一种盐酸戊乙奎醚中杂质的制备方法与流程

本发明涉及医药
技术领域：
，尤其涉及一种盐酸戊乙奎醚中杂质的制备方法。
背景技术：
：盐酸戊乙奎醚(PenehyclidineHydrochloride)，化学名为3-(2-环戊基-2-羟基-2苯基乙氧基)奎宁环烷盐酸盐，是1999年获得国家药品监督管理局批准(军事医学科学院)，后由成都力思特制药股份有限公司以商品名长托宁进行生产，用于有机磷毒物(农药)中毒急救治疗和中毒后期或胆碱酯酶(ChE)老化后维持阿托品化。化学结构式如(1)所示。本品系新型选择性抗胆碱药，能与M、N胆碱受体结合，抑制节后胆碱能神经支配的平滑肌与腺体生理功能，对抗乙酰胆碱和其它拟胆碱药物的毒蕈碱样及烟碱样作用，能透过血脑屏障，故同时具有较强、较全面的中枢和外周抗胆碱作用。本品对M受体具有明显选择性，即主要选择作用于M1、M3受体，而对M2受体的作用较弱或不明显，不阻断突触前膜M2受体调控神经末梢释放ACh的功能，稳定心率。同时，本品对N1、N2受体也有一定作用。本品能较好的对抗乙酰胆碱的作用，解除因体内大量释放乙酰胆碱，引起迷走神经高度兴奋所致的平滑肌痉挛；解除肺、脑微血管的持续痉挛引起的急性微循环功能障碍。同时，能较好地拮抗有机磷毒物(农药)中毒引起的中枢中毒症状，如惊厥、中枢呼吸循环衰竭和烦躁不安等；在外周也能较强地拮抗有机磷毒物(农药)中毒引起的毒蕈碱样中毒症状，如支气管平滑肌痉挛和分泌物增多、出汗、流涎、缩瞳和胃肠道平滑肌痉挛和收缩等。它还能增加呼吸频率和呼吸流量。本品抗小鼠和家兔的唾液分泌作用均比阿托品强，且家兔的ED50仅为0.03mg/kg，比阿托品强约17倍；本品可明显抑制小鼠唾液分泌及气管粘液分泌(p<0.001)作用强度要强于等剂量的阿托品注射液；肌注本品后，对麻醉家兔及清醒家兔的胃、小肠、结肠、胆囊痉挛性收缩的松驰作用均较阿托品强(P<0.05)，对膀胱痉挛性收缩的松驰作用明显强于阿托品(P<0.01)。长期毒性试验表明：本品0.68、3.38、13.50mg/kg(分别相当于人临床常用量的40、199、794倍)分别肌注于大鼠，本品0.015、0.9mg/kg(分别相当于人临床常用量的0.9、53倍)分别肌注于狗，每天1次，连续12周给药，除出现一些常见抗胆碱反应外，未见其它异常；一般生殖毒性试验表明：本品2.5、12.5、62.5ppm(分别相当于人用量的15、75、375倍)分别口服于雄鼠连续给药60天，雌鼠连续给药14天，除高剂量组对小鼠有一定的毒性外，本品对小鼠配子的发生、受胎能力、分娩和出生后F1代仔鼠生长发育未见明显影响，致突变试验为阴性，在相当于人用量300倍内未见致畸胎作用和胚胎毒性。经检索，盐酸戊乙奎醚的合成主要有两条路线：路线一：如(2)所示，以α-环戊基扁桃酸为起始原料，经还原得α-苯基-α-环戊基-α-羟基乙醇、α-苯基-α-环戊基-α-羟基乙醇经磺酸酯化得到α-苯基-α-环戊基-α-羟基对甲苯磺酸乙酯，磺酸酯中间体在无水碳酸钾作用下经环化后制得α-苯基-α-环戊基-1,2-环氧乙烷，与3-奎宁醇反应得到戊乙奎醚游离碱，最后与氯化氢成盐后得盐酸戊乙奎醚。路线二：如(3)所示，以苯甲酰氯为起始物料，和环戊烯反应得α-苯基-α-环戊基甲酮，再环合制得α-苯基-α-环戊基-1,2-环氧乙烷，与3-奎宁醇反应得到戊乙奎醚游离碱，最后与氯化氢成盐后得盐酸戊乙奎醚。两条路线均产生一种主要杂质(4)：3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷盐酸盐。目前，并无文献报道3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷盐酸盐的制备方法，而在开发盐酸戊乙奎醚的过程中，发现此杂质是α-苯基-α-环戊基-1,2-环氧乙烷与3-奎宁醇反应制备戊乙奎醚游离碱的过程中产生，量小且分离操作复杂。药物开发过程中杂质的研究是重要的一个环节，同时质量标准的建立需要一定量的标准品。基于此，对盐酸戊乙奎醚中的主要杂质：3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷盐酸盐的制备具有重要的意义，它可以用于盐酸戊乙奎醚合成中杂质的定性及定量分析等质量研究，从而有助于提高盐酸戊乙奎醚的质量，并为降低盐酸戊乙奎醚的用药风险提供重要的指导意义。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种盐酸戊乙奎醚中的杂质的制备方法。本发明所述的杂质制备步骤如下：α-苯基-α-环戊基-α-羟基对甲苯磺酸乙酯和3-奎宁醇在碱性条件下反应一定时间，经后处理得3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷游离碱，和氯化氢成盐得3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷盐酸盐。合成路线(5)如下：本发明所述杂质的制备方法，包括以下步骤：(1)二甲基亚砜中加入3-奎宁醇，搅拌溶解后加入碱反应得3-奎宁醇盐；滴加α-苯基-α-环戊基-α-羟基对甲苯磺酸乙酯的二甲基亚砜溶液，搅拌反应后滴加纯化水，乙酸乙酯萃取；(2)酸性水溶液萃取有机相，分去有机相，水相用碱调节pH为8～9，乙酸乙酯萃取，有机相用纯化水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤和浓缩得粘稠物；(3)所得粘稠物经柱层析分离得3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷游离碱；(4)将游离碱溶于混合溶剂中，控温下滴加含有氯化氢的溶液，调节pH为2～3；(5)降温析晶，过滤得粗品；(6)粗品用混合溶剂重结晶，得3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷盐酸盐成品。进一步地，所述步骤(1)中加入的碱为氢化钠、叔丁醇钾、甲醇钠中的一种，优选氢化钠。进一步地，所述步骤(1)中所述α-苯基-α-环戊基-α-羟基对甲苯磺酸乙酯与3-奎宁醇的摩尔比为1～5:1，优选1～3:1。进一步地，所述步骤(1)中搅拌反应温度为40～100℃，优选60～80℃、反应时间为1～10小时，优选6～8小时。进一步地，所述步骤(2)中酸性溶液为盐酸、柠檬酸、马来酸、硫酸中的一种，优选柠檬酸。进一步地，所述步骤(3)中柱层析的步骤为：a、拌样：将粘稠物溶于二氯甲烷中，加适量拌样硅胶，蒸干拌样，其中粘稠物和硅胶的质量比为1:1～5，优选1:1～2；b、装柱：称取硅胶，加入二氯甲烷匀浆，倒入玻璃柱中沉降，其中固定相硅胶和粘稠物的质量比为10～50:1，优选10～30:1；C、洗脱：加入二氯甲烷和甲醇的混合溶液洗脱，收集产品点，其中二氯甲烷和甲醇的体积比为10～50:1，优选10～30:1。进一步地，所述步骤(4)中溶解游离碱的混合溶剂为异丙醇-乙酸乙酯、乙醇-乙酸乙酯、甲醇-乙酸乙酯，优选异丙醇-乙酸乙酯。进一步地，所述步骤(4)中所述的氯化氢的溶液为氯化氢的甲基叔丁基醚溶液、氯化氢的石油醚溶液、氯化氢的乙酸乙酯溶液中的一种，优选氯化氢的乙酸乙酯溶液。进一步地，所述步骤(5)中析晶温度为-10～10℃，优选-5～5℃。进一步地，所述步骤(6)中所述混合溶剂为乙醇和乙酸乙酯、乙醇和甲基叔丁基醚、异丙醇和乙酸乙酯、异丙醇和甲基叔丁基醚，丙酮和乙酸乙酯中的一种，优选异丙醇-乙酸乙酯。本发明有益效果是：本发明提供了一种盐酸戊乙奎醚中的杂质的制备方法，能显著提高制备过程中杂质的含量，降低操作复杂程度，适用于大规模制备，采用新的制备工艺就可以获得达到质量要求的高纯度3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷盐酸盐，HPLC检测3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷盐酸盐纯度达到100％。附图说明图1为3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷盐酸盐的核磁共振氢谱(1H-NMR)；图2为3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷盐酸盐ES-APIPositive谱；图3为3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷盐酸盐高效液相(HPLC)图谱。具体实施方式以下结合具体实施例和附图详细说明本发明，目的是使本发明的优点更翔实，而非限制本发明。本领域技术人员应该理解，本发明并不限于这些实施例以及使用的制备方法，任何对本发明进行同等替换、组合、改良或修饰，均包含于本发明内。本发明中使用的α-苯基-α-环戊基-α-羟基对甲苯磺酸乙酯，可购自于市售产品，也可通过现有技术合成得到。实施例1一种盐酸戊乙奎醚中杂质的制备方法，包括以下步骤：(1)于1L反应瓶中加入100ml二甲基亚砜、20g3-奎宁醇，搅拌使固体溶解，分次加入7.5g氢化钠(60％)，搅拌混匀，升温至60℃搅拌1小时，得3-奎宁醇钠盐。升温至70℃，混合物中滴加113.4gα-苯基-α-环戊基-α-羟基对甲苯磺酸乙酯的二甲基亚砜溶液(100ml)，维持温度搅拌反应6小时，降温至10℃以下，滴加150ml纯化水，滴毕，加入300ml乙酸乙酯，搅拌均匀后，静置分液。(2)有机相用300ml10％柠檬酸水溶液萃取，分去有机相，水相用饱和碳酸氢钠溶液调节酸水相pH值至8～9，加入100ml乙酸乙酯，分液，有机相用100ml纯化水洗涤两次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干，得黄色油状物87g。(3)滤液用400ml二氯甲烷溶解，加入200～300目柱层析硅胶100g，减压蒸干，得拌样样品。将2kg200～300目柱层析硅胶加入至10L二氯甲烷中，搅拌均匀后加入至玻璃层析柱中，沉降，加压将柱子压实，将拌好的样品加入至玻璃柱中，用二氯甲烷：甲醇＝20:1的混合溶剂进行洗脱，收集目标点并减压蒸干，得3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷淡黄色油状物15.4g。(4)油状物溶于45ml异丙醇和450ml乙酸乙酯混合溶剂中，滴加含有2mol/L氯化氢乙酸乙酯溶液，调节pH至2～3。(5)降温至0～5℃析晶2小时，过滤，干燥得类白色固体3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环盐酸盐11.4g。(6)将上述固体加入60ml异丙醇和600ml乙酸乙酯混合溶剂中，加热至40～50℃，过滤，降温至0～5℃析晶2小时，过滤，40～50℃减压干燥得3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环盐酸盐8.7g，纯度100％。ES-APIPositive：504.41H-NMR(400MHz,CDCl3):δ7.13-7.38(m,2H),7.36-7.29(m,2H),7.26-7.17(m,4H),7.07-7.05(m,1.3H),6.87-6.85(m,0.7H),3.91(t,0.4H),3.86-3.85(m,0.3H),3.83-3.78(m,1.3H),3.75-3.73(m,0.7H),3.71-3.69(m,0.7H),3.62-3.61(m,0.3H),3.56-3.55(m,0.6H),3.52-3.47(m,1H),3.45-3.41(m,0.3H),3.24-3.18(m,2.5H),3.16-3.08(m,2H),3.07-2.94(m,1H),2.38-2.34(m,1H),2.27-2.16(m,2H),2.03-1.93(m,2H),1.85-1.68(m,2H),1.67-1.56(m,3H),1.55-1.42(m,3H),1.40-1.33(m,5H),1.29-1.12(m,5H)。实施例2一种盐酸戊乙奎醚中杂质的制备方法，包括以下步骤：(1)于2L反应瓶中加入120ml二甲基亚砜、24g3-奎宁醇，搅拌使固体溶解，分次加入9.8g氢化钠(60％)，搅拌混匀，升温至50℃搅拌1小时，得3-奎宁醇钠盐。升温至70℃，混合物中滴加204.2gα-苯基-α-环戊基-α-羟基对甲苯磺酸乙酯的二甲基亚砜溶液(200ml)，维持温度搅拌反应8小时，降温至10℃以下，滴加300ml纯化水，滴毕，加入400ml乙酸乙酯，搅拌均匀后，静置分液。(2)有机相用370ml10％柠檬酸水溶液萃取，分去有机相。水相用饱和碳酸氢钠溶液调节酸水相pH值至8～9，加入120ml乙酸乙酯，分液，有机相用120ml纯化水洗涤两次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，得黄色油状物104g。(3)滤液用500ml二氯甲烷溶解，加入200～300目柱层析硅胶150g，减压蒸干，得拌样样品。将2.5kg200～300目柱层析硅胶加入至11L二氯甲烷中，搅拌均匀后加入至玻璃层析柱中，沉降，加压将柱子压实，将拌好的样品加入至玻璃柱中，二氯甲烷：甲醇＝20:1的混合溶剂进行洗脱，收集目标点并减压蒸干，得3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷淡黄色油状物20.8g。(4)油状物溶于60ml异丙醇中和600ml乙酸乙酯混合溶剂中，滴加2mol/L氯化氢乙酸乙酯溶液，调节pH至2～3。(5)降温至0～5℃析晶2小时，过滤，干燥得类白色固体3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环盐酸盐16.5g。(6)将上述固体加入100ml异丙醇和1L乙酸乙酯混合溶剂中，加热至40～50℃，过滤，降温至0～5℃析晶3小时，过滤，40～50℃减压干燥得3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环盐酸盐13.2g，纯度100％。实施例3一种盐酸戊乙奎醚中杂质的制备方法，包括以下步骤：(1)于1L反应瓶中加入60ml二甲基亚砜、12.7g3-奎宁环醇，搅拌使固体溶解，分次加入5g氢化钠(60％)，搅拌混匀，升温至50℃搅拌1小时，得3-奎宁醇钠盐。升温至80℃，滴加90gα-苯基-α-环戊基-α-羟基对甲苯磺酸乙酯的二甲基亚砜溶液(90ml)，维持温度搅拌反应7小时。降温至10℃以下，滴加100ml纯化水，滴毕，加入200ml乙酸乙酯，搅拌均匀后，静置分液。(2)有机层用230ml10％柠檬酸水溶液萃取，分去有机层。水层用饱和碳酸氢钠溶液调节酸水层pH值至8～9，加入100ml乙酸乙酯，分液，有机相用50ml纯化水洗涤两次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，得黄色油状物56g。(3)滤液用300ml二氯甲烷溶解，加入200～300目柱层析硅胶80g，减压蒸干，得拌样样品。将1.2kg200～300目柱层析硅胶加入至6L二氯甲烷中，搅拌均匀后加入至玻璃层析柱中，沉降，加压将柱子压实，将拌好的样品加入至玻璃柱中，二氯甲烷：甲醇＝20:1的混合溶剂进行洗脱，收集目标点并减压蒸干，得3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷淡黄色油状物10.9g。(4)油状物溶于30ml异丙醇和300ml乙酸乙酯混合溶剂中，滴加2mol/L氯化氢乙酸乙酯溶液，调节pH至2～3。(5)降温至0～5℃析晶2小时，过滤干燥得类白色固体3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环盐酸盐8.1g。(6)将上述固体加入50ml异丙醇和500ml乙酸乙酯混合溶剂中，加热至40～50℃，过滤，降温至0～5℃析晶3小时，过滤，40～50℃减压干燥得3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环盐酸盐6.6g，纯度100％。实施例4一种盐酸戊乙奎醚中杂质的制备方法，包括以下步骤：(1)于1L反应瓶中加入120ml二甲基亚砜、25.4g3-奎宁环醇，搅拌使固体溶解，分次加入10g氢化钠(60％)，搅拌混匀，升温至50℃搅拌1小时，得3-奎宁醇钠盐。升温至75℃，滴加180gα-苯基-α-环戊基-α-羟基对甲苯磺酸乙酯的二甲基亚砜溶液(180ml)，维持温度搅拌反应7.5小时。降温至10℃以下，滴加200ml纯化水，滴毕，加入400ml乙酸乙酯，搅拌均匀后，静置分液。(2)有机层用460ml10％柠檬酸水溶液萃取，分去有机层。水层用饱和碳酸氢钠溶液调节酸水层pH值至8～9，加入200ml乙酸乙酯，分液，有机相用100ml纯化水洗涤两次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，得黄色油状物110g。(3)滤液用500ml二氯甲烷溶解，加入200～300目柱层析硅胶130g，减压蒸干，得拌样样品。将2.4kg200～300目柱层析硅胶加入至10L二氯甲烷中，搅拌均匀后加入至玻璃层析柱中，沉降，加压将柱子压实，将拌好的样品加入至玻璃柱中，二氯甲烷：甲醇＝20:1的混合溶剂进行洗脱，收集目标点并减压蒸干，得3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷淡黄色油状物22.6g。(4)油状物溶于60ml异丙醇和600ml乙酸乙酯混合溶剂中，滴加2mol/L氯化氢乙酸乙酯溶液，调节pH至2～3。(5)降温至0～5℃析晶2小时，过滤干燥得类白色固体3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环盐酸盐16.7g。(6)将上述固体加入100ml异丙醇和1L乙酸乙酯混合溶剂中，加热至40～50℃，过滤，降温至0～5℃析晶3小时，过滤，40～50℃减压干燥得3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环盐酸盐12.7g，纯度100％。3-[2-环戊基-2-苯基-2-(2-环戊基-2-羟基-2-苯基-乙氧基)乙氧基]奎宁环烷盐酸盐的HPLC检测方法：检查方法：中国药典2015版二部附录高效液相色谱法试验条件：C18柱(型号：长150mm，内径4.6mm，填充料粒径3μm)检测器：UV检测器检测波长：230nm柱温：25℃流速：1.0ml/min流动相A：0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(含0.5％三乙胺，用磷酸调pH至4.5)流动相B：乙腈线性梯度洗脱如下表1所示：时间(min)流动相A(％)流动相B(％)0.073275.0732720.0505030.0406050.0406055.0732765.07327其中精密量取供试品(实施例1)溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按峰面积归一化法计算，结果见附图3，纯度为100％。当前第1页1 2 3