本发明属于蔬菜育种及分子遗传学领域，具体涉及细胞质遗传、进化和核质互作机制，特别是分子水平上细胞质雄性不育的恢复机理等领域。
背景技术：
Pol CMS是甘蓝型油菜（B.napus）中发现的第一个有实用价值的雄性不育类型，后被转育到大白菜(Brassica campestris L．ssp．pekinensis)等多种十字花科蔬菜作物中，是目前大白菜育种中应用比较广泛的不育源之一。大白菜杂种优势明显，杂交种是目前主要生产用种。目前生产中应用的杂交种，大多是通过自交不亲和系和雄性不育两用系配制。自交不亲和系存在亲本自交衰退、扩繁困难、制种成本高等缺点，而用雄性不育两用系制种则要拔除50%的可育株，增加了育苗成本，费时费工，降低了制种产量，若拔除不彻底，则会降低种子纯度。利用细胞质雄性不育系进行杂种生产，可大大降低制种成本，避免自交不亲和系和雄性不育两用系的缺点。恢复系是利用细胞质雄性不育系生产油菜杂交种所必不可少的材料。Pol CMS转入大白菜后，经过广泛测交，筛选到多个育性恢复材料。本研究利用图位克隆技术定位到一个Pol CMS的恢复基因，并根据测序结果开发一个与恢复基因共分离的显性标记，为在大白菜种质资源中筛选恢复材料和分子标记辅助选择育种奠定基础。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一个大白菜polCMS的恢复基因，该基因编码的蛋白质及这种基因的检测方法和应用。
在大白菜中该恢复基因可恢复polCMS的育性，使花药正常发育，产生正常的花粉，其等位基因由于碱基突变而不具仍恢复pol CMS育性的功能。
这一个大白菜pol CMS的恢复基因，具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。
所述的基因序列所编码的蛋白质，具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。
一对用于检测上述基因的特异性PCR引物，序列为：
上游：5’-GGATGCGATCCTGATATTTG-3’
下游：5’-AGAGAGAGGCTACAGAACAAACT-3’
即SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的序列。
检测这一个大白菜pol CMS的恢复基因的方法为，采用上述的特异性PCR引物对大白菜叶片所提取的DNA进行PCR扩增反应，能得到416 bp DNA序列，如SEQ ID No.5所示。该片段只能在含有pol CMS恢复基因的大白菜中能扩增得到，而在不具有恢复能力的大白菜中不能扩增出条带（图1）。
在本发明研究中，发明人设计的特异性PCR引物和检测方法，不仅能对大白菜苗期所提取的DNA进行PCR扩增，还能用于大量筛选大白菜种质资源。该PCR引物是利用引物设计软件Primer 5.0，以大白菜polCMS的恢复基因及其等位基因之间的序列差异为基础设计的。根据扩增条带的有无能快速检测到含有此基因的大白菜品种和种质资源，其检测的准确性高，操作简单，成本低廉。若一个大白菜品种或种质资源中含有此恢复基因，则用上述引物能够扩增出长度为416 bp的特异性片段，若不含有此恢复基因，则扩增不出任何产物（图1）。
含有一个大白菜polCMS的恢复基因的材料92S105（柯桂兰，宋胭脂，赵利民，张鲁刚等. 秦白四号大白菜选育. 陕西农业科学,1996,No.4，12-15）是经过测交验证，并多代自交育成的各种农艺性状稳定的品系。发明人在研究中将此品系与大白菜polCMS的不育系06J45（许小勇,孙希禄,方智远,张鲁刚. 大白菜CMS雄性不育发生相关基因的克隆与分析[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2014,42（12）: 119-125）进行杂交，并以06J45为母本用杂交一代回交构建了BC1F1，进一步用杂合单株自交获得BC1S2遗传群体，利用SSR和InDel分子标记将含有一个大白菜pol CMS的恢复基因定位在白菜的第9号染色体上。
本发明的有益效果为：获得了一个大白菜polCMS的恢复基因及快速检测是否含有该基因的检测方法，并且利用该方法可以快速检测含有该基因的大白菜植株，其检测准确性高，操作简单，成本低廉。使得在大白菜种质资源中大量筛选恢复系成为可能，从而减少大田人工测交和育性调查的工作量。另个通过本发明得到的一个大白菜polCMS的恢复基因可用于研究pol CMS/Rf系统中核质互作的机理等，并且也可以作为标记性状在大白菜细胞质雄性不育系选育、杂交育种和杂交种的纯度鉴定中得以应用。
附图说明
图1为本发明的特异性PCR引物对该基因进行PCR扩增的结果。F代表含有恢复基因的大白菜PCR扩增产物，S代表不含有恢复基因的大白菜的扩增产物。
具体实施方式
实施例1 白菜基因组总DNA的提取
1）取0.2g去掉主脉的白菜新鲜嫩叶片，塞入装有钢珠（钢珠需要由质量分数为75%的酒精清洗过）的2 mL的离心管中，放入液氮中速冻，利用组织研磨仪磨成粉末；
2）向离心管中加700 μl经65℃预热的CTAB提取液（CTAB：2％，Tris-HCl（pH=8.0）：100 mmol/L，EDTA：20 mmol/L，NaCl：1.4mol/L），再加入10 µL的β-巯基乙醇，迅速混匀；
3） 随后将离心管放入65℃烘箱中，中间每间隔5-10min分钟摇一次，温浴45 min；
4）取出离心管，加入等体积的酚：氯仿：异戊醇（25:24:1）的混合物，摇匀15 min后，常温下10000 r/min 离心10 min；
5）将上层液相（约700μl）转移到另一离心管中，加入等体积的氯仿和异戊醇混合溶液（氯仿：异戊醇＝24：1），轻轻摇匀10 min，常温下10000 r/min离心10 min；
6）取上清（约500 μl），加入2倍体积经预冷的无水乙醇，轻轻混匀使DNA抱团，-20℃条件下沉淀30 min，4℃条件下8000 r/min离心5 min；
7）弃上清，加入500 μl质量百分数为75%的乙醇洗涤沉淀2次后，沉淀物室温晾干；
8）加入500 μl的无菌蒸馏水溶解DNA，加入0.29 μl的RNaseA（10 µg/µl），混匀后稍离心，37℃保温30 min；
9）加入3 mol/L的NaAc溶液50 µL和2倍体积经预冷的无水乙醇，轻轻混匀使DNA抱团，-20℃条件下沉淀30 min；
10）在4℃条件下，8000 r/min离心5 min，弃上清，加入质量百分数为75％的乙醇清洗沉淀1～2次后，沉淀物室温晾干，加入400 µl～500 µl的灭菌ddH2O溶解使用。
实施例2 PCR扩增和基因检测
（一）分别获得大白菜polCMS的恢复基因及其在不育系中的等位基因
1）20 μl PCR 反应体系为： 50 ng/μl的模板 DNA 为2 μl，2×Taq Master Mix 10 μl，10 μM的上、下游引物各1 μl，用无菌去离子水补充反应体系至20μl。
引物序列为：
上游：5’-GTTCTCTCTCTCCCACAAAGATT-3’
下游：5’-TTAAGCCCAAGTACCTCAGAAAC-3’
2）PCR 扩增反应在PCR仪上进行
温度和反应条件为：94 ℃预变性5 min；然后94 ℃变性30 s，58℃退火 30 s，72℃延伸 2 min，共 35个循环；最后72℃再延伸10 min，4℃保存。
PCR扩增产物长度为2196 bp，恢复系大白菜中该基因测序结果如SEQ ID No.6，不育系大白菜中该基因测序结果如SEQ ID No.7。
使用DNA Star软件包中的EditSeq软件获得该基因的ORF序列、并翻译成氨基酸序列，恢复系大白菜氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，不育系大白菜氨基酸序列如SEQ ID No.8所示。
（二）检测一个大白菜polCMS的恢复基因
1）10 μl PCR 反应体系为： 50ng/μl的模板 DNA 为1μl，2×Taq Master Mix 5μl，10μ M的上、下游引物各0.5μl，用无菌去离子水补充反应体系至10μl。
引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示：
上游：5’-GGATGCGATCCTGATATTTG-3’
下游：5’-AGAGAGAGGCTACAGAACAAACT-3’
2）PCR 扩增反应在PCR仪上进行
温度和反应条件为：94 ℃预变性5 min；然后94 ℃变性30 s，55℃退火 30 s，72℃延伸30 s，共 35个循环；最后72℃再延伸10 min，4℃保存。
得到的扩增产物，上样于1.5%琼脂糖凝胶上并电泳，经溴化乙锭染色后在凝胶成像仪上成像，结果如图1所示，含有polCMS恢复基因的大白菜扩增出一条416 bp的条带，其是SEQ ID No.1中的一段，而不育系或保持大白菜中则不能扩增出条带。
<110> 西北农林科技大学
<120> 一个大白菜pol CMS育性恢复基因及其检测方法和应用
<160> 8
<210> 1
<211> 1953bp
<212> DNA
<213> 大白菜pol CMS的核苷酸序列
<400> 1
ATGGTGTTGAGGACACAGAGATGGAATCGTCTTACTACTTTGAGATTGGTTCATCTCCGT 60
TCAACTGAGACAGGTACTCTGAGAAATGCTGCTTTCTTCCAAAGCCCATACGACTTCTTC 120
TTCTGCGTACAAGGCTTCTCTGGTCTCACCAGCGATAGAAAGATGTCTTCTTACAAAGAG 180
AGATTGAGAAGTGGACTCGTCGATATCAAGAAGGATGATGTTGTGGCTCTGTTTCAGTCC 240
ATGCTTCGGTCTCGTCCTCTTCCTACGGTCATTGATTTCAACAGATTGTTTGGTTTACTT 300
GCCAGAACTAAACAGTACGATCTCGTGTTAGCTCTCTGCAAGCAAATGGAACTGAAAGGG 360
ATTGCGTATGACCTCTACACTCTCAACATTATGATCAATTGCTTCTGCAGGCGTCGGAAA 420
CTCGGTTTTGCTTTTTCCGCTATGGGGGAGATCTTCAAACTTGGGTATGAGCCTAACACA 480
GTCACATTTAACACCCTCCTCAATGGCTTATGTCTCGAGGGCAGAGTCTTTGAAGCTGTG 540
GAGTTAGTTGATTGTATGGTCCTAAGCCAACATGTACCAGATCTCATCACCCTCAACACT 600
CTTGTCAATGGGCTTTGTCTCAAAGATAGAGTGTCTGAAGCAGTGGATTTAATAGCTCGA 660
ATGATGGCTAATGGATGTCAACCCAATCAGTTTACCTATGGTCCAATCTTGAACAGAATG 720
TGTAAGTCTGGGAACACTGCCTCGGCCTTGGATCTGCTCAGGAAGATGGAACATAGAAAG 780
ATCAAGCCACACGTAGTCACATACACTATCATCATTGACAATCTTTGCAAAGATGGGAGA 840
CTCGACGATGCACTCAGCTTTTTCAGTGAAATGGAAACCAAAGGGATCAAAGCAAATGTC 900
TTTACCTACAACTCTCTCATAGGAAGCTTCTGTAGTTTTGGCAGATGGGATGATGGTGCA 960
CAGTTGCTGAGGGATATGATTACAAGGAAAATCACCCCCAACGTTGTCACTTTCAGTGCT 1020
TTGATTGATAGTCTTGTTAAAGAGGGAAAGCTTACTGAGGCTAAAGACTTGTACAATGAG 1080
ATGATCACAAGAGGCATAGAGCCTAACACCATTACATATAATTCTTTGATATATGGGCTG 1140
TGCAACGACAAGCGCTTAGATGAAGCCAACCAGATGATGGACCTGATGGTTAGCAAGGGA 1200
TGCGATCCTGATATTTGGACGTATAATATCCTTATAAACGGATTTTGTAAGGCTAAACAG 1260
GTTGATGATGGTATGAGACTATTCCGAAAGATGTCTCTGAGAGGAATGATTGCAGATACA 1320
GTGACTTATAGCACTCTCATCCAAGGGTTTTGTCAATCAAGAAAACTTATTGTCGCCAAA 1380
AAAGTCTTCCAAGAGATGGTCTCTCAAGGTGTTCATCCTGGTATTATGACTTATGCTATT 1440
TTGCTGGATGGGTTGTGTGACAATGGCGAACTAGAAGAGGCTTTGGGAATACTTGATCAA 1500
ATGCACAAGTGTAAGATGGAACTTGATATTGGTATATATAATATCATCATTCACGGGATG 1560
TGCAATGCAAATAAGGTCGATGATGCTTGGAGTTTGTTCTGTAGCCTCTCTCTCAAAGGA 1620
GTGAAGCGTGATATTCAGTCATACAACATAATGTTGTCAGGATTATGTAAGGGGAGCTCA 1680
TTGTCTGAAGCGGATGCATTGTTTAGAAAAATGAAGGAAGATGGGTATGAGCCAGATGGT 1740
TGTACGTACAATACACTTATCAGAGCACATCTTCGAGGTAATGACATAACAACTTCAGTT 1800
CAACTCATTGAAGAAATGAAGAGGTGTGGGTTCTCTTCAGATGCTTCCACCGTAAAGATT 1860
GTTATGGATATGTTATCGAGTGGTGAATTGGACAAAAGCTTTCTAAATATGCTTTCTGGT 1920
CCTTTTGGAGACAAATCATCATCGTTGGATTGA 1953
<210> 2
<211> 650bp
<212> DNA
<213> 大白菜pol CMS的氨基酸序列
<400> 2
MVLRTQRWNRLTTLRLVHLRSTETGTLRNAAFFQSPYDFFFCVQGFSGLTSDRKMSSYKE 60
RLRSGLVDIKKDDVVALFQSMLRSRPLPTVIDFNRLFGLLARTKQYDLVLALCKQMELKG 120
IAYDLYTLNIMINCFCRRRKLGFAFSAMGKIFKLGYEPNTVTFNTLLNGLCLEGRVFEAV 180
ELVDCMVLSQHVPDLITLNTIVNGLCLKDRVSEAVDLIARMMANGCQPNQFTYGPILNRM 240
CKSGNTASALDLLRKMEHRKIKPHVVTYTIIIDNLCKDGRLDDALSFFSEMETKGIKANV 300
FTYNSLIGSFCSFGRWDDGAQLLRDMITRKITPNVVTFSALIDSLVKEGKLTEAKDLYNE 360
MITRGIEPNTITYNSLIYGLCNDKRLDEANQMMDLMVSKGCDPDIWTYNILINGFCKAKQ 420
VDDGMRLFRKMSLRGMIADTVTYSTLIQGFCQSRKLIVAKKVFQEMVSQGVHPGIMTYAI 480
LLDGLCDNGELEEALGILDQMHKCKMELDIGIYNIIIHGMCNANKVDDAWSLFCSLSLKG 540
VKRDIQSYNIMLSGLCKRSSLSEADALFRKMKEDGYEPDGCTYNTLIRAHLRGNDITTSV 600
QLIEEMKRCGFSSDASTVKIVMDMLSSGELDKSFLNMLSGPFGDKSSSLD 650
<210> 3
<211> 20bp
<212> DNA
<213> 引物的核苷酸序列
<400> 3
GGATGCGATCCTGATATTTG 20
<210> 4
<211> 23bp
<212> DNA
<213> 引物的核苷酸序列
<400> 4
AGAGAGAGGCTACAGAACAAACT 23
<210> 5
<211> 416bp
<212> DNA
<213> 扩增物的核苷酸序列
<400> 5
GGATGCGATCCTGATATTTGGACGTATAATATCCTTATAAACGGATTTTGTAAGGCTAAA 60
CAGGTTGATGATGGTATGAGACTATTCCGAAAGATGTCTCTGAGAGGAATGATTGCAGAT 120
ACAGTGACTTATAGCACTCTCATCCAAGGGTTTTGTCAATCAAGAAAACTTATTGTCGCC 180
AAAAAAGTCTTCCAAGAGATGGTCTCTCAAGGTGTTCATCCTGGTATTATGACTTATGCT 240
ATTTTGCTGGATGGGTTGTGTGACAATGGCGAACTAGAAGAGGCTTTGGGAATACTTGAT 300
CAAATGCACAAGTGTAAGATGGAACTTGATATTGGTATATATAATATCATCATTCACGGG 360
ATGTGCAATGCAAATAAGGTCGATGATGCTTGGAGTTTGTTCTGTAGCCTCTCTCT 416
<210> 6
<211> 2194bp
<212> DNA
<213> 恢复系大白菜的扩增基因序列
<400> 6
GTTCTCTCTCTCCCACAAAGATTTTCAAAGCTCAGTCACTCAGAGAACGAATCTTTGTGT 60
GGCCTAAGAAGAAGAGGGCGATTCATTTGAAGCTCTAAGATGGTGTTGAGGACACAGAGA 120
TGGAATCGTCTTACTACTTTGAGATTGGTTCATCTCCGTTCAACTGAGACAGGTACTCTG 180
AGAAATGCTGCTTTCTTCCAAAGCCCATACGACTTCTTCTTCTGCGTACAAGGCTTCTCT 240
GGTCTCACCAGCGATAGAAAGATGTCTTCTTACAAAGAGAGATTGAGAAGTGGACTCGTC 300
GATATCAAGAAGGATGATGTTGTGGCTCTGTTTCAGTCCATGCTTCGGTCTCGTCCTCTT 360
CCTACGGTCATTGATTTCAACAGATTGTTTGGTTTACTTGCCAGAACTAAACAGTACGAT 420
CTCGTGTTAGCTCTCTGCAAGCAAATGGAACTGAAAGGGATTGCGTATGACCTCTACACT 480
CTCAACATTATGATCAATTGCTTCTGCAGGCGTCGGAAACTCGGTTTTGCTTTTCTGCTA 540
TGGGGAAGATCTTCAAACTTGGGTATGAGCCTAACACAGTCACATTTAACACCCTCCTCA 600
ATGGCTTATGTCTCGAGGGCAGAGTCTTTGAAGCTGTGGAGTTAGTTGATTGTATGGTCC 660
TAAGCCAACATGTACCAGATCTCATCACCCTCAACACTATTGTCAATGGGCTTTGTCTCA 720
AAGATAGAGTGTCTGAAGCAGTGGATTTAATAGCTCGAATGATGGCTAATGGATGTCAAC 780
CCAATCAGTTTACCTATGGTCCAATCTTGAACAGAATGTGTAAGTCTGGGAACACTGCCT 840
CGGCCTTGGATCTGCTCAGGAAGATGGAACATAGAAAGATCAAGCCACACGTAGTCACAT 900
ACACTATCATCATTGACAATCTTTGCAAAGATGGGAGACTCGACGATGCACTCAGCTTTT 960
TCAGTGAAATGGAAACCAAAGGGATCAAAGCAAATGTCTTTACCTACAACTCTCTCATAG 1020
GAAGCTTCTGTAGTTTTGGCAGATGGGATGATGGTGCACAGTTGCTGAGGGATATGATTA 1080
CAAGGAAAATCACCCCCAACGTTGTCACTTTCAGTGCTTTGATTGATAGTCTTGTTAAAG 1140
AGGGAAAGCTTACTGAGGCTAAAGACTTGTACAATGAGATGATCACAAGAGGCATAGAGC 1200
CTAACACCATTACATATAATTCTTTGATATATGGGCTGTGCAACGACAAGCGCTTAGATG 1260
AAGCCAACCAGATGATGGACCTGATGGTTAGCAAGGGATGCGATCCTGATATTTGGACGT 1320
ATAATATCCTTATAAACGGATTTTGTAAGGCTAAACAGGTTGATGATGGTATGAGACTAT 1380
TCCGAAAGATGTCTCTGAGAGGAATGATTGCAGATACAGTGACTTATAGCACTCTCATCC 1440
AAGGGTTTTGTCAATCAAGAAAACTTATTGTCGCCAAAAAAGTCTTCCAAGAGATGGTCT 1500
CTCAAGGTGTTCATCCTGGTATTATGACTTATGCTATTTTGCTGGATGGGTTGTGTGACA 1560
ATGGCGAACTAGAAGAGGCTTTGGGAATACTTGATCAAATGCACAAGTGTAAGATGGAAC 1620
TTGATATTGGTATATATAATATCATCATTCACGGGATGTGCAATGCAAATAAGGTCGATG 1680
ATGCTTGGAGTTTGTTCTGTAGCCTCTCTCTCAAAGGAGTGAAGCGTGATATTCAGTCAT 1740
ACAACATAATGTTGTCAGGATTATGTAAGAGGAGCTCATTGTCTGAAGCGGATGCATTGT 1800
TTAGAAAAATGAAGGAAGATGGGTATGAGCCAGATGGTTGTACGTACAATACACTTATCA 1860
GAGCACATCTTCGAGGTAATGACATAACAACTTCAGTTCAACTCATTGAAGAAATGAAGA 1920
GGTGTGGGTTCTCTTCAGATGCTTCCACCGTAAAGATTGTTATGGATATGTTATCGAGTG 1980
GTGAATTGGACAAAAGCTTTCTAAATATGCTTTCTGGTCCTTTTGGAGACAAATCATCAT 2040
CGTTGGATTGAAATAAATCTTCTTGGAAGACGCTGGTGAGCCTTGTCGGAAGGGAGATGT 2100
GCACTTGCTAATTAATATGTCTTCTTAGAATGTTTGGATCTTATCCGCAAGAGACAAAGT 2160
CCCGGTTAATGGTTTCTGAGGTACTTGGGCTTAA 2194
<210> 7
<211> 2195bp
<212> DNA
<213> 不育系大白菜的扩增基因序列
<400> 7
GTTCTCTCTCTCCCACAAAGATTTTCAAAGCTCAGTCACTCAGAGAACGAATCTTTGTGT 60
GGCCTAAGAAGAAGAGGGCGATTCATTTGAAGCTCTAAGATGGTGTTGAGGACACAGAGA 120
TGGAATCGTCTTACTACTTTGAGATTGGTTCATCTCCGTTCAACTGAGACAGGTACTCTG 180
AGAAATGCTGCTTTCTTCCAAAGCCCATACGACTTCTTCTTCTGCGTACAAGGCTTCTCT 240
GGTCTCACCAGCGATAGAAAGATGTCTTCTTACAAAGAGAGATTGAGAAGTGGTCTCGTC 300
GATATCAAGAAGGATGATGCTGTTGCTCTGTTTCAGTCCATGCTTCGGTCTCGTCCTCTT 360
CCTACGGTCATTGATTTCAACAGATTGTTTGGTTTACTTGCCAGAACTAAACAGTACGAT 420
CTCGTGTTAGCTCTCTGCAAGCAAATGGAACTGAAAGGGATTGCGTATGACCTCTACACT 480
CTCAACATTATGATCAATTGCTTCTGCAGGCGTCGGAAACTCGGTTTTGCTTTTTCCGCT 540
ATGGGGGAGATCTTCAAACTTGGGTATGAGCCTAACACAGTCACATTTAACACCCTCCTC 600
AATGGCTTATGTCTCGAGGGCAGAGTCTTTGAAGCTGTGGAGTTAGTTGATTGTATGGTC 660
CTAAGCCAACATGTACCAGATCTTATCACCCTCAACACTATTGTCAATGGGCTTTGTCTC 720
AAAGATAGAGTGTCTGAAGCAGTGGATTTAATAGCTCGAATGATGGATAAAGGATGTCAA 780
GCCGATCAGTTTACCTATGGTCCAATCTTGAACAGAATGTGTAAGTCTGGGAACACTGCC 840
TCGGCCTTGGATCTGCTCAGGAAGATGGAACATAGAAAGATCAAGCCACACGTAGTCACA 900
TACAATATCATCATTGACAATCTTTGCAAAGATGGGAGACTCGACGATGCACTCAGCTTT 960
TTCAGTGAAATGGAAACCAAAGGGATCAAAGCAGATGTCATTACCTACAACTCTCTCATA 1020
GGAAGCTTCTGTAGTTTTGGCAGATGGGATGATGGTGCACAGTTGCTGAGGGATATGATT 1080
ACAAGGAAAATCACCCCCAACGTTGTCACTTTCAGTGCTTTGATTGATAGTCTTGTTAAA 1140
GAGGGAAAGCTTACTGAGGCTAAAGACTTGTACAATGAGATGATCACAAGAGGCATAGAT 1200
CCTAATACCATTACATATAGTACTTTGATATATGGGTTGTGCATGGAGAACCGCTTAGAT 1260
GAAGCCAACCAGATGATGGACCTCATGGTTAGCAAGGGATGCGATCCTGATATCGTGACG 1320
TTTAATGTCCTTATAAACGGATTTTGTAAGGCTAAACAGGTTGATGTTGGTATGAGACTA 1380
TTCCGAAAGATGTCTCTGAGAGGAGTGATTGCAGATACAGTGACTTATAGCACTCTCATC 1440
CAAGGGTTTTGTCAATCAAGAGAACTTATTGTCGCCAAAGAAGTCTTCCAAGAGATGGTC 1500
TCTCAAGGTGTTCATCCTGGTATTATGACTTATGGTATTTTGCTGGATGGGTTGTGTGAC 1560
AATGGCGAACTAGAAGAGGCTTTGGGAATACTTGATCAAATGCACAAGTGTAAGATGGAA 1620
CTTGATATTGGTATATATAGTATCATCATTCACGGGTTGTGCAATGCAAGTAAGATCGAT 1680
GATGCTTGGGATCTATTCTGTAGCCTCTCTCTCAAAGGAGTGAAGCGTGATATTCAGTCA 1740
TACAACATAATGTTGTCAGGATTATGTAAAAGGAGCTCATTGTCTGAAGCGGATGCATTG 1800
TTTAGAAAAATGAAGGAAGATGGGTATGAGCCAGATGGTTGTACGTACAATACACTTATC 1860
AGAGCACATCTTCGAGGTAGTGACATAACAACTTCAGTTCAACTCATTGAAGAAATGAAG 1920
AGGTGTGGGTTCTCTTCAGATGCTTCCACCGTAAAGATTGTTATGGATATGCTATCAAGT 1980
GGTGAATTGGACAAAAGCTTTCTAAATATGCTTTCTGGTCCTTTTGGAGACAAATCATCA 2040
TTGTTGGATTGAAATAAATCTTCTTGGAAGACGCTGGTGAGCCTTGTCGGAAGGGAGATG 2100
TGCACTTGCTAATTAATATGTCTTCTTAGAATGTTTGGATCTTATCCGCAAGAGACAAAG 2160
TCCCGGTTAATGGTTTCTGAGGTACTTGGGCTTAA 2195
<210> 8
<211> 649bp
<212> DNA
<213> 不育系大白菜氨基酸序列
<400> 8
MVLRTQRWNRLTTLRLVHLRSTETGTLRNAAFFQSPYDFFFCVQGFSGLTSDRKMSSYKE 60
RLRGLVDIKKDDAVALFQSMLRSRPLPTVIDFNRLFGLLARTKQYDLVLALCKQMELKGI 120
AYDLYTLNIMINCFCRRRKLGFAFSAMGEIFKLGYEPNTVTFNTLLNGLCLEGRVFEAVE 180
LVDCMVLSQHVPDLITLNTIVNGLCLKDRVSEAVDLIARMMDKGCQADQFTYGPILNRMC 240
KSGNTASALDLLRKMEHRKIKPHVVTYNIIIDNLCKDGRLDDALSFFSEMETKGIKADVI 300
TYNSLIGSFCSFGRWDDGAQLLRDMITRKITPNVVTFSALIDSLVKEGKLTEAKDLYNEM 360
ITRGIDPNTITYSTLIYGLCMENRLDEANQMMDLMVSKGCDPDIVTFNVLINGFCKAKQV 420
DVGMRLFRKMSLRGVIADTVTYSTLIQGFCQSRELIVAKEVFQEMVSQGVHPGIMTYGIL 480
LDGLCDNGELEEALGILDQMHKCKMELDIGIYSIIIHGLCNASKIDDAWDLFCSLSLKGV 540
KRDIQSYNIMLSGLCKRSSLSEADALFRKMKEDGYEPDGCTYNTLIRAHLRGSDITTSVQ 600
LIEEMKRCGFSSDASTVKIVMDMLSSGELDKSFLNMLSGPFGDKSSLLD 649