本发明涉及生物技术领域，具体地说涉及从尿液中分离尿激酶的方法。
背景技术：
尿激酶系从健康男尿中分离或从人肾组织培养中获得的一种酶蛋白。直接作用于内源性纤维蛋白溶解系统，能催化裂解纤溶酶原或纤溶酶。亦能降解血循环中的纤维蛋白原，凝血因子V和凝血因子V3等，从而发挥溶栓作用。对新形成的血栓起效快、效果好，还能提高血管ADP酶活性，抑制ADP诱导的血小板凝聚，预防血栓形成。该品主要用于血栓栓塞性疾病的溶栓治疗。包括急性广泛性肺栓塞、胸痛6—12 小时内的冠状动脉栓塞和心肌梗死、症状短于3—6小时的急性期脑血管栓塞、视网膜动脉栓塞和其他外周动脉栓塞症状严重的骼-股静脉血栓形成者。也用于人工心瓣手术后预防血栓形成，保持血管插管和胸腔及心包腔引流管的通畅等。溶栓的疗效均需后继的肝素抗凝加以维持。
但现有技术对于从尿液中提取尿激酶的方法还不成熟，其收率达不到0.01%，效价不高，大大的浪费了原料和时间。
我公司自2006年开始对尿激酶的生产工艺进行试验研究，采用甲壳质吸附等现代蛋白质高端生化分离技术进行生产，使尿激酶的收率大幅提高，达到0.02%以上，提高了效价，生产工艺稳定，缩短时间，质量可控。
技术实现要素：
本发明提供了一种提高尿激酶收率的方法研究，是为了攻克甲壳质吸附法从尿中提取尿激酶，尿激酶收率过低，效价不高不稳定的缺点，利用尿激酶是一种糖蛋白，蛋白质在等电点溶解度最低的性质，在甲壳质吸附过程中，调尿液PH值至尿激酶等电点，使尿激酶易于沉淀析出。从而提高了尿激酶收率，保证了效价的稳定性。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案予以实现：
一种提高尿激酶收率的方法研究，其特征在于：尿液中加入甲壳质，调节到PH5.5～6.0，使其吸附完全。
在发明的技术方案中，还具有以下技术特征：所述甲壳质等电点吸附法包括如下步骤：
1）尿液检查
1.1） 合格的尿液应当澄清；
1.1）合格的尿液pH值应当在5.0-6.5之间。
2）吸附工序：
2.1）取合格尿1.0T用二层纱布过滤，滤入塑料桶中；
2.2）在不断搅拌的同时，加入14～20kg甲壳质，调节尿液pH到5.5～6.0之间；
2.3）搅拌吸附2小时，弃去尿液，用水洗涤甲壳质去残尿及杂质，至澄清为止。
3）脱附工序：
用5%氨水30～35L搅拌洗脱1小时，抽滤，收集洗脱液，甲壳质再用同量的5%的氨水溶液洗脱1小时，收集洗脱液，合并二次洗脱液。
4）盐析工序：
4.1）洗脱液中加入固体硫酸铵3～5kg，搅拌溶解，放置过夜沉淀，离心，收集沉淀的尿激酶盐析品；
4.2）将尿激酶盐析品，置于用五氧化二磷作干燥剂的真空干燥器中真空干燥，干燥后即得尿激酶。
2、根据权利要求1所述的一种提高尿激酶收率的方法研究，其特征在于：尿液中加入甲壳质，调节到PH5.5～6.0，使其吸附完全。
与现有技术相比，本发明的优点和积极效果是：
本发明的甲壳质吸附法从尿液中提取尿激酶，通过调尿液PH至尿激酶等电点，使其易于沉淀析出。使尿激酶产品收率提高到0.02%以上。
具体实施方式
实施例
1尿液检查：
1.1 尿液澄清；
1.2 尿液的pH值在6.0
2 吸附工序：
2.1 取合格尿1.0T用二层纱布过滤，滤入塑料桶中；
2.2 在不断搅拌的同时， 加入16.5kg甲壳质，调节尿液pH到6.0；
2.3 搅拌吸附2小时，弃去尿液，用水洗涤甲壳质去残尿及杂质，至澄清为止。
3 脱附工序：
用5%氨水33L搅拌洗脱1小时，抽滤，收集洗脱液，甲壳质再用同量的5%的氨水溶液洗脱1小时，收集洗脱液，合并二次洗脱液。
4 盐析工序：
4.1 洗脱液中加入固体硫酸铵3.5kg，搅拌溶解，放置过夜沉淀，离心，收集沉淀的尿激酶盐析品；
4.2 将尿激酶盐析品，置于用五氧化二磷作干燥剂的真空干燥器中真空干燥，干燥后即得尿激酶。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。