1.一种猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测引物,其特征在于,所述引物的基因序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2。
2.一种猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测探针,其特征在于,所述探针基因序列为SEQ ID NO:3。
3.根据权利要求2所述的探针,其特征在于,所述探针的5’端标记荧光报告基团;所述探针的3’端标记荧光淬灭基团。
4.根据权利要求3所述的探针,其特征在于,所述荧光报告基团为FAM;所述荧光淬灭基团为BQ1。
5.一种猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测试剂盒,其特征在于,包含权利要求1所述的猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测引物、以及权利要求2~4任一项所述的猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测探针。
6.根据权利要求5所述的检测试剂盒,其特征在于,包括:
(1)反转录部分:
RT预混液1:随机引物和dNTP mix;
RT预混液2:5倍反转录缓冲液,RNA酶抑制剂,反转录酶,不含RNA酶的双蒸水;
(2)定量PCR部分:
定量PCR预混液:定量PCR缓冲液,Taq DNA聚合酶;引物SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和探针SEQ ID NO:3;双蒸水。
7.猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测引物、探针在荧光定量检测方法中的应用,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将待检测样品的RNA反转录的产物使用引物SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和探针SEQ ID NO:3进行实时荧光定量PCR扩增;
荧光定量PCR的反应程序为95℃、5秒;60℃、35秒,按此反应条件做40个循环,其中60℃、30秒收集荧光信号;
(2)结果判读。