一种利用聚乙烯亚胺提高热激法质粒转化大肠杆菌感受态效率的方法与流程

文档序号:12249201阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种利用聚乙烯亚胺提高热激法质粒转化大肠杆菌感受态效率的方法,其特征在于:包括以下步骤:

步骤1、用感受态细胞试剂盒制备E.coli BL21(DE3)感受态,每管100ul,备用;

步骤2、配制浓度为10-7v/v-10-8v/v的PEI溶液,备用;

步骤3、在100ul的E.coli BL21(DE3)中加入1ug质粒DNA,加入1ul步骤2配制好的PEI溶液,依次进行冰浴30min,42℃水浴70s,冰浴5min,置于超净台内,加入900ul SOC培养基,37℃、225rpm培养1h,对培养物进行离心,弃去上清后再用150-200ul培养基重悬菌体涂布加入氨苄的固体平板培养基,37℃过夜培养。

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