截短的轮状病毒VP4蛋白及其用途的制作方法

文档序号:11803082阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种截短的轮状病毒VP4蛋白或其变体,其与野生型轮状病毒VP4蛋白相比,N端截短了1-64个氨基酸(例如5-64个氨基酸),并且C端终止于野生型轮状病毒VP4蛋白的下述位置:与SEQ ID NO:40的氨基酸位置276-497中的任一位置相对应的位置;

优选地,与野生型轮状病毒VP4蛋白相比,该截短的轮状病毒VP4蛋白的N端截短了1-5个,5-21个,21-25个或25-64个氨基酸;并且C端终止于所述野生型轮状病毒VP4蛋白的下述位置:与SEQ ID NO:40的氨基酸位置276-497(例如氨基酸位置281-497、291-497、301-497、311-497、321-497、331-497、341-497、351-497、361-497、371-497、381-497、391-497、401-497、411-497、421-497、431-497、441-497、451-497、461-497、471-497、476-497、482-497、487-497、或492-497)中的任一位置相对应的位置;

优选地,与野生型轮状病毒VP4蛋白相比,该截短的轮状病毒VP4蛋白的N端截短了1个、5个、21个、25个或64个氨基酸,并且C端终止于野生型轮状病毒VP4蛋白的下述位置:与SEQ ID NO:40的氨基酸位置281、291、301、311、321、331、341、351、361、371、381、391、401、411、421、431、441、451、461、471、476、482、487、492或497相对应的位置;

优选地,与野生型轮状病毒VP4蛋白相比,该截短的轮状病毒VP4蛋白的N端截短了25个氨基酸且C端终止于下述位置:与SEQ ID NO:40的氨基酸位置331、351、381、411、441、461、471、476、482、487、492或497相对应的位置;或者,该截短的轮状病毒VP4蛋白的N端截短了1个、5个、21个、25个或64个氨基酸且C端终止于下述位置:与SEQ ID NO:40的氨基酸位置476相对应的位置;

优选地,所述野生型轮状病毒VP4蛋白是来源于轮状病毒LLR株、SA11株、EDIM株的VP4蛋白,或者是来源于P[4]、P[6]、或P[8]基因型轮状病毒的VP4蛋白;

优选地,所述野生型轮状病毒VP4蛋白具有选自下列的氨基酸序列:SEQ ID NO:40和87-91;

优选地,所述截短的轮状病毒VP4蛋白具有选自下列的氨基酸序列:SEQ ID NO:2-5和10-39。

2.一种分离的核酸,其编码权利要求1的截短的轮状病毒VP4蛋白或其变体。

3.包含权利要求2的分离的核酸的载体。

4.包含权利要求2的分离的核酸或权利要求3的载体的宿主细胞。

5.一种多聚体,其包含或者由权利要求1的截短的轮状病毒VP4蛋白或其变体组成。

6.一种组合物,其包含权利要求1的截短的轮状病毒VP4蛋白或其变体,或权利要求2的分离的核酸,或权利要求3的载体,或权利要求4的宿主细胞,或权利要求5的多聚体。

7.一种药物组合物(例如疫苗),其包含权利要求1的截短的轮状病毒VP4蛋白或其变体或者权利要求5的多聚体,任选地还包含药学可接受的载体和/或赋形剂,

优选地,所述药物组合物还包含佐剂,例如铝佐剂;

优选地,所述截短蛋白或其变体或者所述多聚体以预防或治疗轮状病毒感染或由轮状病毒感染所导致的疾病的有效量存在;

优选地,所述药物组合物还包含另外的活性成分;

优选地,所述另外的活性成分能够预防或治疗轮状病毒感染或由轮状病毒感染所导致的疾病。

8.制备权利要求1的截短的轮状病毒VP4蛋白或其变体的方法,其包括,在允许所述截短蛋白或其变体表达的条件下,培养权利要求4的宿主细胞;和,回收所表达的截短蛋白或其变体,

优选地,所述方法包括步骤:利用大肠杆菌来表达所述截短蛋白或其变体,然后将大肠杆菌裂解,并从裂解液中纯化获得所述截短蛋白或其变体,优选地,所述纯化包括层析(例如两步层析法)。

9.一种制备疫苗的方法,其包括将权利要求1的截短的轮状病毒VP4蛋白或其变体或者权利要求5的多聚体与药学可接受的载体和/或赋形剂混合,任选地还混合佐剂例如铝佐剂,和/或另外的活性成分,例如能够预防或治疗轮状病毒感染或由轮状病毒感染所导致的疾病的另外的活性成分。

10.一种预防或治疗轮状病毒感染或由轮状病毒感染所导致的疾病的方法,其包括将预防或治疗有效量的权利要求1的截短的轮状病毒VP4蛋白或其变体,或权利要求5的多聚体,或权利要求7的药物组合物施用给受试者,

优选地,所述由轮状病毒感染所导致的疾病是轮状病毒性胃肠炎和腹泻;

优选地,所述受试者是哺乳动物,例如小鼠和人。

11.权利要求1的截短的轮状病毒VP4蛋白或其变体或者权利要求5的多聚体在制备药物组合物(例如疫苗)中的用途,所述药物组合物(例如疫苗)用于在受试者中预防或治疗轮状病毒感染或由轮状病毒感染所导致的疾病,

优选地,所述由轮状病毒感染所导致的疾病是轮状病毒性胃肠炎和腹泻;

优选地,所述受试者是哺乳动物,例如小鼠和人。

12.权利要求1的截短的轮状病毒VP4蛋白或其变体或者权利要求5的多聚体,其用于在受试者中预防或治疗轮状病毒感染或由轮状病毒感染所导致的疾病,

优选地,所述由轮状病毒感染所导致的疾病是轮状病毒性胃肠炎和腹泻;

优选地,所述受试者是哺乳动物,例如小鼠和人。

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