本发明是一种花色苷系统纯化方法，属于食品纯化技术领域。
背景技术：
花色苷是18种天然存在的花色素的糖苷化合物，在紫心甘薯中含量较为丰富。其具有与其他天然类黄酮相同的C6-C3-C6碳骨架，为2-苯基苯并芘或黄烊盐离子的多羟基以及多甲氧基衍生物。花色素苷由配基(花色素)与一个或几个糖分子结合而成。游离配基在食品中很少存在，仅在降解反应中才有微量产生。
相关研究表明紫心甘薯花色苷具有相当强的还原力和清除羟自由基的能力，且与浓度呈正比关系；具有抗Fe2+引发的卵磷脂脂质体过氧化、抑制由H202引发的红细胞溶血作用的能力。日本人曾比较橙色番薯(富含β-胡萝卜素)和紫番薯两者榨汁成分，发现后者具有很强的超氧化歧化酶(SOD)活性，故进而比较两者清除游离02离子的能力。即经与次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶作用产生的02离子与N-氧化-5,5-二甲基-1-吡咯啉作用，经电子自旋共振装置(ESR)测定它们对02离子的清除能力。结果证明紫番薯汁具有比富含β-胡萝卜素的橙番薯汁更强的02离子清除能力。又有人曾比较多种番薯品种，用80％乙醇提取物试验对脂质过氧化作用(亚油酸在80℃下加热时过氧化物值上升的抑制能力)，及对BuOO基[特丁基氢氧化物/氯高铁血红素/氨基苯二酰一肼(tert-Butylhudroxide/hemin/luminnol)]所导致的化学发光能力抑制作用，说明高含花色素苷的阿雅紫番薯具有很强的抗氧化能力。还有研究人员以大鼠为试验材料，研究了含大量花色苷的紫色甘薯饮料的生理功效试验。结果表明，给大鼠喂食四氯化碳后，大鼠体内产生游离自由基，引发急性肝炎，血清中谷氨酸.草醋酸转氨酶(GOT)、谷氨酸.焦葡萄糖酸转氨酶(GPT) 激增；但给其喂食含大量花色苷的紫色甘薯饮料后，病鼠血清中GOT、GPT的上升受到明显地抑制，而且表现出对血清中的硫化巴比酸(TBA)反应物、肝脏中的TBA反应物及氧化脂蛋白的增加均有一定的抑制能力。
但是我国对于紫心甘薯花色苷研究还较少，国内有研究者从紫心甘薯中提取多糖、色素和制作饲料，但对于紫心甘薯花色苷纯化方面的研究尚未见报道。
技术实现要素：
针对现有技术存在的不足，本发明目的是提供一种成本低廉、易于推广的花色苷系统纯化方法。
为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：一种花色苷系统纯化方法，具体步骤为：
1)切碎热烫；称取100重量份紫心甘薯，切片，沸水中熟烫0.5～2min；
2)破碎均质：破碎前紫心甘薯先用流动水冲洗干净，立即按照1：10料液比例加入超纯水用打浆机破碎；
3)糖化：紫甘薯浆降温后，加入糖化酶，紫甘薯浆调节至pH约为4.5，水浴温度为60℃～66℃；
4)乙醇浸提：根据糖化后浆料的体积，按照1：5体积比例向浆料中加入无水乙醇，将此混合液置于4℃冰箱中冷藏过夜；
5)离心：合并滤液，再于5000r/min的速率对其进行离心5min处理离心后取上清液；
6)回收粗提取物：减压回收乙醇，冷冻干燥得花色苷粗提取物；
7)溶解萃取：先将粗提取物溶于超纯水，再加入等体积不同的萃取溶剂，室温振荡并静置分层，取有机层，进行浓缩干燥，得到花色苷粗纯化物；
8)复萃取：加入等体积的氯仿，室温振荡并静置分层，取水层，再加入 等体积不同的萃取溶剂，振荡并静置分层，取其上层有机层，进行浓缩干燥，得到花色苷纯化物。
本发明的有益效果：本发明采用的溶剂萃取法是用一种溶剂将一种液体混合物中的某一化学组分提取出来的分离技术。紫心甘薯中含有淀粉、果胶、多糖，蛋白质等物质，而且乙醇对花色苷具有较高的溶解性，对蛋白质、多糖的溶解性较低，淀粉、果胶不溶于乙醇，利用此性质采用溶剂萃取法可以初步纯化花色苷。花色苷可溶于乙酸乙酯溶液中，而多糖、单糖及小分子蛋白质难溶于乙酸乙酯溶液，利用此性质可以进一步纯化花色苷。与传统提取技术相比，具有操作简便、提取速度快、效率高、耗能少等优点，同时本发明可减少产品的污染和热敏性物质的分解。
具体实施方式
为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
实施例1
一种花色苷系统纯化方法，具体步骤为：
1)切碎热烫；称取100重量份紫心甘薯，切片，沸水中熟烫0.5～2min；
2)破碎均质：破碎前紫心甘薯先用流动水冲洗干净，立即按照1：10料液比例加入超纯水用打浆机破碎；
3)糖化：紫甘薯浆降温后，加入糖化酶，紫甘薯浆调节至pH约为4.5，水浴温度为60℃～66℃；
4)乙醇浸提：根据糖化后浆料的体积，按照1：5体积比例向浆料中加入无水乙醇，将此混合液置于4℃冰箱中冷藏过夜；
5)离心：合并滤液，再于5000r/min的速率对其进行离心5min处理离心后取上清液；
6)回收提取物：减压回收乙醇，冷冻干燥得花色苷粗提取物。
分别用乙酸乙酯、正丁醇对紫心甘薯花色苷提取物溶液进行等体积萃取，取有机层萃取液进行浓缩干燥，得到纯化物，测定花色苷含量。结果如表l所示。
表1不同溶剂萃取花色苷的结果
从表1中可以看出，正丁醇萃取花色苷的得率较高，但是其萃取物中花色苷的含量较低，为17.36％，只比粗提物中花色苷含量(10.45％)稍有提高，纯化效果不是很好。用乙酸乙酯萃取，虽然花色苷的得率有所下降，但是其花色苷的含量较高，达到35.27％，比用正丁醇萃取效果提高了近2倍，纯化效果较明显。
实施例2
一种花色苷系统纯化方法，具体步骤为：
1)切碎热烫；称取100重量份紫心甘薯，切片，沸水中熟烫0.5～2min；
2)破碎均质：破碎前紫心甘薯先用流动水冲洗干净，立即按照1：10料液比例加入超纯水用打浆机破碎；
3)糖化：紫甘薯浆降温后，加入糖化酶，紫甘薯浆调节至pH约为4.5，水浴温度为60℃～66℃；
4)乙醇浸提：根据糖化后浆料的体积，按照1：4体积比例向浆料中加入无水乙醇，将此混合液置于4℃冰箱中冷藏过夜；
5)离心：合并滤液，再于5000r/min的速率对其进行离心5min处理离心后取上清液；
6)回收提取物：减压回收乙醇，冷冻干燥得花色苷粗提取物。
先用等体积的氯仿对紫心甘薯花色苷提取溶液进行萃取，除去部分油溶性物质，取水层再用等体积的乙酸乙酯或正丁醇进行萃取，取有机层进行浓缩干燥，得到香焦皮花色苷纯化物，测定其花色苷含量。结果如表2所示。
表2不同溶剂萃取花色苷的结果
从表2可以看出，此萃取效果明显要好于直接用有机溶剂进行萃取。用乙酸乙酯萃取的纯化物中花色苷含量达到了48.95％，而直接用乙酸乙酯萃取的纯化物花色苷含量只有35.27％。虽然用乙酸乙酯萃取的得率较低，但是其花色苷含量要明显高于用正丁醇萃取的纯化物。而且乙酸乙酯的毒性小，沸点较低，正丁醇的沸点高，溶剂回收困难，所以选用乙酸乙酯作为花色苷的萃取溶剂。
实施例3
一种花色苷系统纯化方法，具体步骤为：
1)切碎热烫；称取100重量份紫心甘薯，切片，沸水中熟烫0.5～2min；
2)破碎均质：破碎前紫心甘薯先用流动水冲洗干净，立即按照1：10料液比例加入超纯水用打浆机破碎；
3)糖化：紫甘薯浆降温后，加入糖化酶，紫甘薯浆调节至pH约为4.5，水浴温度为60℃～66℃；
4)乙醇浸提：根据糖化后浆料的体积，按照1：4体积比例向浆料中加入无水乙醇，将此混合液置于4℃冰箱中冷藏过夜；
5)离心：合并滤液，再于5000r/min的速率对其进行离心5min处理离心后取上清液；
6)回收提取物：减压回收乙醇，冷冻干燥得紫心甘薯花色苷提取物。
先用等体积的氯仿对紫心甘薯花色苷提取液进行萃取，除去部分油溶性物质，取水层再用等体积的乙酸乙酯进行萃取1次、2次、3次，分别收集有机层进行浓缩干燥，得到紫心甘薯花色苷纯化物，测定其花色苷含量。实验结果如表3所示。
表3不同溶剂萃取花色苷的结果
从表3可以看出，随着萃取次数的增加，纯化物中花色苷的含量有多增加从48.95％增加到了58.47％；得率也从20.63％增加到38.63％。经过三次萃取紫心甘薯花色苷己基本萃取完全，可以达到纯化紫心甘薯花色苷的效果。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。