一种人尿激肽原酶粗制品的制备方法与流程

文档序号:12411707阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种人尿激肽原酶粗制品的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:

S1收集吸附尿蛋白后的吸附剂,洗脱,收集尿蛋白洗脱峰;

S2将步骤S1得到的尿蛋白洗脱峰进行超滤浓缩,调节pH为4~5.8,电导率为20~70mS/cm,得到浓缩液;

S3将步骤S2得到的浓缩液上样金属螯合亲和层析柱,平衡液冲洗金属螯合亲和层析柱,然后使用水作为洗脱液进行洗脱,收集人尿激肽原酶洗脱峰;所述平衡液由0.5~2mol/L的磷酸盐缓冲液和0.01~0.1mol/L的醋酸溶液以3~5:1的体积比组成,平衡液的pH为4~5.8;

S4向步骤S3得到的人尿激肽原酶洗脱峰中缓慢加入硫酸铵,搅拌,静置,收集沉淀,得到人尿激肽原酶粗制品。

2.根据权利要求1所述的人尿激肽原酶粗制品的制备方法,其特征在于:所述步骤S2中,调节pH为4.5~5.5,电导率为25~60mS/cm。

3.根据权利要求1所述的人尿激肽原酶粗制品的制备方法,其特征在于:所述步骤S3中,平衡液由0.8~1.2mol/L的磷酸盐缓冲液和0.03~0.5mol/L的醋酸溶液以3~4:1的体积比组成,平衡液的pH为4.2~5.0。

4.根据权利要求3所述的人尿激肽原酶粗制品的制备方法,其特征在于:所述步骤S3中,平衡液由1.0~1.2mol/L的磷酸盐缓冲液和0.1~0.3mol/L的醋酸溶液以4:1的体积比组成,平衡液的pH为4.4~4.8,电导率为40~55mS/cm。

5.根据权利要求1所述的人尿激肽原酶粗制品的制备方法,其特征在于:所述步骤S1中,吸附剂为阴离子交换树脂。

6.根据权利要求5所述的人尿激肽原酶粗制品的制备方法,其特征在于:所述步骤S1中,吸附剂为大孔型强阴离子交换树脂。

7.根据权利要求1所述的人尿激肽原酶粗制品的制备方法,其特征在于:所述步骤S1中,洗脱液为0.3~2mol/L的磷酸盐缓冲液,pH为4~6,NaCl的浓度为0.01~0.45mol/L。

8.根据权利要求1所述的人尿激肽原酶粗制品的制备方法,其特征在于:所述金属螯合亲和层析柱的金属离子为Cu2+、Zn2+或Ni2+

9.根据权利要求8所述的人尿激肽原酶粗制品的制备方法,其特征在于:所述金属螯合亲和层析柱的金属离子为Cu2+

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