本发明涉及的是一种从荔枝提取物中制备含低聚体原花青素的方法，属于食品技术领域。
背景技术：
荔枝是无患子科植物荔枝的果实，果肉甜美多汁，味道鲜美，既可口又具有很高的营养价值。荔枝中含有大量的原花青素（procyangidins,pc），原花青素是植物界中广泛存在的一大类多酚类化合物的总称，自然界中的原花青素是由不同数量的儿茶素和表儿茶素结合而成的。按聚合度的大小，通常将2-4聚体称为低聚体（OPC），将5聚体及以上的称为高聚体（PPC）。其中最简单的原花青素是儿茶素、或表儿茶素、或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体，此外还有三聚体、四聚体甚至十聚体等。因其单体连接方式不同，可以分为A型（C2-O-C7或C2-O-C5连接）和B型（C4- C8或C4-C6连接）两种。
原花青素具有很强的抗氧化和清除自由基活性。据报道，其抗氧化能力是维E的50倍、维C的20倍，是迄今为止发现的最好的天然抗氧化剂之一。此外它还具有防癌抗癌，防治心血管疾病，抗高血糖，抗辐射，免疫调节，改善人体微循环及保护皮肤等多种功效，是欧美国家最受欢迎的植物药之一。经研究表明，对于聚合体而言，原花青素的抗氧化活性随着聚合度的升高而降低。高聚体的抗氧化活性远不及低聚体，且难以被人体吸收利用。因此，原花青素中单体及低聚体含量越高，价值就越高。
目前关于荔枝提取物的相关技术，只涉及了荔枝提取物的提取方法，尚未发现针对荔枝提取物中具体成分的提取。且目前只发现利用无机酸水解原花青素高聚体的相关研究，尚未发现利用有机酸水解原花青素高聚体的相关研究报道。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种从荔枝提取物中制备含低聚体原花青素的方法，针对荔枝提取物中的原花青素进行提取，以及降低原花青素中的聚合度。
为了解决上述技术问题，本发明采用了以下技术措施，一种从荔枝提取物中制备含低聚体原花青素的方法，主要包括下述步骤：。
一、提取：取新鲜荔枝原料为原料，按提取溶剂水与原料3:1-3的重量比，于80-90℃提取1-3小时，提取1-3次，得到提取液；
二、离心：将提取液放入离心机，经转速3000-5000r/min，离心5-30min提取得到离心提取液；
三、浓缩：离心提取液浓缩至20-60波美度，其中浓缩温度控制在50-65℃，真空度控制在0.09-0.1 MPa，得到离心提取浓缩液；
四、分离纯化：使用AB-8或LX-36大孔吸附树脂柱进行分离纯化，按树脂量与离心提取浓缩液1:1-2的比例，以1-2BV/h的速率上料；依次用纯净水、5-30%低碳醇以1-2BV/h速率进行杂质洗脱，至杂质洗脱收集液澄清；再用50-95%低碳醇以1-2BV/h速率进行多酚洗脱，其中多酚洗脱液收集量为离心提取浓缩液的3-5倍；
五、多酚洗脱液浓缩：将多酚洗脱液进行真空浓缩，温度控制在50-60℃，真空度控制在0.09-0.1 MPa，得到的多酚洗脱浓缩液水相体积为多酚洗脱液体积的1/5至1/8；
六、干燥：将多酚洗脱浓缩液进行喷雾干燥，其中进风温度控制在150-180℃，出风温度控制在50-70℃，得到纯化后干粉；
七、有机酸水解：首先经改良香草醛法测定水解原料中原花青素的质量浓度，将水解原料与有机酸溶液充分混匀，其中水解反应体系中每含有原花青素2.0-5.0mg的水解原料与有机酸溶液总体积为24-26ml，水解条件为避光水浴，水浴温度为40-70℃，水浴时间为15-45min，即水解得到含低聚体原花青素提取物；所述有机酸为柠檬酸、酒石酸、苹果酸、枸椽酸、抗坏血酸其中一种，柠檬酸优选，有机酸溶液浓度为5-30%；所述水解原料为提取液或离心提取液或离心提取浓缩液或多酚洗脱浓缩液或纯化后干粉；
所述新鲜荔枝原料指荔枝皮、荔枝核、荔枝叶、荔枝生理落果其中一种或者任意两种以上混合物。
所述低碳醇指乙醇、甲醇、丙醇、异丙醇等。
本发明利用有机酸对荔枝提取物中原花青素高聚体进行水解以提高提取物中原花青素低聚体含量。在本发明中，利用有机酸进行水解荔枝提取物，使得提取物中的原花青素平均聚合度下降13.0-33.8%，原花青素单体表儿茶素含量升高0.9-4.1%，原花青素低聚体A1含量升高14.5-22.6%，原花青素低聚体A2含量升高约30.7%，大大提高了荔枝提取物中单体及低聚体原花青素的含量，使得荔枝提取物中原花青素天然资源得到更充分的利用。
经有机酸水解后，提取物干粉中多酚含量为70%以上，原花青素平均聚合度小于2.0，原花青素单体表儿茶素含量为6.5%以上，原花青素低聚体A1含量为5.0%以上，原花青素低聚体A2含量为4.0%以上。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明的技术方案作进一步的说明。
实施例1
1、提取：将收集的新鲜荔枝皮、荔枝核、荔枝生理落果、荔枝叶清洗干净后破碎，按水与原料重量比3:1进行浸提，浸提至80℃开始计时，并保持80-90℃3个小时，提取1次，得到提取液；
2、离心：将提取液于低速离心机以转速为4000r/min，离心10min，得到离心提取液；
3、浓缩：将离心提取液真空浓缩至400BX，其中浓缩的温度控制在55-60℃，真空度控制在0.09-0.1MPa，得到400BX离心提取浓缩液；
4、分离纯化：利用AB-8大孔树脂，按树脂量与离心提取浓缩液1:1.5的比例，以2BV/h的速率上料；依次用纯净水、5%乙醇以1.6BV/h速率进行杂质洗脱，至收集液澄清；再用60%乙醇以1.6BV/h速率进行多酚洗脱，其中多酚洗脱液收集量为离心提取浓缩液的3-4倍；
5、多酚洗脱液浓缩：将收集的多酚洗脱液进行真空浓缩，浓缩温度在60℃，真空度在0.1 MPa；浓缩液水相体积浓缩至多酚洗脱液体积的1/5，得到多酚洗脱浓缩液；
6、柠檬酸水解多酚洗脱浓缩液：将多酚洗脱浓缩液经柠檬酸进行水解，其中水解体系为：5ml 多酚洗脱浓缩液加入20ml 15%柠檬酸水解液，于60℃水浴30min。
7、喷雾干燥：将柠檬酸水解后的多酚洗脱浓缩液在进风温度为170℃左右，出风温度为60℃左右的条件下进行喷雾干燥制得干粉。其中干粉多酚重量含量为70.08%，原花青素平均聚合度为1.40，表儿茶素EC重量含量为6.80%，原花青素A1重量含量为7.46%，原花青素A2重量含量为4.39%。
实施例2
1、提取：将收集的新鲜荔枝皮清洗干净后不破碎，按水与原料重量比3:1进行浸提，浸提至80℃开始计时，并保持80-90℃2个小时，提取2次，得到提取液；
2、离心：将提取液置于低速离心机以转速为3000r/min，离心5min；
3、浓缩：将提取液真空浓缩至200BX，其中浓缩的温度控制在50-60℃，真空度控制在0.09-0.1MPa，得到200BX的离心提取浓缩液；
4、酒石酸水解浓缩液：将离心提取浓缩液经酒石酸进行水解，其中水解体系为：2ml提取浓缩液加入23ml 5%酒石酸水解液，于40℃水浴45min，得到酒石酸水解浓缩液；
5、分离纯化：利用AB-8大孔树脂，按树脂量与酒石酸水解浓缩液量以1:1的比例，以2BV/h的速率上料；依次用纯净水、5%乙醇以1BV/h速率进行杂质洗脱，至收集液澄清；再用50%乙醇以1BV/h速率进行多酚洗脱，其中多酚洗脱液收集量为酒石酸水解浓缩液的3-4倍；
6、多酚洗脱液浓缩：将收集的多酚洗脱液进行真空浓缩，浓缩温度在60℃，真空度在0.1 Mpa，得到的多酚洗脱浓缩液水相体积为多酚洗脱液体积的1/8；
7、喷雾干燥：将浓缩液在进风温度为150℃左右，出风温度为50℃左右的条件下进行喷雾干燥制得干粉。其中干粉多酚重量含量为76.32%，原花青素平均聚合度为0.67，表儿茶素EC重量含量为15.76%，原花青素A1重量含量为5.79%，原花青素A2重量含量为4.76%。
实施例3
1、提取：将收集的新鲜荔枝叶清洗干净后不破碎捆绑，按水与原料重量比1:1进行浸提，浸提至80℃开始计时，并保持80-90℃ 1个小时，提取3次，得到提取液；
2、离心：将提取液于低速离心机以转速为5000r/min，离心30min，得到离心提取液；
3、浓缩：将离心提取液真空浓缩至600BX，其中浓缩的温度控制在55-65℃，真空度控制在0.09-0.1MPa，得到200BX离心提取浓缩液；
4、分离纯化：利用LX-36大孔树脂，按树脂量与离心提取浓缩液1：2的比例，以1BV/h的速率上料；依次用纯净水、30%乙醇以2BV/h速率进行杂质洗脱，至收集液澄清；再用95%乙醇以2BV/h速率进行多酚洗脱，其中多酚洗脱液收集量为料液量的3-5倍；
5、多酚洗脱液浓缩：将收集的多酚洗脱液进行真空浓缩，浓缩温度在50℃左右，真空度在0.09 MPa 左右，得到的多酚洗脱浓缩液水相体积为多酚收集液体积的1/6倍；
6、喷雾干燥：将多酚洗脱浓缩液在进风温度为180℃，出风温度为70℃左右的条件下进行喷雾干燥制得干粉；
7、苹果酸水解干粉：将提取物干粉经苹果酸进行水解，其中水解体系为：0.2g干粉+25ml的15%苹果酸水解液，于70℃水浴15min。水解后制得的干粉多酚重量含量为76.70%，原花青素平均聚合度为1.87，表儿茶素EC重量含量为7.23%，原花青素A1重量含量为5.04%，原花青素A2重量含量为4.08%。