一种用于检测绿脓杆菌的试剂盒与应用的制作方法

文档序号:14827977发布日期:2018-06-30 09:15阅读:来源:国知局
一种用于检测绿脓杆菌的试剂盒与应用的制作方法

技术特征:

1.一种LAMP引物组,其特征在于,包括如SEQ ID NO:1~6所示核苷酸序列的6条引物。

2.如权利要求1所述的引物组在制备检测绿脓杆菌试剂中的应用。

3.如权利要求2所述应用,其特征在于,所述眼部检测的样品为眼部样品、医疗器械、药品、食品、化妆品、皮肤、分泌物或口腔黏膜。

4.一种用于检测绿脓杆菌的试剂盒,其特征在于,包括如权利要求1所述的LAMP引物组。

5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,还包括:LAMP反应液、LAMP密封液和LAMP显色液。

6.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述LAMP反应液中,包括:Bst聚合酶,LAMP反应缓冲液,超纯水。

7.一种非诊断目的的绿脓杆菌检测方法,其特征在于,以待测样品为模板,以如权利要求1所述的引物组进行LAMP扩增,经显色后,根据显色结果判断样品是否含有绿脓杆菌。

8.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,所述LAMP扩增的温度为65℃时间为30min。

9.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,所述LAMP扩增的反应液体系包括:引物组工作液、LAMP反应液、样品混悬液、超纯水和LAMP密封液,

所述引物组工作液、所述LAMP反应液、所述样品混悬液、所述超纯水和所述LAMP密封液的体积比为1:12.5:2:(8.5~10.5):20。

10.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,所述引物组工作液中,

如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的引物的浓度为25μmol/L~50μmol/L;

如SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的引物的浓度为25μmol/L~50μmol/L;

如SEQ ID NO:3所示核苷酸序列的引物的浓度为15μmol/L~30μmol/L;

如SEQ ID NO:4所示核苷酸序列的引物的浓度为15μmol/L~30μmol/L;

如SEQ ID NO:5所示核苷酸序列的引物的浓度为5μmol/L~10μmol/L;

如SEQ ID NO:6所示核苷酸序列的引物的浓度为5μmol/L~10μmol/L。

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