接头部分连接于该抗体，所述方法为，使下式表示的化合物：(马来酰亚胺－N－基)－(CH2)n3－C(＝O)－L2－LP－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－(NH－DX)与抗TROP2抗体或其反应性衍生物反应，在存在于该抗体的铰链部的二硫键部分中形成硫醚键。式中，n3表示整数2～8，L2表示－NH－(CH2CH2－O)n4－CH2CH2－C(＝O)－或单键，其中，n4表示1～6的整数，LP表示由2～7个选自苯丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸、赖氨酸、瓜氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸中的氨基酸构成的肽残基，n1表示0～6的整数，n2表示0～5的整数，La表示－O－或单键，(马来酰亚胺－N－基)－为下式表示的、氮原子成为连接部位的基团。－(NH－DX)为下式表示的、1位的氨基的氮原子成为连接部位的基团。[31]如[30]所述的制造方法，其中，将药物－接头部分连接于抗TROP2抗体的方法为对该抗体进行还原处理而转化为反应性衍生物的方法。[32]如[30]或[31]所述的制造方法，其中，选择的1种药物－接头结构相对于1抗体而言的平均连接数在1～10个的范围内。[33]如[30]或[31]所述的制造方法，其中，选择的1种药物－接头结构相对于1抗体而言的平均连接数在2～8个的范围内。[34]如[30]或[31]所述的制造方法，其中，选择的1种药物－接头结构相对于1抗体而言的平均连接数在3～8个的范围内。[35]抗体－药物偶联物，其是利用[30]～[34]中任一项所述的制造方法得到的。[36]抗体－药物偶联物，其是通过以下方法得到的：在还原条件下处理抗TROP2抗体，然后使其与选自以下的组中的化合物反应，在该抗体的铰链部的硫醚键部分中形成硫醚键：(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、及(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)。其中，(马来酰亚胺－N－基)－为下式表示的、氮原子成为连接部位的基团。－(NH－DX)为下式表示的、1位的氨基的氮原子成为连接部位的基团。－GGFG－表示－Gly－Gly－Phe－Gly－的四肽残基。[37]抗体－药物偶联物，其是通过以下方法得到的：在还原条件下处理抗TROP2抗体，然后使其与选自以下的组中的化合物反应，在该抗体的铰链部的硫醚键部分中形成硫醚键：(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、及(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)。其中，(马来酰亚胺－N－基)－、－(NH－DX)、及－GGFG－如上所述。[38]如[36]或[37]所述的抗体－药物偶联物，其中，选择的1种药物－接头结构相对于1抗体而言的平均连接数在1～10个的范围内。[39]如[36]或[37]所述的抗体－药物偶联物，其中，选择的1种药物－接头结构相对于1抗体而言的平均连接数在2～8个的范围内。[40]如[36]或[37]所述的抗体－药物偶联物，其中，选择的1种药物－接头结构相对于1抗体而言的平均连接数在3～8个的范围内。发明的效果通过介由特定的结构的接头连接抗肿瘤性化合物依沙替康而成的抗TROP2抗体－药物偶联物，可达成优异的抗肿瘤效果及安全性。附图说明[图1]表示cTINA1抗体重链的核苷酸序列(序列号7)及氨基酸序列(序列号8)。[图2]表示cTINA1抗体轻链的核苷酸序列(序列号9)及氨基酸序列(序列号10)。[图3]表示hTINA1－H1重链的核苷酸序列(序列号11)及氨基酸序列(序列号12)。[图4]表示hTINA1－H2重链的核苷酸序列(序列号13)及氨基酸序列(序列号14)。[图5]表示hTINA1－H3重链的核苷酸序列(序列号15)及氨基酸序列(序列号16)。[图6]表示hTINA1－L1轻链的核苷酸序列(序列号17)及氨基酸序列(序列号18)。[图7]表示hTINA1－L2轻链的核苷酸序列(序列号19)及氨基酸序列(序列号20)。[图8]表示hTINA1－L3轻链的核苷酸序列(序列号21)及氨基酸序列(序列号22)。[图9]表示TINA1抗体的CDRH1的氨基酸序列(序列号23)、CDRH2的氨基酸序列(序列号24)、CDRH3的氨基酸序列(序列号25)、CDRL1的氨基酸序列(序列号26)、CDRL2的氨基酸序列(序列号27)、及CDRL3的氨基酸序列(序列号28)。[图10]表示抗CD9抗体、抗CD46抗体、抗CD55抗体、抗CD59抗体、抗CD71抗体、抗CD73抗体、抗CD147抗体、抗CD276抗体、抗EpCAM抗体、抗EGFR抗体、及抗TROP2抗体(TINA1抗体)的细胞内化能力。[图11]表示抗CD59抗体、抗CD71抗体、抗EGFR抗体、抗EpCAM抗体、及抗TROP2抗体(TINA1抗体)的细胞内化能力。[图12]表示各种抗TROP2抗体的细胞内化能力。[图13]表示抗体－药物偶联物(1)、(6)、或(12)对人大肠癌细胞株COLO205皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图14]表示抗体－药物偶联物(1)、(6)、或(12)对人胰腺癌细胞株BxPC－3皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图15]表示抗体－药物偶联物(1)、(6)、或(12)对人胰腺癌细胞株Capan－1皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图16]表示抗体－药物偶联物(2)、(5)、(7)、或(10)对人大肠癌细胞株COLO205皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图17]表示抗体－药物偶联物(2)、(5)、(7)、或(10)对人胰腺癌细胞株BxPC－3皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图18]表示抗体－药物偶联物(3)、(4)、(8)、或(9)对人大肠癌细胞株COLO205皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图19]表示抗体－药物偶联物(3)、(4)、(8)、或(9)对人胰腺癌细胞株BxPC－3皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图20]表示抗体－药物偶联物(3)、(4)、(8)、或(9)对人卵巢癌细胞株NIH：OVCAR－3皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图21]表示抗体－药物偶联物(3)、(4)、(8)、或(9)对人胃癌细胞株NCI－N87皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图22]表示抗体－药物偶联物(3)、(4)、(8)、或(9)对人肺癌细胞株NCI－H292皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图23]表示抗体－药物偶联物(3)、(4)、(8)、或(9)对人咽癌细胞株FaDu皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图24]表示抗体－药物偶联物(3)、(4)、(8)、或(9)对人胰腺癌细胞株CFPAC－1皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图25]表示抗体－药物偶联物(8)或(13)对人胰腺癌细胞株CFPAC－1皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图26]表示抗体－药物偶联物(8)或(13)对人胰腺癌细胞株HPAC皮下移植BALB/c－nu/nu小鼠显示的抗肿瘤效果。[图27]表示抗体－药物偶联物(8)或(13)对人食道癌组织皮下移植NOD－scid小鼠显示的抗肿瘤效果。具体实施方式以下，参照附图来说明本发明的具体实施方式。需要说明的是，以下说明的实施方式表示本发明的代表实施方式的一例，本发明的范围并不受其限制。本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物为介由接头结构部分将抗肿瘤性化合物连接于抗TROP2抗体而得到的抗肿瘤性药物，以下详细进行说明。[抗体]本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物中使用的抗TROP2抗体可来源于任何物种，可优选例举人、大鼠、小鼠、及兔。当来源于人以外的物种时，优选使用已知的技术，将其嵌合化或人源化。本发明的抗体可以是多克隆抗体，也可以是单克隆抗体，优选单克隆抗体。抗TROP2抗体为能将肿瘤细胞作为靶标的抗体，即，具有能识别肿瘤细胞的特性、能与肿瘤细胞结合的特性、以及能进入到肿瘤细胞内而内化的特性等，可介由接头与具有抗肿瘤活性的化合物连接而形成抗体－药物偶联物。抗体与肿瘤细胞的结合性可利用流式细胞仪确认。作为抗体进入到肿瘤细胞内的确认方法，可举出以下方法：(1)使用与治疗抗体结合的二抗(荧光标记)，利用荧光显微镜使已进入到细胞内的抗体可视化的检验(CellDeathandDifferentiation(2008)15,751－761)；(2)使用与治疗抗体结合的二抗(荧光标记)，测定进入到细胞内的荧光量的检验(MolecularBiologyoftheCellVol.15,5268－5282,December2004)；或者，(3)Mab－ZAP检验，其中使用与治疗抗体结合的免疫毒素，其进入到细胞内之后会放出毒素从而抑制细胞增殖(BioTechniques28:162－165,January2000)；等等。需要说明的是，作为免疫毒素，也可使用白喉毒素的催化区域与G蛋白的重组体复合蛋白。由于抗体－药物偶联物连接有发挥抗肿瘤效果的化合物，所以抗体自身不必须具有抗肿瘤效果，但优选具有抗肿瘤效果。为了特异性地·选择性地在肿瘤细胞内发挥抗肿瘤性化合物的细胞毒性，优选抗体具有内化而转移到肿瘤细胞内的性质，这是重要的。对于抗TROP2抗体而言，可通过利用本领域中通常实施的方法，将作为抗原的多肽对动物进行免疫，采集在生物体内产生的抗体，并将其纯化而得到。抗原的来源不限于人，也可将来源于小鼠、大鼠等人以外的动物的抗原对动物进行免疫。这种情况下，通过对获取的与异种抗原结合的抗体与人抗原的交叉性进行试验，可选择适用于人的疾病抗体。另外，也可按照已知的方法(例如，KohlerandMilstein,Nature(1975)256,p.495－497；Kennet,R.ed.,MonoclonalAntibodies,p.365－367,PlenumPress,N.Y.(1980))，通过将产生针对抗原的抗体的产抗体细胞与骨髓瘤细胞融合，从而建立杂交瘤，获得单克隆抗体。需要说明的是，抗原可通过利用基因操作使宿主细胞产生编码抗原蛋白的基因而得到。具体而言，制作可表达抗原基因的载体，将其导入至宿主细胞，使该基因表达，将表达的抗原纯化即可。也可通过使用将基于上述基因操作的抗原表达细胞、或表达抗原的细胞株对动物进行免疫的方法而获取抗体。抗TROP2抗体可利用已知的手段获取。本发明中可使用的抗TROP2抗体没有特别限制，例如，可优选使用由本申请的序列表所表示的氨基酸序列规定的抗TROP2抗体。作为本发明中可使用的TROP2抗体，优选具有以下的特性。(1)抗体，其特征在于，具有以下的特性；(a)与TROP2特异性地结合(b)具有通过与TROP2结合而向TROP2表达细胞内化的活性(2)上述(1)所述的抗体，其中，TROP2为人TROP2。(3)上述(1)或(2)所述的抗体，其具有：作为重链中的互补性决定区的包含序列号23所记载的氨基酸序列的CDRH1、包含序列号24所记载的氨基酸序列的CDRH2、及包含序列号25所记载的氨基酸序列的CDRH3、以及作为轻链中的互补性决定区的包含序列号26所记载的氨基酸序列的CDRL1、包含序列号27所记载的氨基酸序列的CDRL2、及包含序列号28所记载的氨基酸序列的CDRL3。(4)上述(1)～(3)中任一项所述的抗体，其中，恒定区为来源于人的恒定区。(5)上述(1)～(4)中任一项所述的抗体，其被人源化。(6)上述(5)所述的抗体，其具有：包含选自由(a)序列号12中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列、(b)序列号14中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列、(c)序列号16中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列、(d)相对于(a)～(c)的序列具有至少95％以上的同源性的氨基酸序列、及(e)(a)～(c)的序列中1个或数个氨基酸被缺失、取代或添加而成的氨基酸序列组成的组中的氨基酸序列的重链的可变区，以及包含选自由(f)序列号18中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列、(g)序列号20中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列、(h)序列号22中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列、(i)相对于(f)～(h)的序列具有至少95％以上的同源性的氨基酸序列、及(j)(f)～(h)的序列中1个或数个氨基酸被缺失、取代或添加而成的氨基酸序列组成的组中的氨基酸序列的轻链的可变区。(7)上述(6)所述的抗体，其具有：选自由包含序列号12中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号18中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区、包含序列号12中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号20中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区、包含序列号12中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号22中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区、包含序列号14中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号18中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区、包含序列号14中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号20中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区、包含序列号14中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号22中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区、包含序列号16中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号18中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区、包含序列号16中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号20中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区、以及包含序列号16中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号22中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区组成的组中的重链的可变区及轻链的可变区。(8)上述(7)所述的抗体，其具有：选自由包含序列号12中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号18中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区、包含序列号14中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号18中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区、包含序列号14中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号20中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区、以及包含序列号16中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的重链的可变区及包含序列号22中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的轻链的可变区组成的组中的重链的可变区及轻链的可变区。(9)上述(6)或(7)所述的抗体，其包含：选自由包含序列号12中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号12中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号12中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号14中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号14中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号14中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号16中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号16中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链、以及包含序列号16中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链组成的组中的重链及轻链。(10)上述(6)或(7)所述的抗体，其包含：选自由包含序列号12所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号12所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号12所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号14所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号14所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号14所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号16所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号16所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20所记载的氨基酸序列的轻链、以及包含序列号16所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22所记载的氨基酸序列的轻链组成的组中的重链及轻链。(11)上述(8)所述的抗体，其包含：选自由包含序列号12中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号14中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链、包含序列号14中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链、以及包含序列号16中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链组成的组中的重链及轻链。(12)上述(1)～(11)中任一项所述的抗体，其中，重链羧基末端的赖氨酸残基缺失。(13)抗体，其是通过以下的制造抗体的方法而得到的，所述方法包括以下工序：培养经含有编码上述(1)～(12)中任一项所述的抗体的多核苷酸的表达载体转化的宿主细胞的工序，以及从所述工序中得到的培养物中采集目标抗体的工序。以下，对本发明中可使用的抗TROP2抗体进行说明。本说明书中，“癌”与“肿瘤”以相同含义使用。本说明书中，术语“基因”，不仅包括DNA，还包括其mRNA、cDNA、及其cRNA。本说明书中，术语“多核苷酸”以与核酸相同的含义使用，其也包括DNA、RNA、探针、寡核苷酸、及引物。本说明书中，“多肽”和“蛋白”以无区别的方式使用。本说明书中，“细胞”也包括动物个体内的细胞、培养细胞。本说明书中，“TROP2”以与TROP2蛋白相同的含义使用。本说明书中的“CDR”是指互补性决定区(CDR：Complemetaritydeterringregion)。已知抗体分子的重链及轻链中分别具有3个CDR。CDR也被称为高可变区(hypervariabledomain)，其为在抗体的重链及轻链的可变区内一级结构的突变性特别高的部位，在重链及轻链的多肽链的一级结构上，分别地，分离在3处。本说明书中，关于抗体的CDR，针对重链的CDR，从重链氨基酸序列的氨基末端侧开始记载为CDRH1、CDRH2、CDRH3，针对轻链的CDR，从轻链氨基酸序列的氨基末端侧开始记载为CDRL1、CDRL2、CDRL3。这些部位在立体结构上相互接近，决定针对结合的抗原的特异性。本发明中，所谓“在严格条件下进行杂交”，是指在下述条件下或与其同等的条件下进行杂交，在所述条件下，可通过下述操作而进行鉴定：在市售的杂交溶液ExpressHybHybridizationSolution(Clontech公司制)中，于68℃进行杂交，或者，使用固定有DNA的滤器，在0.7－1.0M的NaCl存在下，于68℃进行杂交，然后使用0.1－2倍浓度的SSC溶液(所谓1倍浓度SSC，包含150mMNaCl、15mM柠檬酸钠)，于68℃进行洗涤。1.TROP2TROP2是在人滋养层细胞(trophoblasts)中表达的TACSTD家族之一，是参与人滋养层细胞与癌细胞共有的免疫抵抗性的单次跨膜型的1型细胞膜蛋白。对于本发明中使用的TROP2蛋白而言，可从人、非人哺乳动物(大鼠、小鼠等)的TROP2表达细胞中直接纯化而使用，或制备该细胞的细胞膜级分而使用，另外，可在体外(invitro)合成TROP2，或通过基因操作而使宿主细胞产生TROP2而得到。基因操作中，具体而言，通过在将TROP2cDNA整合至可表达其的载体中后，在包含转录和翻译所需要的酶、底物及能量物质的溶液中进行合成，或者将其他原核生物或真核生物的宿主细胞进行转化而使其表达TROP2，可得到该蛋白。另外，也可将基于前述的基因操作而得到的TROP2表达细胞、或表达了TROP2的细胞株作为TROP2蛋白使用。TROP2的DNA序列及氨基酸序列已在公开数据库上公开，例如，可通过NM＿002353、NP＿002344(NCBI)等登录号而参考。另外，TROP2也包括：包含上述TROP2的氨基酸序列中1个或数个氨基酸被取代、缺失及/或添加而成的氨基酸序列、且具有与该蛋白同等的生物活性的蛋白质。人TROP2蛋白由包含N末端的26个氨基酸残基的信号序列、包含248个氨基酸残基的胞外结构域、包含23个氨基酸残基的跨膜结构域、包含26个氨基酸残基的胞内结构域构成。2.抗TROP2抗体的制造本发明的针对TROP2的抗体可通过以下方式得到：利用本领域中通常实施的方法将TROP2或选自TROP2的氨基酸序列中的任意的多肽对动物进行免疫，采集在生物体内产生的抗体并进行纯化。作为抗原的TROP2的生物种类不限于人，也可将来源于小鼠、大鼠等人以外的动物的TROP2对动物进行免疫。这种情况下，通过对获取的与异种TROP2结合的抗体与人TROP2的交叉性进行试验，可选出可应用于人的疾病的抗体。另外，也可通过按照已知的方法(例如，KohlerandMilstein，Nature(1975)256，p.495－497；Kennet，R.ed.，MonoclonalAntibodies，p.365－367，PlenumPress，N.Y.(1980))，将产生针对TROP2的抗体的抗体产生细胞与骨髓瘤细胞融合而建立杂交瘤，得到单克隆抗体。需要说明的是，作为抗原的TROP2可通过对TROP2基因进行基因操作而使其在宿主细胞中表达而得到。具体而言，制作可表达TROP2基因的载体，将其导入至宿主细胞，使该基因表达，将表达的TROP2纯化即可。另外，也可将基于上述的基因操作的TROP2表达细胞、或表达TROP2的细胞株作为TROP2蛋白使用。以下，具体说明针对TROP2的抗体的获取方法。(1)抗原的制备作为用于制作抗TROP2抗体的抗原，可举出TROP2或包含其至少6个连续氨基酸的部分氨基酸序列的多肽、或向它们中添加任意的氨基酸序列、载体而得到的衍生物。TROP2可从人的肿瘤组织或肿瘤细胞中直接纯化而使用，另外，可通过在体外(invitro)合成TROP2、或通过基因操作而在宿主细胞中产生TROP2而得到。基因操作中，具体而言，通过在将TROP2的cDNA整合至可表达的载体中后，在包含转录和翻译所需要的酶、底物及能量物质的溶液中进行合成，或将其他原核生物或真核生物的宿主细胞转化而使其表达TROP2，可得到抗原。另外，也可通过使将作为膜蛋白的TROP2的细胞外区域与抗体的恒定区连接的融合蛋白在适当的宿主·载体系统中表达，从而作为分泌蛋白而得到抗原。TROP2的cDNA例如可通过所谓PCR法获取：以表达TROP2的cDNA的cDNA文库为模板，使用特异性地扩增TROP2cDNA的引物，进行聚合酶链反应(以下，称为“PCR”；参照Saiki，R.K.，等，Science(1988)239，p.487－489)。作为多肽的体外(invitro)合成，例如，可举出RocheDiagnostics,Inc.制的RapidTranslationSystem(RTS)，但不限于此。作为原核细胞的宿主，例如，可举出大肠杆菌(Escherichiacoli)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)等。为了将目标基因在这些宿主细胞内转化，用包含来源于能与宿主匹配的种类的复制子即复制起点、和调节序列的质粒载体转化宿主细胞。另外，作为载体，优选具有可向转化细胞赋予表型性状(表型)的选择性的序列的载体。真核细胞的宿主细胞包括脊椎动物、昆虫、酵母等细胞，作为脊椎动物细胞，例如，常使用作为猴的细胞的COS细胞(Gluzman，Y.Cell(1981)23，p.175－182、ATCCCRL－1650；ATCC：AmericanTypeCultureCollection)、小鼠成纤维细胞NIH3T3(ATCCNo.CRL－1658)、中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞、ATCCCCL－61)的二氢叶酸还原酶缺陷株系(Urlaub，G.andChasin，L.A.Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1980)77，p.4126－4220)等，但不限于这些。可按照本领域中通常实施的方法培养如上所述地得到的转化体，通过该培养，可在细胞内或细胞外产生目标多肽。作为该培养中使用的培养基，可适当选择本领域技术人员根据采用的宿主细胞而常用的各种培养基，如果是大肠杆菌，例如，根据需要，可向LB培养基中添加氨苄西林等抗生素、IPMG而使用。对于通过上述培养而在转化体的细胞内或细胞外产生的重组蛋白，可通过利用了该蛋白的物理性质、化学性质等的各种已知的分离操作方法进行分离·纯化。作为该方法，具体而言，例如，可例举基于通常的蛋白沉淀剂的处理、超滤、分子筛色谱法(凝胶过滤)、吸附色谱法、离子交换色谱法、亲和色谱法等各种液相色谱法、透析法、它们的组合等。另外，通过在表达的重组蛋白上连接包括6个残基的组氨酸标签，从而能用镍亲和柱高效地纯化。或者，通过在表达的重组蛋白上连接IgG的Fc区域，从而能用蛋白A柱高效地纯化。通过组合上述方法，能容易地以高收率、高纯度大量制造目标多肽。也可将上文所述的转化体自身作为抗原使用。另外，也可将表达TROP2的细胞株作为抗原使用。作为这样的细胞株，可举出人源化肺癌株NCI－H322、PC14、NCIH－H2122、或LCAM1、人前列腺癌株PC3、人胰腺癌株BxPC－3、Capan－1、或PK－1、人卵巢癌株SKOV3以及人大肠癌株COLO205，但不限于这些细胞株，只要能表达TROP2即可。(2)抗TROP2单克隆抗体的制造作为与TROP2特异性地结合的抗体的例子，可举出与TROP2特异性地结合的单克隆抗体，其获取方法如下所述。在制造单克隆抗体时，通常需要下述这样的作业工序。即，(a)纯化作为抗原使用的生物高分子，或制备抗原表达细胞，(b)通过向动物注射抗原而将动物免疫，然后采集血液并检测其抗体效价，确定摘出脾脏的时机，然后制备抗体产生细胞的工序，(c)制备骨髓瘤细胞(以下称为“骨髓瘤”)，(d)进行产抗体细胞与骨髓瘤的细胞融合，(e)筛选产生目标抗体的杂交瘤群，(f)分割成单一细胞克隆(克隆)，(g)根据情况，培养用于大量制造单克隆抗体的杂交瘤，或饲养移植了杂交瘤的动物，(h)对如上所述地制造的单克隆抗体的生理活性、及其结合特异性进行研究，或检验作为标记试剂的特性，等等。以下，按照上述工序详细说明单克隆抗体的制作方法，该抗体的制作方法不限于此，例如也可使用脾细胞以外的产抗体细胞及骨髓瘤。(a)抗原的纯化作为抗原，可使用利用上述那样的方法制备的TROP2或其一部分。另外，也可将利用TROP2表达重组体细胞制备的膜级分、或TROP2表达重组体细胞自身、以及利用本领域技术人员公知的方法进行化学合成而得到的本发明的蛋白的部分肽作为抗原使用。此外，也可将TROP2表达细胞株作为抗原使用。(b)产抗体细胞的制备将工序(a)中得到的抗原、与弗式完全或不完全佐剂、或硫酸铝钾之类的助剂混合，作为免疫原而向实验动物免疫。此外，还有将抗原表达细胞作为免疫原而向实验动物免疫的方法。作为实验动物，可无障碍地使用已知的杂交瘤制作方法中使用的动物。具体而言，例如，可使用小鼠、大鼠、山羊、绵羊、牛、马等。但是，从与摘出的产抗体细胞融合的骨髓瘤细胞的获得容易性等观点考虑，优选将小鼠或大鼠作为被免疫动物。另外，对于实际使用的小鼠及大鼠的品系没有特别限制，在小鼠的情况下，例如可使用各品系A、AKR、BALB/c、BDP、BA、CE、C3H、57BL、C57BL、C57L、DBA、FL、HTH、HT1、LP、NZB、NZW、RF、RIII、SJL、SWR、WB、129等，另外，在大鼠的情况下，例如，可使用Wistar、Low、Lewis、Sprague、Dawley、ACI、BN、Fischer等。这些小鼠及大鼠可从例如CLEAJapan,Inc.、CharlesRiverLaboratoriesJapan,Inc.等实验动物饲养销售商获得。考虑到与后述的骨髓瘤细胞的融合适应性，作为被免疫动物，小鼠中特别优选BALB/c系，大鼠中特别优选Wistar及Low系。另外，考虑抗原的人与小鼠的同源性，还优选使用除去了自身抗体的降低了生物体机能的小鼠，即自己免疫疾病小鼠。需要说明的是，这些小鼠或大鼠在免疫时的周龄优选为5～12周龄，进一步优选为6～8周龄。为了通过TROP2或其重组体而将动物免疫，可使用例如Weir，D.M.，HandbookofExperimentalImmunologyVol.I.II.III.，BlackwellScientificPublications，Oxford(1987)；Kabat，E.A.andMayer，M.M.，ExperimentalImmunochemistry，CharlesCThomasPublisherSpringfield，Illinois(1964)等中详细记载的已知的方法。这些免疫方法中，可合适地用于本发明中的方法具体例如如下所述。即，首先，将作为抗原的膜蛋白级分、或表达抗原的细胞向动物的皮内或腹腔内给予。但是，为了提高免疫效率，优选并用两者，前半段进行皮内给予，后半段或仅最后一次进行腹腔内给予，这样，可特别地提高免疫效率。抗原的给予时间表根据被免疫动物的种类、个体差别等的不同而不同，通常优选抗原给予次数为3～6次、给予间隔为2～6周，进一步优选给予次数为3～4次、给予间隔为2～4周。另外，抗原的给予量根据动物的种类、个体差异等的不同而不同，通常为0.05～5mg，优选为0.1～0.5mg左右。加强免疫在如上所述的抗原给予的1～6周后、优选为1～4周后、进一步优选为1～3周后进行。免疫原为细胞的情况下，使用1×106～1×107个细胞。需要说明的是，进行加强免疫时的抗原给予量根据动物的种类、大小等的不同而不同，通常，例如小鼠的情况下，设定为0.05～5mg、优选为0.1～0.5mg、进一步优选为0.1～0.2mg左右。免疫原为细胞的情况下，使用1×106～1×107个细胞。上述加强免疫1～10天后、优选为2～5天后、进一步优选为2～3天后，无菌地从被免疫动物取出包含产抗体细胞的脾脏细胞或淋巴细胞。此时，测定抗体效价，若将抗体效价足够高的动物作为产抗体细胞的供给源，则可提高后续操作的效率。作为此处使用的抗体效价的测定方法，例如，可举出RIA法或ELISA法，但不限于这些方法。本发明中的抗体效价的测定例如可利用ELISA法，按照以下记载的步骤进行。首先，将纯化或部分纯化的抗原吸附于ELISA用96孔板等的固相表面，进而利用与抗原没有关系的蛋白例如牛血清白蛋白(BSA)覆盖未吸附抗原的固相表面，将该表面洗涤后，与作为一抗的分级稀释的试样(例如小鼠血清)接触，使上述抗原与试样中的抗体结合。进而，作为二抗，添加经酶标记的针对小鼠抗体的抗体，使其与小鼠抗体结合，洗涤后添加该酶的底物，测定因基于底物分解的显色而导致的吸光度的变化等，由此计算抗体效价。可按照已知的方法(例如，Kohler等，Nature(1975)256，p.495；Kohler等，Eur.J.Immunol.(1977)6，p.511；Milstein等，Nature(1977)，266，p.550；Walsh，Nature，(1977)266，p.495)从被免疫动物的脾脏细胞或淋巴细胞分离产抗体细胞。例如，在脾脏细胞的情况下，可采用常规方法：将脾脏切碎，用不锈钢网过滤细胞，然后悬浮于伊格尔最小限度培养基(MEM)，分离产抗体细胞。(c)骨髓瘤细胞(以下称为“骨髓瘤”)的制备对于用于细胞融合的骨髓瘤细胞没有特别限制，可从已知的细胞株中适当选择使用。但是，考虑到从融合细胞选择杂交瘤时的便利性，优选使用其选择工艺已确立的HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶，Hypoxanthine－guaninephosphoribosyltransferase)缺陷株系。即，为来源于小鼠的X63－Ag8(X63)、NS1－ANS/1(NS1)、P3X63－Ag8.U1(P3U1)、X63－Ag8.653(X63.653)、SP2/0－Ag14(SP2/0)、MPC11－45.6TG1.7(45.6TG)、FO、S149/5XXO、BU.1等，来源于大鼠的210.RSY3.Ag.1.2.3(Y3)等，来源于人的U266AR(SKO－007)、GM1500·GTG－A12(GM1500)、UC729－6、LICR－LOW－HMy2(HMy2)、8226AR/NIP4－1(NP41)等。这些HGPRT缺陷株系例如可从ATCC等获得。对于这些细胞株而言，用适当的培养基，例如8－氮鸟嘌呤培养基(在RPMI－1640培养基中添加了谷氨酰胺、2－巯基乙醇、庆大霉素、及胎牛血清(以下称为“FBS”)，进一步添加8－氮鸟嘌呤而成的培养基)、Iscove改良Dulbecco培养基(Iscove’sModifiedDulbecco’sMedium；IMDM)、或Dulbecco改良Eagle培养基(Dulbecco’sModifiedEagleMedium；DMEM)，进行继代培养，在细胞融合的3～4天前，用正常培养基(例如，包含10％FCS的ASF104培养基(味之素株式会社制))进行继代培养，在融合当天预先确保2×107以上的细胞数。(d)细胞融合对于产抗体细胞与骨髓瘤细胞的融合而言，可按照已知的方法(Weir，D.M.，HandbookofExperimentalImmunologyVol.I.II.III.，BlackwellScientificPublications，Oxford(1987)；Kabat，E.A.andMayer，M.M.，ExperimentalImmunochemistry，CharlesCThomasPublisherSpringfield，Illinois(1964)等)，在不极度降低细胞的生存率的程度的条件下适当实施。作为这样的方法，例如，可使用在聚乙二醇等高浓度聚合物溶液中将产抗体细胞和骨髓瘤细胞混合的化学方法、利用电刺激的物理方法等。其中，上述化学方法的具体例如下所示。即，当使用聚乙二醇作为高浓度聚合物溶液时，在分子量1500～6000、优选为2000～4000的聚乙二醇溶液中，于30～40℃、优选35～38℃的温度，对产抗体细胞与骨髓瘤细胞进行1～10分钟、优选5～8分钟混合。(e)杂交瘤群的选择对于通过上述细胞融合而得到的杂交瘤的选择方法没有特别限制，通常可使用HAT(次黄嘌呤、氨基喋呤、胸嘧啶核苷，hypoxanthine,aminopterin,thymidine)选择法(Kohler等，Nature(1975)256，p.495；Milstein等，Nature(1977)266，p.550)。该方法在使用无法在氨基蝶呤中生存的HGPRT缺陷株系的骨髓瘤细胞得到杂交瘤的情况下是有效的。即，通过在HAT培养基中培养未融合细胞及杂交瘤，从而仅选择性地残留具有针对氨基蝶呤的耐性的杂交瘤，并且使其增殖。(f)分割成单一细胞克隆(克隆)作为杂交瘤的克隆法，例如可使用甲基纤维素法、软琼脂糖法、有限稀释法等已知的方法(例如参照Barbara，B.M.andStanley，M.S.：SelectedMethodsinCellularImmunology，W.H.FreemanandCompany，SanFrancisco(1980))。这些方法中，特别优选甲基纤维素法等三维培养法。例如，将通过细胞融合而形成的杂交瘤群悬浮于ClonaCell－HYSelectionMediumD(StemCellTechnologies公司制#03804)等甲基纤维素培养基中而进行培养，通过回收形成的杂交瘤集落(colony)，可得到单克隆杂交瘤。培养回收的各杂交瘤集落，在得到的杂交瘤培养上清液中，选择稳定确认抗体效价的株作为TROP2单克隆抗体产生杂交瘤株。作为如上所述地建立的杂交瘤株的例子，可举出TROP2杂交瘤TINA1。需要说明的是，本说明书中，将TROP2杂交瘤TINA1所产生的抗体记载为“TINA1抗体”或简记为“TINA1”。TINA1抗体的重链可变区具有序列表的序列号2所示的氨基酸序列。另外，TINA1抗体的轻链可变区具有序列表的序列号4所示的氨基酸序列。(g)通过培养杂交瘤而制备单克隆抗体对于如上所述地选择的杂交瘤而言，可通过对其进行培养，而高效地得到单克隆抗体，但优选在培养之前，筛选产生目标单克隆抗体的杂交瘤。该筛选可采用本身已知的方法进行。本发明中的抗体效价的测定例如可利用上述(b)项中说明的ELISA法进行。利用以上的方法得到的杂交瘤，可在液氮中或－80℃以下的冰箱中以冷冻状态而保存。对于完成了克隆的杂交瘤，将培养基从HT培养基换成正常培养基而进行培养。大量培养可利用使用了大型培养瓶的旋转培养、或旋动培养进行。从该大量培养中的上清液中，利用凝胶过滤等本领域技术人员公知的方法进行纯化，从而可得到与本发明的蛋白特异性地结合的单克隆抗体。另外，向同系的小鼠(例如，上述的BALB/c)、或Nu/Nu小鼠的腹腔内注射杂交瘤，使该杂交瘤增殖，由此，可得到大量含有本发明的单克隆抗体的腹水。当在腹腔内给予时，如果事先(3～7天前)给予2，6，10，14－四甲基十五烷(2，6，10，14－tetramethylpentadecane；姥鲛烷)等矿物油，则可得到更多量的腹水。例如，向与杂交瘤同系的小鼠的腹腔内预先注射免疫抑制剂，使T细胞失活，然后20天后，使106～107个杂交瘤·克隆细胞悬浮于不含血清的培养基中(0.5ml)并向腹腔内给予，通常，在腹部膨胀、腹水积存时，从小鼠采集腹水。通过该方法，可得到与培养液中相比为约100倍以上的浓度的单克隆抗体。利用上述方法得到的单克隆抗体例如可利用Weir，D.M.：HandbookofExperimentalImmunology，Vol.I，II，III，BlackwellScientificPublications，Oxford(1978)中记载的方法纯化。如上所述地得到的单克隆抗体针对TROP2具有高抗原特异性。(h)单克隆抗体的检验如上所述地得到的单克隆抗体的同种型及亚类可按照以下方式确定。首先，作为鉴定法，可举出Ouchterlony法、ELISA法、或RIA法。Ouchterlony法虽然简单，但在单克隆抗体的浓度低时，需要进行浓缩操作。另一方面，当使用ELISA法或RIA法时，使培养上清液与抗原吸附固相直接反应，进而使用作为二抗的各种免疫球蛋白同种型、亚类相对应的抗体，由此，可鉴定单克隆抗体的同种型、亚类。另外，作为更简单的方法，也可利用市售的鉴定用的试剂盒(例如，MouseTyperKit；Bio－RadLaboratories,Inc.制)等。此外，蛋白的定量可利用FolinLowry法、及由280nm时的吸光度(1.4(OD280)＝免疫球蛋白1mg/ml)计算的方法进行。此外，在再次实施(2)的(a)～(h)的工序，另外独立地获得单克隆抗体时，可获得具有与TINA1抗体同等的细胞毒性活性的抗体。作为这样的抗体中的一例，可举出结合于与TINA1抗体相同的表位的抗体。若新制作的单克隆抗体与TINA1抗体结合的部分肽或部分立体结构结合，则判断为该单克隆抗体结合于与TINA1抗体相同的表位。另外，通过确认该单克隆抗体与TINA1抗体竞争向TROP2的结合(即，该单克隆抗体抑制TINA1抗体与TROP2的结合)，即使不确定具体的表位的序列或结构，也能判断该单克隆抗体与抗TROP2抗体结合于相同的表位。当确认了表位相同时，可强烈期待该单克隆抗体具有与TINA1抗体同等的抗原结合能力或生物活性。(3)其他抗体本发明的抗体中，除了包括上述针对TROP2的单克隆抗体之外，还包括以降低针对人的异种抗原性等为目的而进行了人为修饰的基因重组型抗体，例如包括嵌合(Chimeric)抗体、人源化(Humanized)抗体、人抗体等。这些抗体可利用已知的方法制造。作为嵌合抗体，可举出将抗体的可变区和恒定区相互不同的抗体、例如来源于小鼠或大鼠的抗体的可变区接合于来源于人的恒定区而成的嵌合抗体(参照Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，81，6851－6855，(1984))。作为人源化抗体，可举出：仅将互补性决定区(CDR)整合至来源于人的抗体而得到的抗体(参照Nature(1986)321，p.522－525)；利用CDR移植法，除了CDR的序列之外，还向人抗体移植一部分的框架(framework)的氨基酸残基的抗体(国际公开第90/07861号)。但是，作为来源于TINA1抗体的人源化抗体，只要保持TINA1抗体的全部的6种CDR序列，就不限于特定的人源化抗体。需要说明的是，TINA1抗体的重链可变区具有：包含序列表的序列号23所示的氨基酸序列的CDRH1(TAGMQ)、包含序列号24所示的氨基酸序列的CDRH2(WINTHSGVPKYAEDFKG)、及包含序列号25所示的氨基酸序列的CDRH3(SGFGSSYWYFDV)。另外，TINA1抗体的轻链可变区具有：包含序列表的序列号26所示的氨基酸序列的CDRL1(KASQDVSTAVA)、包含序列号27所示的氨基酸序列的CDRL2(SASYRYT)、及包含序列号28所示的氨基酸序列的CDRL3(QQHYITPLT)。作为小鼠抗体TINA1的人源化抗体的实例，可举出下述重链和下述轻链的任意的组合，所述重链包含：包含(1)包含序列表的序列号12、14、或16的第20～140位的氨基酸残基的氨基酸序列、(2)相对于上述(1)的氨基酸序列具有至少95％以上的同源性的氨基酸序列、及(3)上述(1)的氨基酸序列中1个或数个氨基酸被缺失、取代或添加而成的氨基酸序列中的任一种的重链可变区；所述轻链包含：包含(4)包含序列号18、20、或22的第21～129位的氨基酸残基的氨基酸序列、(5)相对于上述(4)的氨基酸序列具有至少95％以上的同源性的氨基酸序列、及(6)上述(4)的氨基酸序列中1个或数个氨基酸被缺失、取代或添加而成的氨基酸序列中的任一种的轻链可变区。需要说明的是，本说明书中的“数个”是指1～10个、1～9个、1～8个、1～7个、1～6个、1～5个、1～4个、1～3个、或1或2个。另外，作为本说明书中的氨基酸的取代，优选保守的氨基酸取代。保守的氨基酸取代是指，在与氨基酸侧链相关的氨基酸群组内发生的取代。优选的氨基酸群组如下所述：酸性群组＝天冬氨酸、谷氨酸；碱性群组＝赖氨酸、精氨酸、组氨酸；非极性群组＝丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸；非带电极性家族＝甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸。其他的优选氨基酸群组如下所述：脂肪族羟基群组＝丝氨酸及苏氨酸；含酰胺群组＝天冬酰胺及谷氨酰胺；脂肪族群组＝丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸及异亮氨酸；以及芳香族群组＝苯丙氨酸、色氨酸及酪氨酸。所述氨基酸取代，优选在不降低具有原来的氨基酸序列的物质的特性的范围内进行。作为上述的重链及轻链的优选的组合的抗体，可举出：包含具有包含序列号12中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号18中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体、包含具有包含序列号12中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号20中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体、包含具有包含序列号12中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号22中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体、包含具有包含序列号14中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号18中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体、包含具有包含序列号14中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号20中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体、包含具有包含序列号14中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号22中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体、包含具有包含序列号16中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号18中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体、包含具有包含序列号16中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号20中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体、以及包含具有包含序列号16中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号22中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体。作为更优选的组合的抗体，可举出：含有包含序列号12中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号12中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号12中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号14中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号14中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号14中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号16中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18中氨基酸编号第21～234位的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号16中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、以及含有包含序列号16中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体。作为优异的优选的组合，可举出：包含具有包含序列号12中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号18中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体、包含具有包含序列号14中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号18中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体、包含具有包含序列号14中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号20中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体、以及包含具有包含序列号16中氨基酸编号20～140所记载的氨基酸序列的可变区的重链及具有包含序列号22中氨基酸编号21～129所记载的氨基酸序列的可变区的轻链的抗体。另外，作为其他的优选的组合，可举出：含有包含序列号12所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号12所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号12所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号14所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号14所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号14所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号16所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号16所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、以及含有包含序列号16所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22所记载的氨基酸序列的轻链的抗体。作为优异的优选的组合，可举出：含有包含序列号12中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号14中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号14中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、以及含有包含序列号16中氨基酸编号20～470所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体。作为更优异的优选的组合，可举出：含有包含序列号12中氨基酸编号20～469所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号14中氨基酸编号20～469所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号18中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、含有包含序列号14中氨基酸编号20～469所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号20中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体、以及含有包含序列号16中氨基酸编号20～469所记载的氨基酸序列的重链及包含序列号22中氨基酸编号21～234所记载的氨基酸序列的轻链的抗体。可通过将显示与上述的重链氨基酸序列及轻链氨基酸序列的高同源性的序列进行组合，来选择具有与上述的各抗体同等的生物活性的抗体。这样的同源性通常为80％以上的同源性，优选为90％以上的同源性，更优选为95％以上的同源性，最优选为99％以上的同源性。另外，还可通过将重链或轻链的氨基酸序列中1个～数个氨基酸残基被取代、缺失或添加的氨基酸序列进行组合，来选择具有与上述的各抗体同等的生物活性的抗体。两种氨基酸序列间的同源性可通过使用Blastalgorithmversion2.2.2(Altschul，StephenF.，ThomasL.Madden，AlejandroA.Schaeffer，JinghuiZhang，ZhengZhang，WebbMiller，andDavidJ.Lipman(1997)，“GappedBLASTandPSI－BLAST：anewgenerationofproteindatabasesearchprograms”，NucleicAcidsRes.25：3389－3402)的默认参数而确定。Blastalgorithm也可通过用互联网访问www.ncbi.nlm.nih.gov/blast而使用。需要说明的是，序列表的序列号12、14、或16所示的重链氨基酸序列中，包含第1～19位的氨基酸残基的氨基酸序列为信号序列，包含第20～140位的氨基酸残基的氨基酸序列为可变区，包含第141～470位的氨基酸残基的氨基酸序列为恒定区。分别地，序列号12的序列记载于图3，序列号14的序列记载于图4，序列号16的序列记载于图5。另外，序列表的序列号18、20、或22所示的轻链氨基酸序列中，包含第1～20位的氨基酸残基的氨基酸序列为信号序列，包含第21～129位的氨基酸残基的氨基酸序列为可变区，包含第130～234位的氨基酸残基的氨基酸序列为恒定区。分别地，序列号18的序列记载于图6，序列号20的序列记载于图7，序列号22的序列记载于图8。作为本发明的抗体，还可举出与TROP2结合的人抗体。抗TROP2人抗体是指，仅具有来源于人染色体的抗体的基因序列的人抗体。抗TROP2人抗体可通过以下方法得到：使用了具有包含人抗体的重链和轻链的基因的人染色体片段的产生人抗体的小鼠的方法(参照Tomizuka，K.等，NatureGenetics(1997)16，p.133－143；Kuroiwa，Y.等，Nucl.AcidsRes.(1998)26，p.3447－3448；Yoshida，H.等，AnimalCellTechnology：BasicandAppliedAspectsvol.10，p.69－73(Kitagawa，Y.，Matsuda，T.andIijima，S.eds.)，KluwerAcademicPublishers，1999.；Tomizuka，K.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(2000)97，p.722－727等。)。这样的产生人抗体的小鼠具体可按照以下方式建立，通过制作敲除动物及转基因动物，以及使这些动物彼此交配，制作出以下动物：内源性免疫球蛋白重链及轻链的基因座被破坏，代替地，介由酵母人工染色体(Yeastartificialchromosome，YAC)载体等导入了人免疫球蛋白重链及轻链的基因座的基因重组动物。另外，也可通过基因重组技术，利用分别编码这样的人抗体的重链及轻链的cDNA、优选包含该cDNA的载体而转化真核细胞，培养产生基因重组人单克隆抗体的转化细胞，由此，从培养上清液中得到该抗体。此处，作为宿主，可使用例如真核细胞，优选CHO细胞、淋巴细胞、骨髓瘤等哺乳动物细胞。另外，还已知获取从人抗体文库中筛选的来源于噬菌体展示的人抗体的方法(参照Wormstone，I.M.et.al，InvestigativeOphthalmology&VisualScience.(2002)43(7)，p.2301－2308；Carmen，S.等，BriefingsinFunctionalGenomicsandProteomics(2002)，1(2)，p.189－203；Siriwardena，D.等，Ophthalmology(2002)109(3)，p.427－431等。)。例如，可使用使人抗体的可变区作为单链抗体(scFv)而在噬菌体表面表达，选择与抗原结合的噬菌体的噬菌体展示法(NatureBiotechnology(2005)，23，(9)，p.1105－1116)。通过对通过与抗原结合而选择的噬菌体的基因进行分析，可确定编码与抗原结合的人抗体的可变区的DNA序列。如果明确与抗原结合的scFv的DNA序列，则可通过制作具有该序列的表达载体、导入至适当的宿主而使其表达，从而获取人抗体(国际公开第92/01047号、国际公开92/20791号、国际公开93/06213号、国际公开93/11236号、国际公开93/19172号、国际公开95/01438号、国际公开95/15388号；Annu.Rev.Immunol(1994)12，p.433－455；NatureBiotechnology(2005)23(9)，p.1105－1116)。若新制作的人抗体与TINA1抗体所结合的部分肽或部分立体结构相结合，则可判断为该人抗体结合于与TINA1抗体相同的表位。另外，通过确认该人抗体与TINA1抗体竞争向TROP2的结合(即，该人抗体抑制TINA1抗体与TROP2的结合)，即使不确定具体的表位的序列或结构，也能判断该人抗体与TINA1抗体结合于相同的表位。当确认了表位相同时，可强烈期待该人抗体具有与TINA1抗体同等的生物活性。对于通过以上的方法得到的嵌合抗体、人源化抗体、或人抗体而言，可利用已知的方法等评价针对抗原的结合性，选出优选的抗体。作为比较抗体性质时的其他指标的一例，可举出抗体的稳定性。差示扫描量热测定仪(DSC)是能快速且准确地测定适于作为蛋白的相对结构稳定性的指标的热变性中点(Tm)的装置。使用DSC测定Tm值，比较该值，由此可比较热稳定性的不同。已知抗体的保存稳定性与抗体的热稳定性显示一定程度的相关性(LoriBurton，et.al.，PharmaceuticalDevelopmentandTechnology(2007)12，p.265－273)，以热稳定性为指标，可选出合适的抗体。作为用于选出抗体的其他指标，可举出在适当的宿主细胞中的收量高，以及在水溶液中的凝集性低。例如收量最高的抗体不一定显示最高的热稳定性，因此，有必要基于上文说明的指标综合判断，选出最合适向人给予的抗体。本发明的抗体中也包括抗体的修饰体。该修饰体是指，对本发明的抗体实施化学修饰或生物修饰而成的修饰体。化学修饰体中，包括化学部分连接于氨基酸骨架的化学修饰体、N－连接或O－连接的糖链的化学修饰体等。生物修饰体中，包括翻译后经修饰(例如，N－连接或O－连接的糖基化、N末端或C末端的加工、脱酰胺化、天冬氨酸的异构化、甲硫氨酸的氧化)的生物修饰体，使用原核生物宿主细胞进行表达从而于N末端添加甲硫氨酸残基而得到的生物修饰体。另外，为了能进行本发明的抗体或抗原的检出或分离而标记的标记物例如酶标记物、荧光标记物、亲和标记物也被包括在所述修饰物的含义之内。这样的本发明的抗体的修饰物对于改善抗体的稳定性及血中滞留性、抗原性的降低、抗体或抗原的检出或分离等是有用的。另外，通过调节连接于本发明的抗体的糖链修饰(糖基化、脱岩藻糖化等)，可增强抗体依赖性细胞毒性活性。作为抗体的糖链修饰的调节技术，已知国际公开第1999/54342号、国际公开2000/61739号、国际公开2002/31140号等，但不限于此。本发明的抗体也包括调节了该糖链修饰的抗体。在分离抗体基因后，导入至适当的宿主来制作抗体时，可使用适当的宿主与表达载体的组合。作为抗体基因的具体例，可举出组合编码本说明书中记载的抗体的重链序列的基因、及编码轻链序列的基因而成的抗体基因。当转化宿主细胞时，重链序列基因和轻链序列基因可被插入到同一表达载体中，或者也可被插入到分别的表达载体中。使用真核细胞作为宿主时，可使用动物细胞、植物细胞、真核微生物。尤其是，作为动物细胞，可举出哺乳类细胞，例如，作为猴的细胞的COS细胞(Gluzman，Y.Cell(1981)23，p.175－182、ATCCCRL－1650)、小鼠成纤维细胞NIH3T3(ATCCNo.CRL－1658)、中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞、ATCCCCL－61)的二氢叶酸还原酶缺陷株系(Urlaub，G.andChasin，L.A.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.(1980)77，p.4126－4220)。使用原核细胞时，例如，可举出大肠杆菌、枯草芽孢杆菌。通过转化而向这些细胞中导入目标抗体基因，通过体外(invitro)培养经转化的细胞，而可得到抗体。该培养中，随着抗体的序列的不同，收量有时存在差异，在具有同等结合活性的抗体中，可使用收量作为指标筛选出容易生产药物的抗体。因此，本发明的抗体中也包括通过以下制造方法得到的抗体，所述方法的特征在于，包括培养上述经转化的宿主细胞的工序，及从在该工序中得到的培养物中采集目标抗体或该抗体的功能性片段的工序。需要说明的是，已知哺乳类培养细胞所生产的抗体的重链的羧基末端的赖氨酸残基缺失(JournalofChromatographyA，705：129－134(1995))，另外，同样还已知重链羧基末端的甘氨酸、赖氨酸这2个氨基酸残基缺失，新位于羧基末端的脯氨酸残基被酰胺化(AnalyticalBiochemistry，360：75－83(2007))。然而，这些重链序列的缺失及修饰不影响抗体的抗原结合能力及效应子功能(补体的活化、抗体依赖性细胞毒性作用等)。因此，本发明的抗体中也包括受到了该修饰的抗体及该抗体的功能性片段，也包括在重链羧基末端缺失1个或2个氨基酸的缺失体、经酰胺化的该缺失体(例如羧基末端部位的脯氨酸残基被酰胺化的重链)等。但是，只要能保持抗原结合能力及效应子功能即可，本发明涉及的抗体的重链的羧基末端的缺失体不限于上述种类。构成本发明涉及的抗体的2条重链可以是完全长度及选自上述的缺失体中的重链中的任一种，也可以是任意两种的组合。各缺失体的量比可受到产生本发明涉及的抗体的哺乳类培养细胞的种类及培养条件的影响，作为本发明涉及的抗体的主成分，可举出2条重链的双方的羧基末端之一的氨基酸残基缺失的情况。作为本发明的抗体的同种型，可举出例如IgG(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)等，可优选举出IgG1或IgG2。作为抗体的生物活性，通常，可举出：抗原结合活性、通过与抗原结合而向表达该抗原的细胞中内化的活性、将抗原的活性中和的活性、增强抗原的活性的活性、抗体依赖性细胞毒性(ADCC)活性、补体依赖性细胞毒性(CDC)活性及抗体依赖性细胞介导的吞噬作用(ADCP)，本发明涉及的抗体所具有的功能为相对于TROP2的结合活性，优选为通过与TROP2结合而向TROP2表达细胞中内化的活性。此外，本发明的抗体除了具有细胞内化活性之外，也可同时具有ADCC活性、CDC活性及/或ADCP活性。对于得到的抗体，可纯化至均一(homogeneity)。对于抗体的分离、纯化而言，可使用通常的蛋白所使用的分离、纯化方法。例如，可适当选择、组合柱色谱法、滤器过滤、超滤、盐析、透析、制备用聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电点电泳等，可对抗体进行分离、纯化(StrategiesforProteinPurificationandCharacterization：ALaboratoryCourseManual，DanielR.Marshak等eds.，ColdSpringHarborLaboratoryPress(1996)；Antibodies：ALaboratoryManual.EdHarlowandDavidLane，ColdSpringHarborLaboratory(1988))，但不限于这些。作为色谱法，可举出亲和色谱法、离子交换色谱法、疏水性色谱法、凝胶过滤色谱法、反相色谱法、吸附色谱法等。这些色谱法可利用HPLC、FPLC等液相色谱法进行。作为亲和色谱法中使用的柱，可举出蛋白A柱、G蛋白柱。例如，作为使用了蛋白A柱的柱，可举出HyperD，POROS，SepharoseF.F.(PharmaciaCorporation)等。另外，也可使用将抗原固定的载体，利用针对抗原的结合性而纯化抗体。[抗肿瘤性化合物]对本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物中连接的抗肿瘤性化合物进行说明。作为本发明中使用的抗肿瘤性化合物，只要是具有抗肿瘤效果、且具有能连接于接头结构的取代基、部分结构的化合物即可，没有特别限制。对于抗肿瘤性化合物而言，接头的一部分或全部在肿瘤细胞内被切断，游离出抗肿瘤性化合物部分，从而显示抗肿瘤效果。在与药物的连接部分切断接头时，以未修饰的结构游离出抗肿瘤性化合物，可发挥其本来的抗肿瘤效果。作为本发明中使用的抗肿瘤性化合物，可合适地使用作为喜树碱衍生物的依沙替康((1S,9S)－1－氨基－9－乙基－5－氟－2,3－二氢－9－羟基－4－甲基－1H,12H－苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲哚嗪并[1,2－b]喹啉－10,13(9H,15H)－二酮；下式：)该依沙替康具有优异的抗肿瘤活性，但尚未作为抗肿瘤药在市场上销售。该化合物可利用已知的方法容易地获得，可优选将1位氨基作为与接头结构连接的连接部位使用。另外，有时依沙替康以连接接头的一部分的状态游离于肿瘤细胞内，即使是这种结构，也可发挥优异的抗肿瘤效果。依沙替康具有喜树碱结构，因此，在酸性水性介质中(例如pH3左右)，平衡偏向形成内酯环的结构(闭环体)，另一方面，在碱性水性介质中(例如pH10左右)，平衡偏向内酯环开环的结构(开环体)，这是已知的。即使是导入了对应于上述闭环结构及开环结构的依沙替康残基的药物偶联物，也可期待同等的抗肿瘤效果，不言自明，本发明的范围中包含任意状态的该化合物。作为其他的抗肿瘤性化合物，例如，可举出多柔比星(doxorubicin)、柔红霉素(daunorubicin)、丝裂霉素C(mitomycinC)、博来霉素(bleomycin)、安西他滨(cyclocytidine)、长春新碱(vincristine)、长春碱(vinblastine)、甲氨蝶呤(methotrexate)、铂系抗肿瘤剂(顺铂(cisplatin)或其衍生物)、紫杉醇(taxol)或其衍生物、以及喜树碱或其衍生物(日本特开平6－87746号公报中记载的抗肿瘤剂)等。抗体－药物偶联物中，连接于1分子抗体的药物的连接数是影响其有效性、安全性的重要因素。对于抗体－药物偶联物的制造而言，为了使药物的连接数为定数，可规定反应的原料·试剂的使用量等反应条件而进行实施，但与低分子化合物的化学反应不同，抗体－药物偶联物通常以连接不同数目的药物的混合物的形式获得。用平均值即平均药物连接数，规定、表示连接于每分子抗体的药物的连接数。本发明中，原则上只要没有特别说明，即，除了表示具有不同的药物连接数的抗体－药物偶联物混合物中包含的具有特定的药物连接数的抗体－药物偶联物的情况之外，药物的连接数是指平均值。可控制连接于抗体分子的依沙替康的连接数，作为每1抗体的药物平均连接数，可连接1～10个左右的依沙替康，优选为2～8个，更优选为3～8个。需要说明的是，本领域技术人员可根据本申请的实施例的记载，来设计在抗体上连接必要数目的药物的反应，可得到控制了依沙替康的连接数的抗体－药物偶联物。[接头结构]对本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物中将抗肿瘤性化合物连接于抗TROP2抗体的接头结构进行说明。该接头具有下式的结构：－L1－L2－LP－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－抗体连接于L1的末端(与连接L2的一侧相反的末端)，抗肿瘤性化合物连接于－La－(CH2)n2－C(＝O)－部分的羰基。n1表示0～6的整数，优选为1～5的整数，更优选为1～3。1.L1L1由以下结构表示：－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－(CH2)n3－C(＝O)－其中，n3为2～8的整数，“－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－”具有下式表示的结构。该部分结构中的3位是与抗TROP2抗体的连接部位。在该3位处的与该抗体的连接的特征是形成硫醚而连接。该结构部分的1位的氮原子与存在于包含该结构的接头内的亚甲基的碳原子连接。即，－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－(CH2)n3－C(＝O)－L2－为下式表示的结构(其中，“抗体－S－”是来源于抗体。)。式中，n3为2～8的整数，优选为2～5。作为L1的具体例，可举出－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－、等等。2.L2L2为－NH－(CH2CH2－O)n4－CH2CH2－C(＝O)－表示的结构，L2也可以不存在，这种情况下，L2为单键。另外，n4为1～6的整数，优选为2～4。L2以末端的氨基连接于L1，以相反的末端的羰基与LP连接。作为L2的具体例，可举出－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－、等等。3.LPLP为由2～7个氨基酸构成的肽残基。即，由2～7个氨基酸以肽键连接而成的寡肽的残基构成。LP在N末端连接于L2，在C末端与接头的－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－部分的氨基连接。构成LP的氨基酸没有特别限制，例如为L－或D－氨基酸，优选为L－氨基酸。另外，除了α－氨基酸之外，还可以是β－丙氨酸、ε－氨基己酸、γ－氨基丁酸等结构的氨基酸，此外，也可以是例如经N－甲基化的氨基酸等非天然型的氨基酸。LP的氨基酸序列没有特别限制，作为构成的氨基酸，可举出苯丙氨酸(Phe；F)、酪氨酸(Tyr；Y)、亮氨酸(Leu；L)、甘氨酸(Gly；G)、丙氨酸(Ala；A)、缬氨酸(Val；V)、赖氨酸(Lys；K)、瓜氨酸(Cit)、丝氨酸(Ser；S)、谷氨酸(Glu；E)、天冬氨酸(Asp；D)等。这些中，可优选举出苯丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸、赖氨酸、瓜氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸。可根据氨基酸的种类，来控制药物游离的模式。氨基酸的数目可以为2～7个。作为LP的具体例，可举出：－GGF－、－DGGF－、－(D－)D－GGF－、－EGGF－、－GGFG－、－SGGF－、－KGGF－、－DGGFG－、－GGFGG－、－DDGGFG－、－KDGGFG－、－GGFGGGF－。上述的“(D－)D”表示D－天冬氨酸。作为本发明的抗体－药物偶联物的特别优选的LP，可举出－GGFG－的四肽残基。4.La－(CH2)n2－C(＝O)－La－(CH2)n2－C(＝O)－中的La为－O－的结构、或单键。n2为0～5的整数，优选为0～3，更优选为0或1。作为La－(CH2)n2－C(＝O)－，可举出以下的结构。－O－CH2－C(＝O)－、－O－CH2CH2－C(＝O)－、－O－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－O－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－、－O－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－、－CH2－C(＝O)－、－CH2CH2－C(＝O)－、－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－、－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－。这些中，优选的是：－O－CH2－C(＝O)－、－O－CH2CH2－C(＝O)－或者，La为单键，且n2为0。作为接头－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－表示的结构的具体例，可举出：－NH－CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2－O－C(＝O)－、－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－、等等。更优选为：－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－、－NH－CH2CH2－O－C(＝O)－。对于接头－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－而言，作为链长，优选具有4～7个原子的链长，进一步优选具有5或6个原子的链长。对于本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物而言，认为在转移至肿瘤细胞内后，接头部分被切断，游离出NH2－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－(NH－DX)表示的结构的药物衍生物而显示抗肿瘤作用。作为从本发明的抗体－药物偶联物中游离而显示抗肿瘤效果的抗肿瘤性衍生物，可举出具有上文中列举的接头－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－表示的结构的末端成为氨基的结构部分的抗肿瘤性衍生物，特别优选的如下所示。NH2－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、NH2－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、NH2－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、NH2－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)。需要说明的是，确认了在NH2－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)的情况下，位于同分子内的缩醛胺结构不稳定，因而进一步自分解而游离出HO－CH2－C(＝O)－(NH－DX)这些化合物也可作为本发明的抗体－药物偶联物的制造中间体而合适地使用。在以依沙替康为药物的本发明的抗体－药物偶联物中，优选将下述的结构的药物－接头结构部分[－L1－L2－LP－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－(NH－DX)]连接于抗体。对于这些药物－接头结构部分而言，作为每1抗体的平均连接数，可以为1～10，优选为2～8，更优选为3～8。－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)。这些中，更优选的是：－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)。进一步优选的是：－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)。本发明的抗体－药物偶联物中，对于连接抗TROP2抗体与药物的接头结构而言，通过连接上文中说明的接头各部分中所述的优选结构，可构建优选的接头。作为这样的接头结构，可合适地使用以下的结构的接头。需要说明的是，结构的左端是与抗体的连接部位，右端是与药物的连接部位。－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－。这些中，更优选的是：。－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－。可进一步优选举出：－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－、－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2O－CH2CH2O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－。[制造方法]接下来，对本发明的抗体－药物偶联物或其制造中间体的代表的制造方法进行说明。需要说明的是，下文中，为了表示化合物，使用各反应式中所示的化合物的编号。即，称为“式(1)的化合物”、“化合物(1)”等。另外，其他编号的化合物也以同样方式记载。1.制造方法1式(1)表示的介由硫醚而将抗体与药物－接头结构连接而成的抗体－药物偶联物例如可通过下述方法制造。[式中，AB表示具有巯基的抗体，L1’表示L1表示的接头结构中接头末端为马来酰亚胺基(下式)的结构(其中，氮原子成为连接部位)，具体而言，表示L1中的－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－(CH2)n3－C(＝O)－中－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－部分为马来酰亚胺基的基团。另外，－(NH－DX)为下式：表示的结构，表示依沙替康的1位的氨基的氢原子被除去1个而产生的基团。]需要说明的是，上述的反应式中，式(1)的化合物中，以1个从药物至接头末端的结构部分与1个抗体连接而得到的结构进行了解释，但这是为了说明方便，实际上，相对于1个抗体分子而言连接多个该结构部分的情况也是多见的。这种情况在以下的制造方法的说明中也同样。通过使利用后述的方法而可获得的化合物(2)与具有巯基的抗体(3a)反应，可制造抗体－药物偶联物(1)。具有巯基的抗体(3a)可利用本领域技术人员公知的方法获得(Hermanson,G.T,BioconjugateTechniques,pp.56－136,pp.456－493,AcademicPress(1996))。例如，可举出以下方法：使Traut’s试剂与抗体的氨基作用；使N－琥珀酰亚胺基S－乙酰硫代链烷酸酯(N－succinimidylS－acetylthioalkanoate)类与抗体的氨基作用后，与羟基胺作用；在使N－琥珀酰亚胺基3－(吡啶基二硫代)丙酸酯作用后，使还原剂作用；使二硫苏糖醇、2－巯基乙醇、三(2－羧基乙基)膦盐酸盐(TCEP)等还原剂与抗体作用而将抗体内铰链部的二硫键还原从而产生巯基；等等，但不限于这些方法。具体而言，作为还原剂，相对于每1个抗体内铰链部二硫醚键，使用0.3～3摩尔当量TCEP，在含有螯合剂的缓冲液中，使其与抗体反应，由此，可得到部分或完全地将抗体内铰链部二硫醚还原而得到的抗体。作为螯合剂，可举出例如乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)等。可以以1mM～20mM的浓度使用它们。作为缓冲液，可使用磷酸钠、硼酸钠、乙酸钠溶液等。具体而言，于4℃～37℃使抗体与TCEP反应1～4小时，由此，可得到部分或完全还原的具有巯基的抗体(3a)。此处，通过实施在药物－接头部分添加巯基的反应，可通过硫醚键而连接药物－接头部分。相对于每1个具有巯基的抗体(3a)，可使用2～20摩尔当量的化合物(2)，制造每1个抗体连接2个～8个药物而成的抗体－药物偶联物(1)。具体而言，在含有具有巯基的抗体(3a)的缓冲液中，添加溶解有化合物(2)的溶液并使其进行反应。此处，作为缓冲液，可使用乙酸钠溶液、磷酸钠、硼酸钠等。反应时的pH为5～9，更优选在pH7附近反应。作为溶解化合物(2)的溶剂，可使用二甲基亚砜(DMSO)、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基乙酰胺(DMA)、N－甲基－2－吡啶酮(NMP)等有机溶剂。可以以1～20％v/v将溶解有化合物(2)的有机溶剂溶液添加到含有具有巯基的抗体(3a)的缓冲液中并进行反应。反应温度为0～37℃、更优选为10～25℃，反应时间为0.5～2小时。可通过利用含硫醇试剂使未反应的化合物(2)的反应性失活而结束反应。含硫醇试剂例如为半胱氨酸或N－乙酰－L－半胱氨酸(NAC)。更具体而言，添加相对于使用的化合物(2)而言为1～2摩尔当量的NAC，于室温孵育10～30分钟，由此使反应结束。对于制造的抗体－药物偶联物(1)，可利用以下的共通操作，进行浓缩、缓冲液交换、纯化、抗体浓度及每一分子抗体的药物平均连接数的测定，进行抗体－药物偶联物(1)的鉴定。共通操作A：抗体或抗体－药物偶联物水溶液的浓缩在AmiconUltra(50，000MWCO，MilliporeCorporation)的容器内，放入抗体或抗体－药物偶联物溶液，使用离心机(AllegraX－15R，BeckmanCoulter，Inc.)进行离心操作(以2000G～3800G离心5～20分钟)，将抗体或抗体－药物偶联物溶液浓缩。共通操作B：抗体的浓度测定使用UV测定器(Nanodrop1000，ThermoFisherScientificInc.)，按照制造商规定的方法，进行抗体浓度的测定。此时，使用随着抗体不同而不同的280nm吸光系数(1.3mLmg－1cm－1～1.8mLmg－1cm－1)。共通操作C－1：抗体的缓冲液交换按照制造商规定的方法，用含有氯化钠(137mM)及乙二胺四乙酸(EDTA，5mM)的磷酸缓冲液(10mM，pH6.0；本说明书中称为PBS6.0/EDTA)，将使用了SephadexG－25载体的NAP－25柱(Cat.No.17－0852－02，GEHealthcareJapanCorporation)平衡化。针对一根该NAP－25柱，装填2.5mL抗体水溶液，然后分离获取用PBS6.0/EDTA3.5mL洗脱的级分(3.5mL)。利用共通操作A将该级分浓缩，利用共通操作B，进行抗体浓度的测定，然后使用PBS6.0/EDTA，将抗体浓度调整至10mg/mL。共通操作C－2：抗体的缓冲液交换按照制造商规定的方法，用含有氯化钠(50mM)及EDTA(2mM)的磷酸缓冲液(50mM，pH6.5；本说明书中称为PBS6.5/EDTA)将使用了SephadexG－25载体的NAP－25柱(Cat.No.17－0852－02，GEHealthcareJapanCorporation)平衡化。针对一根该NAP－25柱，装填2.5mL抗体水溶液，然后分离获取用PBS6.5/EDTA3.5mL洗脱的级分(3.5mL)。利用共通操作A将该级分浓缩，利用共通操作B进行抗体浓度的测定，然后使用PBS6.5/EDTA，将抗体浓度调整为20mg/mL。共通操作D：抗体－药物偶联物的纯化用市售的磷酸缓冲液(PBS7.4，Cat.No.10010－023，Invitrogen)、含有氯化钠(137mM)的磷酸钠缓冲液(10mM，pH6.0；本说明书中称为PBS6.0)或含有山梨糖醇(5％)的乙酸缓冲液(10mM，pH5.5；本说明书中称为ABS)中的任一种缓冲液将NAP－25柱平衡化。在该NAP－25柱中装填抗体－药物偶联物反应水溶液(约1.5mL)，用制造商规定的量的缓冲液洗脱，由此分离获取抗体级分。将该分离获取的级分再次装填至NAP－25柱，用缓冲液洗脱，进行凝胶过滤纯化操作，反复操作计2～3次，由此，得到了除去了未连接的药物接头、低分子化合物(三(2－羧基乙基)膦盐酸盐(TCEP)、N－乙酰－L－半胱氨酸(NAC)、二甲基亚砜)的抗体－药物偶联物。共通操作E：抗体－药物偶联物中的抗体浓度及每一分子抗体的药物平均连接数的测定(1)抗体－药物偶联物中的连接药物浓度可通过以下方式算出：测定抗体－药物偶联物水溶液在280nm及370nm这两种波长下的UV吸光度，然后进行下述计算，由此算出。由于某一波长下的总吸光度等于存在于体系内的所有吸收化学物质种类的吸光度的和(吸光度的加成性)，所以，假设在抗体与药物偶联前后，抗体及药物的摩尔吸光系数不发生变化时，抗体－药物偶联物中的抗体浓度及药物浓度如下述的关系式所示。A280＝AD,280+AA,280＝εD,280CD+εA,280CA式(I)A370＝AD,370+AA,370＝εD,370CD+εA,370CA式(II)此处，A280表示280nm处的抗体－药物偶联物水溶液的吸光度，A370表示370nm处的抗体－药物偶联物水溶液的吸光度，AA，280表示280nm处的抗体的吸光度，AA，370表示370nm处的抗体的吸光度，AD，280表示280nm处的偶联物前体的吸光度，AD，370表示370nm处的偶联物前体的吸光度，εA，280表示280nm处的抗体的摩尔吸光系数，εA，370表示370nm处的抗体的摩尔吸光系数，εD，280表示280nm处的偶联物前体的摩尔吸光系数，εD，370表示370nm处的偶联物前体的摩尔吸光系数，CA表示抗体－药物偶联物中的抗体浓度，CD表示抗体－药物偶联物中的药物浓度。此处，εA，280、εA，370、εD，280、εD，370可使用事先准备的值(计算推定值或由化合物的UV测定得到的实测值)。例如，εA，280可由抗体的氨基酸序列利用已知的计算方法(ProteinScience,1995,vol.4,2411－2423)推定。εA，370通常为0。εD，280及εD，370可通过测定以一定摩尔浓度溶解使用的偶联物前体的溶液的吸光度并根据朗伯－比尔定律(吸光度＝摩尔浓度×摩尔吸光系数×吸收池光程)而得到。测定抗体－药物偶联物水溶液的A280及A370，将它们的值代入式(I)及(II)，解联立方程式，从而可求出CA及CD。进而，通过将CD除以CA，从而可求出每1抗体的药物平均连接数。共通操作F：抗体－药物偶联物中的每一分子抗体的药物平均连接数的测定(2)对于抗体－药物偶联物中的每一分子抗体的药物平均连接数而言，除了前述的共通操作E之外，也可通过使用了以下的方法的高效液相色谱法(HPLC)分析求出。[F－1.HPLC分析用样品的制备(抗体－药物偶联物的还原)]将抗体－药物偶联物溶液(约1mg/mL、60μL)与二硫苏糖醇(DTT)水溶液(100mM、15μL)混合。于37℃孵育混合物30分钟，由此，将切断了抗体－药物偶联物的L链及H链间的二硫键的样品用于HPLC分析。[F－2.HPLC分析]在下述的测定条件进行HPLC分析。HPLC系统：Agilent1290HPLC系统(AgilentTechnologies)检测器：紫外吸光光度计(测定波长：280nm)柱：PLRP－S(2.1×50mm、8μm、AgilentTechnologies、P/NPL1912－1802)柱温：80℃移动相A：0.04％三氟乙酸(TFA)水溶液移动相B：含有0.04％TFA的乙腈溶液梯度程序：29％－36％(0分钟－12.5分钟)、36％－42％(12.5－15分钟)、42％－29％(15分钟－15.1分钟)、29％－29％(15.1分钟－25分钟)样品注入量：15μL[F－3.数据分析]〔F－3－1〕相对于未连接药物的抗体的L链(L0)及H链(H0)，对于连接了药物的L链(连接了一个药物的L链：L1)及H链(连接了一个药物的H链：H1、连接了两个药物的H链：H2、连接了三个药物的H链：H3)而言，与连接的药物的数目成比例地，疏水性增加，保留时间延长，因此，按照L0、L1、H0、H1、H2、H3的顺序被洗脱。通过与L0及H0的保留时间进行比较，可将检出峰分配给L0、L1、H0、H1、H2、H3中的某一个。〔F－3－2〕由于药物接头存在UV吸收，所以根据药物接头的连接数，使用L链、H链及药物接头的摩尔吸光系数，按照下式进行峰面积值的修正。此处，各抗体中的L链及H链的摩尔吸光系数(280nm)可使用利用已知的计算方法(ProteinScience,1995,vol.4,2411－2423)，由各抗体的L链及H链的氨基酸序列推定的值。在hTINA的情况下，根据其氨基酸序列，作为L链的摩尔吸光系数，使用34690作为推定值，作为H链的摩尔吸光系数，使用95000作为推定值。另外，对于药物接头的摩尔吸光系数(280nm)而言，使用用巯基乙醇或N－乙酰半胱氨酸使各药物接头反应，将马来酰亚胺基转化为琥珀酰亚胺硫醚而得到的化合物的实测的摩尔吸光系数(280nm)。〔F－3－3〕按照下式计算各链峰面积与峰面积修正值总和之比(％)。ALi、AHi：Li、Hi各峰面积修正值〔F－3－4〕按照下式计算抗体－药物偶联物中的每一分子抗体的药物平均连接数。药物平均连接数＝(L0峰面积比×0+L0峰面积比×1+H0峰面积比×0+H1峰面积比×1+H2峰面积比×2+H3峰面积比×3)/100×2制造方法1中的式(2)表示的化合物为下式表示的化合物：(马来酰亚胺－N－基)－(CH2)n3－C(＝O)－L2－LP－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－C(＝O)－(NH－DX)式中，n3表示整数2～8，L2表示－NH－(CH2CH2－O)n4－CH2CH2－C(＝O)－或单键，此处，n4表示1～6的整数，LP表示由2～7个选自苯丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸、赖氨酸、瓜氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸中的氨基酸构成的肽残基，n1表示0～6的整数，n2表示0～5的整数，La表示－O－或单键，(马来酰亚胺－N－基)－为下式表示的马来酰亚胺基(2,5－二氧代－2,5－二氢－1H－吡咯－1－基)，为氮原子成为连接部位的基团，－(NH－DX)为下式表示的1位的氨基的氮原子成为连接部位的基团。作为制造中间体，优选的是，L2为单键，或为－NH－(CH2CH2－O)n4－CH2CH2－C(＝O)－时，n4为整数2～4。作为制造中间体，优选LP的肽残基为由选自苯丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸、赖氨酸、瓜氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸中的氨基酸形成的肽残基的化合物。作为制造中间体，优选上述肽残基中LP为由4个氨基酸构成的肽残基的化合物。更具体而言，作为制造中间体，优选LP为－GGFG－的四肽残基的化合物。另外，作为制造中间体，优选－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－为－NH－CH2CH2－、－NH－CH2CH2CH2－、－NH－CH2CH2CH2CH2－、－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－、－NH－CH2－O－CH2－、或－NH－CH2CH2－O－CH2－的化合物，更优选－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－为－NH－CH2CH2CH2－、－NH－CH2－O－CH2－、或－NH－CH2CH2－O－CH2的化合物。此外，对于式(2)表示的化合物而言，作为制造中间体，优选n3为整数2～5、L2为单键，－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－为－NH－CH2CH2－、－NH－CH2CH2CH2－、－NH－CH2CH2CH2CH2－、－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－、－NH－CH2－O－CH2－、或－NH－CH2CH2－O－CH2－的化合物。更优选－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－为－NH－CH2CH2－、－NH－CH2CH2CH2－、－NH－CH2－O－CH2－、或－NH－CH2CH2－O－CH2－的化合物。进一步优选n3为整数2或5的化合物。另外，对于式(2)表示的化合物而言，作为制造中间体，优选n3为整数2～5、L2为－NH－(CH2CH2－O)n4－CH2CH2－C(＝O)－、n4为整数2～4、－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－为－NH－CH2CH2－、－NH－CH2CH2CH2－、－NH－CH2CH2CH2CH2－、－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－、－NH－CH2－O－CH2－、或－NH－CH2CH2－O－CH2－的化合物。更优选n4为整数2或4的化合物。进一步优选－NH－(CH2)n1－La－(CH2)n2－为－NH－CH2CH2CH2－、－NH－CH2－O－CH2－、或－NH－CH2CH2－O－CH2－的化合物。作为这样的对于制造本发明化合物有用的中间体，可例举下述物质作为优选例。(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)。通过使选自上述的制造中间体化合物组中的药物－接头化合物与抗TROP2抗体或其反应性衍生物反应而在存在于抗TROP2抗体的铰链部的二硫键部分中形成硫醚键，可制造本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物。这种情况下，优选使用抗TROP2抗体的反应性衍生物，特别优选对抗TROP2抗体进行还原处理而得到的反应性衍生物。以下物质为作为制造中间体的更优选的化合物。(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)。另外，上述的中间体化合物组中，下式：(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2－C(＝O)－NH－CH2CH2－O－CH2CH2－O－CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2CH2－C(＝O)－(NH－DX)、(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、或(马来酰亚胺－N－基)－CH2CH2CH2CH2CH2－C(＝O)－GGFG－NH－CH2CH2－O－CH2－C(＝O)－(NH－DX)、表示的化合物为进一步优选的化合物。需要说明的是，为了确保偶联物的量，可混合在同样的条件下制作而得到的平均药物数为同等程度的多种偶联物(例如±1程度)而形成新的一批。这种情况下，平均药物数落入混合前的平均药物数之间。2.制造方法2之前的制造方法中使用的中间体式(2)表示的化合物及它们的药理学上可接受的盐例如可利用下述方法制造。[式中，L1’表示末端马来酰亚胺基，P1、P2及P3表示保护基。]将羧酸(5)衍生为活性酯、混合酸酐、或酰卤等，在碱存在下，使其与NH2－DX(4)或其药理学上可接受的盐反应，由此可制造化合物(6)。NH2－DX(4)表示依沙替康(化学名：(1S,9S)－1－氨基－9－乙基－5－氟－2,3－二氢－9－羟基－4－甲基－1H,12H－苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲哚嗪并[1,2－b]喹啉－10,13(9H,15H)－二酮)。该反应可使用肽合成中通常使用的反应试剂和条件。活性酯包括各种物质，例如可使用N，N’－二环己基碳二亚胺或1－乙基－3－(3－二甲基氨基丙基)碳二亚胺·盐酸盐等缩合剂，使对硝基苯酚等酚类、N－羟基苯并三唑或N－羟基琥珀酰亚胺等与羧酸(5)反应而制造。另外，活性酯也可利用以下反应来制造：羧酸(5)与三氟乙酸五氟苯基酯等的反应；羧酸(5)与1－苯并三唑基氧基三吡咯烷磷鎓六氟亚磷酸盐的反应；羧酸(5)与氰基膦酸二乙酯的反应(盐入法)；羧酸(5)与三苯基膦及2，2’－二吡啶基二硫醚的反应(向山法)；羧酸(5)与4－(4，6－二甲氧基－1，3，5－三嗪－2－基)－4－甲基吗啉鎓氯化物(DMTMM)等三嗪衍生物的反应；等等。另外，也可利用通过在碱存在下用亚硫酰氯、草酰氯等酰卤处理羧酸(5)而可进行制造的酰卤法等而进行反应。可通过在适当的碱的存在下，在惰性溶剂中，于－78℃～150℃的反应温度下使如上所述地得到的羧酸(5)的活性酯、混合酸酐、或酰卤与化合物(4)反应，而制造化合物(6)。需要说明的是，“惰性溶剂”是指，在采用该溶剂的反应中，不抑制实施的目标反应的溶剂。作为上述的各工序中使用的具体的碱，例如，可举出碳酸钠、碳酸钾、乙醇钠、丁醇钾、氢氧化钠、氢氧化钾、氢化钠、氢化钾等碱金属或碱土金属的碳酸盐、醇盐、氢氧化物、或氢化物；以正丁基锂等烷基锂、或二异丙基氨基锂之类的二烷基氨基锂为代表的有机金属碱；双(三甲基甲硅烷基)氨基锂等双甲硅烷基胺的有机金属碱；以及吡啶、2，6－二甲基吡啶、可力丁、4－二甲基氨基吡啶、三乙胺、N－甲基吗啉、二异丙基乙基胺、二氮杂双环[5.4.0]十一碳－7－烯(DBU)等叔胺或含氮杂环化合物等有机碱。作为本反应中使用的惰性溶剂，可举出二氯甲烷、氯仿、四氯化碳等卤化烃系溶剂；四氢呋喃、1，2－二甲氧基乙烷、二氧杂环己烷等醚系溶剂；苯、甲苯等芳香族烃系溶剂；N，N－二甲基甲酰胺、N，N－二甲基乙酰胺、N－甲基吡咯烷－2－酮等酰胺系溶剂，除了上述惰性溶剂之外，根据情况，还可以使用二甲基亚砜、环丁砜等亚砜系溶剂；丙酮、甲基乙基酮等酮系溶剂；甲醇、乙醇等醇系的溶剂等。此外，也可将它们混合而使用。作为化合物(6)的末端氨基的保护基P1，可使用叔丁基氧基羰基、9－芴基甲基氧基羰基、苄基氧基羰基等在肽合成中通常使用的氨基的保护基。作为其他的氨基的保护基，可举出乙酰基等烷酰基；甲氧基羰基、乙氧基羰基等烷氧基羰基；对甲氧基苄基氧基羰基、对(或邻)硝基苄基氧基羰基等芳基甲氧基羰基；苄基、三苯基甲基等芳基甲基；苯甲酰基等芳酰基；2，4－二硝基苯磺酰基、邻硝基苯磺酰基等芳基磺酰基。保护基P1可根据保护氨基的化合物的性质等进行选择。通过使得到的化合物(6)的末端氨基的保护基P1脱保护，可制造化合物(7)。对于该脱保护而言，可根据该保护基来选择试剂、条件。将N末端被P2保护的肽羧酸(8)衍生为活性酯、混合酸酐等，与得到的化合物(7)进行反应，由此，可制造化合物(9)。形成肽羧酸(8)与化合物(7)的肽键的反应条件、试剂、碱、及惰性溶剂可从化合物(6)的合成中说明的那些中适当选择而使用。保护基P2可从化合物(6)的保护基中说明的那些中适当选择而使用，可根据保护氨基的化合物的性质等进行选择。另外，也可如在肽合成中通常使用的那样，针对构成肽羧酸(8)的氨基酸或肽，依次反复进行反应和脱保护而使其伸长，来制造化合物(9)。通过将得到的化合物(9)的氨基的保护基P2脱保护，可制造化合物(10)。对于该脱保护而言，可根据该保护基来适当选择试剂、条件。将羧酸(11)衍生为活性酯、混合酸酐、或酰卤等，使其与得到的化合物(10)进行反应，由此可制造化合物(2)。形成羧酸(11)与化合物(10)的肽键的反应条件、试剂、碱、及惰性溶剂可以从在化合物(6)的合成中说明的那些中适当选择使用。化合物(9)例如也可利用下述方法来制造。将N末端被P2保护的肽羧酸(8)衍生为活性酯、混合酸酐等，在碱存在下，使其与羧基被P3保护的胺化合物(12)反应，由此，可制造化合物(13)。形成肽羧酸(8)与化合物(12)的肽键的反应条件、试剂、碱、及惰性溶剂可从化合物(6)的合成中说明的那些中适当选择使用。对于化合物(13)的氨基的保护基P2而言，可用通常使用的保护基保护。具体而言，作为羟基的保护基，可举出甲氧基甲基等烷氧基甲基；苄基、4－甲氧基苄基、三苯基甲基等芳基甲基；乙酰基等烷酰基；苯甲酰基等芳酰基；叔丁基二苯基甲硅烷基等甲硅烷基；等等。可将羧基形成为与甲基、乙基、叔丁基等烷基、烯丙基、或苄基等芳基甲基的酯等来保护该羧基。关于氨基，除了叔丁基氧基羰基、甲氧基羰基、乙氧基羰基等烷基氧基羰基；烯丙基氧基羰基、或9－芴基甲基氧基羰基、苄基氧基羰基、对甲氧基苄基氧基羰基、对(或邻)硝基苄基氧基羰基等芳基甲氧基羰基之外，可举出乙酰基等烷酰基；苄基、三苯基甲基等芳基甲基；苯甲酰基等芳酰基；2，4－二硝基苯磺酰基、邻硝基苯磺酰基等芳基磺酰基；等等。作为羧基的保护基P3，可使用有机合成化学中、尤其是肽合成中作为羧基的保护基通常使用的保护基，具体而言，为甲基、乙基、叔丁基等烷基酯、烯丙基酯、苄基酯等，可从上文所述的保护基中适当选择使用。这种情况下，优选可利用不同的方法或条件除去氨基的保护基和羧基的保护基。例如，可举出P2为叔丁基氧基羰基、P3为苄基的组合等情况作为代表。这些保护基可根据保护氨基和羧基的化合物的性质等从上文中说明的保护基中选择，在将这些保护基切断时，也可根据该保护基来选择试剂、条件。通过将得到的化合物(13)的羧基的保护基P3脱保护，可制造化合物(14)。对于该脱保护而言，可根据该保护基来选择试剂、条件。将得到的化合物(14)衍生为活性酯、混合酸酐、或酰卤等，在碱存在下，使其与化合物(4)反应，由此可制造化合物(9)。该反应可适用在肽合成中通常使用的反应试剂、条件，反应条件、试剂、碱、及惰性溶剂可从在化合物(6)的合成中说明的那些中适当选择使用。化合物(2)例如也可利用下述方法来制造。通过将化合物(13)的氨基的保护基P2脱保护，可制造化合物(15)。对于该脱保护而言，可根据该保护基来选择试剂、条件。将羧酸衍生物(11)衍生为活性酯、混合酸酐、或酰卤等，在碱存在下，使其与得到的化合物(15)反应，由此可制造化合物(16)。形成肽羧酸(11)与化合物(15)的酰胺键的反应条件、试剂、碱、及惰性溶剂可从化合物(6)的合成中说明的那些中适当选择使用。通过将得到的化合物(16)的羧基的保护基脱保护，可制造化合物(17)。对于该脱保护而言，可以与化合物(14)的制造中的羧基的脱保护同样地进行。将化合物(17)衍生为活性酯、混合酸酐、或酰卤等，在碱存在下，使其与化合物(4)反应，由此可制造化合物(2)。该反应可适用在肽合成中通常使用的反应试剂、条件，反应条件、试剂、碱、及惰性溶剂可从在化合物(6)的合成中说明的那些中适当选择使用。3.制造方法3中间体式(2)表示的化合物也可通过下述方法制造。[式中，L1’为末端被转化为马来酰亚胺基的结构的L1，P4表示保护基。]将化合物(11)衍生为活性酯、混合酸酐等，在碱存在下，使其与C末端被P4保护的肽羧酸(18)反应，由此可制造化合物(19)。形成肽羧酸(18)与化合物(11)的肽键的反应条件、试剂、碱、及惰性溶剂可从化合物(6)的合成中说明的那些中适当选择使用。化合物(18)的羧基的保护基P4可从上文中说明的保护基中适当选择使用。通过将得到的化合物(19)的羧基的保护基脱保护，可制造化合物(20)。对于该脱保护而言，可以与化合物(14)的制造中的羧基的脱保护同样地进行。将得到的化合物(20)转化为活性酯、或混合酸酐等，使其与化合物(7)反应，由此可制造化合物(2)。该反应可适用在肽合成中通常使用的反应试剂、条件，反应条件、试剂、碱、及惰性溶剂可从在化合物(6)的合成中说明的那些中适当选择使用。4.制造方法4以下，对制造方法2中记载的制造中间体(10)中n1＝1、La＝O的化合物(10b)的制造方法进行详细说明。式(10b)表示的化合物、其盐或它们的溶剂化物例如可利用下述方法制造。[式中，LP与上文中定义相同，L表示酰基、且为乙酰基等烷酰基或苯甲酰基等芳酰基、或氢原子等，X及Y表示包含1～3个氨基酸的寡肽，P5及P7表示氨基的保护基，P6表示羧基的保护基]式(21)表示的化合物可通过日本特开2002－60351号公报中记载的方法、文献(J.Org.Chem.,51卷，3196页，1986年)记载的方法、或应用该方法并根据需要进行保护基的除去、官能团转化而制造。此外，可通过将末端氨基已被保护的氨基酸或氨基已被保护的寡肽的酰胺用醛或酮处理而得到。通过在惰性溶剂中，在酸或碱存在下，在从冷却下直到室温的温度条件下，使化合物(21)与具有羟基的化合物(22)反应，可制造化合物(23)。作为此处可使用的酸，例如，可举出氢氟酸、盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、硼酸等无机酸；乙酸、柠檬酸、对甲苯磺酸、甲磺酸等有机酸；四氟硼酸盐、氯化锌、氯化锡、氯化铝、氯化铁等路易斯酸；等等。这些中，优选磺酸类，特别优选对甲苯磺酸。此外，作为碱，可从上文中说明的碱中适当选择使用，尤其是，优选叔丁醇钾等碱金属醇盐；氢氧化钠、氢氧化钾等碱金属氢氧化物；氢化钠、氢化钾等碱金属氢化物；以二异丙基氨基锂等二烷基氨基锂为代表的有机金属碱；双(三甲基甲硅烷基)氨基锂等双甲硅烷基胺的有机金属碱；等等。作为反应中使用的溶剂，可使用四氢呋喃、1，4－二氧杂环己烷等醚系溶剂；苯、甲苯等芳香族烃系溶剂；等等。上述的溶剂可以是与水的混合物。另外，作为P5中所例举的氨基的保护基，只要是通常可用于保护氨基的基团即可，没有特别限制。作为代表的氨基的保护基，可举出制造方法2中记载的氨基的保护基，但本反应中，有时P5中所例举的氨基的保护基被切断。这种情况下，根据需要，可适当地与适当的氨基的保护试剂反应，再次导入保护基。化合物(24)可通过将化合物(23)的保护基P6除去而制造。此处，关于作为P6而例举的羧基的保护基，制造方法2中记载了代表的羧基的保护基，可从其中适当选择。化合物(23)中，优选可利用不同的方法或条件除去氨基的保护基P5和羧基的保护基P6的保护基。例如，可举出P5为9－芴基甲基氧基羰基、P6为苄基的组合等情况作为代表。这些保护基可根据保护氨基和羧基的化合物的性质等而选择，在将这些保护基除去时，也可根据该保护基来选择试剂、条件。将羧酸(24)衍生为活性酯、混合酸酐、或酰卤等，在碱存在下，使其与化合物(4)或其药理学上可接受的盐反应，由此制造化合物(25)，将得到的化合物(25)的保护基P5除去，由此可制造化合物(26)。在化合物(4)与羧酸(24)的反应及除去保护基P6的反应中，可使用与制造方法2中说明的试剂、反应条件同样的实际、反应条件。通过使化合物(26)与末端氨基已被保护的氨基酸或氨基已被保护的寡肽(27)反应，而制造化合物(9b)，通过将得到的化合物(9b)的保护基P7除去而可制造化合物(10b)。关于作为P7而说明的氨基的保护基，只要是通常可用于保护氨基的基团即可，没有特别限制，作为代表的氨基的保护基，可举出制造方法2中记载的氨基的保护基，在将其除去时，可根据保护基而选择试剂、条件。化合物(26)与化合物(27)的反应中，可使用肽合成中通常使用的反应试剂、条件。利用上述的方法制造的化合物(10b)可按照上述的制造方法转化为本发明化合物(1)。对于本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物而言，在大气中放置，或通过进行重结晶等而进行纯化，吸收水分，附着吸附水，有时形成水合物，这样的含有水的化合物和盐也被包含在本发明中。另外，本发明中也包括用各种放射性或非放射性同位素标记的化合物。构成本发明的抗体－药物偶联物的原子中的一种以上，也可以以非天然比例含有原子同位素。作为原子同位素，可举出例如氘(2H)、氚(3H)、碘－125(125I)或碳－14(14C)等。另外，本发明化合物可以用例如氚(3H)、碘－125(125I)或碳－14(14C)等放射性同位素进行放射性标记。经放射性标记的化合物作为治疗或预防剂、研究试剂例如检验试剂、及诊断剂、例如体内图像诊断剂是有用的。对于本发明的抗体－药物偶联物的所有同位素突变种而言，无论是否具有放射性，均包含在本发明的范围内。[医药]本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物对癌细胞显示细胞毒性活性，因此，可作为医药、尤其是作为针对癌的治疗剂及/或预防剂使用。即，本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物可作为用于作为癌症治疗的主要治疗方法的化学疗法的药剂而选择使用，作为其结果，可减缓癌细胞的生长，抑制增殖，进而破坏癌细胞。由此，对于癌症患者而言，可从因癌而导致的症状中解脱，可实现QOL的改善，维持癌症患者的生命，达成治疗效果。在达到破坏癌细胞的程度的情况下，可通过抑制或控制癌细胞的增殖而使癌症患者达到更高的QOL，并且可实现更长期生存。对于本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物而言，除了单独使用药物之外，也可在辅助疗法中作为与其他疗法组合的药剂使用，也可与外科手术、放射线疗法、激素疗法等组合。此外，也可作为新辅助疗法中的药物疗法的药剂使用。除了用于上述这样的治疗之外，还可期待利用抗体向抗原的结合性而与微小的转移癌细胞结合从而抑制癌细胞的增殖、进而将其破坏的效果。即，尤其是，在原发性的癌细胞中确认了TROP2的表达时，通过给予本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物，可期待癌转移的抑制、预防效果。例如，可期待抑制、破坏转移过程中存在于体液中的癌细胞的效果、对刚着床于某种组织后的微小的癌细胞的抑制、破坏等效果。另外，尤其是可期待抑制、预防用外科方法除去癌组织后发生的癌转移的效果，可期待抑制癌转移的效果。对于本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物而言，除了作为全身疗法而全身性地向患者给予之外，也可期待局部地向癌组织给予的治疗效果。作为可应用本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物的癌的种类，可举出肺癌、肾癌、尿路上皮癌、大肠癌、前列腺癌、多形性成胶质细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、肝癌、膀胱癌、胃癌、宫颈癌、头颈部癌、食道癌等，在作为治疗对象的癌细胞中，只要是表达抗体－药物偶联物中的抗体所能识别的蛋白的癌细胞即可，不限于这些。本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物可合适地向哺乳动物给予，更优选为人。作为包含本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物的医药组合物中使用的物质，对于给予量、给予浓度而言，可从本领域中通常使用的制剂添加物中适当选择使用。本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物可作为包含1种以上的药学上的适应性的成分的药学组合物而给予。例如，代表性地，上述药学组合物包含1种以上的药学载体(例如，经灭菌的液体)。此处，液体例如包含水及油(石油、动物来源、植物来源、或合成来源的油)。油例如可以是花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。在静脉内给予上述药学组合物的情况下，水是更有代表性的载体。食盐水溶液、以及右旋糖(dextrose)水溶液及甘油水溶液也可作为液体载体，特别是可用于注射用溶液。适当的药学的赋形剂是本领域中已知的。根据期望，上述组合物还可以包含微量的湿润剂或乳化剂、或pH缓冲剂。适当的药学载体的例子在E.W.Martin的“Remington’sPharmaceuticalSciences”有记载。其处方与给予的方式对应。已知多种递送系统，可用于给予本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物。作为导入方法，可举出皮内、肌内、腹腔内、静脉内、及皮下的路径，但不限于这些。给予例如可利用输液或推注。特别优选的实施方式中，上述配体药物结合体的给予利用输液进行。肠胃外的给予是优选的给予路径。代表的实施方式中，将上述药学组合物形成为适于向人静脉内给予的药学组合物，按照常规步骤而制备。代表性地，用于静脉内给予的组合物为灭菌的等张性的水性缓冲液中的溶液。必要时，上述医药还可包含增溶剂及用于缓解注射部位的疼痛的局麻药(例如，利多卡因)。通常，上述成分例如可以以下述方式供给：将呈现活性的量密封于安瓿或Sachet等中，制成在密封的容器中的干燥冷冻干燥粉末或无水的浓缩物，分别地，或在单位剂型中一起混合而供给。在利用输液而给予上述药物的情况下，例如，可将其投入到含有灭菌的制药等级的水或食盐水的输液瓶。在利用注射而给予上述药物的情况下，可提供注射用灭菌水或食盐水的安瓿，例如在给予上述成分前进行混合。本发明的医药组合物可以是仅包含本申请的抗TROP2抗体－药物偶联物的医药组合物，也可以是包含抗TROP2抗体－药物偶联物及至少一种除此之外的癌症治疗剂的医药组合物。本发明的抗TROP2抗体－药物偶联物可以与其他癌症治疗剂共同给予，由此可增强抗癌效果。这样的目的下使用的其他抗癌剂可以与抗体－药物偶联物同时、分别、或连续地向个体给予，也可改变各自的给予间隔而给予。作为这样的癌症治疗剂，可举出abraxane、紫杉醇(paclitaxel)、、顺铂(cisplatin)、吉西他滨(gemcitabine)、伊立替康(irinotecan)(CPT－11)、紫杉醇(paclitaxel)、培美曲塞(pemetrexed)、索拉非尼(sorafenib)、长春花碱(vinblastin)、或国际公开第2003/038043号中记载的药剂、以及LH－RH类似物(亮丙瑞林、戈舍瑞林等)、雌莫司汀·磷酸盐、雌激素拮抗剂(他莫昔芬、雷洛昔芬等)、芳香酶抑制剂(阿那曲唑、来曲唑、依西美坦等)等，只要是具有抗肿瘤活性的药剂即可，没有特别限制。对于这样的医药组合物，作为具有选择的组成和必要的纯度的制剂，可制成冷冻干燥制剂或液状制剂。制成冷冻干燥制剂时，可以是包含本领域中使用的适当的制剂添加物的制剂。另外，在液剂中也同样地操作，可制成包含本领域中使用的各种的制剂添加物的液状制剂。医药组合物的组成及浓度根据给予方法的不同而发生变化，对于本发明的医药组合物中包含的抗TROP2抗体－药物偶联物而言，在抗体－药物偶联物针对抗原的亲和性、即针对抗原的解离常数(Kd值)方面，亲和性越高(Kd值越低)，就能以越少量的给予量发挥药效。因此，在确定抗体－药物偶联物的给予量时，也可基于抗体－药物偶联物与抗原的亲和性的情况而设定给予量。在将本发明的抗体－药物偶联物向人给予时，例如，以约0.001～100mg/kg给予1次，或每次间隔1～180天而给予多次。实施例通过以下所示的实施例具体地说明本发明，但本发明不受它们的限制。另外，不对这些实施例进行任何方式的限定性解释。另外，本说明书中，没有特别记载的试剂、溶剂及起始材料可由市售的供给源容易地获得。[实施例1：小鼠的免疫与杂交瘤的获取]1－1)准备用于小鼠免疫的细胞在RPMI－1640(RoswellParkMemorialInstitute－1640)培养基(10ml)中培养5×106个NCI－H322细胞(人非小细胞肺癌细胞株，ATCCCRL－5806；ATCC：AmericanTypeCultureCollection)5天，然后回收，用PBS(磷酸缓冲生理盐水)洗涤2次，再次悬浮到PBS(500μl)中。1－2)对小鼠的免疫对于BALB/c小鼠(6周龄)，第1次的免疫为将NCI－H322细胞(1×107个)向腹腔内免疫。第2～5次为以1周间隔将1×106个NCI－H322细胞向腹腔内免疫。第6次的最终免疫中，以1×106细胞/200μlPBS将NCI－H322细胞向尾静脉以及腹腔内分别免疫。最终免疫3天后摘出脾脏细胞。1－3)准备经免疫的小鼠的脾脏细胞摘出免疫完成的小鼠的脾脏，磨碎并将其悬浮于RPMI164010％FBS(胎牛血清)(+)培养基。使细胞悬浮液通过细胞滤网(cellstrainer)(100μm、BDFalcon公司)，然后在室温下以1500rpm离心5分钟，废弃上清液。添加Tris－NH4Cl溶液(20mMTris－HClpH7.5、0.83％NH4Cl；10mL)，在室温下处理5分钟。向细胞悬浮液中添加RPMI1640FBS(+)培养基(10ml)，使其通过细胞滤网，然后在室温下以1500rpm离心5分钟。废弃上清液，用RPMI1640FBS(－)培养基(10ml)将脾脏细胞再次悬浮。1－4)骨髓瘤细胞的准备回收P3U1细胞(小鼠骨髓瘤细胞株)，在室温下以1500rpm离心5分钟。向P3U1细胞中添加EDTA(0.02％)溶液(10ml)，于37℃处理5分钟。针对P3U1细胞悬浮液，在室温下以1500rpm离心5分钟。废弃上清液，用RPMI1640FBS(－)培养基(10ml)将其再次悬浮。1－5)细胞融合以5：1的比例将脾脏细胞与骨髓瘤细胞混合，进行离心分离(1200rpm、5分钟)。将得到的沉淀级分的细胞群充分散开，然后一边搅拌、一边经约1分钟缓缓添加聚乙二醇－4000(PEG－4000；1mL)。然后，向该细胞液中数次添加RPMI培养基(1mL)(每隔1分钟添加1次)，然后添加RPMI培养基，使总量为50mL。将该细胞悬浮液离心分离(900rpm、5分钟)，将得到的沉淀级分的细胞轻缓散开，将其轻缓悬浮于HAT培养基(添加有10％胎牛血清及HATMediaSupplement的MI1640培养基；100mL)中。以200μL/孔将该悬浮液分别注入到96孔培养用板各孔中，在37℃、5％CO2的培养箱中，培养至50％融合(confluent)。1－6)利用突变型腺病毒病毒FZ33进行的杂交瘤的筛选以5×103细胞/孔将NCI－H322细胞接种于96孔板，于37℃培养48小时。用150μl/孔的PBS洗涤细胞2次，向各孔中添加各杂交瘤培养上清液(50μl)，于4℃反应1小时。用150μl/孔的PBS洗涤2次，用RPMI1640(－)培养基稀释腺病毒Ax3CAZ3－FZ33(为了连接抗体、Z33纤突已被改变的β－半乳糖苷酶表达腺病毒(参照美国专利申请公开第2012/0237518号说明书))，以使得成为3×106vp/100μl(1×103vp/细胞)的浓度，以100μl/孔添加该稀释溶液。于4℃反应1小时后，用150μl/孔的PBS洗涤2次。以100μl/孔添加RPMI1640FBS(+)培养基，于37℃培养24小时。利用使用了Galacto－LightPlusReporterGeneAssaySystem(AppliedBiosystems公司)的β－Gal报告基因分析(reportergeneassay)对NCI－H322细胞进行处理，用200μl/孔的PBS洗涤经处理的NCI－H322，以50μl/孔添加裂解液(LysisSolution)，在室温下静置10分钟。用Galacton－PlusGalactoReactionBufferDiluent对该细胞裂解液(10μL)进行100倍稀释，添加WhitemicrowellSH96wellplate(Nunc公司)，在室温下反应1小时。以150μl/孔添加AcceleratorII，使用多标计数仪(multilabelcounter)Wallac1420ARVOsx(PerkinElmer公司)，测定化学发光5秒，将每1秒的平均值记为RLU(发光量)，表示NCI－H322细胞所感染的病毒感染量。如上所述地进行的杂交瘤群的筛选中，从整个群(最小值1383RLU、平均值10914RLU、最大值78746RLU)中选出测定值(RLU)为5000RLU以上的克隆。首先，作为初步筛选(primaryscreening)，从经一次细胞融合而得到的960孔的杂交瘤孔中，选出81孔的阳性孔。此外，作为确认筛选，利用与初步筛选同样的方法，用副本(duplicate)进行分析，将两者的测定值为5000RLU以上的孔作为阳性，从经初步筛选而得到的81孔中，选出52孔的阳性孔。对于选出的克隆，进行2～4次亚克隆，建立单克隆的杂交瘤细胞株44株。[实施例2：来自杂交瘤的抗体的纯化]向腹腔内给予姥鲛烷(Pristane；2，6，10，14－四甲基十五烷；0.5ml)并预先饲育了2周的8～10周龄的小鼠或裸鼠，在腹腔内注射实施例1中得到的单克隆抗体产生杂交瘤。进而，经10～21天而使杂交瘤形成腹水癌，然后采集腹水。对得到的腹水进行离心分离，除去固态成分，然后用40～50％硫酸铵进行盐析，利用辛酸沉淀法、DEAE－琼脂糖柱(sepharosecolumn)、G蛋白柱进行纯化，收集IgG或IgM级分，作为纯化单克隆抗体。[实施例3：杂交瘤产生的抗体所结合的抗原的鉴定]对作为实施例2中制备的杂交瘤所产生的抗体之一的TINA1，进行抗原的鉴定。3－1)使用了经生物素标记的细胞表面蛋白的TINA1抗体的免疫沉淀回收5×106个NCI－H322细胞，用PBS洗涤3次。以0.1mg/ml的浓度将EZ－LinkSulfo－NHS－Biotin(PIERCE公司)悬浮于PBS。将NCI－H322细胞置于Biotin/PBS溶液中，在室温下进行30分钟旋转(rotate)，然后用100mM甘氨酸/PBS溶液(25ml)洗涤2次，然后，用PBS(25ml)洗涤3次。将洗涤后的细胞在裂解缓冲液(150mMNaCl、50mMTris－HClpH7.6、1％NP－40+蛋白酶抑制剂(Proteaseinhibitor)、完全无EDTA(CompleteEDTAfree)(Roche公司)1粒/50ml；2ml)中再次悬浮，于4℃进行30分钟处理。向细胞裂解液中添加将蛋白G琼脂糖凝胶(ProteinGSepharose)(蛋白G琼脂糖凝胶4高流速(FastFlow)(GEHealthcare公司))的缓冲液置换为裂解缓冲液而得到的蛋白G琼脂糖凝胶/裂解缓冲液(50％浆料；30μl)，于4℃旋转1小时后，于4℃离心5分钟，回收上清液。向该上清液中添加TINA1抗体(3μg)，于4℃进行1小时旋转，然后添加蛋白G琼脂糖凝胶/裂解缓冲液(50％浆料；60μl)，于4℃进行2小时旋转。用裂解缓冲液(1ml)将蛋白G琼脂糖凝胶洗涤6次，然后将其再次悬浮于1×SDS样品缓冲液/5％2－ME(2－巯基乙醇)buffer(62.5mMTris－HCl(于25℃，pH6.8)、2％(w/v)SDS、10％甘油(glycerol)及0.01％(w/v)酚红(phenolred))。于100℃处理悬浮液5分钟，然后回收溶液，作为用于SDS－PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)的样品。3－2)SDS－PAGE及蛋白免疫印迹(westernblotting)针对3－1)中制备的SDS－PAGE样品，使用ReadyGelsJ5－20％(BioRad公司)，以20mA进行电泳，然后，以0.1mA/cm2将印迹从凝胶转移到膜上。用PBS－T(PBS(－)－0.05％Tween20)洗涤膜5分钟，然后进行1小时封闭。用PBS－T洗涤膜5分钟3次，然后，使其与辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(Streptavidin－horseradishperoxidaseconjugate)(Amersham公司；用PBS－T稀释至2000倍而使用)反应1小时。用PBS－T洗涤膜10分钟4次，然后，使用ECLwesternblottingdetectionreagents(Amersham公司)及HyperfilmECL(Amersham公司)，检测目标条带。利用实施例3－1)的步骤，针对经生物素标记的NCI－H322细胞，利用已经利用质谱分析确定了抗原为TROP2的KCI7A3抗体及TINA1抗体，进行免疫沉淀，针对得到的免疫沉淀物，分别在未添加DTT或添加DTT的情况下，利用SDS－PAGE及蛋白免疫印迹进行分析。无论是在使用KCI7A3抗体的情况下，还是在使用TINA1抗体的情况下，在未添加DTT时，检测到分子量46kDa的条带，在添加了DTT的样品中，检测到分子量37kDa的条带。3－3)FACS分析由带型可预测TINA1抗体的抗原为TROP2，因此，不进行质谱，利用cDNA的基因导入而进行强制表达分析。FACS分析的结果，在人TROP2表达CHOK1细胞中，TINA1抗体显示强阳性反应，因此，表明TINA1抗体的抗原为TROP2。另外，使用肺癌细胞株PC14、肺癌细胞株NCI－H322、肺癌细胞株NCI－H2122、肺癌细胞株LCAM1、肺癌细胞株LC2/ad、胰腺癌细胞株MIAPaCa2、胰腺癌细胞株PK－1、前列腺癌细胞株PC3、大肠癌细胞株HCT116、黑色素瘤细胞株A375、卵巢癌细胞株SKOV3、造血系肿瘤细胞株RPMI8226、造血系肿瘤细胞株K562、PBMC(人末梢血单核细胞)及人血小板进行了同样的FACS分析。考察的肺癌细胞株均为TROP2阳性，肺癌以外的细胞株中，PC3、PK1、SKOV3为阳性。另一方面，正常血液细胞均为阴性。[实施例4：抗体内化活性的测定]4－1)抗体内化活性评价系为了抗体的内化及免疫毒素活性的测定，制作了作为重组复合蛋白的DT3C。该DT3C是兼具白喉毒素(DT)的催化区域和3个G蛋白的抗体结合区域的蛋白。DT3C与抗体的Fc部分特异性地结合，稳定地进入到细胞内，通过抑制蛋白合成而诱导细胞死亡。通过利用该系统，可同时观察因抗体的内化和免疫毒素而导致的杀细胞效果(Yamaguchi,M.,Hamada,H.,等,BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications454(2014)600－603)。4－2)依赖于DT3C的内化以及免疫毒素活性的评价向96孔板(96wllPlate)中添加4μg/mL的DT3C(25μL)，进而添加利用实施例1或以此为基准的方法获取的11种杂交瘤的培养上清液(25μL)，在室温下孵育30分钟。需要说明的是，预先确认了产生TINA1抗体的杂交瘤以外的杂交瘤所产生的抗体所识别的抗原为CD9、CD46、CD55、CD59、CD71、CD73、CD147、CD276、EpCAM、或EGFR。接种2×104个/mL(20％LowIgGFBS加RPMI1640培养基)的NCI－H322细胞(50μL)，在室温下孵育30分钟，然后在37℃CO2培养箱中培养3天。培养后，去除上清液，添加10％WST－10％FBS－RPMI1640(100μL)，在37℃CO2培养箱内孵育1小时，用酶标仪(microplatereader)(OD450～OD640，infinite200，TecanJapanCo.,Ltd.)测定活细胞数。在评价的杂交瘤细胞的培养上清液中，用针对CD59、CD71、EGFR、EpCAM、及TROP2的抗体确认了强内化以及免疫毒素活性(图10)。4－3)利用针对CD59、CD71、EGFR、EpCAM、及TROP2的抗体的内化以及免疫毒素活性的不同向96孔板(96wellplat)中添加DT3C(0、0.004、0.04、0.4、4、40μg/mL)稀释溶液(25μL)，添加各抗体(40μg/mL；25μL)，在室温下孵育30分钟。进而，接种2×104个/mL(20％LowIgGFBS加RPMI1640培养基)的NCI－H322细胞(50μL)，在室温下孵育30分钟，然后，在37℃CO2培养箱中培养3天。培养后，去除上清液，添加10％WST－1加10％FBS－RPMI1640(100μL)，在37℃CO2培养箱内孵育1小时，用酶标仪(platereader)(OD450～OD640)测定活细胞数。在评价的抗体中，作为针对TROP2的抗体的TINA1的内化以及免疫毒素活性最强(图11)。4－4)抗TROP2抗体的各克隆中的内化以及免疫毒素活性的不同对于利用实施例1或以此为基准的方法而获取的TINA1(免疫原：肺癌株NCI－H322)、KCL7A3、及KCL2D6(免疫原：胰腺癌株KCL－MOH1)、Pr1E11及Pr8H10(免疫原：前列腺癌株Pc－1)、NY16及NY17(免疫原：胰腺癌株PK－1)以及市售的77220(R&DSystem)的各抗TROP2抗体的内化以及免疫毒素活性，与实施例4－3)同样地进行了评价。结果，8种抗TROP2抗体中，TINA1抗体具有最强的活性(图12)。[实施例5：编码TINA1抗体基因的可变区的cDNA的核苷酸序列的确定和嵌合TINA1(以下cTINA1)抗体的制作]5－1)编码TINA1抗体基因的可变区的cDNA的核苷酸序列的确定5－1－1)由产生TINA1抗体的杂交瘤制备mRNA为了将包含TINA1抗体的可变区的cDNA扩增，由产生TINA1抗体的杂交瘤，利用mRNAIsolationkit(Rocheappliedscience公司)制备mRNA。5－1－2)cDNA(5’－RACE－ReadycDNA)的合成cDNA(5’－RACE－ReadycDNA)的合成使用实施例5－1－1)中制备的mRNA(100ng)和SMARTerRACEcDNA扩增试剂盒(AmplificationKit)(CLONTECH公司)实施。5－1－3)依赖于5’－RACEPCR的包含TINA1抗体的重链可变区的cDNA的扩增和序列的确定作为用于利用PCR将重链基因的可变区的cDNA扩增的引物，使用了UPM(通用引物(UniversalPrimer)AMix：SMARTerRACEcDNA扩增试剂盒(AmplificationKit)附带)、及具有5’－AGAGTTCCAGGTCAAGGTCACTGGCTCAGG－3’(序列号33：引物mG2aVR2)的序列的寡核苷酸。UPM使用SMARTerRACEcDNA扩增试剂盒(AmplificationKit)(CLONTECH公司)所附带的UPM，mG2aVR2由数据库的小鼠重链(IgG2a)的恒定区的序列设计。利用该引物的组合、和以实施例5－1－2)中合成的cDNA(5’－RACE－ReadycDNA)为模板的5’－RACEPCR，将包含TINA1抗体的重链的可变区的cDNA扩增。对于PCR而言，使用KOD－plus(TOYOBO公司)作为聚合酶(Polymerase)，按照SMARTerRACEcDNA扩增试剂盒(AmplificationKit)(CLONTECH公司)的手册，以降落PCR程序实施(touchdownpcrprogram)。使用MinElutePCR纯化试剂盒(PurificationKit)(QIAGEN公司)，将用5’－RACEPCR扩增的包含重链的可变区的cDNA纯化，然后使用ZeroBluntTOPOPCR克隆试剂盒(CloningKit)(Invitrogen公司)进行克隆，实施了克隆的包含重链的可变区的cDNA的核苷酸序列的序列分析。作为测序引物(sequencingprimer)，使用了由数据库的小鼠重链的恒定区的序列设计的上述引物mG2aVR2、及NUP(Nested通用引物(UniversalPrimer)A：SMARTerRACEcDNA扩增试剂盒(AmplificationKit)附带)。序列分析使用基因序列分析装置(“ABIPRISM3700DNAAnalyzer”或“AppliedBiosystems3730xlAnalyzer”、AppliedBiosystems公司)实施，测序反应(sequencingreaction)使用了GeneAmp9700(AppliedBiosystems公司)。将已确定的编码TINA1抗体的重链的可变区的cDNA的核苷酸序列示于序列表的序列号1，将氨基酸序列示于序列号2。5－1－4)依赖于5’－RACEPCR的包含TINA1抗体的轻链可变区的cDNA的扩增和序列的确定作为用于利用PCR将TINA1抗体的轻链基因的可变区的cDNA扩增的引物，使用了UPM(通用引物(UniversalPrimer)AMix：SMARTerRACEcDNA扩增试剂盒(AmplificationKit)附带)及具有5’－AGTCCAACTGTTCAGGACGCCATTTTGTCG－3’(序列号34：引物mKVR2)的序列的寡核苷酸。UPM使用SMARTerRACEcDNA扩增试剂盒(AmplificationKit)(CLONTECH公司)所附带的UPM，mKVR2由数据库的小鼠轻链的恒定区的序列设计。利用该引物的组合、和以实施例5－1－2)中合成的cDNA(5’－RACE－ReadycDNA)为模板的5’－RACEPCR，将包含TINA1抗体的轻链的可变区的cDNA扩增。对于PCR而言，使用KOD－plus－(TOYOBO公司)作为聚合酶(Polymerase)，按照SMARTerRACEcDNA扩增试剂盒(AmplificationKit)(CLONTECH公司)的手册，以降落PCR程序实施。使用MinElutePCR纯化试剂盒(PurificationKit)(QIAGEN公司)，将用5’－RACEPCR扩增的包含轻链的可变区的cDNA纯化，然后使用ZeroBluntTOPOPCR克隆试剂盒(CloningKit)(Invitrogen公司)进行克隆，实施了克隆的包含轻链的可变区的cDNA的核苷酸序列的序列分析。作为测序引物，使用了由数据库的小鼠轻链的恒定区的序列设计的上述引物mKVR2及NUP。序列分析及测序反应使用了上述的装置。将已确定的编码TINA1抗体的轻链的可变区的cDNA的核苷酸序列示于序列表的序列号3，将氨基酸序列示于序列号4。5－2)cTINA1抗体的制作5－2－1)嵌合及人源化抗体轻链表达载体pCMA－LK的构建使用In－FusionAdvantagePCR克隆试剂盒(CLONTECH公司)，将用限制性酶XbaI及PmeI消化质粒pcDNA3.3－TOPO/LacZ(Invitrogen公司)而得到的约5.4kb的片段、和包含序列号5所示的编码人κ链分泌信号及人κ链恒定区的DNA序列的DNA片段连接，制作pcDNA3.3/LK。以pcDNA3.3/LK为模板，使用下述引物组进行PCR，将得到的约3.8kb的片段磷酸化后，进行自连接(self－ligation)，由此，构建在CMV启动子的下游具有信号序列、克隆位点、及人κ链恒定区的嵌合及人源化抗体轻链表达载体pCMA－LK。引物组5’－tataccgtcgacctctagctagagcttggc－3’(序列号35：引物3.3－F1)5’－gctatggcagggcctgccgccccgacgttg－3’(序列号36：引物3.3－R1)5－2－2)嵌合及人源化抗体IgG1型重链表达载体pCMA－G1的构建使用In－FusionAdvantagePCR克隆试剂盒(CLONTECH公司)，将包含用XbaI及PmeI消化pCMA－LK而得到的去除了κ链分泌信号及人κ链恒定区的DNA片段、和序列号6所示的编码人重链信号序列及人IgG1恒定区的氨基酸的DNA序列的DNA片段连接，构建在CMV启动子的下游具有信号序列、克隆位点、人IgG1重链恒定区的嵌合及人源化抗体IgG1型重链表达载体pCMA－G1。5－2－3)cTINA1抗体重链表达载体的构建以实施例5－1－3)中得到的包含TINA1抗体的重链的可变区的cDNA为模板，用KOD－Plus－(TOYOBO公司)和下述的引物组，将包含编码重链的可变区的cDNA的DNA片段扩增，使用In－FusionHDPCR克隆试剂盒(CLONTECH公司)，在用限制性酶BlpI切断嵌合及人源化IgG1型重链表达载体pCMA－G1的位置插入，由此，构建cTINA1抗体重链表达载体。将得到的表达载体命名为“pCMA－G1/cTINA1”。将cTINA1抗体重链的核苷酸序列示于序列号7，将氨基酸序列示于序列号8。序列号7的核苷酸序列及序列号8的氨基酸序列也记载于图1。cTINA1抗体重链用引物组5’－CCAGATGGGTGCTGAGCCAGATCCAGTTGGTGCAGTCTGGACCTGAG－3’(序列号37：引物TINA1H－F)5’－CTTGGTGGAGGCTGAGCTGACGGTGACCGCGGTCCCTGCGCCCCAGAC－3’(序列号38：引物TINA1H－R)5－2－4)cTINA1抗体轻链表达载体的构建以实施例5－1－4)中得到的包含TINA1抗体的轻链的可变区的cDNA为模板，用KOD－Plus－(TOYOBO公司)和下述的引物组，将包含编码轻链的可变区的cDNA的DAN片段扩增，使用In－FusionHDPCR克隆试剂盒(CLONTECH公司)，在用限制性酶BsiWI切断嵌合及人源化抗体轻链表达通用载体pCMA－LK的位置插入，由此，构建cTINA1抗体的轻链表达载体。将得到的表达载体命名为“pCMA－LK/cTINA1”。将cTINA1抗体的轻链的核苷酸序列示于序列表的序列号9，将氨基酸序列示于序列号10。序列号9的核苷酸序列及序列号10的氨基酸序列也记载于图2。cTINA1抗体轻链用引物组5’－ATCTCCGGCGCGTACGGCGACATTGTGATGACCCAGTCTCACAAATTC－3’(序列号39：引物TINA1L－F)5’－GGAGGGGGCGGCCACAGCCCGTTTCAGCTCCAGCTTGGTCCCAGC－3’(序列号40：引物TINA1L－R)5－2－5)cTINA1抗体的小规模生产对于FreeStyle293F细胞(Invitrogen公司)，按照手册进行继代、培养。用FreeStyle293表达培养基(expressionmedium)(Invitrogen公司)，将对数增殖期的1×107个FreeStyle293F细胞(Invitrogen公司)稀释为9.6mL，然后接种于30mL方形贮存瓶(SquareStorageBottle)(Nalgene公司)，在37℃、8％CO2培养箱内，以90rpm振荡培养1小时。将聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine)(Polyscience#24765；30μg)溶解于Opti－ProSFM(Invitrogen公司；200μL)，接下来，将使用PureLinkHiPurePlasmid试剂盒(Invitrogen公司)制备的轻链表达载体(6μg)及重链表达载体(4μg)添加至Opti－ProSFM(Invitrogen公司；200μL)。向聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine)/Opti－ProSFM混合液(200μL)中，添加表达载体/Opti－ProSFM混合液(200μL)，平稳搅拌，进一步放置5分钟后，添加到FreeStyle293F细胞中。在37℃、8％CO2培养箱中，以90rpm振荡培养7天，用Minisart－Plusfilter(Sartorius公司)过滤得到的培养上清液，制成评价用的样品。将通过pCMA－G1/cTINA1与pCMA－LK/cTINA1的组合而获取的人嵌合TINA1抗体命名为“cTINA1抗体”。[实施例6：小鼠抗TROP2单克隆抗体的人源化抗体的设计]6－1)TINA1的人源化版本的设计6－1－1)TINA1的可变区的分子模拟(molecularmodeling)对于TINA1的可变区的分子模拟，作为同源性模拟，利用已知的方法(MethodsinEnzymology，203，121－153(1991))实施。对已登录到蛋白质数据库(ProteinDataBank)(Nuc.AcidRes.35，D301－D303(2007))中的人免疫球蛋白的可变区的1次序列(可获得由X射线晶体结构衍生的三维结构)与之前已确定的TINA1的可变区进行比较。结果，作为在相对于TINA1的重链的可变区同样在框架中存在缺损的抗体中具有最高的序列同源性的，选择1ZEA。另外，作为相对于TINA1的轻链的可变区具有最高的序列同源性的，选择3IU4。将对应于TINA1的重链及轻链的1ZEA及3IU4的坐标组合，获得“框架模型”，由此制作框架区域的三维结构。接下来，将关于各CDR的代表的构象(conformation)整合到框架模型(frameworkmodel)中。最后，从能量方面考虑，为了得到的TINA1的可变区的可能的分子模型，进行了为了消除不利的原子间接触的能量计算。使用市售的蛋白立体结构分析程序DiscoveryStudio(Accelrys，Inc.)进行上述步骤。6－1－2)针对人源化TINA1的氨基酸序列的设计利用作为CDR移植(Proc.Natl.Acad.Sci.USA86，10029－10033(1989))而已知的方法进行人源化TINA1抗体的构建。受主抗体基于框架区域内的氨基酸同源性而选择。对TINA1的框架区域的序列与抗体的氨基酸序列的Kabat数据库(Nuc.AcidRes.29，205－206(2001))的全部人框架进行比较，结果，由于在框架区域的74％的序列同源性，选择HuPR1A3抗体作为受主。将关于HuPR1A3的框架区域的氨基酸残基与关于TINA1的氨基酸残基进行排列比对，鉴别使用不同的氨基酸的位置。对于这些残基的位置，使用上述构建的TINA1的三维模型进行分析，而后，利用Queen等，(Proc.Natl.Acad.Sci.USA86，10029－10033(1989))提供的基准，选择应向受主上移植的施主残基。将选择出的若干施主残基移入到受主抗体中，由此，按照以下的实施例中记载的那样构建人源化TINA1序列。6－2)TINA1重链的人源化6－2－1)hTINA1－H1型重链：将伴随着将序列表的序列号8所示的TINA1重链的氨基酸编号21(异亮氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号28(脯氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号30(亮氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号35(谷氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号36(苏氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号38(精氨酸)取代为赖氨酸、将氨基酸编号39(异亮氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号57(谷氨酰胺)取代为精氨酸、将氨基酸编号58(赖氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号59(甲硫氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号62(赖氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号65(赖氨酸)取代为谷氨酸、将氨基酸编号67(异亮氨酸)取代为甲硫氨酸、将氨基酸编号87(苯丙氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号88(丙氨酸)取代为苏氨酸、将氨基酸编号89(苯丙氨酸)取代为异亮氨酸、将氨基酸编号91(亮氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号92(谷氨酸)取代为天冬氨酸、将氨基酸编号95(丙氨酸)取代为苏氨酸、将氨基酸编号102(异亮氨酸)取代为亮氨酸、将氨基酸编号104(天冬酰胺)取代为丝氨酸、将氨基酸编号107(天冬酰胺)取代为丝氨酸、将氨基酸编号111(苏氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号112(苏氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号114(苯丙氨酸)取代为酪氨酸、将氨基酸编号132(丙氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号135(丙氨酸)取代为亮氨酸而设计的人源化TINA1重链命名为“hTINA1－H1型重链”。hTINA1－H1型重链的氨基酸序列被记载于序列表的序列号12。包含序列号12的氨基酸序列的第1～19位的氨基残基的序列、包含第20～140位的氨基酸残基的序列、包含第141～470位的氨基酸残基的序列分别相当于信号序列、重链可变区、重链恒定区。编码序列号12的氨基酸序列的核苷酸序列被记载于序列表的序列号11。包含序列号11的核苷酸序列的第1～57位的核苷酸的序列、包含第58～420位的核苷酸的序列、包含第421～1410位的核苷酸的序列分别编码信号序列、重链可变区序列、重链恒定区序列。序列号11的核苷酸序列及序列号12的氨基酸序列也记载于图3。6－2－2)hTINA1－H2型重链：将伴随着将序列表的序列号8所示的TINA1重链的氨基酸编号21(异亮氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号28(脯氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号30(亮氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号35(谷氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号36(苏氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号38(精氨酸)取代为赖氨酸、将氨基酸编号39(异亮氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号57(谷氨酰胺)取代为精氨酸、将氨基酸编号58(赖氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号59(甲硫氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号62(赖氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号65(赖氨酸)取代为谷氨酸、将氨基酸编号67(异亮氨酸)取代为甲硫氨酸、将氨基酸编号87(苯丙氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号88(丙氨酸)取代为苏氨酸、将氨基酸编号89(苯丙氨酸)取代为异亮氨酸、将氨基酸编号92(谷氨酸)取代为天冬氨酸、将氨基酸编号95(丙氨酸)取代为苏氨酸、将氨基酸编号102(异亮氨酸)取代为亮氨酸、将氨基酸编号104(天冬酰胺)取代为丝氨酸、将氨基酸编号107(天冬酰胺)取代为丝氨酸、将氨基酸编号111(苏氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号112(苏氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号114(苯丙氨酸)取代为酪氨酸、将氨基酸编号132(丙氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号135(丙氨酸)取代为亮氨酸而设计的人源化TINA1重链命名为“hTINA1－H2型重链”。hTINA1－H2型重链的氨基酸序列被记载于序列表的序列号14。包含序列号14的氨基酸序列的第1～19位的氨基残基的序列、包含第20～140位的氨基酸残基的序列、包含第141～470位的氨基酸残基的序列分别相当于信号序列、重链可变区、重链恒定区。编码序列号14的氨基酸序列的核苷酸序列被记载于序列表的序列号13。包含序列号13的核苷酸序列的第1～57位的核苷酸的序列、包含第58～420位的核苷酸的序列、包含第421～1410位的核苷酸的序列分别编码信号序列、重链可变区序列、重链恒定区序列。序列号13的核苷酸序列及序列号14的氨基酸序列也记载于图4。6－2－3)hTINA1－H3型重链：将伴随着将序列表的序列号8所示的TINA1重链的氨基酸编号28(脯氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号30(亮氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号36(苏氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号38(精氨酸)取代为赖氨酸、将氨基酸编号39(异亮氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号58(赖氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号65(赖氨酸)取代为谷氨酸、将氨基酸编号67(异亮氨酸)取代为甲硫氨酸、将氨基酸编号87(苯丙氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号88(丙氨酸)取代为苏氨酸、将氨基酸编号92(谷氨酸)取代为天冬氨酸、将氨基酸编号95(丙氨酸)取代为苏氨酸、将氨基酸编号102(异亮氨酸)取代为亮氨酸、将氨基酸编号104(天冬酰胺)取代为丝氨酸、将氨基酸编号107(天冬酰胺)取代为丝氨酸、将氨基酸编号111(苏氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号112(苏氨酸)取代为缬氨酸、将氨基酸编号114(苯丙氨酸)取代为酪氨酸、将氨基酸编号132(丙氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号135(丙氨酸)取代为亮氨酸而设计的人源化TINA1重链命名为“hTINA1－H3型重链”。hTINA1－H3型重链的氨基酸序列被记载于序列表的序列号16。包含序列号16的氨基酸序列的第1～19位的氨基残基的序列、包含第20～140位的氨基酸残基的序列、包含第141～470位的氨基酸残基的序列分别相当于信号序列、重链可变区、重链恒定区。编码序列号16的氨基酸序列的核苷酸序列被记载于序列表的序列号15。包含序列号15的核苷酸序列的第1～57位的核苷酸的序列、包含第58～420位的核苷酸的序列、包含第421～1410位的核苷酸的序列分别编码信号序列、重链可变区序列、重链恒定区序列。序列号15的核苷酸序列及序列号16的氨基酸序列也记载于图5。6－3)TINA1轻链的人源化6－3－1)hTINA1－L1型轻链：将伴随着将序列表的序列号10所示的TINA1轻链的氨基酸编号23(缬氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号28(组氨酸)取代为脯氨酸、将氨基酸编号29(赖氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号30(苯丙氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号31(甲硫氨酸)取代为亮氨酸、将氨基酸编号33(苏氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号40(丝氨酸)取代为苏氨酸、将氨基酸编号62(谷氨酰胺)取代为赖氨酸、将氨基酸编号63(丝氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号80(天冬氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号83(苏氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号90(丙氨酸)取代为天冬氨酸、将氨基酸编号93(苯丙氨酸)取代为亮氨酸、将氨基酸编号98(缬氨酸)取代为亮氨酸、将氨基酸编号100(丙氨酸)取代为脯氨酸、将氨基酸编号103(亮氨酸)取代为苯丙氨酸、将氨基酸编号120(丙氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号126(亮氨酸)取代为异亮氨酸、将氨基酸编号129(丙氨酸)取代为苏氨酸而设计的人源化TINA1轻链命名为“hTINA1－L1型轻链”。hTINA1－L1型轻链的氨基酸序列被记载于序列表的序列号18。包含序列号18的氨基酸序列的第1～20位的氨基残基的序列、包含第21～129位的氨基酸残基的序列、包含第130～234位的氨基酸残基的序列分别相当于信号序列、轻链可变区、轻链恒定区。编码序列号18的氨基酸序列的核苷酸序列被记载于序列表的序列号17。包含序列号17的核苷酸序列的第1～60位的核苷酸的序列、包含第61～387位的核苷酸的序列、包含第388～702位的核苷酸的序列分别编码信号序列、轻链可变区序列、轻链恒定区序列。序列号17的核苷酸序列及序列号18的氨基酸序列也记载于图6。6－3－2)hTINA1－L2型轻链：将伴随着将序列表的序列号10所示的TINA1轻链的氨基酸编号28(组氨酸)取代为脯氨酸、将氨基酸编号29(赖氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号30(苯丙氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号31(甲硫氨酸)取代为亮氨酸、将氨基酸编号33(苏氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号40(丝氨酸)取代为苏氨酸、将氨基酸编号62(谷氨酰胺)取代为赖氨酸、将氨基酸编号63(丝氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号80(天冬氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号83(苏氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号90(丙氨酸)取代为天冬氨酸、将氨基酸编号93(苯丙氨酸)取代为亮氨酸、将氨基酸编号98(缬氨酸)取代为亮氨酸、将氨基酸编号100(丙氨酸)取代为脯氨酸、将氨基酸编号103(亮氨酸)取代为苯丙氨酸、将氨基酸编号120(丙氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号126(亮氨酸)取代为异亮氨酸、将氨基酸编号129(丙氨酸)取代为苏氨酸而设计的人源化TINA1轻链命名为“hTINA1－L2型轻链”。hTINA1－L2型轻链的氨基酸序列被记载于序列表的序列号20。包含序列号20的氨基酸序列的第1～20位的氨基残基的序列、包含第21～129位的氨基酸残基的序列、包含第130～234位的氨基酸残基的序列分别相当于信号序列、轻链可变区、轻链恒定区。编码序列号20的氨基酸序列的核苷酸序列被记载于序列表的序列号19。包含序列号19的核苷酸序列的第1～60位的核苷酸的序列、包含第61～387位的核苷酸的序列、包含第388～702位的核苷酸的序列分别编码信号序列、轻链可变区序列、轻链恒定区序列。序列号19的核苷酸序列及序列号20的氨基酸序列也记载于图7。6－3－3)hTINA1－L3型轻链：将伴随着将序列表的序列号10所示的TINA1轻链的氨基酸编号28(组氨酸)取代为脯氨酸、将氨基酸编号29(赖氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号30(苯丙氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号31(甲硫氨酸)取代为亮氨酸、将氨基酸编号33(苏氨酸)取代为丙氨酸、将氨基酸编号40(丝氨酸)取代为苏氨酸、将氨基酸编号62(谷氨酰胺)取代为赖氨酸、将氨基酸编号63(丝氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号80(天冬氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号83(苏氨酸)取代为丝氨酸、将氨基酸编号90(丙氨酸)取代为天冬氨酸、将氨基酸编号93(苯丙氨酸)取代为亮氨酸、将氨基酸编号98(缬氨酸)取代为亮氨酸、将氨基酸编号100(丙氨酸)取代为脯氨酸、将氨基酸编号103(亮氨酸)取代为苯丙氨酸、将氨基酸编号120(丙氨酸)取代为谷氨酰胺、将氨基酸编号126(亮氨酸)取代为异亮氨酸、将氨基酸编号129(丙氨酸)取代为苏氨酸而设计的人源化TINA1轻链命名为“hTINA1－L3型轻链”。hTINA1－L3型轻链的氨基酸序列被记载于序列表的序列号22。包含序列号22的氨基酸序列的第1～20位的氨基残基的序列、包含第21～129位的氨基酸残基的序列、包含第130～234位的氨基酸残基的序列分别相当于信号序列、轻链可变区、轻链恒定区。编码序列号22的氨基酸序列的核苷酸序列被记载于序列表的序列号21。包含序列号21的核苷酸序列的第1～60位的核苷酸的序列、包含第61～387位的核苷酸的序列、包含第388～702位的核苷酸的序列分别编码信号序列、轻链可变区序列、轻链恒定区序列。序列号21的核苷酸序列及序列号22的氨基酸序列也记载于图8。[实施例7：hTINA1抗体表达载体的构建和抗体的生产]7－1)hTINA1的重链表达载体的构建7－1－1)hTINA1－H1表达载体的构建合成包含序列表的序列号11所示的hTINA1－H1的核苷酸序列的核苷酸编号36～437所示的编码hTINA1－H1的可变区的DNA序列的DNA片段(GENEART公司人工基因合成服务)。以合成的DNA片段为模板，用KOD－Plus－(TOYOBO公司)和下述的引物组扩增包含编码hTINA1－H1的可变区的DNA序列的DNA片段，使用In－FusionHDPCR克隆试剂盒(CLONTECH公司)，在用限制性酶BlpI切断嵌合及人源化抗体IgG1型重链表达载体pCMA－G1的位置插入，由此，构建hTINA1－H1表达载体。将得到的表达载体命名为“pCMA－G1/hTINA1－H1”。引物组5’－agctcccagatgggtgctgagc－3’(序列号41：引物EG－Inf－F)5’－gggcccttggtggaggctgagc－3’(序列号42：引物EG1－Inf－R)7－1－2)hTINA1－H2表达载体的构建合成包含序列表的序列号13所示的hTINA1－H2的核苷酸序列的核苷酸编号36～437所示的编码hTINA1－H2的可变区的DNA序列的DNA片段(GENEART公司人工基因合成服务)，利用与实施例7－1－1)同样的方法，构建hTINA1－H2表达载体。将得到的表达载体命名为“pCMA－G1/hTINA1－H2”。7－1－3)hTINA1－H3表达载体的构建合成包含序列表的序列号15所示的hTINA1－H3的核苷酸序列的核苷酸编号36～437所示的编码hTINA1－H3的可变区的DNA序列的DNA片段(GENEART公司人工基因合成服务)，利用与实施例7－1－1)同样的方法，构建hTINA1－H3表达载体。将得到的表达载体命名为“pCMA－G1/hTINA1－H3”。7－2)hTINA1的轻链表达载体的构建7－2－1)hTINA1－L1表达载体的构建合成包含序列表的序列号17所示的hTINA1－L1的核苷酸序列的核苷酸编号38～402所示的编码hTINA1－L1的可变区的DNA序列的DNA片段(GENEART公司人工基因合成服务)。以合成的DNA片段为模板，用KOD－Plus－(TOYOBO公司)和下述的引物组扩增包含编码hTINA1－L1的可变区的DNA序列的DNA片段，使用In－FusionHDPCR克隆试剂盒(CLONTECH公司)，在用限制性酶BsiWI切断嵌合及人源化抗体轻链表达载体pCMA－LK的位置插入，由此，构建hTINA1－L1表达载体。将得到的表达载体命名为“pCMA－LK/hTINA1－L1”。引物组5’－ctgtggatctccggcgcgtacggc－3’(序列号43：引物CM－LKF)5’－ggagggggcggccaccgtacg－3’(序列号44：引物KCL－Inf－R)7－2－2)hTINA1－L2表达载体的构建合成包含序列表的序列号19所示的hTINA1－L2的核苷酸序列的核苷酸编号38～402所示的编码hTINA1－L2的可变区的DNA序列的DNA片段(GENEART公司人工基因合成服务)，利用与实施例7－2－1)同样的方法，构建hTINA1－L2表达载体。将得到的表达载体命名为“pCMA－LK/hTINA1－L2”。7－2－3)hTINA1－L3表达载体的构建合成包含序列表的序列号21所示的hTINA1－L3的核苷酸序列的核苷酸编号38～402所示的编码hTINA1－L3的可变区的DNA序列的DNA片段(GENEART公司人工基因合成服务)，利用与实施例7－2－1)同样的方法，构建hTINA1－L3表达载体。将得到的表达载体命名为“pCMA－LK/hTINA1－L3”。7－3)hTINA1抗体的生产和纯化7－3－1)hTINA1抗体的小规模生产利用与实施例5－2－5)同样的方法进行生产。将通过pCMA－G1/hTINA1－H1与pCMA－LK/hTINA1－L1的组合而获取的hTINA1抗体命名为“hTINA1－H1L1”，将通过pCMA－G1/hTINA1－H2与pCMA－LK/hTINA1－L1的组合而获取的hTINA1抗体命名为“hTINA1－H2L1”，将通过pCMA－G1/hTINA1－H2与pCMA－LK/hTINA1－L2的组合而获取的hTINA1抗体命名为“hTINA1－H2L2”，以及，将通过pCMA－G1/hTINA1－H3与pCMA－LK/hTINA1－L3的组合而获取的hTINA1抗体命名为“hTINA1－H3L3”。7－3－2)hTINA1抗体的生产利用以下的方法，生产hTINA1－H1L1、hTINA1－H2L1、hTINA1－H2L2、及hTINA1－H3L3。对于FreeStyle293F细胞(Invitrogen公司)，按照手册进行继代、培养。将对数增殖期的1.2×109个FreeStyle293F细胞(Invitrogen公司)接种于3LFernbachErlenmeyerFlask(CORNING公司)，用FreeStyle293表达培养基(expressionmedium)(Invitrogen公司)稀释，制备成1.0×106细胞/ml，然后，在37℃、8％CO2培养箱内，以90rpm振荡培养1小时。将聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine)(Polyscience#24765；3.6mg)溶解于Opti－ProSFM(Invitrogen公司；20ml)，接下来，将使用PureLinkHiPurePlasmid试剂盒(Invitrogen公司)制备的轻链表达载体(0.8mg)及重链表达载体(0.4mg)添加至Opti－ProSFM(Invitrogen公司；20ml)。向聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine)/Opti－ProSFM混合液(20ml)中，添加表达载体/Opti－ProSFM混合液(20ml)，平稳搅拌，进一步放置5分钟后，添加到FreeStyle293F细胞中。在37℃、8％CO2培养箱中，以90rpm振荡培养7天，用DisposableCapsuleFilter(ADVANTEC#CCS－045－E1H)过滤得到的培养上清液。7－3－3)hTINA1抗体的纯化用rProteinA亲和色谱法(4－6℃)和羟基磷灰石陶瓷(ceramichydroxyapatite)(室温)的2阶段工序，从上述7－3－2)中得到的培养上清液中纯化抗体。rProteinA亲和色谱法纯化后和羟基磷灰石陶瓷纯化后的缓冲液取代工序于4－6℃实施。最初，将培养上清液上样到用PBS平衡化过的MabSelectSuRe(GEHealthcareBioscience公司制，HiTrap柱)。在培养上清液全部进入柱后，用柱容量2倍以上的PBS洗柱。接下来，用2M精氨酸盐酸盐溶液(pH4.0)，收集包含抗体的级分。针对该级分，利用透析(ThermoScientific公司，Slide－A－LyzerDialysisCassette)置换成PBS，然后用5mM磷酸钠/50mMMES/pH7.0的缓冲液进行5倍稀释，将得到的抗体溶液上样到用5mMNaPi/50mMMES/30mMNaCl/pH7.0的缓冲液平衡化过的羟基磷灰石陶瓷柱(日本BioRad，Bio－ScaleCHTType‐IHydroxyapatiteColumn)。实施基于氯化钠的直线的浓度梯度洗脱，收集包含抗体的级分。针对该级分，利用透析(ThermoScientific公司，Slide－A－LyzerDialysisCassette)进行液体置换，置换成HBSor(25mM组氨酸/5％山梨糖醇，pH6.0)。最后，用CentrifugalUFFilterDeviceVIVASPIN20(分级分子量UF10K，Sartorius公司，4℃)进行浓缩，将IgG浓度调节成20mg/ml以上，制成纯化样品。[参考例1：hRS7抗体表达载体的制作和抗体的生产]hRS7抗体基于国际公开第2003/074566号中记载的轻链及重链的氨基酸序列制作。1－1)hRS7抗体重链表达载体的构建合成包含序列表的序列号29所示的hRS7抗体重链的核苷酸序列的核苷酸编号36～437所示的编码hRS7抗体重链的可变区的DNA序列的DNA片段(GENEART公司人工基因合成服务)，利用与实施例7－1－1)同样的方法，构建hRS7抗体重链表达载体。将得到的表达载体命名为“pCMA－G1/hRS7”。将hRS7抗体重链的氨基酸序列示于序列表的序列号30。1－2)hRS7抗体轻链表达载体的构建合成包含序列表的序列号31所示的hRS7抗体轻链的核苷酸序列的核苷酸编号38～402所示的编码hRS7抗体轻链的可变区的DNA序列的DNA片段(GENEART公司人工基因合成服务)，利用与实施例7－2－1)同样的方法，构建hRS7抗体轻链表达载体。将得到的表达载体命名为“pCMA－LK/hRS7”。将hRS7抗体重链的氨基酸序列示于序列表的序列号32。1－3)hRS7抗体的生产和纯化1－3－1)hRS7抗体的生产利用pCMA－G1/hRS7与pCMA－LK/hRS7的组合，利用与实施例7－3－2)同样的方法，生产hRS7抗体。1－3－2)hRS7抗体的纯化利用与实施例7－3－3)同样的方法，从上述1－3－1)中得到的培养上清液中纯化。[实施例8：hTINA1抗体及hRS7抗体的抗原结合能力的测定]8－1)使用小规模生产的抗体(培养上清液)进行的抗原结合能力的测定关于抗体与抗原(RecombinantHumanTROP－2Fcchimera)的解离常数，利用下述捕获法进行测定：使用Biacore3000(GEHEALTHCAREBIO－SCIENCES)，在经固定化的抗人IgG(Fab)抗体上捕捉(捕获)抗体作为配体，将抗原作为分析物而进行测定。对于抗人IgG(Fab)抗体(HumanFab捕获试剂盒，GEHEALTHCAREBIO－SCIENCES)而言，利用胺偶联(aminecoupling)法，以约2000RU共价连接于传感芯片CM5(BIAcore，Inc.)。在参比试池(referencecell)中也同样地进行固定化。作为电泳缓冲液(runningbuffer)，使用HBS－EP+(10mMHEPESpH7.4，0.15MNaCl，3mMEDTA，0.05％表面活性剂(Surfactant)P20)。在固定有抗人IgG(Fab)抗体的芯片上，添加包含抗体的培养上清液约80秒，然后以30μl/分钟的流速添加抗原的稀释系列溶液(1－1000nM)300秒，接下来，监测600秒的解离相。作为再生溶液，以10μl/分钟的流速添加包含20％DMSO的10mMGly－HClpH1.5，添加60秒。对于数据的分析而言，使用分析软件(BIAevaluationsoftware，版本4.1)的Bivalent结合模型，算出结合速度常数kon、解离速度常数koff及解离常数(KD；KD＝koff/kon)。[表1]使用了培养上清液作为抗体样品的结合活性8－2)使用纯化抗体进行的抗原结合能力的测定关于抗体与抗原(RecombinantHumanTROP－2Fcchimera)的解离常数，利用下述捕获法进行测定：使用Biacore3000(GEHEALTHCAREBIO－SCIENCES)，在经固定化的抗人IgG(Fab)抗体上捕捉(捕获)抗体作为配体，将抗原作为分析物而进行测定。对于抗人IgG(Fab)抗体(HumanFab捕获试剂盒，GEHEALTHCAREBIO－SCIENCES)而言，利用胺偶联法，以约2000RU共价连接于传感芯片CM5(BIAcore，Inc.)。在参比试池中也同样地进行固定化。作为电泳缓冲液，使用HBS－EP+(10mMHEPESpH7.4，0.15MNaCl，3mMEDTA，0.05％表面活性剂(Surfactant)P20)。在固定有抗人IgG(Fab)抗体的芯片上，添加抗体约1分钟，然后以30μl/分钟的流速添加抗原的稀释系列溶液(1－1000nM)300秒，接下来，监测600秒的解离相。作为再生溶液，以100μl/分钟的流速，添加经电泳缓冲液稀释的25mMNaOH，添加3秒，2次。数据的分析利用上述方法进行。[表2]使用了纯化抗体作为抗体样品的结合活性测定[实施例9：hTINA1－H1L1ADC的制作(1)]工序1：(4－{[(1S，9S)－9－乙基－5－氟－9－羟基－4－甲基－10，13－二氧代－2，3，9，10，13，15－六氢－1H，12H－苯并[de]吡喃并[3’，4’：6，7]吲哚嗪并[1，2－b]喹啉－1－基]氨基