本发明涉及医学检验
技术领域：
，特别涉及一种绿脓杆菌显色培养基及其应用。
背景技术：
：绿脓杆菌(P.aeruginosa)或称铜绿色假单胞菌，是一种致病力较低但抗药性强的杆菌。广泛存在于自然界，是伤口感染较常见的一种细菌。能引起化脓性病变。感染后因脓汁和渗出液等病料呈绿色，故名。绿脓杆菌(P.aeruginosa)属假单胞菌属(pseudomonas)，广泛分布于自然界及正常人皮肤、肠道和呼吸道，是临床上较常见的条件致病菌之一。绿脓杆菌为需氧菌，在普通培养基上易于生长，培养适宜温度为35度，PH值为7.2。普通琼脂形成光滑，微隆起，边缘整齐波状的中等大菌落。由于产生水溶性的绿脓素(呈蓝绿色)和荧光素(呈黄绿色)，故能渗入培养基内，使培养基变为黄绿色。数日后，培养基的绿色逐渐变深，菌落表面呈现金属光泽。普通肉汤均匀混浊，呈黄绿色。液体上部的细菌发育更为旺盛，于培养基的表面形成一层很厚的菌膜。但广泛使用有效抗生素后筛选出的变异株常丧失其合成能力。血液琼脂由于绿脓杆菌能产生绿脓酶，可将红细胞溶解，故菌落周围出现溶血环。但对于疾病诊断来说，上述培养基由于培养时间要48小时以上，存在严重的滞后性，灵敏度也较差。因此，提供一种能够快速培养绿脓杆菌的培养基至关重要。技术实现要素：本发明提供一种绿脓杆菌显色培养基及其应用，解决现有的培养基培养时间长、灵敏度较差的问题。为解决上述技术问题，本发明的技术方案为：一种绿脓杆菌显色培养基，是由下述组分组成：乙酰胺5～15g/L，氯化钠3～8g/L，磷酸氢二钾1.2～1.6g/L，磷酸二氢钾0.5～0.9g/L，氯化镁1.0～2.0g/L，硫酸钾5～15g/L，琼脂10～20g/L，酚红0.008～0.016g/L，卵磷脂0.5～1.5g/L，复合维生素B8～12mg/L，其余为去离子水，pH值7.2±0.2。其中，优选地，一种绿脓杆菌显色培养基，是由下述组分组成：乙酰胺8～12g/L，氯化钠4～6g/L，磷酸氢二钾1.3～1.5g/L，磷酸二氢钾0.6～0.8g/L，氯化镁1.2～1.8g/L，硫酸钾8～12g/L，琼脂12～18g/L，酚红0.010～0.014g/L，卵磷脂0.8～1.2g/L，复合维生素B9～11mg/L，其余为去离子水，pH值7.2±0.2。其中，优选地，一种绿脓杆菌显色培养基，是由下述组分组成：乙酰胺10g/L，氯化钠5g/L，磷酸氢二钾1.39g/L，磷酸二氢钾0.7310g/L，氯化镁1.5g/L，硫酸钾10g/L，琼脂15g/L，酚红0.012g/L，卵磷脂1g，复合维生素B10mg/L，其余为去离子水，pH值7.2±0.2。其中，优选地，所述复合维生素B是由重量比为(500～1000):(5～10):(100～200):(1000～2000):(10～20)的维生素B1、维生素B2、尼克酸、盐酸吡哆醇和叶酸组成。本发明并提供了一种绿脓杆菌显色培养基在检测绿脓杆菌中的应用。其中，优选地，该应用包括：称取绿脓杆菌显色培养基30～40g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min，待培养基冷至50℃倾注无菌平皿，凝固后备用；取增菌液划线接种于平板上，置36±1℃培养24h，绿脓杆菌菌落周围显示粉红色。本发明中，绿脓杆菌利用乙酰胺作为碳源，并分解乙酰胺产碱；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钾和磷酸二氢钾为缓冲剂，氯化镁和硫酸钾提供生长必要的离子，复合维生素B采用多种维生素进行组合对绿脓杆菌起到生长因子的作用，对其它杂菌起到有效的抑制作用，绿脓杆菌长的更好，有效地将绿脓杆菌与其它杂菌区分开来。琼脂是培养基的凝固剂；酚经为pH指示剂，绿脓杆分解乙酰胺后产生碱使酚红变色，灵敏度较高。本发明的有益效果：本发明的培养基与常规的培养基相比，能明显促进绿脓杆菌的生长，培养时间为24小时，有效地缩知了培养时间，.且采用酚红作为生长指示剂，灵敏度较高。具体实施方式下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例1本实施例提供一种绿脓杆菌显色培养基，是由下述组分组成：乙酰胺10g/L，氯化钠5g/L，磷酸氢二钾1.39g/L，磷酸二氢钾0.7310g/L，氯化镁1.5g/L，硫酸钾10g/L，琼脂15g/L，酚红0.012g/L，卵磷脂1g，复合维生素B10mg/L，其余为去离子水，pH值7.2±0.2。复合维生素B是由重量比为800:8:150:1500:15的维生素B1、维生素B2、尼克酸、盐酸吡哆醇和叶酸组成。上述培养基的使用方法：1.称取绿脓杆菌显色培养基30～40g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min，待培养基冷至50℃倾注无菌平皿，凝固后备用；2.取绿脓杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌增菌液划线分别接种于不同的平板上，置36±1℃培养24h。结果：菌种类别生长情况培养基颜色绿脓杆菌+++菌落周围培养基显粉红色大肠杆菌--不生长沙门氏菌++未变色金黄色葡萄球菌--不生产实施例2本实施例提供一种绿脓杆菌显色培养基，是由下述组分组成：乙酰胺5g/L，氯化钠8g/L，磷酸氢二钾1.2g/L，磷酸二氢钾0.9g/L，氯化镁1.0L，硫酸钾15g/L，琼脂10g/L，酚红0.016g/L，卵磷脂0.5g/L，复合维生素B12mg/L，其余为去离子水，pH值7.2±0.2。复合维生素B是由重量比为500:10:100:2000:10的维生素B1、维生素B2、尼克酸、盐酸吡哆醇和叶酸组成。上述培养基的使用方法：1.称取绿脓杆菌显色培养基30～40g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min，待培养基冷至50℃倾注无菌平皿，凝固后备用；2.取绿脓杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌增菌液划线分别接种于不同的平板上，置36±1℃培养24h。结果：菌种类别生长情况培养基颜色绿脓杆菌+++菌落周围培养基显粉红色大肠杆菌--不生长沙门氏菌++未变色金黄色葡萄球菌--不生产实施例3本实施例提供一种绿脓杆菌显色培养基，是由下述组分组成：乙酰胺15g/L，氯化钠3g/L，磷酸氢二钾1.6/L，磷酸二氢钾0.5g/L，氯化镁2.0g/L，硫酸钾5g/L，琼脂20g/L，酚红0.008g/L，卵磷脂1.5g/L，复合维生素B8mg/L，其余为去离子水，pH值7.2±0.2。复合维生素B是由重量比为1000:5:200:1000:20的维生素B1、维生素B2、尼克酸、盐酸吡哆醇和叶酸组成。上述培养基的使用方法：1.称取绿脓杆菌显色培养基30～40g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min，待培养基冷至50℃倾注无菌平皿，凝固后备用；2.取绿脓杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌增菌液划线分别接种于不同的平板上，置36±1℃培养24h。结果：实施例4本实施例提供一种绿脓杆菌显色培养基，是由下述组分组成：乙酰胺8g/L，氯化钠6g/L，磷酸氢二钾1.3g/L，磷酸二氢钾0.8g/L，氯化镁1.2g/L，硫酸钾12g/L，琼脂12g/L，酚红0.014g/L，卵磷脂0.8g/L，复合维生素B11mg/L，其余为去离子水，pH值7.2±0.2。复合维生素B是由重量比为600:8:120:1600:12的维生素B1、维生素B2、尼克酸、盐酸吡哆醇和叶酸组成。上述培养基的使用方法：1.称取绿脓杆菌显色培养基30～40g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min，待培养基冷至50℃倾注无菌平皿，凝固后备用；2.取绿脓杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌增菌液划线分别接种于不同的平板上，置36±1℃培养24h。结果：菌种类别生长情况培养基颜色绿脓杆菌+++菌落周围培养基显粉红色大肠杆菌--不生长沙门氏菌++未变色金黄色葡萄球菌--不生产实施例5本实施例提供一种绿脓杆菌显色培养基，是由下述组分组成：乙酰胺12g/L，氯化钠4g/L，磷酸氢二钾1.5g/L，磷酸二氢钾0.6g/L，氯化镁1.8g/L，硫酸钾8g/L，琼脂18g/L，酚红0.010g/L，卵磷脂1.2g/L，复合维生素B9mg/L，其余为去离子水，pH值7.2±0.2。复合维生素B是由重量比为600:6:180:1800:11的维生素B1、维生素B2、尼克酸、盐酸吡哆醇和叶酸组成。上述培养基的使用方法：1.称取绿脓杆菌显色培养基30～40g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min，待培养基冷至50℃倾注无菌平皿，凝固后备用；2.取绿脓杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌增菌液划线分别接种于不同的平板上，置36±1℃培养24h。结果：菌种类别生长情况培养基颜色绿脓杆菌+++菌落周围培养基显粉红色大肠杆菌--不生长沙门氏菌++未变色金黄色葡萄球菌--不生产以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页1 2 3