1.一种地中海贻贝的雌核发育诱导方法,其特征在于,采用电刺激法,电刺激前先将卵子移入电刺激缓冲液中平衡 2min,调好电脉冲仪参数,用吸管吸取 1ml 卵子放入电击杯中,即可进行电刺激处理;
所述电刺激缓冲液为山梨醇缓冲液,具体成分为:含有0.25 mmol/L Mg(C2H3O2)2·4H2O,0.5 mol/L Hepes,0.1 mmol/L Ca(C2H3O2)2H2O,1% BSA,0.25 mmol/L山梨醇;
所述电脉冲仪参数为场强1.25 kv/cm,电容4µF,2次电脉冲。
2.根据权利要求1所述的地中海贻贝的雌核发育诱导方法,其特征在于,所述电刺激时的卵子密度为6×104个/ml。
3.根据权利要求1所述的地中海贻贝的雌核发育诱导方法,其特征在于,电刺激后卵子及胚胎的培养方法为:经电刺激后的卵子被放入直径 15 cm 培养皿中,用高温蒸煮的过滤海水培养,水温保持 20℃,培养密度为每个培养皿中每升约 2×105个卵子;培养初期每半小时轻轻搅动海水一次,以后每 3~4h 搅动一次,以促进其孵化。
4.根据权利要求1所述的地中海贻贝的雌核发育诱导方法,其特征在于,电刺激处理后 2 小时统计各组的卵裂率,24 小时统计胚胎存活率;
卵裂率或雌核发育诱导率=发生卵裂和排放极体的卵数/观察总卵数×100%;
胚胎存活率=上浮的原肠胚数量/发生卵裂的总卵数×100%。