本发明属于药物合成领域，具体涉及一种恩氯米芬的制备方法。
背景技术：
：克罗米芬(clomiphene)是一种与他莫昔芬结构类似的选择性雌激素受体调节剂，结合雌激素受体并阻断在下丘脑上的正常雌激素反馈和随后在垂体上的负反馈，导致黄体生成素(lh)和促卵泡激素(fsh)的增加。克罗米芬可用于治疗无排卵的女性不育症，适用于体内有一定雌激素水平者。药用克罗米芬是由两种几何异构体组成的混合物，包括顺式异构体(珠氯米芬(zuclomiphene))和反式异构体(恩氯米芬(enclomiphene))，其中顺式异构体占约30％-50％。ernst等人，j.pharmaceut.sci.65:148(1976)已经证实，克罗米芬的反式异构体是抗雌激素(ae)的，而顺式异构体是更有效的和更加雌激素的形式，但也被报道具有抗雌激素活性。两种异构体在体内具有不同的半衰期，其中，顺式异构体保留残余血液水平持续超出单次剂量后一个月。而且克罗米芬还具有许多副作用，包括视力模糊、腹部不适、男性乳房发育症、睾丸肿瘤、血管舒缩性潮热、恶心和头痛。此外，其它研究提示，克罗米芬具有遗传毒性作用和肿瘤增强作用。这些观察的净结果是，就男性中用于治疗睾酮缺乏的长期疗法而言，具有30％至50％的顺式异构体的目前形式的克罗米芬是不可接受的。已经证实，口服施用克罗米芬的反式异构体，即恩氯米芬，可有效地治疗男性继发性性腺功能减退症及无排卵的女性不育症等众多障碍。目前，恩氯米芬的制备主要从克罗米芬拆分得到，已报道的克罗米芬化学拆分方法有：(1)us3848030实施例31和32公开使用消旋1,1'-联二萘酚磷酸酯(bpa)作为拆分剂、使用甲醇作为拆分溶剂，拆分后游离可分别得到恩氯米芬和珠氯米芬。(2)e.m.dolginova,g.m.kadatskii等人在synthesisandbiologicalstudyofthecis-andtrans-isomersofclomiphenecitrateandsomeintermediatesofitssynthesis.一文中，采用物理结晶的方法获得了纯度相对较高(98％)的反式异构体恩氯米芬，但是此种方法拆分效率低，拆分时间长且需重复拆分多次，操作过程复杂，不适合于工业化生产。因此，寻找一种拆分效率高、拆分产品纯度高，且适用于工业化生产的恩氯米芬的制备方法具有重要的意义。技术实现要素：本发明提供了一种恩氯米芬的制备方法，所述方法包括：(1)克罗米芬或其盐、消旋联萘酚磷酸酯于混合溶剂中反应，得到固体形式的恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物，所述的混合溶剂为含有醚类溶剂的醇类溶剂；(2)将固体形式的恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物经游离反应制得恩氯米芬。其中，步骤(1)中的克罗米芬为珠氯米芬和恩氯米芬的顺反异构体混合物，恩氯米芬占约20％以上或30％以上或40％以上或45％以上或50％以上或60％以上或65％以上。步骤(1)中所述的“克罗米芬或其盐”中，盐的具体实例包括二氢柠檬酸盐、枸橼酸盐、乙酸盐、丙烯酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、葡萄糖酸盐、延胡索酸盐、乙醇酸盐、己酸盐、羟基苯甲酸盐、异丁酸盐、乳酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、偏磷酸盐、烟酸盐、双羟萘酸盐、苦味酸盐、丙酸盐、邻苯二甲酸盐、苯乙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐。在本发明的具体实施方式中，步骤(1)中克罗米芬或其盐与消旋联萘酚磷酸酯的摩尔比为1:1～1.5，优选1:1.05。在本发明的具体实施方式中，步骤(1)所述的含有醚类溶剂的醇类溶剂为醚类和醇类的混合溶剂。在本发明的具体实施方式中，步骤(1)所述的醚类溶剂选自石油醚、甲醚、乙醚、甲乙醚、正丙醚、叔丁基甲醚、异丙醚、乙二醇二甲醚，优选石油醚、叔丁基甲醚。在本发明的具体实施方式中，步骤(1)所述的醇类溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇，优选甲醇、乙醇。在本发明的优选实施方式中，所述醚类和醇类的混合溶剂选自石油醚和甲醇、叔丁基甲醚和乙醇、异丙醚和乙醇、乙二醇二甲醚和乙醇、正丙醚和甲醇。在本发明的具体实施方式中，步骤(1)所述的混合溶剂中醚类溶剂和醇类溶剂的体积比为1:1-2，优选1:1.2-1.5。在本发明的具体实施方式中，步骤(1)中克罗米芬或其盐(以克罗米芬游离形式计算重量)与混合溶剂的比例选自1g:5-20ml，优选1g:10-16ml，最优选1g:13-16ml，具体的例如1g:13.6ml、1g:14ml、1g:15ml、1g:15.5ml。在本发明的具体实施方式中，步骤(1)的反应温度为室温至使用溶剂的回流温度，具体选自20-80℃或30-40℃或25-30℃。在本发明的具体实施方式中，步骤(1)反应时间选自20分钟至20小时，优选2小时至4小时。在本发明的具体实施方式中，步骤(1)得到固体形式的恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物通常经过从反应溶液中析出固体的过程，所述过程通常在室温或更低的温度下进行，例如-10℃至室温或者-10-20℃，优选0-10℃。步骤(1)得到固体形式的恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物还可进一步精制以得到纯度更高的复合物，例如通过重结晶的方法。具体方法为：将所获得的恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物，于水与醇的混合溶剂中进行打浆或重结晶；所述醇选自甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇；水与醇的体积比为1:1-2，优选1:1.2-1.5，最优选1:1.25；恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物与水与醇的混合溶剂比例为1g:5-15ml，优选1g:8ml-14ml。打浆或重结晶的温度为室温至混合溶剂回流温度，优选50℃至混合溶剂回流温度；打浆或重结晶的时间为2-8小时，优选4-5小时；析出固体的过程在室温或更低的温度下进行，例如-10℃至室温或者-10-20℃，优选0-10℃。步骤(2)所述的游离反应具体为：固体形式的恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物(包括上面描述的恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物精制品)溶解于水与醇的混合溶剂中，无机碱调节ph至10-11，有机溶剂萃取，水洗，干燥浓缩，得恩氯米芬。其中，所述醇选自甲醇、乙醇、或异丙醇，优选乙醇。所述水与醇的混合溶剂中，醇的体积分数选自5％-30％，优选5％-20％，最优选10％-15％例如12.5％。所述恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物与混合溶剂的比例选自1g:10-20ml，优选1g:12ml-15ml。所述无机碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾，优选氢氧化钠。所述有机溶剂选自二氯甲烷、乙酸乙酯或叔丁基甲醚，优选叔丁基甲醚。本发明进一步提供一种固体形式的恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物的制备方法，包括将克罗米芬或其盐、消旋联萘酚磷酸酯于混合溶剂中反应，所述的混合溶剂为含有醚类溶剂的醇类溶剂。其中，克罗米芬为珠氯米芬和恩氯米芬的顺反异构体混合物，恩氯米芬占约20％以上或30％以上或40％以上或45％以上或50％以上或60％以上或65％以上。所述的“克罗米芬或其盐”中，盐的具体实例包括二氢柠檬酸盐、枸橼酸盐、乙酸盐、丙烯酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、葡萄糖酸盐、延胡索酸盐、乙醇酸盐、己酸盐、羟基苯甲酸盐、异丁酸盐、乳酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、偏磷酸盐、烟酸盐、双羟萘酸盐、苦味酸盐、丙酸盐、邻苯二甲酸盐、苯乙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐。在本发明的具体实施方式中，克罗米芬或其盐与消旋联萘酚磷酸酯的摩尔比为1:1～1.5，优选1:1.05。在本发明的具体实施方式中，所述的含有醚类溶剂的醇类溶剂为醚类和醇类的混合溶剂。在本发明的具体实施方式中，所述的醚类溶剂选自石油醚、甲醚、乙醚、甲乙醚、正丙醚、叔丁基甲醚、异丙醚、乙二醇二甲醚，优选石油醚、叔丁基甲醚。在本发明的具体实施方式中，所述的醇类溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇，优选甲醇、乙醇。在本发明的优选实施方式中，所述醚类和醇类的混合溶剂选自石油醚和甲醇、叔丁基甲醚和乙醇、异丙醚和乙醇、乙二醇二甲醚和乙醇、正丙醚和甲醇。在本发明的具体实施方式中，所述的混合溶剂中醚类溶剂和醇类溶剂的体积比为1:1-2，优选1:1.2-1.5。在本发明的具体实施方式中，克罗米芬或其盐(以克罗米芬游离形式计算重量)与混合溶剂的比例选自1g:5-20ml，优选1g:10-16ml，最优选1g:13-16ml，具体的例如1g:13.6ml、1g:14ml、1g:15ml、1g:15.5ml。在本发明的具体实施方式中，反应温度为室温至使用溶剂的回流温度，具体选自20-80℃或30-40℃或25-30℃。在本发明的具体实施方式中，反应时间选自20分钟至20小时，优选2小时至4小时。在本发明的具体实施方式中，得到固体形式的恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物通常经过从反应溶液中析出固体的过程，所述过程通常在室温或更低的温度下进行，例如-10℃至室温或者-10-20℃，优选0-10℃。同时，得到固体形式的恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物还可进一步精制以得到纯度更高的复合物，例如通过重结晶的方法。具体方法为：将所获得的恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物，于水与醇的混合溶剂中进行打浆或重结晶；所述醇选自甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇；水与醇的体积比为1:1-2，优选1:1.2-1.5，最优选1:1.25；恩氯米芬与联萘酚磷酸酯复合物与水与醇的混合溶剂比例为1g:5-15ml，优选1g:8ml-14ml。打浆或重结晶的温度为室温至混合溶剂回流温度，优选50℃至混合溶剂回流温度；打浆或重结晶的时间为2-8小时，优选4-5小时；析出固体的过程在室温或更低的温度下进行，例如-10℃至室温或者-10-20℃，优选0-10℃。本发明提供的恩氯米芬的制备方法，通过使用含有醚类溶剂的醇类溶剂作为拆分溶剂对克罗米芬或其盐顺反异构体混合物进行拆分，恩氯米芬与拆分剂可形成固体复合物，从而直接从拆分溶剂中析出，同时，改善了反应体系的流动性，拆分收率高，拆分产品纯度达到95％以上，一次精制后产品纯度达到99％以上。此外，该制备方法操作简单，拆分剂和拆分溶剂易于回收套用，整个拆分过程收率高、成本低、环境污染小，具有较好的工业应用前景。具体实施方式以下实施例对本发明技术方案作进一步非限制性的详细说明。它们不应该被认为是对本发明范围的限制，而只是本发明的示例性说明和典型代表。本发明hplc检测条件为：仪器：thermou3000高效液相色谱仪色谱柱：thermohypersilgoldc4(250*4.6mm5μm)流动相a：0.1％二乙胺，磷酸调ph＝6.2流动相b：乙腈检测波长：233nm流速：1.0ml/min柱温：30度浓度：1.0mg/ml溶解溶剂：30％乙腈/水进样量：5μl洗脱梯度：时间(min)a(％)b(％)0901025307035307035.19010429010本发明中使用的溶剂、试剂和原料等均为市售化学纯或分析纯产品。实施例1：克罗米芬顺反异构体混合物的制备将n，n-二乙基-2-[4-(1,2-二苯基乙烯基)苯氧基]乙胺盐酸盐(59.8g,含量92％)溶解于二氯甲烷730ml中，一次性加入n-氯代丁二酰亚胺20.35g后加热至回流避光反应6小时。hplc监测原料反应完全，hplc中顺式峰面积比为24.50％，反式峰面积比为61.26％，将反应液用过量的2％氢氧化钠水溶液436ml洗涤二次，水洗，饱和食盐水洗，干燥浓缩后得到克罗米芬顺反异构体混合物50.0g，纯度85.76％，粗收率78.2％。实施例2：克罗米芬枸橼酸盐顺反异构体混合物的制备将实施例1中得到的克罗米芬顺反异构体混合物25.0g溶解在无水乙醇25ml中，加入无水柠檬酸12.18g,加完后升温至回流反应5分钟，自然降温直至室温20℃后无固体析出，冰浴冷却后继续搅拌半小时，析出白色粘稠固体，加入叔丁基甲醚50ml稀释后继续冰浴搅拌半小时，过滤，固体用少量叔丁基甲醚洗涤，干燥得克罗米芬枸橼酸盐30.8g,收率97.53％。实施例3：克罗米芬丙二酸盐顺反异构体混合物的制备参照实施例2的方法，制备相应的克罗米芬丙二酸盐顺反异构体混合物12.6g，收率93.7％。实施例4：克罗米芬马来酸盐顺反异构体混合物的制备参照实施例2的方法，制备相应的克罗米芬马来酸盐顺反异构体混合物12.8g，收率92.6％。实施例5：克罗米芬枸橼酸盐顺反异构体混合物拆分(1)将实施例2中克罗米芬枸橼酸盐顺反异构体混合物18.5g(hplc中顺式峰面积比为25.18％，反式峰面积比为68.93％)分散于含90ml叔丁基甲醚和108ml乙醇的混合溶剂中，加热至回流之后，分批加入1,1'-联二萘酚磷酸酯11.31g，加完后自然降温至30℃至35℃后慢速搅拌3小时。反应结束后，冰浴冷却至0℃，析晶搅拌0.5小时，抽滤，得到1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物粗品16.5g，纯度为96.5％。拆分收率为98.9％(以粗品中实际含有的克罗米芬反式异构体计算)(2)将上述1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物粗品16.0g分散于含65ml水和80ml乙醇的混合溶剂中，加热至回流打浆5小时，自然冷却至室温，继续用冰浴冷却至0℃，然后在此温度下搅拌0.5小时，过滤，干燥，得到13.87g精制的1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物，纯度为99.3％。(3)将上述经过精制的1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物13.87g分散于含26ml乙醇与180ml水的混合溶剂中，分批缓慢加入固体氢氧化钠4.5g，调节ph至10-11，加完后搅拌0.5小时待固体全部溶解，然后加入叔丁基甲醚(70ml×3)萃取三次，合并有机相，有机相用少量2m氢氧化钠溶液洗涤，水洗，干燥，浓缩得到克罗米芬反式异构体，即恩氯米芬纯品7.3g，收率96％，纯度99.5％以上。(4)将按步骤(1)所述方法得到的未经精制的1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物粗品2.0g分散于含3.8ml乙醇与26ml水的混合溶剂中，分批缓慢加入固体氢氧化钠0.65g，调节ph至10-11，加完后搅拌0.5小时待固体全部溶解，然后加入叔丁基甲醚(10ml×3)萃取三次，合并有机相，有机相用少量2m氢氧化钠溶液洗涤，水洗，干燥，浓缩得到克罗米芬反式异构体，即恩氯米芬纯品1.0g，收率95％，纯度96％以上。实施例6：克罗米芬丙二酸盐顺反异构体混合物拆分(1)将克罗米芬丙二酸盐顺反异构体混合物12.6g(hplc中顺式峰面积比为25.39％，反式峰面积比为66.12％)分散于异丙醚63ml与乙醇87ml中，加热至回流之后，分批加入1,1'-联二萘酚磷酸酯9.0g(1.05eq)，加完后自然降温至30℃至35℃后慢速搅拌3小时。反应结束后，冰浴冷却至0℃，析晶搅拌0.5小时，抽滤，得到1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物粗品12.0g，纯度为95.2％。拆分收率为92.8％(以粗品中实际含有的克罗米芬反式异构体计算)(2)将上述1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物粗品12.0g分散于含48ml水和60ml乙醇的混合溶剂中，加热至回流打浆5小时，自然冷却至室温，继续用冰浴冷却至0℃，然后在此温度下搅拌0.5小时，过滤，干燥，得到11.1g精制的1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体复合物，纯度为99.5％。实施例7：克罗米芬马来酸盐顺反异构体混合物拆分(1)将克罗米芬马来酸盐顺反异构体混合物12.8g(hplc中顺式峰面积比为24.17％，反式峰面积比为70.25％)分散于乙二醇二甲醚72ml与乙醇87ml中，室温下(25℃)分批加入1,1'-联二萘酚磷酸酯8.97g(1.05eq)，加完后室温(25℃)慢速搅拌3小时。反应结束后，冰浴冷却至0℃，析晶搅拌0.5小时，抽滤，得到1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物粗品12.8g，纯度为95.8％。拆分收率为94.5％(以粗品中实际含有的克罗米芬反式异构体计算)(2)将上述1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物粗品12.8g分散于含51ml水和64ml乙醇的混合溶剂中，加热至回流打浆5小时，自然冷却至室温，继续用冰浴冷却至0℃，然后在此温度下搅拌0.5小时，过滤，干燥，得到12g精制的1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物，纯度为99.6％。实施例8：克罗米芬枸橼酸盐顺反异构体混合物的拆分(1)克罗米芬枸橼酸盐顺反异构体混合物7.0g，hplc测得顺式峰面积比为51.4％，反式峰面积比为49.6％。(2)将上述克罗米芬枸橼酸盐顺反异构体混合物7.0g分散于含39ml石油醚和56ml甲醇的混合溶剂中，将溶液加热至回流之后，分批加入1,1'-联二萘酚磷酸酯6.12g，加完后自然降温至25℃至30℃，然后于此温度下慢速搅拌4小时。反应结束后，将反应液冰浴冷却至0℃，析晶搅拌1小时，抽滤，得到1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物粗品3.3g，纯度为96.9％。拆分收率为73.5％(以粗品中实际含有的克罗米芬反式异构体计算)(3)将上述1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物粗品3.3g分散于含20ml水和25ml乙醇的混合溶剂中，加热至回流打浆5小时，自然冷却至室温，继续用冰浴冷却至0℃，然后在此温度下搅拌0.5小时，过滤，干燥，得到2.6g精制的1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物，纯度为99.6％。(4)将上述精制的1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物2.6g分散于含5.8ml乙醇与25ml水的混合溶剂中，分批缓慢加入固体氢氧化钠867mg，调节ph至10-11，加完后搅拌0.5小时待固体全部溶解，然后加入叔丁基甲醚(10ml×3)萃取三次，合并有机相，有机相用少量2m氢氧化钠溶液洗涤，水洗，干燥，浓缩得到克罗米芬反式异构体，即恩氯米芬纯品1.4g，收率97％，纯度99.5％以上。实施例9：克罗米芬顺反异构体混合物的拆分(1)克罗米芬顺反异构体混合物5.0g，hplc测得顺式峰面积比为68.3％，反式峰面积比为29.8％。(2)将上述克罗米芬顺反异构体混合物5.0g分散于含30ml正丙醚和40ml甲醇的混合溶剂中，将溶液加热至回流之后，分批加入1,1'-联二萘酚磷酸酯4.5g，加完后自然降温至25℃至30℃，然后于此温度下慢速搅拌8小时。反应结束后，将反应液冰浴冷却至0℃，析晶搅拌3小时，抽滤，得到1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物粗品2.1g，纯度为96.1％。拆分收率为72.8％(以粗品中实际含有的克罗米芬反式异构体计算)(3)将上述1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物粗品2.1g分散于含13ml水和16ml乙醇的混合溶剂中，加热至回流打浆5小时，自然冷却至室温，继续用冰浴冷却至0℃，然后在此温度下搅拌0.5小时，过滤，干燥，得到1.7g精制的1,1'-联二萘酚磷酸酯与克罗米芬反式异构体的复合物，纯度为99.5％。当前第1页12