基因修饰的间充质干细胞及其用于生产BsAb抗体的方法与流程

文档序号:12108639阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基因修饰的间充质干细胞,其是利用携带BsAb抗体基因的非病毒载体转染间充质干细胞而得到的。

2.根据权利要求1所述的基因修饰的间充质干细胞,其中,所述间充质干细胞来源于滑膜、骨骼、肌肉、肺脏、肝脏、胰腺、脂肪、脐带、脐带血、胎盘、骨髓、子宫内膜或牙髓;以及包括以iPS技术诱导成体细胞转化为的间充质干细胞。

3.根据权利要求1所述的基因修饰的间充质干细胞,其中,所述携带BsAb抗体基因的非病毒载体选自:质粒DNA、微环质粒DNA或核糖核酸载体。

4.根据权利要求1所述的基因修饰的间充质干细胞,其中,所述BsAb抗体选自antiCD19×antiCD3、antiCD20×antiCD3、antiEGFR×antiCD3、antiGPC3×antiCD3、antiEpCAM×antiCD3、anticMet×antiCD3、antiEGFRvIII×antiCD3、antiIGF1R×antiCD3、antiCD44v6×antiCD3或antiPDL-1×antiCD3。

5.权利要求1~4任一项所述的基因修饰的间充质干细胞的制备方法,该方法包括:

将携带BsAb抗体基因的非病毒载体转染至间充质干细胞,完成对间充质干细胞的基因修饰,得到基因修饰的间充质干细胞。

6.根据权利要求5所述的方法,其中,所述转染为利用化学转染试剂的化学转染方法、或电穿孔转染方法。

7.根据权利要求6所述的方法,其中,所述化学转染试剂包括:脂质体转染试剂,聚阳离子转染试剂,或是无机纳米颗粒转染试剂、有机纳米颗粒转染试剂、或无机有机杂化纳米颗粒转染试剂。

8.权利要求1~4任一项所述的基因修饰的间充质干细胞用于生产BsAb抗体中的应用。

9.一种生产BsAb抗体的方法,该方法包括:

培养权利要求1~4任一项所述的基因修饰的间充质干细胞以分泌表达双特异性单链抗体。

10.根据权利要求9所述的方法,其中,所述培养条件为:37℃、5%CO2静置培养;优选的培养基为含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基。

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