本发明属于药物合成技术领域，涉及一种恩替卡韦中间体的制备工艺及其应用。
背景技术：
恩替卡韦，其化学名称为2-氨基-9-[(1s,3s,4s)-4-羟基-3-羟甲基-2-亚甲戊基]-1,9-氢-6-H-嘌呤-6-酮-水合物，该化合物由Bristol-MyersSquibb公司研究开发，是一种有效的，选择性抑制乙型肝炎病毒复制的脱氧鸟嘌呤核苷类似物，用于治疗乙型肝炎。体外试验表明，恩替卡韦比其他核苷类似物更有效。动物模型和人体临床研究结果显示，恩替卡韦具有极强的抑制乙型肝炎病毒复制，降低血清病毒DNA水平的作用，对耐拉米夫定的突变病毒株仍然有效，且未见明显的不良反应和线粒体毒性。
大量临床试验表明，它对肝细胞内逆转录酶和乙型肝炎病毒DNA多聚酶有直接的抑制作用，有强的抗病毒能力，同时该化合物的选择性比较高，它的细胞毒性是抗乙肝病毒活性的1/8000，可有效治疗慢性乙肝而不干扰流感病毒和HIV病毒。而且由于其作用机制不同，长期使用产生的耐药性低。
目前，全世界有3.5亿～4亿乙型肝炎病毒感染者，其中每年有近100万患者死于HBV感染引起的肝硬化和肝癌。我国约有1.2亿HBV感染者，占世界总数的1/3，居世界第一位，慢性乙型肝炎患者3000万例，而且这一数字目前正呈上升趋势。慢性的乙肝病毒感染到现在为止还没有能够完全治愈的方法，患者需要长期或者大多数情况下需要终生进行病毒抑制。临床指引建议治疗疗程最少为一年。慢性乙肝的治疗药物中核苷类药物的市场占有率超过80％。而在核苷类药物中，恩替卡韦凭借其显著的疗效和良好的抗耐药性，自2007年以来，已替代拉米夫定成为一线的抗乙肝病毒药物。恩替卡韦由美国百时美施贵宝公司研制，美国FDA于2005年3月29日批准上市。于2005年11月15日获得国家食品药品监督管理总局SFDA批准在中国上市。该药物专利已经于2008年到期，药物化学专家们对于其制备方法进行了十分多的研究，但是由于恩替卡韦化合物结构复杂，现有的合成方法中还广泛存在步骤长、收率低、成本高等问题。
CN102593956B公开了一种恩替卡韦的制备工艺，其中，该工艺公开了一种通过环氧化合物开环引入手性羟基的方法，具体下面的路线所示。该工艺需要使用贵重金属钯催化剂以及活泼的镁金属化合物，成本高，条件苛刻。另外，由于2-位取代氧亚甲基的空间位阻效应，使得目标构型的环氧化合物生成较困难，收率降低，工业化难度较大。该方法还必须使用手性试剂将化合物羟基构型转变才能得到目标化合物。
CN105037363B公开了一种恩替卡韦化合物的合成方法，盖房以(S)-3-羟基己二酸二甲酯为起始原料，通过羟基TBS保护、Dieckmann缩合反应、酮保护成缩酮、酯基还原成羟基、羟基保护、脱保护、酮成烯醇硅醚、Rubottom氧化反应制得中间体T，中间体T再经Wittg反应、Mitsunobu反应等得到恩替卡韦，该方法虽然提供了一种更适合工业化生产的方法，收率也有提高，但是，该方法特别是中间体T的生产仍然存在步骤繁琐、反应条件要求高以及收率不高的问题。相关步骤如下：
技术实现要素：
鉴于恩替卡韦的制备工艺中还存在上述问题，特提出本发明。
本发明提供一种恩替卡韦中间体(式T所示的化合物)的制备工艺，该制备工艺反应步骤较短、收率更高且操作更加简便，适合放大批量化生产。
本发明提供恩替卡韦中间体的制备工艺，该制备工艺包括：
在NHPI存在下将式S所示的化合物与有机过氧化物在有机溶剂中接触反应得到恩替卡韦中间体式T所示的化合物；
优选情况下，所述制备工艺的更具体的过程为：将NHPI、式S所示的化合物以及有机溶剂加入到反应釜中，降温至-10～10℃，滴加含有有机过氧化物的溶液，滴毕，保持温度搅拌2～5小时，饱和氯化铵淬灭反应，二氯甲烷萃取，水洗，重结晶得式T所示的化合物，其中有机溶剂为四氢呋喃或乙醚或其他醚类溶剂等。
在本发明中，NHPI为N-羟基邻苯二甲酰亚胺的简写，其加入可以快速引发上述反应，并与有机过氧化物配合得到对映体过量乃至单一构型的产物。
在本发明中，优选情况下，式S所示的化合物与NHPI、有机过氧化物的用量摩尔比为1：0.05～0.25：1～3。进一步优选情况下，式S所示的化合物与NHPI、有机过氧化物的用量摩尔比为1：0.05～0.15：1.2～2。发明人大量实践发现，有机过氧化物用量大于式S所示的化合物2当量以及N-羟基邻苯二甲酰亚胺的用量大于0.15当量时，反应均没有更好的表现，反而会增加成本和后处理的工作量。
在本发明中，发明人还发现采用不同结构的过氧化物对于产物构型的选择性影响较大，优选情况下，所述有机过氧化物为过氧化二异丙苯和/或过氧化叔丁基异丙苯。该条件下，能够高选择性的得到单一构型的目标化合物。优选情况下，有机过氧化物例如过氧化二异丙苯或过氧化叔丁基异丙苯以其溶液的形式滴入反应体系中，例如滴入过氧化二异丙苯的乙醚溶液或过氧化二异丙苯的四氢呋喃溶液、过氧化叔丁基异丙苯的乙醚溶液或过氧化叔丁基异丙苯的四氢呋喃溶液。
在本发明中，为了防止外界环境中水分以及氧气等对反应的影响，优选情况下，制备工艺在氮气保护下进行。本发明的反应可以根据本领域常规的手段进行反应后处理，例如洗涤、过滤、结晶等。每步骤的过程中可以根据常用手段进行监控，例如LCMS、GCMS、TLC等。在没有其他特殊说明情况下，在本发明中所使用的室温是指23±2℃。
本发明还提供一种恩替卡韦的制备工艺，其中该工艺由上述的制备工艺制备的恩替卡韦中间体(式T所示的化合物)为起始原料，通过中间体T再经Wittg反应、Mitsunobu反应、脱羟基保护基以及水解得到恩替卡韦，这些步骤可以参考现有技术中的方法进行，例如CN105037363B中的相关操作方法，在此引用并入本文。
本发明提供的恩替卡韦中间体的制备工艺，采用一步法，直接将立体羟基引入环戊烷环，收率大大提高，并且选择性得到R构型产物，无需手性拆分或者纯化即得到目标目标化合物，操作更加简便，有效降低了恩替卡韦制备过程中的工作量。恩替卡韦中间体式T所示的化合物的收率明显提高，保障了恩替卡韦的原料需求。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。
实施例1
氮气保护下，将NHPI 0.81g(5mmol)、式S所示的化合物35.9g(100mmol)以及100ml无水四氢呋喃加入到在250ml反应釜中，搅拌并降温至5℃，然后滴加过氧化二异丙苯的乙醚溶液或过氧化二异丙苯的四氢呋喃溶液(含有过氧化二异丙苯40.56g)，滴毕，保持温度搅拌3小时，监测到反应结束，在冰浴中加入饱和氯化铵淬灭反应，二氯甲烷萃取，水洗三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，石油醚重结晶得式T所示的化合物32.37g，收率86.40％。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ5.51(brs,1H),4.40-4.35(m,2H),3.51(d,1H),3.28(m,1H),2.79-2.75(m,1H),2.19-1.98(m,1H),1.82(d,1H),0.98(s,9H),0.96(s,9H),0.12(m,12H)。
实施例2
氮气保护下，将NHPI 1.63g(10mmol)、式S所示的化合物35.9g(100mmol)以及100ml无水四氢呋喃加入到在250ml反应釜中，搅拌并降温至0℃，然后滴加过氧化二异丙苯的乙醚溶液(含有过氧化二异丙苯或过氧化叔丁基异丙苯54.07g)，滴毕，保持温度搅拌2小时，监测到反应结束，在冰浴中加入饱和氯化铵淬灭反应，二氯甲烷萃取，水洗三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，石油醚重结晶得式T所示的化合物32.32g，收率86.27％。
实施例3
氮气保护下，将NHPI 2.45g(15mmol)、式S所示的化合物35.9g(100mmol)以及100ml无水四氢呋喃加入到在500ml反应釜中，搅拌并降温至0℃，然后滴加过氧化叔丁基异丙苯的乙醚溶液(含有过氧化二异丙苯或过氧化叔丁基异丙苯25.0g)，滴毕，保持温度搅拌4小时，监测到反应结束，在冰浴中加入饱和氯化铵淬灭反应，二氯甲烷萃取，水洗三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，石油醚重结晶得式T所示的化合物31.89g，收率85.12％。
实施例4
氮气保护下，将NHPI 3.26g(20mmol)、式S所示的化合物35.9g(100mmol)以及100ml无水四氢呋喃加入到在250ml反应釜中，搅拌并降温至-10℃，然后滴加过氧化二异丙苯的四氢呋喃溶液(含有过氧化二异丙苯或过氧化叔丁基异丙苯27.04g)，滴毕，保持温度搅拌5小时，监测到反应结束，在冰浴中加入饱和氯化铵淬灭反应，二氯甲烷萃取，水洗三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，石油醚重结晶得式T所示的化合物30.51g，收率81.43％。
实施例5
氮气保护下，将NHPI 4.08g(25mmol)、式S所示的化合物35.9g(100mmol)以及100ml无水四氢呋喃加入到在500ml反应釜中，搅拌并降温至-5℃，然后滴加过氧化叔丁基异丙苯的乙醚溶液(含有过氧化二异丙苯或过氧化叔丁基异丙苯62.49g)，滴毕，保持温度搅拌3小时，监测到反应结束，在冰浴中加入饱和氯化铵淬灭反应，二氯甲烷萃取，水洗三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，石油醚重结晶得式T所示的化合物31.75g，收率84.75％。
对比例
氮气保护下，将式S所示的化合物35.9g(100mmol)以及100ml无水四氢呋喃加入到在250ml反应釜中，搅拌并降温至5℃，然后滴加过氧化二异丙苯的乙醚溶液或过氧化二异丙苯的四氢呋喃溶液(含有过氧化二异丙苯40.56g)，滴毕，保持温度搅拌5小时，监测到反应原料(式S所示的化合物)不再变化，在冰浴中加入饱和氯化铵淬灭反应，二氯甲烷萃取，水洗三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析得式T所示的化合物12.25g，收率32.70％。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ5.51(brs,1H),4.40-4.35(m,2H),3.51(d,1H),3.28(m,1H),2.79-2.75(m,1H),2.19-1.98(m,1H),1.82(d,1H),0.98(s,9H),0.96(s,9H),0.12(m,12H)。