本发明属于生物医药技术领域,涉及一种检测试剂,具体涉及一种腺苷脱氨酶检测试剂。
背景技术:
腺苷脱氨酶(ADA)是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶。测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视。ADA活性是反映肝损伤的敏感指标,可作为肝功能常规检查项目之一,与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。
近十几年来,随着对ADA的深入研究,检测方法也不断发展。目前已发展了四代。对于第一代ADA测试方法,由于高底物浓度造成吸光度过高,该法仅适用于腺苷浓度低于40μM。如此低的底物浓度达不到底物饱和要求,造成ADA活性检测失真。因此,该法不适用于临床应用。对于第二代ADA测试方法,所需试剂易配制,仪器简单,但灵敏度低,易受外源性NH3影响,空白过高,不能直接测定红细胞ADA活性。同样原因,对于ADA偶联谷氨酸脱氢酶(Glutamate Dehydrogenase,GLDH)反应方法来说,其是通过测量340nm处NADPH吸光度下降的速度来测算ADA活性。该法也因血清含氨干扰,以及测试系统中过高NADPH造成非特异性氧化而无成算。对于第三代ADA测试方法,在293nm时血清吸光度太高,造成临床应用不便。第四代ADA测试该法克服了以往ADA测试的困难,然而,鉴于试剂成本高,阻碍了实际临床使用。
鉴于现有技术的上述技术缺陷,迫切需要研制一种新型的腺苷脱氨酶测试方法。
技术实现要素:
本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺点,提供一种腺苷脱氨酶检测试剂,该检测试剂具有测定精密度高、抗干扰能力强、适合自动化快速测定。
为了实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种腺苷脱氨酶检测试剂,该检测试剂的组成为:嘌呤核苷磷酸化酶6-10u/L;甘氨酸缓冲液20-40mmol/L;甘露醇20-30mmol/L;苯甲酸钠20-40mmol/L;黄嘌呤氧化酶10-20u/L;乙二胺四乙酸二钠0.05g/L;甘油醛10-20g/L;叠氮钠0.3g/L;磷酸氢二钠20-100mmol/L;过氧化物酶50-100u/L;KCl 80-90mmol/L;N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐2mmol/L;防腐剂0.4-0.5ml/L;腺苷80-95mmol/I;4-氨基替比林5-8mmol/L;显色剂20-30mmol/L;腺嘌呤核苷50-70mmol/L;牛血清白蛋白6-8g/L;聚乙二醇6000 0.3g/L。
与现有的腺苷脱氨酶测试方法相比,本发明的腺苷脱氨酶检测试剂具有如下有益技术效果:
1、其显色效果好,反应迅速、稳定,因此,测定精密度高、抗干扰能力强。
2、其使用方便。
3、其试剂稳定、易存储、保质期长。
4、其价格低、能减轻患者负担、便于推广应用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进一步说明,实施例的内容不作为对本发明的保护范围的限制。
实施例1
该实施例的腺苷脱氨酶检测试剂的组成为:嘌呤核苷磷酸化酶6u/L;甘氨酸缓冲液20mmol/L;甘露醇20mmol/L;苯甲酸钠20mmol/L;黄嘌呤氧化酶10u/L;乙二胺四乙酸二钠0.05g/L;甘油醛10g/L;叠氮钠0.3g/L;磷酸氢二钠20mmol/L;过氧化物酶50u/L; KCl 80mmol/L;N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐2mmol/L;防腐剂0.4ml/L;腺苷80mmol/L;4-氨基替比林5mmol/L;显色剂20mmol/L;腺嘌呤核苷50mmol/L;牛血清白蛋白6g/L;聚乙二醇60000.3g/L。
实施例2
该实施例的腺苷脱氨酶检测试剂的组成为:嘌呤核苷磷酸化酶10u/L;甘氨酸缓冲液40mmol/L;甘露醇30mmol/L;苯甲酸钠40mmol/L;黄嘌呤氧化酶20u/L;乙二胺四乙酸二钠0.05g/L;甘油醛20g/L;叠氮钠0.3g/L;磷酸氢二钠100mmol/L;过氧化物酶100u/L;KCl 90mmol/L;N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐2mmol/L;防腐剂0.5ml/L;腺苷95mmol/L;4-氨基替比林8mmol/L;显色剂30mmol/L;腺嘌呤核苷70mmol/L;牛血清白蛋白8g/L;聚乙二醇6000 0.3g/L。
实施例3
该实施例的腺苷脱氨酶检测试剂的组成为:嘌呤核苷磷酸化酶8u/L;甘氨酸缓冲液30mmol/L;甘露醇25mmol/L;苯甲酸钠30mmol/L;黄嘌呤氧化酶15u/L;乙二胺四乙酸二钠0.05g/L;甘油醛15g/L;叠氮钠0.3g/L;磷酸氢二钠60mmol/L;过氧化物酶80u/L;KCl 85mmol/L;N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐2mmol/L;防腐剂0.45ml/L;腺苷88mmol/L;4-氨基替比林7mmol/L;显色剂25mmol/L;腺嘌呤核苷60mmol/L;牛血清白蛋白7g/L;聚乙二醇6000 0.3g/L。
采用本发明的腺苷脱氨酶检测试剂对病人进行测试实验,发现:与现有的测试试剂相比,其测试速度更快、准确度更高、显示更清晰,且易存储、保质期长;而且,抗干扰能力强、更稳定。
本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例,而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来 说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。