一种大规模分离纯化亮丙瑞林(Leupeorelin)的方法与流程

文档序号:11803075阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种大规模分离纯化亮丙瑞林的方法,包括以下步骤:

1)样品处理:将亮丙瑞林粗品溶解在25%的乙腈水溶液中,超声处理,滤膜过滤,取滤液待用;

2)纯化:a、纯化条件:通过DAC-CXTH200制备动态轴向加压柱,流动相A为磷酸二氢钠缓冲溶液,用磷酸或氢氧化钠调pH;流动相B为乙腈,进行流动相梯度洗脱分离纯化,流速为700-1000ml/min,检测波长为220nm,分段收集目的峰;

b、纯化过程:将色谱柱用流动相A平衡,上样品溶液,线性梯度洗脱40min,收集目的峰;将分离纯化后纯度99%以上高浓度目的肽溶液于不超过40℃的水温下进行减压旋蒸浓缩,浓缩后至约40-50mg/ml后备用;

3)转盐:将步骤2)中得到的浓缩液经过反相动态轴向加压柱完成离子交换转成醋酸盐;具体过程为:将色谱柱用流动相A平衡后上样,醋酸铵水溶液冲洗柱子3个柱体积,每一个柱体积约8分钟;最后用占本次冲洗体积总量50%的质量百分浓度0.1%醋酸乙腈溶液,把样品冲洗下来;

4)样品终处理:收集转好醋酸盐的肽溶液进行减压旋蒸浓缩至40-50mg/ml,得到纯度99%以上产品,再经过冷冻干燥,得到粉末状产品,经检测合格即为最终产品。

2.根据权利要求1所述的一种大规模分离纯化亮丙瑞林的方法,其特征在于:步骤1)中亮丙瑞林粗品与乙腈溶液的质量体积比为1g/50ml。

3.根据权利要求1所述的一种大规模分离纯化亮丙瑞林的方法,其特征在于:所述的滤膜的孔径为0.4-0.5μm。

4.根据权利要求1所述的一种大规模分离纯化亮丙瑞林的方法,其特征在于:DAC-CXTH200制备动态轴向加压柱内装固定相为十八烷基硅烷键合硅胶的反相硅胶。

5.根据权利要求1所述的一种大规模分离纯化亮丙瑞林的方法,其特征在于:流动相A的磷酸二氢钠质量浓度为:0.012%~3.0%,pH值为2.5~4.5。

6.根据权利要求1所述的一种大规模分离纯化亮丙瑞林的方法,其特征在于:流动相A,其磷酸二氢钠的质量百分浓度为0.3%-0.6%,pH值为3.0-4.0。

7.根据权利要求1所述的一种大规模分离纯化亮丙瑞林的方法,其特征在于:步骤2)中的流动相梯度选择0到40分钟A:B由(85~75):(15~25)到(25~15):(75~85)。

8.根据权利要求1所述的一种大规模分离纯化亮丙瑞林的方法,其特征在于:步骤3)中反相动态轴向加压柱转盐所用到的流动相A为20~400mmol/L醋酸铵缓冲盐体系。

9.根据权利要求1所述的一种大规模分离纯化亮丙瑞林的方法,其特征在于:步骤2)中上样量为70-100g,步骤3)中上样量为120-200g。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1