一种用于人外周血T细胞的分离及激活的方法与流程

文档序号:12411430阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于人外周血T细胞的分离及激活的方法,其特征在于:所述方法是利用CD4和CD8抗体磁珠分离人外周血T细胞,然后将获得的T细胞用T细胞激活试剂激活,从而用于慢病毒转化做准备。

2.根据权利要求1所述的用于人外周血T细胞的分离及激活的方法,其特征在于:所述利用CD4和CD8抗体磁珠分离人外周血T细胞是将人外周血白细胞与CD4和CD8抗体磁珠共孵育,然后将孵育后的T细胞置于磁场内的分离柱中,使其与抗体磁珠结合,通过磁场的作用,未与抗体磁珠结合的阴性细胞能够用缓冲液洗出分离柱;与抗体磁珠结合的T细胞滞留于分离柱内,将滞留有T细胞的分离柱移离磁场,即分离获得人外周血T细胞。

3.根据权利要求1所述的用于人外周血T细胞的分离及激活的方法,其特征在于:所述T细胞激活试剂采用TransAct CD3/28,其是将人源化的CD3和CD28抗体偶联与聚合的纳米基质,能够通过离心便利地清除,经该试剂激活后的细胞可有效的被慢病毒转化。

4.根据权利要求1至3任一项权利要求所述的用于人外周血T细胞的分离及激活的方法,其特征在于:所述用于人外周血T细胞的分离及激活的方法,包括以下步骤:

S1:用外周血单个核细胞分离液分离外周血单个核细胞;

S2:将外周血单个核细胞与CD4和CD8抗体磁珠孵育结合;

S3:孵育后的T细胞通过置于磁场内的分离柱,分离获得人外周血T细胞;

S4:将分离获得的人外周血T细胞悬浮于T细胞培养基中,加入T细胞激活试剂TransAct CD3/28进行激活。

5.根据权利要求4所述的用于人外周血T细胞的分离及激活的方法,其特征在于:所述外周血单个核细胞分离液采用外周血单个核细胞分离液Ficoll-Paque。

6.根据权利要求4所述的用于人外周血T细胞的分离及激活的方法,其特征在于:所述T细胞培养基为含2%人血清AB和200单位/mL细胞介素-2的T细胞培养基。

7.根据权利要求4所述的用于人外周血T细胞的分离及激活的方法,其特征在于:所述T细胞激活试剂TransAct CD3/28的加入量按1:17.5稀释度加入。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1