细胞捕获装置、带有前处理部的细胞捕获器件及前处理部的制作方法

本发明涉及用于利用过滤器将侵入到被检液中的特定细胞捕获的细胞捕获装置、带有前处理部的细胞捕获器件及前处理部。

背景技术：

在也被称作“恶性肿瘤”的癌症发展时，由于会对生物体的生命维持产生巨大的障碍，因此对治疗方法进行了各种探讨。作为决定癌症患者的治疗方针时的标准，是有无癌症的转移。转移是癌细胞侵入到血管或淋巴管的内部、经由它们扩散到身体中、从而癌细胞移居到其他脏器所导致的。因此，血中的癌细胞的有无及其量的测定在预测癌症转移时成为重要的信息。这种通过血管或淋巴管在人体内循环的癌细胞被称作血中循环癌细胞(Circulating Tumor Cell：CTC)。

作为为了进行转移癌的检查或抗癌评价来捕获CTC的现有技术，例如如专利文献1所示，已知利用过滤器捕获CTC的方法。专利文献1示出了使用了过滤器的半导体技术的制造方法、收纳有过滤器的池单元的形状以及流过血液及处理液的流路的结构。具体地说，示出了通过将含有癌细胞的血液流入收纳有过滤器的池单元中来捕获癌细胞、利用染色将存在于过滤器上的细胞鉴定为癌细胞的构成。另外，专利文献2、3中公开了一种体液处理系统，其具备使含有癌细胞及免疫细胞中的至少一者的细胞分散液通过、能够对所述癌细胞及所述免疫细胞的至少一者赋予物理作用、化学作用及生理活性作用中的至少一种的细胞处理盒。另外，专利文献4中公开了一种微流体器件，其在镍基板上具有微细贯通孔的镍基板的上下具备具有试样供给口的聚二甲基硅氧烷(PDMS)制上部构件和具有试样排出口的下部构件。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：美国专利申请公开第2011/0053152号说明书

专利文献2：日本特开2010-227011号公报

专利文献3：日本特开2010-75191号公报

专利文献4：日本特开2011-163830号公报

技术实现要素：

发明要解决的技术问题

但是，使用专利文献1～4记载的装置时，当在装置的流路内混入了空气时，有显著地降低检体的处理效率、进而测定精度降低的危险。另外，还有处理液中的异物蓄积在过滤器上、变成细胞捕获的障碍的危险。

本发明鉴于上述内容而完成，其目的在于提供可以在特别地抑制空气混入到捕获细胞的过滤器附近的同时将液中的异物除去、能够重现性良好地进行与细胞捕获有关的处理的细胞捕获装置、带有前处理部的细胞捕获器件、及前处理部。

用于解决技术问题的方法

为了解决上述课题，本发明人们进行深入研究的结果发现，处理液及被检液在从导入流路移动到细胞捕获器件的导入区域的时刻产生了大量气泡，认为有可能是在从狭窄的导入路出来进入到宽敞的导入区域时，处理液及被检液的内压暂时降低，结果溶于液体中的气泡分离而产生，从而完成了本发明。

即，本发明一个方式的细胞捕获装置的特征在于，其具备：被检液收纳容器，其收纳含有细胞的被检液；细胞捕获器件，其具有用于将被检液或用来对被检液中的细胞进行处理的处理液导入至内部的导入流路、用于将被检液或处理液排出至外部的排出流路、及在厚度方向上形成有多个贯通孔且按照被检液或处理液通过贯通孔的方式配置在导入流路与排出流路之间的流路上的过滤器；被检液流路，其将被检液收纳容器与细胞捕获器件的导入流路连接；处理液收纳容器，其收纳用来对通过过滤器而被过滤器捕获的细胞进行处理的处理液；处理液流路，其将处理液收纳容器与细胞捕获器件的导入流路连接；选择机构，其从被检液及处理液中选择向细胞捕获器件供给的液体；送液机构，其根据选择机构的选择结果将来自被检液收纳容器的被检液或来自处理液收纳容器的处理液供给至细胞捕获器件；以及前处理部，其设置在处理液流路上及/或被检液流路上，在内部形成有直径大于供设置所述前处理部的流路的直径的气泡滞留区域，并且在气泡滞留区域中具备在厚度方向上形成有多个贯通孔、按照处理液或被检液通过该贯通孔的方式配置的异物除去用过滤器。

如上述的细胞捕获装置那样，通过在处理液流路或被检液流路上设置在内部形成有直径大于流路直径的气泡滞留区域的前处理部，处理液及被检液的内压暂时下降，结果混在流过处理液流路的处理液或流过被检液流路的被检液中的气泡发生分离、储存在气泡滞留区域中。这里，由于气泡的比重比液体的比重小，因此分离的气泡向液体的上部移动、储存在气泡滞留区域中。因而，可抑制混在有气泡的处理液向配置于比前处理部更靠后段的细胞捕获器件的过滤器附近的供给，可以重现性良好地进行与细胞的捕获有关的处理。另外，由于前处理部具备异物除去用过滤器，不会卷入到液体的液流中而迅速地向上部移动，而是使朝向排出口的气泡滞留，能够进行精度更高的气泡除去。进而，即便假设异物混入到处理液中时也能够除去，能够进一步提高细胞捕获器件的过滤器中与细胞捕获有关的处理的效率。

这里，当为处理液或被检液向气泡滞留区域导入的导入口配置在高度方向上比自气泡滞留区域排出的排出口更靠上侧的位置上的构成时，比重大的处理液或被检液流向配置于下部的排出口，因而可促进与比重小的气泡的分离，从而优选。

另外，优选异物除去用过滤器是主成分为金属的方式。通过异物除去用过滤器的主成分为金属，可以发挥其高刚性，进一步减薄厚度。

另外，前处理部设置在处理液流路上时，优选气泡滞留区域在处理液移动方向上的截面积为导入流路在处理液移动方向上的截面积以上。另外，前处理部设置在被检液流路上时，优选气泡滞留区域在被检液移动方向上的截面积为导入流路在被检液移动方向上的截面积以上。

通过采用这种结构，到达气泡滞留区域的处理液或被检液的内压一口气降低，溶于液体内的气泡分离、易于作为气泡滞留，可以提高自处理液的气泡除去效果。通过将这种前处理部设置在细胞捕获器件的过滤器导入流路的上游侧，可以在处理液或被检液通过细胞捕获器件的过滤器之前，预先将气泡除去。另外，通过气泡滞留区域相对于处理液流路或被检液流路的截面积的截面积是细胞捕获器件在处理液或被检液的移动方向上的截面积以上，在未设置有前处理部的现有结构下在细胞捕获器件内产生的气泡全部都会在前处理部的气泡滞留区域中被捕获，因此优选。

另外，优选前处理部由除了过滤器之外、与细胞捕获器件为相同形状的构件构成的方式。

如上所述，通过为使用与细胞捕获器件相同形状的构件来构成前处理部的方式，例如与制造具有与细胞捕获器件不同形状的前处理部的情况相比，可以降低前处理部的制造成本。

另外，优选前处理部分别设置在处理液流路上及被检液流路上。通过将前处理部分别设置在处理液流路上及被检液流路上，可以被检液流路上的前处理部每个被检液地进行更换、而处理液流路上的前处理部重复使用。

另外，还可以使本发明一个方式的细胞捕获装置中含有的前处理部的功能含有在细胞捕获器件中、制成带有前处理部的细胞捕获器件。这种带有前处理部的细胞捕获器件实质上是与上述细胞捕获装置相同的发明，发挥相同的作用及效果。

即，本发明一个方式的带有前处理部的细胞捕获器件的特征在于，其具备：1个以上的导入流路，其用于将含有细胞的被检液或用来对被检液中的细胞进行处理的处理液导入至内部；排出流路，其用于将被检液或处理液排出至外部；过滤器，其在厚度方向上形成有多个贯通孔，且按照被检液或处理液通过该贯通孔的方式配置在导入流路与排出流路之间的流路上；以及前处理部，其设置在至少1个导入流路上，在内部形成有直径大于导入流路的直径的气泡滞留区域，并且在气泡滞留区域中具备在厚度方向上形成有多个贯通孔、按照处理液或被检液通过该贯通孔的方式配置的异物除去用过滤器。

带有前处理部的细胞捕获器件通过具备能够除去气泡的前处理部，可以实现更为紧凑的结构。

这里，优选所述被检液或所述处理液向所述前处理部中所述气泡滞留区域导入的导入口配置在高度方向上比自所述气泡滞留区域排出的排出口更靠上侧的位置上。

另外，优选异物除去用过滤器的主成分为金属。

另外，当前处理部设置在导入流路中处理液流过的处理液流路上时，气泡滞留区域在处理液移动方向上的截面积优选为导入流路在处理液移动方向上的截面积以上。另外，当前处理部设置在导入流路中被检液流过的被检液流路上时，气泡滞留区域在被检液移动方向上的截面积优选为导入流路在被检液移动方向上的截面积以上。

另外，优选设有多个导入流路、前处理部分别设置在所有的导入流路上。

另外，本发明还可以是涉及前处理部的发明。

即，本发明一个方式的前处理部的特征在于，具备将含有细胞的被检液导入至内部的导入流路，其设置在所述导入流路上，在内部形成有直径大于所述导入流路直径的气泡滞留区域，并且在所述气泡滞留区域中具备在厚度方向上形成有多个贯通孔、按照所述被检液通过该贯通孔的方式配置的异物除去用过滤器，该异物除去用过滤器的孔径为15～100μm。

这里，上述异物除去用过滤器优选所述被检液向所述气泡滞留区域导入的导入口配置在高度方向上比自所述气泡滞留区域排出的排出口更靠上侧的位置上的方式。

另外，本发明一个方式的前处理部的特征在于，其具备用于将用来对被检液中的细胞进行处理的处理液导入至内部的1个以上的导入流路，其设置在所述导入流路上，在内部形成有直径大于所述导入流路的直径的气泡滞留区域，并且在所述气泡滞留区域中具备在厚度方向上形成有多个贯通孔、按照所述处理液通过该贯通孔的方式配置的异物除去用过滤器，该异物除去用过滤器的孔径为1～5μm。

这里，上述异物除去用过滤器优选所述处理液向所述气泡滞留区域导入的导入口配置在高度方向上比自所述气泡滞留区域排出的排出口更靠上侧的位置上的方式。

另外，优选所述异物除去用过滤器的主成分为金属的方式。

另外，优选所述气泡滞留区域在所述被检液移动方向上的截面积是所述导入流路在所述被检液移动方向上的截面积以上的方式。

另外，优选所述气泡滞留区域在所述处理液移动方向上的截面积是所述导入流路在所述处理液移动方向上的截面积以上的方式。

发明效果

根据本发明，能够提供可特别地抑制空气混入到捕获细胞的过滤器附近、可以重现性良好地进行与细胞捕获有关的处理的细胞捕获装置、带有前处理部的细胞捕获器件、及前处理部。

附图说明

图1为说明本发明实施方式的细胞捕获装置的构成的图。

图2为说明构成细胞捕获装置的细胞捕获器件的构成的图。

图3为说明构成细胞捕获装置的前处理部的构成的图。

图4为说明变形例的带有前处理部的细胞捕获器件的构成的图。

图5为说明变形例的前处理部的构成的图。

图6为说明变形例的前处理部的构成的图。

图7为说明变形例的前处理部的构成的图。

图8为说明变形例的前处理部的构成的图。

图9为说明变形例的前处理部的构成的图。

图10为说明变形例的前处理部的构成的图。

具体实施方式

以下参照附图详细地说明用于实施本发明的一个方式。另外，附图的说明中相同要素带有相同符号，将重复的说明省略。另外，本说明书中使用“～”表示的数值范围表示将“～”前后所记载的数值分别作为最小值及最大值并包含在内的范围。

(细胞捕获装置)

图1是说明本实施方式的细胞捕获装置的构成的图。细胞捕获装置是通过利用过滤器对作为被检液的血液进行过滤、从而将血液中含有的细胞捕获的装置。另外，对于被过滤器捕获的细胞而言，通过使用染色液等处理液进行染色，进行细胞的鉴定及细胞的个数的计数。以下实施方式中，对被检液为血液、成为捕获对象的细胞为血中循环癌细胞(Circulating Tumor Cell：CTC)的情况进行说明，但对于该方面并无限定。例如，作为被检液可举出血液、淋巴液等，作为成为捕获对象的特定细胞，可举出以CTC为代表的稀有细胞、血液中的细胞(红细胞、白细胞、血小板等)。

如图1所示，细胞捕获装置100中设有：内部设有用于捕获细胞的过滤器的细胞捕获器件1、用于对细胞捕获器件1供给处理液(试剂)的由软质管构成的处理液流路3、用于对细胞捕获器件1供给血液的由软质管构成的被检液流路4。在处理液流路3的上游侧设有装有互不相同的处理液(试剂)的多个处理液收纳容器5。作为投入到处理液收纳容器5中的处理液，可举出用于对细胞进行染色的染色液、用于对过滤器所捕获的细胞等进行洗涤的洗涤液、用于保护细胞免受腐败等的固定液、用于使染色液能够渗透到细胞内部的透过液等。图1所示的多个处理液收纳容器5被密封构件5A所密封，但其构成并无特别限定。

向多个处理液收纳容器5分别插入软质管6，形成独立的流路(处理液流路)。进而，这些流路连接于选择阀8，通过旋转选择阀8，选择连接于处理液流路3的处理液，将插入到装有所选择的处理液的处理液收纳容器5中的软质管6与处理液流路3连接。

在连接于细胞捕获器件1的被检液流路4上连接有在内部作为被检液装有含有特定细胞的血液的血液收纳容器10(被检液收纳容器)。成为并非向细胞捕获器件1同时供给处理液及血液、而是供给其中任一者的构成。供给处理液及血液的何种液体的控制是通过分别安装于处理液流路3及被检液流路4上的阀12、13来进行切换。例如，当向细胞捕获器件1供给血液时，关闭阀12、打开阀13。作为阀12、13，可以使用对软质管进行加压变形来阻断其流动的夹管阀。

另外，向细胞捕获器件1供给处理液及血液中的任一种液体时，通过设置在细胞捕获器件1下游侧的由软质管构成的排出流路9上的泵14的驱动，对目标液体进行抽吸，从而进行液体的供给。泵14是能够通过转速变化来改变流路中的液体的流速的结构。作为泵14，例如可以使用使对软质管的加压所产生的蠕动点依次移动的蠕动泵(软管泵)。通过泵14的驱动，处理液、血液等液体在朝向细胞捕获器件1的方向上在处理液流路3或被检液流路4的内部流动，被供给至细胞捕获器件1中。进而，成为通过了细胞捕获器件1的液体经过排出流路9流入到废液容器16中的结构。通过这些结构，在血液中的细胞可被设置于细胞捕获器件1内的流路上的过滤器捕获，并且可利用染色液将细胞染色。

另外，在向细胞捕获器件1供给处理液的处理液流路3上及供给血液的被检液流路4上设置进行处理液的前处理的前处理部。具体地说，向细胞捕获器件1供给处理液的处理液流路3含有上游侧的处理液流路31和下游侧的处理液流路32而构成，前处理部20A配置在处理液流路31与处理液流路32之间。由此，将来自处理液流路31的处理液导入至前处理部20A、经由前处理部20A的处理液排出至处理液流路32。另外，向细胞捕获器件1供给血液的被检液流路4含有上游侧的被检液流路41和下游侧的被检液流路42而构成，前处理部20B配置在被检液流路41与被检液流路42之间。由此，将来自被检液流路41的血液导入至前处理部20B、经由前处理部20B的血液排出至被检液流路42。前处理部20A、20B的构成及详细情况在后叙述。

上述各部的控制通过利用控制部30(选择机构)进行的控制来实施。具体地说，选择阀8、阀12、13、18及泵14的驱动通过来自控制部30的指示进行。控制部30具备用于输入能够进行对于上述各部的驱动、停止等控制的程序的程序输入功能，并附加有通过由此输入的程序如上所述地使各机器依次工作的驱动机构。通过控制部30(选择机构)选择流过液体的线路，根据该选择结果，由控制部30对各部进行与上述阀的开关及泵的驱动(送液机构)有关的指示。

(细胞捕获器件)

接着，使用图2说明细胞捕获器件1。图2(A)是细胞捕获器件1的俯视图、图2(B)是图2(A)的IIB-IIB矢向图。

细胞捕获器件1为用盖构件58和收纳构件59夹持具有多个贯通孔61的过滤器57的构成。过滤器57配置在将盖构件58及收纳构件59组合时形成于其内部的空间中。过滤器57例如由金属构成，在其厚度方向上形成有多个贯通孔61。

细胞捕获器件1的尺寸从操作性及观察性的观点出发，优选俯视下的盖构件58的一个边的长度为10～100mm、更优选为15～70mm、进一步优选为20～30mm。另外，就厚度而言，从观察机器的高度方向的可动范围的观点出发，优选为2～20mm、更优选为3～15mm、进一步优选为5～10mm。

过滤器57中使用的金属的材质可以例示出金、银、铜、铝、钨、镍、铬及这些金属的合金，但并非限定于这些。另外，金属可以以单质使用，也可以为了赋予功能性制成与其他金属的合金或金属的氧化物进行使用。从价格或获得容易的观点出发，优选使用镍、铜、金及以它们为主成分的金属，特别优选使用以镍为主成分的金属。另外，当过滤器57由以镍为主成分的材料形成时，优选在镍的表面上进行镀金。通过镀金，可以防止过滤器表面的氧化，因此对捕获对象的特定细胞(例如CTC等)的附着性变得相同、可以提高数据的重现性。

过滤器57的厚度优选为3～100μm。当使过滤器57的膜厚为上述范围时，过滤器的处理容易、也适于精密加工。另外，过滤器的设有贯通孔61的区域62的大小优选为25mm²～1000mm²。更优选为25mm²～225mm²、进一步优选为25mm²～100mm²。当大小超过1000mm²时，死空间增多。另外，当小于25mm²时，处理时间变长。

过滤器57的贯通孔的开口形状可以例示出椭圆、圆、长方形、正方形、圆角长方形及多边形，但并非限定于这些。圆角长方形是指端部的角被做圆的长方形。作为圆角长方形的一例，可以举出由2个等长的长边和2个半圆形构成、在长方形的2个短边外侧设有以长方形的短边中点为中心的半圆形状的形状。过滤器57的贯通孔的孔径范围可以约为5.0μm～15.0μm。贯通孔的孔径更优选为7.5μm～13.0μm、进一步优选为7.8μm～10.0μm。另外，贯通孔的孔径是指能够通过贯通孔的最大球的直径。例如，开口形状为圆角长方形的贯通孔孔径可以是贯通孔的短边的长度。

在细胞捕获器件1的盖构件58上形成连接于由软质管形成的处理液流路3的导入流路3A、连接于被检液流路4的导入流路4A、同时设置与导入流路3A、4A连通地形成于过滤器57上方、成为用于将液体诱导至过滤器57的贯通孔61的空间的导入区域62。即，本实施方式中“导入流路”是指在流路中设置于细胞捕获器件1内部的导入流路3A、4A。另外，“处理液流路”、“血液流路”是指分别连接于细胞捕获器件1的导入流路3A、4A上游侧的处理液流路3、被检液流路4。

在细胞捕获器件1的收纳构件59中，设置形成于过滤器57下方且中央部的深度比边缘部更深地形成、成为用于将通过过滤器57的贯通孔61后的液体排出至外部的空间的排出区域63。进而，在收纳构件59上设置与排出区域63连通、同时连接于排出流路9、用于将排出区域63的液体排出至外部的排出流路9A(排出流路)。设置于被盖构件58和收纳构件59夹持的过滤器57中的贯通孔61是成为捕获对象的细胞65无法通过的程度的大小。

处理液流路32(处理液流路3)、被检液流路42(被检液流路4)及排出流路9的安装位置并非限定于图2所示的位置。即，处理液流路32及被检液流路42并无必要相向地配置，例如还可以是构成细胞捕获器件1的4个侧面中的1个连接有处理液流路32及被检液流路42的构成。另外，还可以是上表面连接有处理液流路32及被检液流路42的构成。同样，对于排出流路9而言，其安装位置也可适当地变更。处理液流路3、被检液流路4及排出流路9的安装位置可根据细胞捕获器件1的导入流路3A、4A及排出流路9A进行变更，因此对于细胞捕获器件1的导入流路3A、4A及排出流路9A的配置而言，也可适当地变更。另外，对于流路的数量，也可适当地变更。

(前处理部)

接着，使用图3说明前处理部。图3(A)是前处理部的俯视图，图3(B)是图3(A)的IIIB-IIIB矢向图。前处理部20A、20B是内部夹持着异物除去用过滤器23由导入区域24和排出区域26构成，处理液流路31与前处理部20A上侧的导入区域24相连接、处理液流路32与成为前处理部20A下部的排出区域26相连接。这种前处理部20A具有在从导入来自处理液流路31的处理液至向处理液流路32排出的期间、将处理液中的气泡及异物除去的功能。另外，前处理部20B代替处理液流路31、自被检液流路41被导入血液，将血液向被检液流路42排出，除此之外具有与前处理部20A相同的构成。

前处理部20A的尺寸从操作性及观察性的观点出发，俯视下的盖构件58的一边的长度优选为10～100mm、更优选为15～70mm、进一步优选为20～30mm。另外，就厚度而言，从观察机器的高度方向的可动范围的观点出发，优选为2～20mm、更优选为3～15mm、进一步优选为5～10mm。前处理部20B的尺寸及厚度与前处理部20A相同。

前处理部20A、20B通过成为用盖构件28和收纳构件29夹持着具有多个贯通孔21的异物除去用过滤器23的构成，不仅气泡、处理液中的异物也可被除去。盖构件28及收纳构件29的俯视形状可以与细胞捕获器件1同样为矩形，也可以是圆形，并无特别限定。

异物除去用过滤器23配置在组合盖构件28及收纳构件29时形成于其内部的空间中。异物除去用过滤器23在其厚度方向上形成有多个贯通孔21。异物除去用过滤器23的贯通孔21形状可以例示出与关于细胞捕获器件的贯通孔所例示出的形状相同的形状，但并非限定于这些。另外，贯通孔的孔径与细胞捕获器件的贯通孔同样，是指能够通过贯通孔的最大球的直径。设于异物除去用过滤器23的贯通孔21的大小需要是多种处理液全部能够通过的大小，但优选无论是何种处理液均可容易地通过、即通过时不会施加负荷的程度的大小。进而，处理液流过的前处理部20A中的异物除去用过滤器23的贯通孔21的大小优选与细胞捕获器件的过滤器57的贯通孔相同或者比其更小。具体地说，处理液流过的前处理部20A中的异物除去用过滤器23的贯通孔21的孔径优选为1～5μm、更优选为2～5μm。通过为这种构成，在异物混入到处理液内时，在其前段的前处理部20A处可以确实地将异物除去。而血液流过的前处理部20B中的异物除去用过滤器23的贯通孔21大小优选比捕获对象的细胞的大小足够大、且比细胞捕获器件的过滤器57的孔更大的大小。具体地说，处理液流过的前处理部20B中的异物除去用过滤器23的贯通孔21的孔径优选为15～100μm、更优选为18～100μm、进一步优选为20～50μm。另外，异物除去用过滤器23的材质并无特别限定，为金属时，可以发挥高的刚性、进一步减薄厚度。

异物除去用过滤器23中所用金属的材质可以例示出金、银、铜、铝、钨、镍、铬及这些金属的合金，但并非限定于这些。另外，金属可以以单质使用，为了赋予功能性还可以制成与其他金属的合金或金属的氧化物进行使用。从价格或获得容易的观点出发，优选使用镍、铜、金及以它们为主成分的金属，特别优选使用以镍为主成分的金属。另外，当异物除去用过滤器23由以镍为主成分的材料形成时，优选镍的表面被镀金。通过镀金，可以防止过滤器表面的氧化，可以较高地维持异物除去性能。另外，优选利用对细胞无害的聚合物将过滤器的表面被覆。但是，此时不要求对细胞的粘接性。

异物除去用过滤器23的厚度优选为3～100μm。当使膜厚为上述范围时，过滤器的处理容易、也适合精密加工。另外，过滤器的设有贯通孔21的区域24的大小优选为36mm²～1500mm²。更优选为36mm²～750mm²、进一步优选为36mm²～225mm²。大小超过1500mm²时，死空间增多。另外，小于36mm²时，处理时间变长。

在前处理部20A的盖构件28上形成连接于处理液流路31的流路31A(导入流路)，同时设置与流路31A连通地形成在异物除去用过滤器23的上方、成为用于将处理液诱导至异物除去用过滤器23的贯通孔21的空间的导入区域24。为前处理部20B时，被检液流路41连接于流路41A的上游侧。

另外，在前处理部20A的收纳构件29中设置形成于异物除去用过滤器23的下方且中央部的深度比边缘部更深地形成、成为用于将通过异物除去用过滤器23的贯通孔21后的液体排出至外部的空间的排出区域26。进而，在收纳构件29中，在排出区域26的中央设置与排出区域26连通、同时连接于处理液流路32、用于将排出区域26的液体排出至外部的流路32A(排出流路)。为前处理部20B时，被检液流路42连接于流路32A的下游。排出区域26的底部从端部朝向中央逐渐凹陷、在成为最深部的中央设有流路32A。由此，处理液自流路32A的排出良好地进行。在前处理部20A中，由上述导入区域24及排出区域26形成的空间作为直径比流通处理液的处理液流路3(处理液流路31、32)直径更大的气泡滞留区域发挥作用。同样，在前处理部20B中，由上述导入区域24及排出区域26形成的空间作为直径比流通血液的被检液流路4(被检液流路41、42)直径更大的气泡滞留区域发挥作用。另外，细胞捕获装置100整体的流路直径从重现性的观点出发，优选基本上除了前处理部20A及前处理部20B的气泡滞留区域(由导入区域24及排出区域26形成的空间)及细胞捕获器件1内部的空间(由导入区域62及排出区域63形成的空间)之外、是同等程度的尺寸。这里，气泡滞留区域的直径是指气泡滞留区域在处理液移动方向上的截面的直径。

作为上述前处理部20A(及/或前处理部20B)，可以利用图2所示的细胞捕获器件1。图2所示的细胞捕获器件1在成为上游侧的盖构件58上设有导入流路3A、4A，具备能够连接于互不相同的2个流路的构成。与其相对，图3所示的前处理部20A中，上游侧的盖构件28设有1个流路31A。因此，通过将图2所示细胞捕获器件1的其中一侧的流路(例如导入流路3A)与外部流路(处理液流路3)相连接一侧的端部堵塞，使细胞捕获器件1在盖构件58中能够与外部相连接的流路为1个，可以变更成与图3所示前处理部20A相同的构成。如此，前处理部20A(及/或前处理部20B)可以利用与细胞捕获器件1的盖构件58及收纳构件59为相同形状的盖构件28及收纳构件29进行制造。由此，例如与制造具有与细胞捕获器件1不同形状的前处理部20A(及/或前处理部20B)时相比，可以降低制造成本。即，这里所说的“相同形状”是指流路的配置、数量相同，使用铸模进行成型加工时的各部尺寸被控制在偏差范围内的程度。其中作为“偏差”，被允许的误差是±3μm以内。

上述前处理部20A通过按照盖构件28在高度方向上比收纳构件29更靠上侧的方式设置在细胞捕获装置100中，从而成为处理液向内部空间(导入区域24及排出区域26)导入的导入口的流路31A的导入区域24侧的端部301比成为排出口的流路32A的排出区域26侧的端部302更靠上方。由此，通过由导入区域24及排出区域26构成的气泡滞留区域的处理液在从上方导入口被导入到导入区域24中的同时，自排出区域26下方的排出口排出至外部。这里，到达气泡滞留区域的处理液或被检液的内压一下子降低、溶于液体内的气泡分离、易于作为气泡滞留，可以提高气泡自处理液的除去效果。而且，自处理液分离的气泡向导入区域24的上方侧移动并滞留。另外，处理液通过异物除去用过滤器23的贯通孔21，从而将无法通过贯通孔21的异物用异物除去用过滤器23捕获。由此除去了气泡及异物的处理液自排出区域26经过流路32A向后段的处理液流路32排出。作为成为导入口的流路31A的导入区域24侧的端部301与成为排出口的流路32A的排出区域26侧的端部302的位置关系，优选导入口侧的端部301的下端比排出口侧端部302的上端更靠上方。具体地说，优选导入口侧端部301的下端比排出口侧端部302的上端更靠上方0.1mm～5mm、更优选更靠上方0.1mm～2.5mm、进一步优选更靠上方0.1mm～1.5mm。通过导入口侧端部301的下端比排出口侧端部302的上端更靠上方0.1mm～5mm，可以适当地将气泡和异物除去。

如此，通过在处理液流路上设置前处理部20A，即便是处理液内含有气泡时，由于气泡滞留在前处理部20A内的导入区域24中，因此在导入区域24及排出区域26移动的期间气泡被除去。另外，通过设置异物除去用过滤器23，可以将处理液中含有的异物的至少一部分(无法通过贯通孔21的异物)捕获，因此可以将除去了异物的处理液向后段的细胞捕获器件1供给。同样，通过在血液流路上设置前处理部20B，即便是血液内含有气泡时，由于气泡滞留在前处理部20B内的导入区域24中，因此在导入区域24及排出区域26移动的期间气泡被除去。另外，通过设置异物除去用过滤器23，由于可以将血液中含有的异物的至少一部分(无法通过贯通孔21的异物、例如白细胞变形而无法通过贯通孔21等)，因而可以将除去了异物的血液向后段的细胞捕获器件1供给。

这里，气泡滞留区域在处理液移动方向上的截面积优选比连接于气泡滞留区域的处理液流路31、32的截面积充分大，例如优选相对于处理液流路31、32的截面积为10倍以上。气泡滞留区域通过具有比处理液流路31、32的截面积充分大的截面积，到达该区域的处理液内的内压降低、气泡自处理液分离，与其他气泡接触的机会增加，因此易于作为气泡滞留。另外，气泡滞留区域在处理液移动方向上的截面积可以是前处理部20A俯视图中导入区域24的面积。

另外，当使细胞捕获器件1在处理液移动方向上的截面积为细胞捕获器件1在细胞捕获器件1俯视图中的导入区域62的面积时，优选前处理部20A的气泡滞留区域在处理液移动方向上的截面积是细胞捕获器件1在处理液移动方向上的截面积以上。由此，可以制成在前处理部20A的气泡滞留区域中可以使处理液内的气泡充分地滞留、同时在下游侧的细胞捕获器件1中难以产生气泡的结构。

另外，对于前处理部20B而言，与前处理部20A同样，优选气泡滞留区域在被检液移动方向上的截面积比连接于气泡滞留区域的被检液流路41、42的截面积充分大，例如优选相对于被检液流路41、42的截面积为10倍以上。另外，当使细胞捕获器件1在被检液移动方向上的截面积为细胞捕获器件1在细胞捕获器件1俯视图中的导入区域62的面积时，优选前处理部20B中的气泡滞留区域在被检液移动方向上的截面积是细胞捕获器件1在被检液移动方向上的截面积以上。

(带有前处理部的细胞捕获器件)

图4表示连接有图2所示的细胞捕获器件1、图3所示的前处理部20A、及具有与前处理部20A相同构成的前处理部20B的构成。自处理液收纳容器5供给的处理液在比阀12更靠下游处经过处理液流路31被供至前处理部20A。前处理部20A中，处理液从流路31A进入导入区域24、通过异物除去用过滤器23后朝向排出区域26。此时，处理液中的气泡由于滞留在导入区域24的上方，因此气泡自处理液内被除去。另外，无法通过异物除去用过滤器23的异物由于被异物除去用过滤器23捕获，因此处理液内的异物被除去。除去了气泡及异物的处理液自流路32A被排出至前处理部20A外，经过处理液流路32供给至细胞捕获器件1。进而，除去了气泡的处理液经过细胞捕获器件1内的导入流路3A、经过导入区域62、过滤器57及排出区域63，自排出流路9A排出至细胞捕获器件1外。

另外，由血液收纳容器10供给的血液在比阀13更靠下游侧经过被检液流路41被供给至前处理部20B。在前处理部20B中，血液自流路41A进入导入区域24、通过异物除去用过滤器23后朝向排出区域26。此时，血液中的气泡由于滞留在导入区域24的上方，因此气泡从血液内被除去。另外，无法通过异物除去用过滤器23的异物由于被异物除去用过滤器23捕获，因此血液内的异物被除去。除去了气泡及异物的血液自流路32A排出至前处理部20B外，经过被检液流路42被供给至细胞捕获器件1。进而，除去了气泡的处理液经过细胞捕获器件1内的导入流路3A，经过导入区域62、过滤器57及排出区域63，自排出流路9A排出至细胞捕获器件1外。

另外，对于本发明的实施方式的前处理部、细胞捕获器件及带有前处理部的细胞捕获器件而言，优选以预先利用洗涤液、生理盐水或纯水等将这些各装置内及用于连接它们而设置的流路内填充的状态进行使用。

以上说明了本发明的实施方式，但本发明的细胞捕获装置及带有前处理部的细胞捕获器件及前处理部并非限定于此，可以进行各种变更。

例如，上述实施方式中，对在处理液流路3上设置前处理部20A的同时、在被检液流路4上设置前处理部20B的构成进行了说明，但也可以是仅具备前处理部20A、20B的任一者的构成。此时，由于从流过设有前处理部一侧的流路的液体中将气泡及异物适当地除去，因此可以重现性良好地进行与细胞的捕获有关的处理。

另外，上述实施方式中对前处理部20A(20B)具有与图2所示细胞捕获器件1相同构成的情况进行了说明，但也可以是与细胞捕获器件1不同的构成。例如，可以无需具备盖构件28和收纳构件29而进行一体成型。

这里，一边参照图5～图10一边说明前处理部的变形例。首先，图5(A)是前处理部20C的俯视图、图5(B)是图5(A)的VB-VB矢向图。图5所示的前处理部20C与作为实施方式说明过的前处理部20A相比，改变了比异物除去用过滤器23更靠下游侧的收纳构件29内的排出区域26的形状。具体地说，并非使中央部变深地使其倾斜、而是为水平，在其端部设置有用于排出的流路32A。

接着，图6(A)是前处理部20D的俯视图、图6(B)是沿着图6(A)的VIB-VI线的矢向图。图6所示的前处理部20D与前处理部20A相比，在底面从导入区域24侧流路31A朝向排出区域26侧流路32A倾斜的方面有所不同。因此，异物除去用过滤器23的设有贯通孔21的区域的面积(液体能够通过的区域的面积)比前处理部20A小，但可以使通过异物除去用过滤器23的贯通孔21后的液体从流路32A适当地排出。

图7(A)是前处理部20E的俯视图，图7(B)是图7(A)的VIIB-VIIB矢向图。图7所示的前处理部20E的内部结构与前处理部20C相同，但由盖构件28及收纳构件29形成的外形呈圆形形状。进而，内部的导入区域24、排出区域26及设置于其间的异物除去用过滤器23的形成有贯通孔21的区域(液体能够通过的区域)的形状也形成为俯视下观察时呈圆形。如此，导入区域24、排出区域26、异物除去用过滤器23的设有贯通孔21的区域的形状等也可适当地改变。

图8(A)是前处理部20F的俯视图、图8(B)是图8(A)的VIIIB-VIIIB矢向图。图8所示的前处理部20F的外形为四边形形状，但安装流路31A、32A的位置与前处理部20C等不同。即，前处理部20C中，为在四边形形状的导入区域24及排出区域26中、在其中一边的中央附近设有流路31A、在与安装有流路31A的一边为相对边的中央部附近设有流路32A的构成(参照图5(A)等)。与其相对，前处理部20F中，流路31A、32A在四边形形状的导入区域24及排出区域26中在相向的角的顶点部设有流路31A、32A。

图9(A)是前处理部20G的俯视图，图9(B)是图9(A)的IXB-IXB矢向图。图9(A)、图9(B)所示的前处理部20G的外形为四边形形状，但安装流路31A、32A的位置与前处理部20C等不同。前处理部20G中，在四边形形状的导入区域24及排出区域26中，在其中一边的一端侧设有流路31A的同时、在另一端侧设有流路32A。如上述变形例所示，设置流路31A、32A的位置并无特别限定。例如，如图9所示的前处理部20G那样，流路31A、32A这两者可以设置在四边形形状导入区域24及排出区域26的一边上，也可以设置在互不相同的边上。另外，如前处理部20A等那样，当流路31A和流路32A设置在相向的边上时，流路31A、32A也可以不设置在同一线(参照图3的IIIB-IIIB线)上。

图9(C)是表示相对于前处理部20G改变了异物除去用过滤器23的安装位置的前处理部20H的图，是与图9(B)相对应的图。图9(C)所示的前处理部20H与异物除去用过滤器23水平地安装的前处理部20A～20G相比，过滤器安装在垂直方向上。此时，比异物除去用过滤器23更靠上游侧(图示左侧)为导入区域24，比异物除去用过滤器23更靠下游侧(图示右侧)为排出区域26，按照导入区域24与排出区域26不连通的方式将盖构件28及收纳构件29的形状改变。为前处理部20H时，作为一例示出了排出区域26侧的流路32A的端部支撑异物除去用过滤器23的一端侧的构成。如此，在前处理部中，也可适当地改变异物除去用过滤器23的安装方向。另外，根据异物除去用过滤器23的安装位置等，变盖构件28及收纳构件29的形状也可改变。

图10是表示相对于前处理部20G改变了异物除去用过滤器23的安装位置的前处理部20I的图，图10(A)是前处理部20I的俯视图，图10(B)是图10(A)的XB-XB矢向图。前处理部20I是内部夹持着异物除去用过滤器23由导入区域24和排出区域26构成。另外，当前处理部20I设置在处理液流路3上时，处理液流路31与前处理部20I的导入区域24连接，处理液流路32与前处理部20I的排出区域26连接。此时，前处理部20I具有在自处理液流路31导入处理液、向处理液流路32排出的期间、将处理液中的气泡及异物除去的功能。另外，在前处理部20I设置于被检液流路4上时，将血液自连接于前处理部20I的导入区域24的被检液流路41导入，将血液向与连接于前处理部20I的排出区域26的被检液流路42排出。

前处理部20I的尺寸从操作性及观察性的观点出发，俯视下盖构件28的一边的长度优选为10～100mm、更优选为15～70mm、进一步优选为20～30mm。另外，就厚度而言，从观察机器高度方向的可动范围的观点出发，优选为2～20mm、更优选为3～15mm、进一步优选为5～10mm。

前处理部20I通过为利用盖构件28和收纳构件29夹持具有多个贯通孔21的异物除去用过滤器23的构成，不仅能够将气泡除去、还能将处理液中的异物除去。盖构件28及收纳构件29的俯视形状可以与细胞捕获器件1同样地为矩形，也可以为圆形，并无特别限定。

异物除去用过滤器23配置于组合盖构件28及收纳构件29时形成于其内部的空间中。异物除去用过滤器23在其厚度方向上形成有多个贯通孔。异物除去用过滤器23中的贯通孔的孔径根据前处理部20I是针对处理液进行使用还是针对被检液进行使用来适当选择。异物除去用过滤器23与前处理部20H同样，在垂直方向上安装。此时，比异物除去用过滤器23更靠上游侧(图示左侧)成为导入区域24、比异物除去用过滤器23更靠下游侧(图示右侧)成为排出区域26，按照导入区域24与排出区域26不连通的方式，改变盖构件28及收纳构件29的形状。

前处理部20I中，流路31A及32A如图10(B)所示，设置在导入区域24的底部。当将这种前处理部20I适用于处理液流路3时，在前处理部20I中，在处理液从流路31A到达导入区域24时，处理液内的内压下降、气泡自处理液分离。由于气泡的比重比液体小，因此自己会上升至导入区域24的上部并滞留在上部。另一方面，处理液流过导入区域24的下部，在异物除去用过滤器23中在将异物除去之后，自流路32A流向后段的流路(例如流路32)。进而，前处理部20I如图10(A)所示，在俯视观察时，为了处理液易于流向流路32A，排出区域26的侧壁是倾斜的。因此，可以适当地将通过异物除去用过滤器23后的处理液从流路32A向后段排出。如此，在前处理部中还可以对异物除去用过滤器23的安装方向进行适当变更。另外，根据异物除去用过滤器23的安装位置等，盖构件28及收纳构件29的形状也可改变。

实施例

以下举出实施例及比较例更为具体地说明本发明。但本发明并非限定于这些实施例。

(实施例1)

作为实施例1，使用图4所示的前处理部20A(具备异物除去用过滤器23)及细胞捕获器件1，确认了由前处理部20A产生的气泡除去效果。此时，处理液流路31、32的内径是直径为1mm(截面积为0.8mm²)、前处理部20及细胞捕获器件1的流路31A、32A、3A的内径是直径为0.8mm(截面积为0.5mm²)。另外，由导入区域24及排出区域26构成的气泡滞留区域的容积为79mm³(截面积为56mm²：一边为7.5mm的正方形形状、高度为1.4mm)。另外，作为异物除去用过滤器23，使用孔径为8×100μm、开口率为8.7％的金属过滤器。另外，关于前处理部20A，利用预先进行了脱气的纯水将到达细胞捕获器件1的流路内填充。在对这种前处理部20A通入在纯水中混在有气泡的处理液时，混在于处理液的气泡滞留于导入区域24，不会流入排出侧的流路32A，向细胞捕获器件1供给除去了气泡的处理液。另外，在用通过了异物除去用过滤器23后的处理液填满细胞捕获器件1并进行显微镜观察时，没有确认到超过异物除去用过滤器23的贯通孔21大小的异物，可以良好地进行观察。

(实施例2)

作为实施例2，使用图4所示的前处理部20A(具备异物除去用过滤器23)及细胞捕获器件1，确认了由前处理部20A产生的气泡除去效果。此时，处理液流路31、32的内径是直径为1mm(截面积为0.8mm²)，前处理部20及细胞捕获器件1的流路31A、32A、3A的内径是直径为0.8mm(截面积为0.5mm²)。另外，由导入区域24及排出区域26构成的气泡滞留区域的容积是79mm³(截面积为56mm²：一边为7.5mm的正方形形状、高度为1.4mm)。另外，作为异物除去用过滤器23，使用孔的直径为35μm的正圆、开口率为30％的金属过滤器。另外，就前处理部20A而言，利用预先进行了脱气的纯水将到达细胞捕获器件1的流路内填充。在对这种前处理部20通入作为混存有气泡的被检液的血液时，混在于被检液的气泡滞留于导入区域24，不会流入排出侧的流路32A，向细胞捕获器件1供给除去了气泡的被检液。另外，在用通过了异物除去用过滤器23后的被检液填满细胞捕获器件1并进行显微镜观察时，没有确认到超过异物除去用过滤器23的贯通孔21大小的异物，并且因被检液的经时变化所产生的凝集物被除去，观察视野整体变得清楚，可以良好地观察所捕获的细胞。

(比较例1)

作为比较例1，使用图4所示的前处理部20A(但不具备异物除去用过滤器23)及细胞捕获器件1，确认了由前处理部20A产生的气泡除去效果。此时，处理液流路31、32的内径是直径为1mm(截面积为0.8mm²)、前处理部20及细胞捕获器件1的流路31A、32A、3A的内径是直径为0.8mm(截面积为0.5mm²)。另外，由导入区域24及排出区域26构成的气泡滞留区域的容积是79mm³(截面积为56mm²/一边为7.5mm的正方形形状)。另外，就前处理部20A而言，利用预先进行了脱气的纯水将到达细胞捕获器件1的流路内填充。在对这种前处理部20A通入在纯水中混存有气泡的处理液时，确认到混在于处理液的气泡一定量地滞留于导入区域24中，但气泡的一部分未流入排出侧的流路32A中，将气泡供给至细胞捕获器件1。对处理后的细胞捕获器件1进行显微镜观察时，除了所捕获的细胞以外，还确认到相当量的认为是来自处理液的异物，难以与所捕获的细胞进行区分。进而，数个异物发出强光度的荧光，阻碍了异物周边的所捕获细胞的观察。

(比较例2)

作为比较例2，在细胞捕获器件1的前段，代替前处理部而将流路截面积与处理液流路31、32相同(截面积为0.8mm²)的T字分支管中的2个管部分别连接于处理液流路31、32，将未连接流路的管部朝向上方地安装，将端部堵塞。确认了在这种T字分支管中是否可将气泡除去。另外，就T字分支管而言，利用预先进行了脱气的纯水将到达细胞捕获器件1的流路内填充。在通入在纯水中混存有气泡的处理液时，混存于处理液中的气泡在T字管的分支部不会分离到上方侧的管部、而是排出到处理液流路32中，从而将混存有气泡的处理液供给至细胞捕获器件1。

符号说明

1细胞捕获器件、3、4、9、31、32流路、5处理液收纳容器、10血液收纳容器(被检液收纳容器)、20A～20H前处理部、23异物除去用过滤器、57过滤器、100细胞捕获装置。