本发明涉及一种2-氨甲基嘧啶修饰的香豆素衍生物，它们的制备方法，含有其的药物组合物及其用于制备抗炎药物的用途。
背景技术：
抗炎药有两大类：一类是甾体抗炎药，即肾上腺皮质所分泌的糖皮质激素氢化可的松及其人工合成的衍生物。另一类是非甾体抗炎药如阿司匹林、保泰松等。
甾体类抗炎药其化学本质是天然或人工合成的糖皮质激素。1949年hench等人首先用可的松治疗关节炎、风湿病等，虽发现其具有强大抗炎作用，但其副作用严重，尤其在大剂量应用时，不仅可能产生依赖性，而且能引起肾上腺皮质功能衰退。现在更常用的非甾体类抗炎药都有各自抗炎或是解热镇痛的作用特点，并且大都在一定程度上减轻了不良反应，但其副作用依旧明显，特别是胃肠道的毒性反应，人们希望能研制出不良反应小的抗炎的药物。
香豆素(coumarin)是一类具有苯并α-吡喃酮母核的天然产物，广泛存在于植物界,同时也是cox/5-lox双重抑制剂。文献(参见chens.naturalproductstriggeringbiologicaltargetseareviewoftheanti-inflammatoryphytochemicalstargetingthearachidonicacidpathwayinallergyasthmaandrheumatoidarthritis.currdrugtargets,2011,12:288～301.以及kontogiorgisca,hadjipavlou-litinadj.synthesisandanti-inflammatoryactivityofcoumarinderivatives.jmedchem,2005,48:6400-6408.)中曾公开报道过香豆素显示良好的抗炎活性。
嘧啶类化合物的抗炎活性和作为环氧合酶(cox)抑制剂一直是研究的重点(参见carolinec,catherilinem.dualinhibitionofcyclooxygenase-2(cox-2)and5-lipoxygenase(5-lox)asenewstrategytoprovidesafernon-steroidalanti-inflammatorydrugs.europeanjournalofmedicinalchemistry,2003,38:645～659.以及laufersa,augustinj,dannhardtg,etal.(6,7-diaryldihydropyrrolizin-5-yl)aceticacids,anovelclassofpotentdualinhibitorsofcyclooxygenaseand5-lipoxygenase.jmedchem,1994,37(12):1894～1897.)。长期使用的nsaids可引起胃肠道溃疡，肝、肾功能损害等不良反应，因此，有必要研究开发更安全、不良反应少的抗炎药物，2-氨甲基嘧啶就是其中一个重要的研究方向。
发明人认识到，香豆素与2-氨甲基嘧啶都是具有多种活性的天然产物，氨基酸不仅具有结构多样性的支链而且能够改善化合物的药代动力学，氨基酸的引入可以增加水溶性。天然氨基酸被广泛用于改善药物的吸收和代谢。以苯丙二肽修饰后的7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸为母核，以氨基酸为连接臂，与具有较强抗炎活性的cox-2抑制剂2-氨甲基嘧啶进行偶联，对香豆素结构修饰，试图寻找新的具有更好活性的天然产物的衍生物。从结构的关联应当可以拓展到生物活性的关联。
技术实现要素：
一方面，本发明提供一种通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐：
其中：aa为氨基酸；n为0或1；r1、r3、r4、r5、r6、r7各自独立地选自氢、苄基、苯甲酰基、c1-10烷酰基、c1-10烷基、c1-10烷氧基、c6-14芳基或c5-14杂环基，其中所述烷基任选被c6-14芳基或c5-14杂芳基取代；和r2选自羟基。
特别地，本发明提供一种通式(ii)的化合物或其药学上可接受的盐：
其中aa为氨基酸；n为0或1。
在本发明的化合物或其药学上可接受的盐中，aa优选为甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、酪氨酸、丝氨酸、色氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、蛋氨酸、精氨酸或赖氨酸。
本发明的典型化合物或其药学上可接受的盐如下所示：
另一方面，本发明提供一种通式(i)的化合物的制备方法，其包括下列步骤：
1)2,4-二羟基苯甲醛在哌啶催化下与丙二酸二乙酯缩合生成7-羟基香豆素-3-羧酸乙酯；
2)在hcl存在下，7-羟基香豆素-3-羧酸乙酯在水中加热回流生成7-羟基香豆素-3-羧酸；
3)7-羟基香豆素-3-羧酸与苯丙氨酰苯丙氨酸-obzl偶联得到7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨基酸苄酯；
4)7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸苄酯在钯碳的催化下氢解生成7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸；
5)叔丁氧酰氨基酸与2-氨甲基嘧啶偶联得到叔丁氧酰氨基酰-2-氨甲基嘧啶；
6)在氯化氢/乙酸乙酯溶液中加入叔丁氧酰氨基酰-2-氨甲基嘧啶，脱去叔丁氧羰基，得到通式(iii)的n-氨基酰-2-氨甲基嘧啶；
7)通式(iii)的n-氨基酰-2-氨甲基嘧啶与通式(iv)的7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸偶联得到通式(i)的7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酰-2-氨甲基嘧啶；
8)7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸与l-氨基酸苄酯偶联得到7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酸苄酯；
9)7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酸苄酯在钯碳的催化下氢解生成通式(v)的7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酸；
10)通式(v)的7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酸与通式(vi)的2-氨甲基嘧啶偶联得到通式(i)的7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酰-2-氨甲基嘧啶；
其中aa、n、r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7如上对通式(i)所定义。
优选地，所述制备方法中的aa为甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、酪氨酸、丝氨酸、色氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、蛋氨酸、精氨酸或赖氨酸；r1、r3、r4、r6、r7、各自独立地选自氢；r2选自羟基；和n为0或1。
再一方面，本发明提供一种药物组合物，其含有治疗有效量的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体或辅料。
又一方面，本发明提供一种通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐或含有其的药物组合物在制备抗炎药物中的用途。本发明通过二甲苯诱导的小鼠耳朵肿胀模型评价本发明的化合物10a-n,13a-c的抗炎作用。
本发明的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐可以通过多种途径施用给人或者其他哺乳动物，例如口服、静脉注射、肌肉注射、腹膜内注射、皮下注射等。
本发明的通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐可以与合适的药学上可接受的赋形剂或载体制成本领域技术人员所公知的各种剂型，如片剂、胶囊、乳剂、混悬剂等。
本发明化合物的优选给药方式是口服。优选地，该药学制品以独立的剂量单元形式。在该种形式中，制品被分成合适大小的剂量单元，该单元包含预期剂量的活性化合物，例如，对于其目的来说有效的量。
除非有相反陈述，否则下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义。
“烷基”指饱和的脂族烃基团，优选含有1至10个碳原子，更优选含有1至6个碳原子。非限制性示例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基或2,3-二甲基丁基等。
“芳基”指6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，具有共轭的π电子体系的多环(即其带有相邻对碳原子的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，非限制性示例包含：
“杂芳基”指包含1至4个杂原子，5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子包括氧、硫和氮。优选为5至10元。杂芳基优选为是5元或6元，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、n-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，非限制性示例包含：
以本发明化合物7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酰-2-氨甲基嘧啶10a-n的制备为例说明本发明化合物的制备方法，该化合物可以通过方案2制备，其包括以下步骤：在1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳二亚胺、n-羟基苯并三唑、n-甲基吗啉存在下在无水四氢呋喃中将叔丁氧酰氨基酸与2-氨甲基嘧啶偶联得到叔丁氧酰氨基酰-2-氨甲基嘧啶；在hcl/ea(4n)溶液中脱去叔丁氧羰基得到n-氨基酰基-2-氨甲基嘧啶；7-羟基香豆素-3-羧酸与苯丙氨酰苯丙氨酸苄酯偶联得到7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸苄酯；钯碳催化氢解脱除苄酯得到7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸；将n-氨基酰基-2-氨甲基嘧啶和7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸偶联，得到7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酰-2-氨甲基嘧啶10a-n。
方案1.氨基酰基-2-氨甲基嘧啶的合成路线
方案2.7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酰-2-氨甲基嘧啶10a-n的合成路线
以本发明化合物7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酰-2-氨甲基嘧啶13a-b的制备为例说明本发明化合物的制备方法，该化合物可以通过方案3制备，其包括以下步骤：7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸与l-氨基酸苄酯偶联得到7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酸苄酯；脱除苄酯得到7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酸；将其与2-氨甲基嘧啶缩合得到7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酰-2-氨甲基嘧啶13a-b。
方案3.7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰氨基酰-2-氨甲基嘧啶13a-b的合成路线
具体实施方式
以下通过具体实施例说明本发明。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。
核磁共振仪：avanceii300mhznmr,bruker公司；avanceii500mhznmr,bruker公司。
质谱仪：micromassquattromicrotmapi,waters公司；tracemssystem质谱仪,thermofinnigan公司。
红外光谱仪：nicoletis5,thermofisher公司。
旋光仪：autopolivautomaticpolarimeter,rudolphresearchanalytical公司。
薄层层析硅胶：gf254,青岛海洋化工有限公司。
柱层析硅胶：zcx-11,200-300目,青岛海洋化工有限公司。
本发明实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照原料或商品制造厂商所建议的条件。未注明具体来源的试剂，为市场购买的常规试剂。
制备例17-羟基香豆素-3-羧酸乙酯6的制备
在90℃温度，将2,4-二羟基苯甲醛(5g，36.2mmol)和丙二酸二乙酯(0.70ml，4.00mmol)溶于95％乙醇(200ml)中，加入哌啶(0.4ml，4mmol)，反应液变为棕色，回流8h。冷却，将反应混合物过滤，少量冷乙醇洗，得标题化合物6(7.66g，32.7mmol)为淡黄色固体，产率91％。esi-msm/z233(m-1)。
制备例27-羟基香豆素-3-羧酸7的制备
将7-羟基香豆素-3-甲酸乙酯(2.00g，8.55mmol)置于250ml的茄瓶中，用水(20ml)作为溶剂，并加入浓盐酸(6ml)，90℃油浴下，搅拌，回流8h。冷却，过滤，适量水淋洗，得到化合物3(1.32g，6.41mmol)，为红棕色固体，产率为75％，esi-msm/z205(m-1)。
制备例3叔丁氧酰苷氨酰-2-氨甲基嘧啶3a的制备
将boc-g-oh(900mg，5.14mmol)溶于四氢呋喃50ml中，冰浴下，依次加入n-羟基苯并三唑(hobt)(763.7mg，5.66mmol),1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(edc·hcl)(1090mg，5.68mmol)，用n-甲基吗啉(nmm)，调ph值为8-9，反应30min，称取2-氨甲基嘧啶盐酸盐(824mg，5.66mmol)，置于50ml的烧杯中，加入少量的n,n-二甲基甲酰胺(dmf)使其溶解，并将溶液加入反应瓶中，用nmm调ph值至8，室温反应8小时。过滤，减压浓缩至干。得到的残余物用适量二氯甲烷溶解，置于250ml分液漏斗中，依次用饱和碳酸氢钠水溶液洗(30ml×3)、饱和氯化钠水溶液洗(30ml×3)、5％硫酸氢钾水溶液洗(30ml×3)、饱和氯化钠水溶液洗(30ml×3)、饱和碳酸氢钠水溶液洗(30ml×3)、饱和氯化钠水溶液洗(30ml×3)；有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干。柱层析(二氯甲烷：甲醇＝70：1)得标题化合物3a(889mg，3.34mmol)，为淡黄色油状物，产率为65％。esi-msm/z267(m+1)。
制备例4叔丁氧酰缬氨酰-2-氨甲基嘧啶3b的制备
按照制备例3的操作，由boc-v-oh(800mg，3.69mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(488mg，3.35mmol)，制得标题化合物3b(784mg，2.55mmol)，为淡黄色油状物，产率为76％，esi-msm/z309(m+1)。
制备例5叔丁氧酰亮氨酰-2-氨基甲基嘧啶3c的制备
按照制备例3的操作，由boc-l-oh(500mg，2.16mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(287mg，1.97mmol)，制得标题化合物3c(460mg，1.43mmol)，为淡黄色油状物，产率为70％，esi-msm/z323(m+1)。
制备例6叔丁氧酰异亮氨酰-2-氨基甲基嘧啶3d的制备
按照制备例3的操作，由boc-i-oh(500mg，2.16mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(287mg，1.97mmol)，制得标题化合物3d(431.6mg，1.34mmol)，为淡黄色油状物，产率为68％，esi-msm/z323(m+1)。
制备例7叔丁氧酰丝氨酰-2-氨基甲基嘧啶3e的制备
按照制备例3的操作，由boc-s-oh(500mg，2.44mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(427mg，2.93mmol)，制得标题化合物3e(382.6mg，1.29mmol)，为透明油状物，产率为53％，esi-msm/z297(m+1)。
制备例8丁氧酰苄酯天冬氨酰-2-氨甲基嘧啶3f的制备
按照制备例3的操作，由boc-d(obzl)-oh(1000mg，3.10mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(542mg，3.72mmol)，制得标题化合物3f(717.8mg，1.73mmol)，为无色油状物，产率为56％，esi-msm/z415(m+1)。
制备例9叔丁氧酰苄酯谷氨酰-2-氨甲基嘧啶3g的制备
按照制备例3的操作，由boc-e(obzl)-oh(500mg，1.48mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(237.6mg，1.63mmol)，制得标题化合物3g(374.6mg，0.88mmol)，为无色油状物，产率为59％，esi-msm/z451(m+23)。
制备例10叔丁氧酰蛋氨酰-2-氨甲基嘧啶3h的制备
按照制备例3的操作，由boc-m-oh(500mg，2.01mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(266mg，1.83mmol)，制得标题化合物3h(428.6mg，1.26mmol)，为无色油状物，产率为69％，esi-msm/z341(m+1)。
制备例11叔丁氧酰苏氨酰-2-氨甲基嘧啶3i的制备
按照制备例3的操作，由boc-t-oh(700mg，3.20mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(512mg，3.52mmol)，制得标题化合物3i(713mg，2.30mmol)，为无色油状物，产率为72％，esi-msm/z311(m+1)。
制备例12叔丁氧酰色氨酰-2-氨甲基嘧啶3j的制备
按照制备例3的操作，由boc-w-oh(500mg，1.64mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(217.7mg，1.50mmol)，制得标题化合物3j(461mg，1.17mmol)，为黄色固体，产率为78％，esi-msm/z396(m+1)。
制备例13叔丁氧酰丙氨酰-2-氨甲基嘧啶3k的制备
按照制备例3的操作，由boc-a-oh(900mg，4.76mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(630.3mg，4.33mmol)，制得标题化合物3k(860.6mg，3.07mmol)，为淡黄色油状物，产率为71％，esi-msm/z281(m+1)。
制备例14叔丁氧酰苯丙氨酰-2-氨甲基嘧啶3l的制备
按照制备例3的操作，由boc-f-oh(800mg，3.02mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(483.3mg，3.32mmol)，制得标题化合物3l(580.1mg，1.63mmol)，为淡黄色油状物，产率为54％，esi-msm/z357(m+1)。
制备例15叔丁氧酰苯丙氨酰-2-氨甲基嘧啶3m的制备
按照制备例3的操作，由boc-y-oh(800mg，2.85mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(455.8mg，3.13mmol)，制得标题化合物3m(529.3mg，1.42mmol)，为淡黄色油状物，产率为50％，esi-msm/z373(m+1)。
制备例167-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸苄酯8的制备
冰浴冷却条件下，boc-苯丙氨酰苯丙氨酸苄酯(5.00g，9.96mmol)溶于4nhcl/etoac(50ml)中，反应3小时，抽干，得到苯丙氨酰苯丙氨酸苄酯(3.92g，9.76mmol)，产率98％。将7-羟基香豆素-3-羧酸(1.60g，7.77mmol)溶于四氢呋喃50ml中，冰浴下，依次加入n-羟基苯并三唑(hobt)(1.15g，8.52mmol)，1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(edc·hcl)(1.64g，8.54mmol)，用n-甲基吗啉(nmm)，调ph＝8，反应0.5h，加入化合物苯丙氨酰苯丙氨酸苄酯(3.44g，8.55mmol)，滴加nmm，调ph值为8。室温反应9小时。过滤，减压浓缩至干。得到的残余物用适量乙酸乙酯溶解，置于250ml分液漏斗中，依次用饱和碳酸氢钠水溶液洗(30ml×3)、饱和氯化钠水溶液洗(30ml×3)、5％硫酸氢钾水溶液洗(30ml×3)、饱和氯化钠水溶液洗(30ml×3)、饱和碳酸氢钠水溶液洗(30ml×3)、饱和氯化钠水溶液洗(30ml×3)；有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干。柱层析(二氯甲烷：甲醇＝80：1)得标题化合物8(3.68g，6.21mmol)，为淡黄色固体，产率为80％,esi-msm/z589(m-1)。
制备例177-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸9的制备
在100ml茄瓶中加入7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸苄酯8(1.80g，3.05mmol)，加入30ml甲醇溶解，加入钯碳(pd/c)(0.18g)，抽真空后通入h2，tlc监测反应完全。将反应混合物过滤，滤液减压浓缩至干，得到目标化合9(1.37g，2.74mmol)，为淡黄色固体，计算产率90％。mp:147.6-148.1℃；[α]25d＝+13.8(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3278.87,1702.88,1613.80,1530.88,1452.54,1217.85；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ8.88(1h,d,j＝8.1hz,n-h),8.74(1h,s,ch),8.58(1h,d,j＝8.1hz,n-h),7.80(1h,d,j＝8.7hz,ar-h),7.10-7.30(10h,m,ar-h),6.90(1h,dd,j＝8.7,2.4hz,ar-h),6.81(1h,d,j＝2.1hz,ar-h),4.81(1h,m,ch),4.48(1h,m,ch),3.10(2h,m,ch2),2.90(2h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ173.2,170.6,161.3,156.8,148.9,137.8,137.3,132.6,129.8,129.6,128.7,128.5,126.9,114.9,113.3,111.5,102.2,53.9,53.8,38.5,37.1；esimsm/z499(m-1)；
hrms计算值:(c28h24n2o7-1),m/z(499.1500)；实测值,m/z(499.118)。
制备例187-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰精氨酸苄酯11a的制备
将7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(1000mg，2.00mmol)溶于四氢呋喃50ml中，冰浴下，依次加入n-羟基苯并三唑(hobt)(300mg，2.22mmol),1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(edc·hcl)(420mg，2.19mmol)，用n-甲基吗啉(nmm)，调ph值为8-9,反应30mins，加入r(no2)-obzl·tos(1030mg，2.20mmol)，用nmm调ph值至8，室温反应8小时。过滤，减压浓缩至干。得到的残余物用适量乙酸乙酯溶解，置于250ml分液漏斗中，依次用饱和碳酸氢钠水溶液洗(30ml×3)、饱和氯化钠水溶液洗(30ml×3)、5％硫酸氢钾水溶液洗(30ml×3)、饱和氯化钠水溶液洗(30ml×3)、饱和碳酸氢钠水溶液洗(30ml×3)、饱和氯化钠水溶液洗(30ml×3)；有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干。柱层析(二氯甲烷：甲醇＝70：1)得标题化合物11a(1010mg，1.30mmol)，为淡黄色固体，产率为65％。esi-msm/z776(m-1)。
制备例197-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰精氨酸苄酯11b的制备
按照制备例18的操作，由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(220mg，0.44mmol)和k(boc)-obzl(178mg，0.53mmol)，制得标题化合物11b(360mg，0.44mmol)，为白色固体，产率为63％。esi-msm/z820(m+1)。
制备例207-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰天冬氨酸双苄酯11c的制备
按照制备例18的操作，由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(500mg，1.00mmol)和d(obzl)2·tos(533.5mg，1.10mmol)，制得标题化合物11c(572.4mg，0.72mmol)，为淡黄色固体，产率为72％，esi-msm/z796(m+1)。
实施例17-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰苷氨酰-2-氨甲基嘧啶10a的制备
冰浴冷却条件下，叔丁氧酰苷氨酰-2-氨甲基嘧啶(125mg，0.47mmol)溶于4nhcl/etoac(10ml)中，反应完成，抽干,得到苷氨酰-2-氨甲基嘧啶(70mg，0.26mmol)。将7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(120mg，0.24mmol)溶于dmf中，冰浴下，依次加入n-羟基苯并三唑(hobt)(35.1mg，0.26mmol)，1-乙基-(二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(edc·hcl)(49.9mg，0.26mmol)，用n-甲基吗啉(nmm)，调ph＝8，反应0.5h，加入化合物苷氨酰-2-氨甲基嘧啶(70mg，0.26mmol)，滴加nmm，调ph值为8。室温反应9小时。过滤，减压浓缩至干。柱层析(二氯甲烷：甲醇＝30：1)得标题化合物10a(54.3mg，0.08mmol)，为淡黄色固体，产率为35％。mp:241.5-242.4℃；[α]25d＝-22.2(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3270.28,1696.71,1639.40,1563.33,1525.78,1215.99；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.15(1h,s,o-h),8.87(1h,d,j＝7.8hz,n-h),8.75(3h,m,ch),8.51(1h,d,j＝8.1hz,n-h),8.35(2h,m,n-h),7.79(1h,d,j＝8.7hz,ar-h),7.39(1h,t,j＝5.1hz,ch),7.10-7.28(10h,m,ar-h),6.88(1h,dd,j＝8.7,2.1hz,ar-h),6.80(1h,d,j＝2.1hz,ar-h),4.75(1h,m,ch),4.60(1h,m,ch),4.48(2h,s,ch2),3.84(2h,d,j＝2.4hz,ch2),3.08(2h,m,ch2),2.84(2h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.6,170.6,169.1,167.0,164.0,161.4,161.3,157.8,156.8,148.9,138.2,137.3,132.6,129.8,129.6,128.5,126.8,126.7,120.3,114.8,113.4,111.5,102.2,54.4,54.2,45.2,42.4,38.3,37.8；
esimsm/z647(m-1)；hrms计算值:(c35h32n6o7-1),m/z(647.2249)；实测值,m/z(647.1824)。
实施例27-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰缬氨酰-2-氨甲基嘧啶10b的制备
按照实施例1的操作，叔丁氧酰缬氨酰-2-氨甲基嘧啶(611mg，1.98mmol)在4nhcl/ea(20ml)中脱除boc保护基，得到缬氨酰-2-氨甲基嘧啶(371mg，1.78mmol)。由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(810mg，1.62mmol)和缬氨酰-2-氨甲基嘧啶缩合得到标题化合物10b(524.6mg，0.76mmol),为淡黄色固体，产率为47％。mp:217.7-218.4℃；[α]25d＝+20.4(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3275.31,1702.81,1667.45,1563.14,1526.19,1218.47；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.11(1h,brs,o-h),8.85(1h,d,j＝7.8hz,n-h),8.74(3h,m,ch),8.43(2h,m,n-h),8.04(1h,d,j＝8.7hz,n-h),7.80(1h,d,j＝8.7hz,ar-h),7.39(1h,t,j＝4.8hz,ch),7.10-7.32(10h,m,ar-h),6.87(1h,dd,j＝8.4,2.1hz,ar-h),6.78(1h,d,j＝1.8hz,ar-h),4.73(2h,m,ch),4.49(2h,m,ch2),4.33(1h,m,ch),3.07(2h,m,ch2),2.87(2h,m,ch2),2.06(1h,m,ch),0.89(6h,t,j＝15hz,ch3)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.4,171.3,170.4,167.2,164.3,161.3,157.7,156.8,148.9,138.2,137.3,132.6,129.9,129.7,128.4,126.8,126.6,120.3,114.9,113.4,111.5,102.3,58.2,54.2,54.1,45.4,38.4,38.0,31.2,19.7,18.5；
esimsm/z689(m-1)；hrms计算值:(c38h38n6o7-1),m/z(689.2718)；实测值,m/z(689.2266)。
实施例37-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰亮氨酰-2-氨甲基嘧啶10c的制备
按照实施例1的操作，叔丁氧酰亮氨酰-2-氨甲基嘧啶(708mg，2.20mmol)在4nhcl/ea(20ml)中脱除boc保护基，得到亮氨酰-2-氨甲基嘧啶(439mg，1.98mmol)。由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(900mg，1.80mmol)和亮氨酰-2-氨甲基嘧啶，缩合得到标题化合物10c(544mg，0.77mmol)，为淡黄色固体，产率为43％。mp:235.4-236.9℃；[α]25d＝+2.57(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3266.18,1694.82,1634.88,1562.98,1529.23,1215.25；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.09(1h,brs,o-h),8.85(1h,d,j＝8.1hz,n-h),8.74(3h,m,ch),8.44(1h,d,j＝8.4hz,n-h),8.30(1h,t,j＝5.4hz,n-h),8.18(1h,d,j＝8.1hz,n-h),7.79(1h,d,j＝8.4hz,ar-h),7.39(1h,t,j＝5.1hz,ch),7.09-7.28(10h,m,ar-h),6.87(1h,dd,j＝8.7,2.1hz,ar-h),6.79(1h,d,j＝2.1hz,ar-h),4.75(1h,m,ch),4.62(1h,m,ch),4.45(3h,m,ch,ch2),3.09(2h,m,ch2),2.84(2h,m,ch2),1.67(1h,m,ch),1.53(2h,m,ch2),0.90(6h,t,j＝6.9hz,ch3)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ172.3,171.2,170.5,167.1,164.3,161.4,161.3,157.8,156.8,148.8,138.2,137.4,132.5,129.8,129.6,128.4,126.8,126.6,120.3,114.9,113.4,111.5,102.3,54.2,54.1,51.6,45.4,38.4,38.0,24.6,23.5,22.2；
esimsm/z703(m-1)；hrms计算值:(c39h40n6o7-1),m/z(703.2875)；实测值,m/z(703.2429)。
实施例47-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰异亮氨酰-2-氨甲基嘧啶10d的制备
按照实施例1的操作，叔丁氧酰异亮氨酰-2-氨甲基嘧啶(250mg，0.78mmol)在4nhcl/ea(20ml)中脱除boc保护基，得到异亮氨酰-2-氨甲基嘧啶(155mg，0.70mmol)。由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(320mg，0.64mmol)和异亮氨酰-2-氨甲基嘧啶缩合得到标题化合物10d(184.5mg，0.26mmol)，为淡黄色固体，产率为41％。mp:236.5-236.9℃；[α]25d＝+9.59(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3268.98,1688.06,1669.67,1562.48,1525.92,1215.48；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.09(1h,brs,o-h),8.86(1h,d,j＝7.8hz,n-h),8.74(3h,m,ch,ch,ch),8.46(2h,m,n-h),8.04(1h,d,j＝9.0hz,n-h),7.80(1h,d,j＝8.4,hz,ar-h),7.39(1h,t,j＝2.4hz,ch),7.10-7.31(10h,m,ar-h),6.87(1h,dd,j＝8.4,2.4hz,ar-h),6.79(1h,d,j＝2.1hz,ar-h),4.73(2h,m,ch),4.46(3h,m,ch,ch2),3.08(2h,m,ch2),2.88(2h,m,ch2),1.82(1h,m,ch),1.50(1h,m,ch2),1.13(1h,m,ch2),0.90(3h,d,j＝6.6hz,ch3),0.84(3h,t,j＝7.2hz,ch3)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.4,171.3,170.4,167.2,164.3,161.3,161.2,157.7,156.8,148.9,138.2,137.3,132.6,129.9,129.7,128.4,126.8,126.6,120.3,114.9,113.3,111.5,102.2,57.4,54.1,54.0,45.3,38.4,38.0,37.4,24.6,15.9,11.7；
esimsm/z703(m-1)；hrms计算值:(c39h40n6o7-1),m/z(703.2875)；实测值,m/z(703.2457)。
实施例57-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰丝氨酰-2-氨基甲基嘧啶10e的制备
按照实施例1的操作，叔丁氧酰丝氨酰-2-氨甲基嘧啶(300mg，1.01mmol)在4nhcl/ea(20ml)中脱除boc保护基，得到丝氨酰-2-氨甲基嘧啶(174.8mg，0.89mmol)。由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(405mg，0.81mmol)和丝氨酰-2-氨甲基嘧啶缩合得到标题化合物10e(202mg，0.30mmol)，为淡黄色固体，产率为37％。mp:239.5-240.1℃；[α]25d＝+8.29(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3270.66,1700.84,1661.14,1563.96,1526.81,1217.81；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ8.86(1h,d,j＝8.1hz,n-h),8.71(3h,m,ch,ch,ch),8.46(2h,d,j＝8.4hz,n-h),8.30(1h,t,j＝5.7hz,n-h),8.25(1h,d,j＝8.1hz,n-h),7.79(1h,d,j＝8.7hz,ar-h),7.41(1h,t,j＝5.1hz,ar-h),7.09-7.32(10h,m,ar-h),6.86(1h,dd,j＝8.4,2.1hz,ar-h),6.77(1h,d,j＝2.1hz,ar-h),5.04(1h,brs,o-h),4.72(2h,m,ch),4.47(3h,m,ch,ch2),3.65(2h,m,ch2),3.11(2h,m,ch2),2.84(2h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.6,170.5,166.8,164.6,161.4,157.8,156.8,148.8,138.3,137.4,132.6,129.8,129.7,128.4,126.8,126.6,120.4,115.0,113.1,111.4,102.3,62.3,55.7,54.1,45.4,38.4,38.0；esimsm/z677(m-1)；
hrms计算值:(c36h34n6o8–1),m/z(677.2354)；实测值,m/z(677.1905)。
实施例67-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰天冬氨酰苄酯-2-氨甲基嘧啶10f的制备
按照实施例1的操作，叔丁氧酰天冬氨酰苄酯-2-氨甲基嘧啶(650mg，1.57mmol)在4nhcl/ea(20ml)中脱除boc保护基，得到天冬氨酰苄酯-2-氨甲基嘧啶(429mg，1.36mmol)。由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(618mg，1.24mmol)和天冬氨酰苄酯-2-氨甲基嘧啶缩合得到10f(403mg，0.51mmol)，为淡黄色固体，产率为41％。mp:222.7–224.2℃；[α]25d＝-17.6(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3270.08,1703.29,1671.74,1615.14,1602.71,1215.83；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ8.86(1h,d,j＝7.8hz,n-h),8.73(3h,m,ch,ch,ch),8.50(2h,m,n-h),8.21(1h,t,j＝5.4hz,n-h),7.78(1h,d,j＝8.7hz,ar-h),7.09-7.40(17h,m,ch,ar-h),6.87(1h,dd,j＝8.4,2.1hz,ar-h),6.79(1h,d,j＝2.1hz,ar-h),5.10(2h,s,ch2),4.80(2h,m,ch),4.55(3h,m,ch,ch2),3.08(2h,m,ch2),2.89(3h,m,ch2),2.67(1h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.5,170.6,170.4,166.7,164.0,161.4,157.8,156.8,148.9,138.1,137.4,136.4,132.6,129.8,129.6,128.8,128.5,128.4,128.3,126.8,126.7,120.4,114.8,113.4,111.5,102.2,66.2,54.3,54.1,49.7,45.3,38.4,37.8,36.6；
esimsm/z795(m-1)；hrms计算值:(c44h40n6o9-1),m/z(795.2773)；实测值,m/z(795.2308)。
实施例77-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰谷氨酰苄酯-2-氨甲基嘧啶10g的制备
按照实施例1的操作，叔丁氧酰谷氨酰苄酯-2-氨甲基嘧啶(590mg，1.38mmol)在4nhcl/ea(20ml)中脱除boc保护基，得到谷氨酰苄酯-2-氨甲基嘧啶(398mg，1.21mmol)。由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(550mg，1.10mmol)和谷氨酰苄酯-2-氨甲基嘧啶缩合得到标题化合物10g(329mg，0.41mmol)，为淡黄色固体，产率为37％。mp:240.7-242.2℃；[α]25d＝-9.82(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3266.08,1695.83,1635.69,1562.86,1527.10,1214.67；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.11(1h,brs,o-h),8.87(1h,d,j＝7.8hz,n-h),8.71(3h,m,ch,ch,ch),8.48(1h,d,j＝8.4hz,n-h),8.41(1h,t,j＝5.7hz,n-h),8.23(1h,d,j＝7.8hz,n-h),7.79(1h,d,j＝8.7hz,ar-h),7.08-7.40(16h,m,ch,ar-h),6.87(1h,dd,j＝8.4,2.1hz,ar-h),6.79(1h,d,j＝2.1hz,ar-h),5.09(2h,s,ch2),4.75(1h,m,ch),4.62(2h,m,ch),4.45(2h,m,ch2),3.07(2h,m,ch2),3.05(2h,m,ch2),2.50(2h,重叠,ch2),1.98(2h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ172.8,171.4,171.3,170.6,167.0,164.3,161.4,161.3,157.8,156.8,148.9,138.2,137.3,136.6,132.6,129.8,129.6,128.9,128.4,126.8,126.7,120.3,114.9,113.3,111.5,102.2,66.0,54.2,54.1,52.3,45.2,38.4,37.8,30.4,28.0；
esi-msm/z809(m-1)；hrms计算值:(c45h42n6o9-1),m/z(809.2929)；实测值,m/z(809.2427)。
实施例87-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰蛋氨酰-2-氨甲基嘧啶10h的制备
按照实施例1的操作，叔丁氧酰蛋氨酰-2-氨甲基嘧啶(560mg，1.65mmol)在4nhcl/ea(20ml)中脱除boc保护基，得到蛋氨酰-2-氨甲基嘧啶(352mg，1.46mmol)。由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(663.6mg，1.33mmol)和蛋氨酰-2-氨甲基嘧啶缩合得到标题化合物10h(368mg，0.51mmol)，为淡黄色固体，产率为40％。mp:238.1-239.3℃；[α]25d＝+0.36(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3266.19,1634.48,1614.87,1601.27,1563.17,1525.88,1215.68；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.09(1h,s,o-h),8.87(1h,d,j＝7.8hz,n-h),8.76(3h,m,ch,ch,ch),8.48(1h,d,j＝8.1hz,n-h),8.36(1h,t,j＝5.7hz,n-h),8.24(1h,d,j＝7.8hz,n-h),7.80(1h,d,j＝8.7hz,ch),7.40(1h,t,j＝5.1hz,ar-h),7.10-7.29(10h,m,ar-h),6.88(1h,dd,j＝8.7,2.4hz,ar-h),6.79(1h,d,j＝2.1hz,ar-h),4.74(1h,m,ch),4.52(4h,m,ch,ch2),3.08(2h,m,ch2),2.85(2h,m,ch2),2.54(2h,m,ch2),2.05(3h,s,ch3),1.88(2h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.4,171.0,170.6,167.0,166.9,164.3,161.4,161.3,157.8,157.7,156.8,148.8,138.2,138.1,137.3,132.6,129.8,129.6,128.5,126.8,126.7,120.4,114.9,113.4,111.5,102.3,54.3,54.2,52.2,45.3,38.5,37.6,32.5,30.0,5.1；
esimsm/z721(m-1)；hrms计算值:(c38h38n6o7s-1),m/z(721.2440)；实测值,m/z(724.2076)。
实施例97-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰苏氨酰-2-氨甲基嘧啶10i的制备
按照实施例1的操作，叔丁氧酰苏氨酰-2-氨甲基嘧啶(450mg，1.45mmol)在4nhcl/ea(20ml)中脱除boc保护基，得到苏氨酰-2-氨甲基嘧啶(274mg，1.31mmol)。由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(595mg，1.19mmol)和苏氨酰-2-氨甲基嘧啶缩合得到标题化合物10i(263.1mg，0.38mmol)，为淡黄色固体，产率为32％。mp:221.9-223.5℃；[α]25d＝+13.1(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3273.58,1635.66,1614.79,1601.20,1563.61,1524.80,1215.60；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.11(1h,brs,o-h),8.88(1h,d,j＝7.8hz,n-h),8.75(3h,m,ch,ch,ch),8.50(1h,d,j＝8.4hz,n-h),8.49(1h,t,j＝5.4hz,n-h),8.30(1h,d,j＝7.2hz,n-h),7.81(1h,d,j＝8.7hz,ar-h),7.40(1h,t,j＝4.8hz,ch),7.11-7.29(10h,m,ar-h),6.87(1h,dd,j＝8.7,2.4hz,ar-h),6.79(1h,d,j＝2.1hz,ar-h),4.75(1h,m,ch),4.61(1h,m,ch),4.48(3h,m,ch,ch2),3.08(2h,m,ch2),2.84(2h,m,ch2),1.31(3h,d,j＝6.9hz,ch3)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.9,170.6,170.5,166.8,164.3,161.3,157.8,156.8,148.9,138.4,137.3,132.6,129.9,129.7,128.4,126.8,126.6,120.4,114.9,113.3,111.5,102.2,67.1,58.7,54.3,54.0,45.3,38.4,37.9,20.1；
esimsm/z691(m-1)；hrms计算值:(c37h36n6o8-1),m/z(691.2511)；实测值,m/z(691.2072)。
实施例107-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰色氨酰-2-氨甲基嘧啶10j的制备
按照实施例1的操作，叔丁氧酰色氨酰-2-氨甲基嘧啶(420mg，1.06mmol)在4nhcl/ea(20ml)中脱除boc保护基，得到色氨酰-2-氨甲基嘧啶(282mg，0.96mmol)。由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(435mg，0.87mmol)和色氨酰-2-氨甲基嘧啶缩合得到标题化合物10j(216mg，0.28mmol)，为淡黄色固体，产率为32％。mp:227.1-228.3℃；[α]25d＝-0.67(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3265.76,1692.94,1635.84,1563.23,1215.55；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.09(1h,brs,o-h),10.82(1h,s,n-h),8.84(1h,d,j＝8.1hz,n-h),8.74(3h,m,ch,ch,ch),8.40(2h,m,n-h),8.25(1h,d,j＝7.8hz,n-h),7.77(1h,d,j＝8.4hz,ar-h),7.61(1h,d,j＝7.8hz,ar-h),7.40(1h,t,j＝4.8hz,ch),7.32(1h,d,j＝7.8hz,ar-h),6.94-7.24(14h,m,ar-h),6.87(1h,dd,j＝8.7,2.1hz,ar-h),6.79(1h,d,j＝1.8hz,ar-h),4.75(2h,m,ch),4.62(1h,m,ch),4.46(2h,d,j＝6.6hz,ch2),3.20(1h,m,ch2),3.06(3h,m,ch2),2.83(2h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.7,171.3,170.5,167.0,164.3,161.4,161.3,157.8,156.8,148.9,138.2,137.4,136.5,132.6,129.8,129.7,128.4,127.9,126.8,126.6,124.1,121.2,120.3,118.8,118.6,114.9,113.4,111.7,111.5,110.3,102.3,54.3,54.2,53.9,45.4,38.3,38.1,28.4；
esimsm/z776(m-1)；hrms计算值:(c44h39n7o7-1),m/z实测值,m/z(776.2317)。
实施例117-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰丙氨酰-2-氨甲基嘧啶10k的制备
按照实施例1的操作，叔丁氧酰丙氨酰-2-氨甲基嘧啶(380mg，1.36mmol)在4nhcl/ea(20ml)中脱除boc保护基，得到丙氨酰-2-氨甲基嘧啶(220mg，1.22mmol)。由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(555mg，1.11mmol)和丙氨酰-2-氨甲基嘧啶缩合得到标题化合物10k(293.5mg，0.44mmol)，为淡黄色固体，产率为40％。mp:223.8–224.7℃；[α]25d＝+6.78(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3265.93,1694.58,1635.36,1563.05,1525.92,1215.18；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.13(1h,brs,o-h),8.88(1h,d,j＝7.8hz,n-h),8.75(3h,m,ch,ch,ch),8.51(1h,d,j＝8.4hz,n-h),8.35(1h,t,j＝6.3hz,n-h),8.30(1h,d,j＝7.5hz,n-h),7.81(1h,d,j＝8.7hz,ar-h),7.40(1h,t,j＝5.1hz,ch),7.11-7.29(10h,m,ar-h),6.87(1h,dd,j＝8.4,2.1hz,ar-h),6.79(1h,d,j＝1.8hz,ar-h),4.75(1h,m,ch),4.61(1h,m,ch),4.46(3h,m,ch,ch2),3.08(2h,m,ch2),2.85(2h,m,ch2),1.31(3h,d,j＝7.2hz,ch3)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ172.6,171.2,170.4,167.1,164.3,161.3,157.8,156.8,148.9,138.2,137.3,132.6,129.9,129.7,128.5,126.8,126.7,120.3,114.9,113.3,111.5,102.2,54.2,54.1,48.7,45.2,38.4,37.9,18.8；
esi-msm/z661(m-1)；hrms计算值:(c36h34n6o7-1),m/z(661.2405)；实测值,m/z(661.2121)。
实施例127-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰苯丙氨酰-2-氨甲基嘧啶10l的制备
按照实施例1的操作，叔丁氧酰苯丙氨酰-2-氨甲基嘧啶(290mg，0.81mmol)在4nhcl/ea(20ml)中脱除boc保护基，得到苯丙氨酰-2-氨甲基嘧啶(186mg，0.72mmol)。由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(325mg，0.65mmol)和苯丙氨酰-2-氨甲基嘧啶缩合得到标题化合物10l(191.6mg，0.26mmol)，为淡黄色固体，产率为40％。mp:246.5-247.1℃；[α]25d＝-1.47(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3264.24,1693.67,1636.54,1562.50,1530.72,1215.34；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.09(1h,s,o-h),8.84(1h,d,j＝8.1hz,n-h),8.75(3h,m,ch,ch,ch),8.47(1h,t,j＝5.7hz,n-h),8.35(1h,d,j＝8.4hz,n-h),8.26(1h,d,j＝8.1hz,n-h),7.79(1h,d,j＝8.7hz,ar-h),7.40(1h,t,j＝4.8hz,ch),7.10-7.30(15h,m,ar-h),6.87(1h,dd,j＝8.4,2.1hz,ar-h),6.79(1h,d,j＝1.8hz,ar-h),4.68(2h,m,ch),4.55(1h,m,ch,ch2),3.11(3h,m,ch2),2.82(3h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.4,171.3,170.4,167.0,164.3,161.4,161.3,157.8,156.8,148.9,138.2,138.1,137.4,132.6,129.8,129.7,128.5,128.4,126.8,126.7,126.6,120.4,114.9,113.3,111.5,102.2,54.4,54.2,54.0,45.4,38.4,38.2；
esimsm/z737(m-1)；hrms计算值:(c42h38n6o7-1),m/z(737.2718)；实测值,m/z(737.2253)。
实施例137-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰酪氨酰-2-氨甲基嘧啶10m的制备
按照实施例1的操作，叔丁氧酰酪氨酰-2-氨甲基嘧啶(500mg，1.34mmol)在4nhcl/ea(20ml)中脱除boc保护基，得到酪氨酰-2-氨甲基嘧啶(333mg，1.22mmol)。由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(554.5mg，1.11mmol)和酪氨酰-2-氨甲基嘧啶缩合得到标题化合物10m(208.7mg，0.28mmol)，为淡黄色固体，产率为25％。mp:250.5-251.1℃；[α]25d＝-8.93(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3265.33,1693.04,1637.10,1613.14,1563.55,1532.15,1513.09,1215.85；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.11(1h,brs,o-h),9.16(1h,brs,o-h),8.85(1h,d,j＝7.8hz,n-h),8.73(3h,m,ch,ch,ch),8.44(1h,t,j＝5.7hz,n-h),8.38(1h,d,j＝8.4hz,n-h),8.21(1h,d,j＝8.1hz,n-h),7.79(1h,d,j＝8.7hz,ar-h),7.40(1h,t,j＝4.8hz,ch),7.05-7.26(13h,m,ar-h),6.88(1h,dd,j＝8.7,2.1hz,ar-h),6.79(1h,d,j＝2.1hz,ar-h),6.64(2h,d,j＝8.4hz,ar-h),4.77(1h,m,ch),4.58(2h,m,ch),4.46(2h,m,ch2),3.02(3h,m,ch2),2.78(3h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.4,171.2,170.4,167.0,164.3,157.8,156.8,156.3,148.9,138.1,137.4,132.6,130.6,129.8,129.7,128.5,128.4,128.2,126.8,126.6,120.3,115.4,114.9,113.4,111.5,102.3,54.8,54.2,54.1,45.4,38.4,38.1,37.4；
esi-msm/z753(m-1)；hrms计算值:(c42h38n6o8-1),m/z(753.2667)；实测值,m/z(753.2216)。
实施例147-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰-2-氨甲基嘧啶10n的制备
按照实施例1的操作，由7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酸(800mg，1.60mmol)和2-氨甲基嘧啶盐酸盐(212mg，1.46mmol)，制得标题化合物10n(387mg，0.65mmol),淡黄色固体，产率为45％。mp:116.8-117.5℃；[α]25d＝+0.26(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3276.69,1701.56,1644.16,1614.44,1562.98,1525.60,1217.56；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.13(1h,s,oh),8.89(1h,d,j＝7.8hz,n-h),8.76(3h,m,ch,ch,ch),8.60(1h,t,j＝5.7hz,n-h),8.52(1h,d,j＝8.4hz,n-h),7.80(1h,d,j＝8.4hz,ar-h),7.04-7.42(11h,m,ch,ar-h),6.87(1h,dd,j＝8.4,2.1hz,ar-h),6.79(1h,d,j＝2.1,ar-h),4.85(1h,m,ch),4.67(1h,m,ch),4.52(2h,m,ch2),3.09(2h,m,ch2),2.85(2h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.4,170.5,167.1,164.3,161.4,161.3,157.8,156.8,148.8,138.2,137.4,132.6,129.9,129.8,129.7,128.5,126.8,126.6,120.3,114.9,113.4,111.5,102.3,54.3,54.2,45.4,38.4,38.1；
esi-msm/z590(m-1)；hrms计算值:(c33h29n5o6-1),m/z(590.2034)；实测值,m/z(590.1703)。
实施例157-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰精氨酰-2-氨基甲基嘧啶13a的制备
在100ml茄瓶中加入7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰精氨酸苄(370mg，0.48mmol)，加入1ml加入少量二氯甲烷使其溶解，再加入2ml加甲醇，加入钯碳(pd/c)(40mg)，抽真空后通入h2，tlc监测反应完全。将反应混合物过滤，滤液减压浓缩至干，得到7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰精氨酸(262mg，0.38mmol)。加入n,n-二甲基甲酰胺(dmf)(30ml)使其溶解，冰浴下，依次加入hobt(56.4mg，0.42mmol)，edc·hcl(80.6mg，0.42mmol)，用nmm调节ph值＝8，反应30分钟，加入2-氨甲基嘧啶盐酸盐(61.2mg，0.42mmol)，室温反应12小时。过滤，减压浓缩至干。柱层析(二氯甲烷：甲醇＝25：1)得标题化合物13a(112mg，0.14mmol)，淡黄色固体，产率为38％。mp:211.7-212.5℃；[α]25d＝+8.60(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3267.22,1633.27,1600.79,1563.87,1526.89,1215.29；
1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ11.10(1h,s,o-h),8.87(1h,d,j＝7.8hz,n-h),8.75(3h,m,ch,ch,ch),8.58(1h,brs,n-h),8.44(2h,m,n-h),8.25(1h,d,j＝8.1hz,n-h),7.81(1h,d,j＝8.4hz,ar-h),7.39(1h,t,j＝4.8hz,ch),7.12-7.28(10h,m,ar-h),6.87(1h,dd,j＝8.4,1.8hz,ar-h),6.80(1h,s,ar-h),4.76(1h,m,ch),4.61(1h,m,ch),4.46(3h,m,ch,ch2),3.18(2h,m,ch2),3.07(2h,m,ch2),2.85(2h,m,ch2),1.78(1h,m,ch2),1.61(3h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.8,171.4,170.6,167.0,164.3,161.4,161.3,157.8,156.8,148.9,138.2,137.3,132.6,129.8,129.6,128.5,126.8,126.7,120.3,114.9,113.4,111.5,102.3,54.3,54.1,52.7,45.3,38.4,37.9,30.0；
esi-msm/z791(m-1)；hrms计算值:(c39h40n10o9-1)m/z(791.2896)；实测值,m/z(791.2415)。
实施例167-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰赖氨酰-2-氨甲基嘧啶13b的制备
按照实施例14的操作，7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸苄酯(900mg，1.10mmol)在pd/c(5％)(90mg)的催化作用下氢解，得到7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸(681mg，0.94mmol)。与2-氨甲基嘧啶盐酸盐(150mg，1.03mmol)，缩合得到得中间体化合物(386mg，0.47mmol)，用4mol/lhcl/ea(7ml)脱除boc保护，得标题化合物13b(305mg，0.42mmol)白色固体，产率为41％。mp:218.3-218.8℃；[α]25d＝-12.9(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3263.76,1694.08,1636.35,1612.70,1527.83,1215.97；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ11.30(1h,brs,o-h),8.87(1h,d,j＝8.1hz,n-h),8.76(3h,m,ch,ch,ch),8.54(1h,d,j＝8.1hz,n-h),8.43(1h,t,j＝5.7hz,n-h),8.31(1h,d,j＝8.1hz,n-h),7.95(3h,s,nh3+),7.80(1h,d,j＝8.7hz,ar-h),7.41(1h,t,j＝4.8hz,ar-h),7.10-7.30(10h,m,ar-h),6.90(1h,dd,j＝8.7,1.8hz,ar-h),6.84(1h,d,j＝1.5hz,ar-h),4.51(5h,m,ch,ch2),3.12(2h,m,ch2),2.82(4h,m,ch2),1.78(1h,m,ch),1.50(3h,m,ch2),1.42(2h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.9,171.4,170.6,167.0,164.4,161.4,161.3,157.8,156.8,148.5,138.2,137.4,132.5,129.8,129.7,128.5,126.8,126.7,120.4,115.0,113.3,111.4,102.3,54.4,54.2,52.9,45.2,38.4,37.9,31.9,27.1,22.6；
esi-msm/z718(m-1)；hrms计算值:(c39h41n7o7-1),m/z(718.2984)；实测值,m/z(718.2503)。
实施例177-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰天冬氨酰双-2-氨甲基嘧啶13c的制备
按照实施例14的操作，7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰天冬氨酸双苄酯(450mg，0.57mmol)在pd/c(5％)(45mg)的催化作用下氢解，得到7-羟基香豆素-3-甲酰苯丙氨酰苯丙氨酰天冬氨酸(310mg，0.50mmol)。与2-氨甲基嘧啶盐酸盐(80.1mg，0.55mmol)，缩合得到标题化合物13c(115mg，0.14mmol)，淡黄色固体，产率为33％。mp:240.7-241.5℃；[α]25d＝-5.97(c＝0.1mg/100ml,dmf)；ir:3269.18,1639.69,1562.77,1527.17,1423.07,1216.56；
1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ8.86(1h,d,j＝7.8hz,n-h),8.74(5h,m,ch,ch,ch,ch,ch),8.52(2h,m,n-h),8.44(1h,d,j＝8.1hz,n-h),7.79(1h,d,j＝8.4hz,ar-h),7.38(2h,m,ch,ch),7.10-7.27(10h,m,ar-h),6.87(1h,dd,j＝8.4,2.1hz,ar-h),6.79(1h,d,j＝2.1,ar-h),4.75(2h,m,ch),4.53(5h,m,ch,ch2),3.09(2h,m,ch2),2.81(3h,m,ch2),2.60(1h,m,ch2)；
13cnmr(75mhz,dmso-d6)δ171.3,171.1,170.5,169.9,167.2,166.7,164.0,161.4,161.3,157.8,156.8,148.9,138.2,137.4,132.6,129.8,129.7,128.5,128.4,126.8,126.7,120.3,120.2,114.8,113.4,111.5,102.2,54.2,54.1,50.0,45.4,45.3,39.1,38.4,37.9；
esi-msm/z796(m-1)；hrms计算值:(c42h39n9o8-1),m/z(796.2838)；实测值,m/z(796.2346)。
实验例1小鼠耳二甲苯炎症模型实验
本发明的化合物均用含0.5％cmc-na的蒸馏水配制，给药剂量为0.1μmol/kg，给药方式为口服，阿司匹林(北京精华耀邦医药科技有限公司)为阳性对照，给药剂量为1.11mmol/kg，给药方式为口服。
选用21±3g的icr雄性小鼠(北京维通利华实验动物技术有限公司)，随机分为20组，每组12只，20组分别为cmc-na、阿司匹林、9、10a、10b、10c、10d、10e、10f、10g、10h、10i、10j、10k、10l、10m、10n、13a、13b、13c。30分钟后，抓取小鼠一侧，露出左耳，用移液枪吸取30μl二甲苯，沿内耳廓涂抹均匀。2小时后处死，剪下左右耳朵，用砸片器械将两只耳朵砸成一样大小的圆片。称重，计算两耳差值。肿胀度＝左耳重量–右耳重量，抗炎抑制率％＝(1-两耳差/右耳重)％。
表1二甲苯诱导的小鼠耳朵炎症抑制活性
所试化合物口服剂量＝0.1μmol/kg，阿司匹林剂量＝1.1mmol/kg；n＝12。
a与空白组(cmc-na)相比，p<0.01；
b与空白组(cmc-na)相比，p<0.05。
实验例2化合物10j抗炎活性与剂量的关系
动物实验方法同实验例1，受试化合物10j按0.1μmol/kg，0.01μmol/kg，和0.001μmol/kg的剂量给药，均采用灌胃单次给药。实验结果见表2。
表2不同剂量10j对小鼠耳肿胀的抑制作用
a阿司匹林＝阳性对照，cmc-na＝空白组，n＝12；
b与cmc-na组相比p<0.01；与0.01μmol/kg组相比p<0.05；
c与cmc-na组相比p<0.05。