本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种蚕沙叶蛋白的提取方法。
技术背景
桑叶中的叶蛋白主要有叶肉蛋白和叶绿蛋白两种，叶肉蛋白约占桑叶干重的11.89％，叶绿蛋白约占桑叶干重的12.31％。家蚕在食用桑叶后对叶蛋白的消化和破坏不大，因此蚕沙中所含叶蛋白仍占蚕沙干重的14％左右。经叶绿素和果胶提取后，蚕沙中的叶蛋白有一定的损失，但含量仍在12％左右，提取完果胶和叶绿素后的蚕沙废渣中仍还含有丰富的蛋白质。随着畜牧业的迅速发展，蛋白质饲料供应严重不足的问题日益突出。现有叶蛋白的提取原料多种多样，但成本都相对较高，且工艺复杂。
技术实现要素：
本发明的目的在于针对现有技术中存在的不足，提供了以提取叶绿素后的脱绿蚕沙为原料提取蚕沙叶蛋白的方法，其特征在于，是通过以下步骤实现的：
(1) 打浆、酶解、过滤：按蚕沙与水(g/ml)1 ：3-5 的比例加入水，用打浆机将蚕沙打浆3-5min，然后加入（蚕沙浆质量0.1-0.3%）植物复合蛋白酶充分搅拌后静置1-2 h 进行酶解后， 用 800-2000 目滤网过滤取滤液备用。
（2）加热、发酵：将(1) 所取滤液迅速放入沸水中加热到40-45℃后加入保加利亚乳酸杆菌((1) 所取滤液质量0.01-0.03%)、嗜热链球菌((1) 所取滤液质量0.01-0.03%)、在密闭条件下发酵 36-48 小时。
（3）膜分离：将经（2）发酵过的蚕沙液用10000-50000 道尔顿膜超滤，分离出乳清溶液和蛋白溶液。
（4）吸附、酶氧化脱色：将经（3）分离出的蛋白溶液中放入活性炭粉吸附5-10 min，然后过滤将活性炭粉清除，再加入( 蛋白溶液质量0.3-0.5%) 脂肪氧合酶充分搅拌后静置1-2 h 进行酶解。
（5）干燥：将经（4）吸附、酶氧化脱色后的蚕沙蛋白溶液采用真空冷冻干燥制得白色蚕沙蛋白粉。冻干工艺参数：物料厚度8-9 mm，预冻温度-35--40℃，预冻时间2-2.5h，升华时加热板温度45-50℃，干燥仓工作压力22-26Pa，解析时加热板温度60-65℃。
步骤（1）中的植物复合蛋白酶含量为蚕沙浆质量的0.1-0.3%。
步骤（2）中保加利亚乳酸杆菌含量为所取步骤(1) 滤液质量0.01-0.03%、嗜热链球菌含量为步骤(1) 所取滤液质量0.01-0.03%。
步骤（4）中脂肪氧合酶含量为蛋白溶液质量的0.3-0.5%。
本发明的优点 ：本发明以蚕沙为原料经→打浆→酶解→过滤→加热→发酵→膜分离→吸附→酶氧化脱色→真空冷冻干燥，得到的蚕沙蛋白的提取率为85%以上，蚕沙叶蛋白得率为10.6%以上，蚕沙蛋白的颜色为白色，无腥味，蛋白质量分数为58%以上。
具体实施方式
实施例1
(1) 打浆、酶解、过滤：按蚕沙与水(g/ml)1 ：3 的比例加入水，用打浆机将蚕沙打浆3min，然后加入（蚕沙浆质量0.1%）植物复合蛋白酶充分搅拌后静置1h 进行酶解后， 用 800 目滤网过滤取滤液备用。
（2）加热、发酵：将(1) 所取滤液迅速放入沸水中加热到40℃后加入保加利亚乳酸杆菌((1) 所取滤液质量0.01%)、嗜热链球菌((1) 所取滤液质量0.01%)、在密闭条件下发酵 36 小时。
（3）膜分离：将经（2）发酵过的蚕沙液用10000 道尔顿膜超滤，分离出乳清溶液和蛋白溶液。
（4）吸附、酶氧化脱色：将经（3）分离出的蛋白溶液中放入活性炭粉吸附5 min，然后过滤将活性炭粉清除，再加入( 蛋白溶液质量0.3%) 脂肪氧合酶充分搅拌后静置1 h进行酶解。
（5）干燥：将经（4）吸附、酶氧化脱色后的蚕沙蛋白溶液采用真空冷冻干燥制得白色蚕沙蛋白粉。冻干工艺参数：物料厚度8 mm，预冻温度-35℃，预冻时间2h，升华时加热板温度45℃，干燥仓工作压力22Pa，解析时加热板温度60℃。
经检测，得到的蚕沙蛋白的提取率为85.2%，蚕沙叶蛋白得率为10.65%，蚕沙蛋白的颜色为白色，无腥味，蛋白质量分数为58.84%。
实施例2
(1) 打浆、酶解、过滤：按蚕沙与水(g/ml)1 ：5 的比例加入水，用打浆机将蚕沙打浆5min，然后加入（蚕沙浆质量0.3%）植物复合蛋白酶充分搅拌后静置2 h 进行酶解后， 用2000 目滤网过滤取滤液备用。
（2）加热、发酵：将(1) 所取滤液迅速放入沸水中加热到45℃后加入保加利亚乳酸杆菌((1) 所取滤液质量0.03%)、嗜热链球菌((1) 所取滤液质量0.03%)、在密闭条件下发酵48 小时。
（3）膜分离：将经（2）发酵过的蚕沙液用50000 道尔顿膜超滤，分离出乳清溶液和蛋白溶液。
（4）吸附、酶氧化脱色：将经（3）分离出的蛋白溶液中放入活性炭粉吸附10 min，然后过滤将活性炭粉清除，再加入( 蛋白溶液质量0.5%) 脂肪氧合酶充分搅拌后静1-2 h进行酶解。
（5）干燥：将经（4）吸附、酶氧化脱色后的蚕沙蛋白溶液采用真空冷冻干燥制得白色蚕沙蛋白粉。冻干工艺参数：物料厚度9 mm，预冻温度-40℃，预冻时间2.5 h，升华时加热板温度50℃，干燥仓工作压力26Pa，解析时加热板温度65℃。
经检测，得到的蚕沙蛋白的提取率为85.3%，蚕沙叶蛋白得率为10.68%，蚕沙蛋白的颜色为白色，无腥味，蛋白质量分数为58.98%。
实施例3
(1) 打浆、酶解、过滤：按蚕沙与水(g/ml)1 ：5 的比例加入水，用打浆机将蚕沙打浆4min，然后加入（蚕沙浆质量0.2%）植物复合蛋白酶充分搅拌后静置1.5 h 进行酶解后， 用 1500 目滤网过滤取滤液备用。
（2）加热、发酵：将(1) 所取滤液迅速放入沸水中加热到42℃后加入保加利亚乳酸杆菌((1) 所取滤液质量0.02%)、嗜热链球菌((1) 所取滤液质量0.02%)、在密闭条件下发酵 40 小时。
（3）膜分离：将经（2）发酵过的蚕沙液用30000 道尔顿膜超滤，分离出乳清溶液和蛋白溶液。
（4）吸附、酶氧化脱色：将经（3）分离出的蛋白溶液中放入活性炭粉吸附5-10min，然后过滤将活性炭粉清除，再加入( 蛋白溶液质量0.4%) 脂肪氧合酶充分搅拌后静置1.5 h 进行酶解。
（5）干燥：将经（4）吸附、酶氧化脱色后的蚕沙蛋白溶液采用真空冷冻干燥制得白色蚕沙蛋白粉。冻干工艺参数：物料厚度8 mm，预冻温度-37℃，预冻时间2 h，升华时加热板温度47℃，干燥仓工作压力24Pa，解析时加热板温度62℃。
经检测，得到的蚕沙蛋白的提取率为85.6%，蚕沙叶蛋白得率为10.86%，蚕沙蛋白的颜色为白色，无腥味，蛋白质量分数为59.28%。
以上关于本发明的具体描述，仅用于说明本发明而并非受限于本发明实施例所描述的技术方案，本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本发明进行修改或等同替换。