本发明属于生物组织培养技术领域,尤其是一种培养基及其用于培养观赏凤梨继代苗的方法。
背景技术:
植物离体保存种质资源是将植物外植体在无菌环境下进行组织培养保存,可克服常规田间保存法的缺点,不占用土地、节省贮存空间、免去日常管理、便于运输和交流等。目前国内外对观赏凤梨的种质保存多采用了离体保存方法,但是在组织培养保存种质的过程中,由于培养基营养耗尽、水分蒸发,每隔一段时间,要将培养物及时转移接种到新培养基中,以保证培养物正常生长。观赏凤梨组培苗一般3个月左右继代一次,需要花费人力、物力,同时由于培养材料长期受外源激素的刺激,变异几率的发生随着继代次数的增加而越大。随着离体培养技术的全面展开,以之为基础的限制生长法离体保存技术也得到了应用。限制生长保存法,即在组培苗继代保存过程中,通过调控培养物生长的外界条件,使材料生长降至最小限度,营养消耗减少,从而延长继代间隔时间,减少继代次数,既大大节省试管苗继代接种的工作量,又降低变异机率,保持种质的遗传稳定性。公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解,而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
技术实现要素:
针对现有技术的不足,本发明提供一种培养基及其用于培养观赏凤梨继代苗的方法,改变以前采用低温培养的保存方法,采用常规培养方法达到了延长观赏凤梨组培苗的保存周期。本发明是通过以下技术方案来实现的:一种培养基,包括:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+琼脂4.0g/L+马铃薯汁300g/L。本发明还提供了一种利用所述的培养基培养观赏凤梨继代苗的方法,包括以下步骤:(1)制备延缓继代培养基:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+琼脂4.0g/L+马铃薯汁300g/L,培养基灭菌前调节至pH5.8-6.0;(2)将凤梨组培苗接入延缓培养基中,在25±3℃,光照2000Lx,光照时间12-14h/d的培养条件下保存;(3)待发现延缓培养基接近干枯或者需要重新扩繁时直接转接到新的培养基即可。与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:1.本发明的培养基可以将凤梨组培苗的继代间隔时间由3个月延长到18-24个月,大大的减少了继代接种的工作量,降低了组培苗变异率,节省了生产成本。2.本发明的培养基可应用于观赏凤梨组培苗种质保存,简单、方便、节约、有效,为种质资源保存提供了新途径。3.本发明的培养方法中条件和正常的凤梨继代、壮苗、生根培养条件相同,不需要低温保存,降低了能耗同时没有空间限制方法步骤更为简单,可以规模化的保存应用。具体实施方式下面结合实施例对本发明的具体实施方式进行详细描述,但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。除非另有其它明确表示,否则在整个说明书和权利要求书中,术语“包括”或其变换如“包含”或“包括有”等等将被理解为包括所陈述的元件或组成部分,而并未排除其它元件或其它组成部分。实施例1:一种培养基,包括:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+琼脂4.0g/L+马铃薯汁300g/L。一种利用所述的培养基培养观赏凤梨继代苗的方法,包括以下步骤:(1)制备延缓继代培养基:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+琼脂4.0g/L+马铃薯汁300g/L,培养基灭菌前调节至pH5.8;(2)将凤梨组培苗接入延缓培养基中,在温度25±3℃,光照2000Lx,光照时间12h/d的培养条件下保存;(3)待发现延缓培养基接近干枯或者需要重新扩繁时直接转接到新的培养基即可。实施例2:一种培养基,包括:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+琼脂4.0g/L+马铃薯汁300g/L。一种利用所述的培养基培养观赏凤梨继代苗的方法,包括以下步骤:(1)制备延缓继代培养基:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+琼脂4.0g/L+马铃薯汁300g/L,培养基灭菌前调节至pH6.0;(2)将凤梨组培苗接入延缓培养基中,在温度25±3℃,光照2000Lx,光照时间14h/d的培养条件下保存;(3)待发现延缓培养基接近干枯或者需要重新扩繁时直接转接到新的培养基即可。实施例3:一种培养基,包括:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+琼脂4.0g/L+马铃薯汁300g/L。一种利用所述的培养基培养观赏凤梨继代苗的方法,包括以下步骤:(1)制备延缓继代培养基:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+琼脂4.0g/L+马铃薯汁300g/L,培养基灭菌前调节至pH5.9;(2)将凤梨组培苗接入延缓培养基中,在温度25±3℃,光照2000Lx,光照时间13h/d的培养条件下保存;(3)待发现延缓培养基接近干枯或者需要重新扩繁时直接转接到新的培养基即可。分别采用实施例1-3中所述的培养方法对观赏凤梨继代苗在金花茶扦插繁育中进行培养,并对继代苗的存活率、增殖数等性能进行测定,同时设置对照,对照是采用普通继代培养基,其它条件相同,测定结果见表1。表1本发明的方法培养观赏凤梨继代苗的性能测定从表1可以看出,采用本发明的方法在延缓培养基上的凤梨继代苗可以保持在18-24个月不用更换培养基,存活率在95%以上,增殖数在20左右;而使用普通继代培养基在保存了18-24个月以后,存活率仅有4%,增殖数5在。与其他观赏植物在低温条件下继代苗保存的效果大致相同。综上所述,本发明的培养基可以将凤梨组培苗的继代间隔时间由3个月延长到18-24个月,大大的减少了继代接种的工作量,降低了组培苗变异率,节省了生产成本。该培养基可应用于观赏凤梨组培苗种质保存,简单、方便、节约、有效,为种质资源保存提供了新途径。前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式,并且很显然,根据上述教导,可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用,从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。