极性溶剂溶液及其制造方法与流程

本发明涉及能够高度保持溶液的粘度的极性溶剂溶液及其制造方法。
背景技术：
：二甲基亚砜(dmso)等极性溶剂由于易于溶解聚合物等物质，因此被用作丙烯酸纤维的聚合、纺纱液或聚酰亚胺的聚合溶剂等。本申请人在专利文献1～2中提出了将上述极性溶剂用作蛛丝蛋白及蚕丝蛋白等多肽的溶剂。现有技术文献专利文献专利文献1：日本专利第5427322号公报专利文献2：日本专利第5584932号公报技术实现要素：发明要解决的技术问题但是，溶解有蛛丝蛋白及蚕丝蛋白等多肽的二甲基亚砜(dmso)等极性溶剂溶液有由于管理的方式不同而粘度降低的情况，作为纺纱或膜等的纺丝原液使用时，从进行稳定的纺纱或流延的观点出发，仍有改善的余地。本发明提供作为纺纱或膜等的纺丝原液使用时，能够不发生粘度降低地、进行稳定的纺纱或流延的极性溶剂溶液及其制造方法。用于解决技术问题的手段本发明涉及一种极性溶剂溶液，其特征在于，其为在极性溶剂中溶解有含聚氨基酸的溶质的极性溶剂溶液，其中，以所述溶液为100质量％时，所述溶液中的水含量(含水率)小于5质量％。本发明还涉及一种极性溶剂溶液的制造方法，其特征在于，其为在极性溶剂中溶解有含聚氨基酸的溶质的极性溶剂溶液的制造方法，其中，通过改变所述溶液中的水含量来调整所述溶液的粘度。本发明还涉及一种极性溶剂溶液的制造方法，其特征在于，其为在极性溶剂中溶解有含聚氨基酸的溶质的极性溶剂溶液的制造方法，其中，通过减少所述溶液中的水含量来增加所述溶液的粘度。发明效果本发明的极性溶剂溶液通过使在极性溶剂中溶解有含聚氨基酸的溶质的极性溶剂溶液的水含量小于5质量％，可防止粘度的显著降低，由此在作为纺纱或膜等的纺丝原液使用时等，可以进行稳定的纺纱或流延。另外，本发明的制造方法中，通过改变在极性溶剂中溶解有含聚氨基酸的溶质的极性溶剂溶液中的水含量来调整所述溶液的粘度，可以获得能够进行稳定的纺纱或流延的极性溶剂溶液。另外，本发明的制造方法中，通过减少所述溶液中的水含量、增加所述溶液的粘度，可以获得能够进行稳定的纺纱或流延的极性溶剂溶液。附图说明图1为研究本发明的数个实施例和比较例的相对于温度变化的粘度变化的曲线图。图2为研究本发明另外数个实施例的有无湿度管理及改变蛋白浓度和温度时的粘度变化的曲线图。图3为表示将全干状态的蛛丝蛋白(粉体)暴露在大气中时的含水率的变化的曲线图。具体实施方式本发明者们发现，聚氨基酸(特别是多肽)自身、极性溶剂中溶解有含所述聚氨基酸的溶质的极性溶剂溶液均易于吸湿，当发生吸湿时，有粘度降低等的问题。因此，本发明在极性溶剂中溶解有含聚氨基酸的溶质的极性溶剂溶液中，以所述溶液为100质量％时，所述溶液中的水含量小于5质量％(0质量％以上且小于5质量％)。优选的水含量为0质量％以上且3质量％以下、更优选为0质量％以上且1.5质量％以下。为上述范围时，聚氨基酸(特别是多肽)以膨润的状态溶解在极性溶剂中，可高度地维持极性溶剂溶液的粘度。水含量为5质量％以上时，粘度显著地降低，作为用于制作纺纱或膜等的纺丝原液等进行使用时，纺纱性或流延性降低。本说明书中，有时也将所述极性溶剂溶液称作纺丝原液。以下，主要以作为聚氨基酸代表例的多肽为例进行说明。本发明中使用的极性溶剂优选含有选自由(i)二甲基亚砜(dmso)、(ii)n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、(iii)n,n-二甲基乙酰胺(dma)及(iv)n-甲基-2-吡咯烷酮(nmp)组成的组中的至少1种非质子性极性溶剂。其原因在于，这些非质子性极性溶剂易于使含有多肽的溶质溶解。另外，本发明中使用的极性溶剂中除了包括所述非质子性极性溶剂之外、还包括含有六氟异丙醇(hfip)或甲酸、各种醇(例如甲醇、乙醇、2-丙醇等碳数为1～6的低级醇)等质子性极性溶剂的情况。其中，优选所述极性溶剂在以所述极性溶剂整体为100质量％时，使选自上述(i)～(iv)中的至少1种非质子性极性溶剂的总量的比例为10～100质量％范围内的值。由此，可提高含有多肽的溶质的溶解度。本发明中使用的溶质只要含有聚氨基酸(特别是多肽)即可，并无特别限定。本说明书中，聚氨基酸是指多个氨基酸的氨基与羧基通过酰胺键聚合而成的聚酰胺化合物。作为聚氨基酸，构成聚酰胺化合物的氨基酸优选为15个以上、更优选为20个以上、进一步优选为30个以上、更进一步优选为100个以上、特别优选为500个以上。作为聚氨基酸，优选为6000个以下、更优选为5000个以下、进一步优选为3000个以下、特别优选为2000个以下。本说明书中使用的溶质例如可以单独使用聚氨基酸，或者也可将例如碳水化物或合成树脂等除聚氨基酸以外的物质中的1种或2种以上与多肽组合使用。另外，本说明书中使用的溶质例如可以单独使用多肽，或者也可将例如碳水化物或合成树脂等除多肽以外的物质中的1种或2种以上与多肽组合使用。所述多肽优选是结构蛋白、更优选含有结晶区域。这种多肽在制成纤维或膜时，可以发挥高的强度或韧性。另外，结构蛋白是指与生物体的结构有关的蛋白、或者生物体所制造的构成结构体的蛋白，例如可举出丝蛋白、丝胶(sericin)、胶原、角蛋白、弹性蛋白、节肢弹性蛋白等。另外，所述多肽优选是蛛丝蛋白或蚕丝蛋白等丝蛋白，其中特别优选蛛丝蛋白。其原因在于，蛛丝蛋白与极性溶剂的亲和性高、易于溶解。在以本发明的极性溶剂溶液为100质量％时，溶质(例如蛛丝蛋白)的浓度优选为2～50质量％、更优选为3～40质量％、特别优选为5～30质量％。通过为这种浓度，可以有效地防止极性溶剂溶液的粘度降低或过度提高。本发明的极性溶剂溶液的粘度优选在去除了杂质等无用之物或气泡等的状态下达到10～100000mpa·s、进一步优选达到15～20000mpa·s、特别优选达到100～10000mpa·s。通过作为纺丝原液使用这种范围内的粘度的极性溶剂溶液，可以良好地进行湿式纺纱、膜流延成型。本发明的制造方法通过改变所述极性溶剂溶液中的水含量，调整所述极性溶剂溶液的粘度。另外，本发明的制造方法通过减少所述极性溶剂溶液中的水含量，增加所述极性溶剂溶液的粘度。这些制法中，在以所述极性溶剂溶液为100质量％时，按照所述极性溶剂溶液中的水含量优选小于5质量％、更优选为0～3质量％、进一步优选为0～1.5质量％的方式进行调整。如此，可获得作为纺纱或膜的纺丝原液等使用时、可进行稳定的纺纱或流延的极性溶剂溶液。本发明的制造方法中，用于减少所述溶液中的水含量的调整可以如下实现：例如预先对所述溶质或溶剂进行加热干燥、真空干燥，对所述溶液在制造时和储存时的至少任一情况下的环境气体的相对湿度进行调整，或者对所制造的所述溶液进行加热、使水分蒸发，使用以沸石为代表的各种吸湿剂(吸湿材料)等进行吸湿等，或者适当地组合这些操作等，从而实现。其中，作为用于减少所述溶液中的水含量的调整方法，优选采用在使所述溶质溶解于所述溶剂之前、对其干燥的方法。由此，可以更为确实且高效地减少所述溶液中的水含量。另外，通过调整环境气体的相对湿度改变所述溶液中的水含量时，有利的是使所述溶液在制造时和储存时的至少任一情况下的环境气体的相对湿度保持在1.3％rh以下的条件。为了使环境气体保持在相对湿度为1.3％rh以下的条件，优选在所谓的干燥室内进行溶液制作或保存等的处理。本发明中，作为将含多肽的溶质溶解的极性溶剂优选使用的dmso特别有利地被用作例如溶解含蛛丝蛋白的溶质的溶剂。dmso的熔点为18.4℃、沸点为189℃，与现有方法中使用的六氟异丙醇(hfip)的沸点59℃、六氟丙酮(hfac)的沸点–26.5℃相比，沸点高得多。另外，dmso在一般产业领域中也被用作丙烯酸纤维的聚合、纺纱液，还被用作聚酰亚胺的聚合溶剂，因此是成本低廉且安全性得到确认的物质。本发明中作为溶质所含的多肽示例的蛛丝蛋白可以是天然蛛丝蛋白、天然蛛丝蛋白来源或类似(以下称作来源)的蛋白，并无特别限定。另外，这里所说的天然蛛丝蛋白来源的蛋白是指具有与天然蛛丝蛋白所具有的氨基酸的重复序列相同或类似的氨基酸序列，例如可举出基因重组蛛丝蛋白或天然蛛丝蛋白的突变体、类似物或衍生物等。所述蛛丝蛋白从强韧性优异的观点出发，优选是蜘蛛的大壶状腺所产生的大吐丝管拖丝蛋白或其来源的蛛丝蛋白。作为所述大吐丝管拖丝蛋白，可举出络新妇蛛(nephilaclavipes)来源的大壶状腺丝蛋白(spidroin)masp1或masp2、十字园蛛(araneusdiadematus)来源的adf3或adf4等。所述蛛丝蛋白可以是蜘蛛的小壶状腺所产生的小吐丝管拖丝蛋白或其来源的蛛丝蛋白。作为所述小吐丝管拖丝蛋白，可举出络新妇蛛(nephilaclavipes)来源的小壶状腺丝蛋白(spidroin)misp1或misp2。另外，所述蛛丝蛋白还可以是蜘蛛的鞭状腺(flagelliformgland)所产生的横丝蛋白或其来源的蛛丝蛋白。作为所述横丝蛋白，例如可举出络新妇蛛(nephilaclavipes)来源的鞭毛状丝蛋白(flagelliformsilkprotein)等。作为所述大吐丝管拖丝蛋白来源的蛛丝蛋白(多肽)，例如可举出含有2个以上、优选4个以上、更优选6个以上的式1：rep1-rep2(1)所示的氨基酸序列的单元的基因重组蛛丝蛋白。其中，所述基因重组蛛丝蛋白中，式(1)：rep1-rep2(1)所示的氨基酸序列的单元可相同，也可不同。所述式(1)中，rep1表示主要由丙氨酸构成的(x1)p所示的聚丙氨酸区域、优选rep1表示聚丙氨酸。这里，p并无特别限定，优选表示2～20的整数，更优选表示4～12的整数。x1表示丙氨酸(ala)、丝氨酸(ser)或甘氨酸(gly)。(x1)p所示的聚丙氨酸区域中，丙氨酸的总残基数优选是该区域的氨基酸的总残基数的80％以上、更优选为85％以上。所述rep1中，连续排列的丙氨酸优选是2个残基以上、更优选是3个残基以上、进一步优选是4个残基以上、特别优选是5个残基以上。另外，所述rep1中，连续排列的丙氨酸优选是20个残基以下、更优选是16个残基以下、进一步优选是12个残基以下、特别优选是10个残基以下。所述式(1)中，rep2为10～200个残基的氨基酸所构成的氨基酸序列，所述氨基酸序列中所含的甘氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸及丙氨酸的总残基数相对于氨基酸残基数整体为40％以上、优选为50％以上、更优选为60％以上。所述rep1在纤维内相当于形成结晶β片的结晶区域，所述rep2在纤维内相当于具有柔软性、大部分缺乏整齐排列的结构的无定形区域。进而，所述[rep1-rep2]相当于由结晶区域和无定形区域构成的反复区域(重复序列)，是拖丝蛋白的特征性序列。作为含有2个以上所述式1：rep1-rep2(1)所示的氨基酸序列的单元的蛛丝蛋白，例如可举出具有序列号1、序列号2及序列号3中的任一个所示的氨基酸序列的adf3来源的基因重组蛛丝蛋白。序列号1所示的氨基酸序列是在n末端附加有由起始密码子、his10标签及hrv3c蛋白酶(人鼻病毒3c蛋白酶)识别位点构成的氨基酸序列(序列号4)的adf3的氨基酸序列中，将第1～13个反复区域增加至大约2倍、同时使其突变以使翻译在第1154个氨基酸残基处终止的序列。序列号2所示的氨基酸序列是在从ncbi数据库获得的adf3的部分氨基酸序列(ncbi的genebank的登记号：aac47010、gi：1263287)的氨基酸序列的n末端附加有由起始密码子、his10标签及hrv3c蛋白酶(人鼻病毒3c蛋白酶)识别位点构成的氨基酸序列(序列号4)的氨基酸序列。序列号3所示的氨基酸序列是在n末端附加有由起始密码子、his10标签及hrv3c蛋白酶(人鼻病毒3c蛋白酶)识别位点构成的氨基酸序列(序列号4)的adf3的氨基酸序列中，使第1～13个反复区域增加至大约2倍的序列。另外，作为含有2个以上所述式1：rep1-rep2(1)所示的氨基酸序列的单元的蛛丝蛋白，也可以使用由在序列号1、序列号2及序列号3中的任一个所示的氨基酸序列中取代、缺失、插入和/或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列构成，并且具有由结晶区域和无定形区域构成的反复区域的蛛丝蛋白。作为所述小吐丝管拖丝蛋白来源的蛛丝蛋白(多肽)，可举出含有式2：rep3-rep4-rep5(2)所示的氨基酸序列的基因重组蛛丝蛋白。所述式2中，rep3表示(gly-gly-z)m所示的氨基酸序列，rep4表示(gly-ala)l所示的氨基酸序列，rep5表示(ala)r所示的氨基酸序列。rep3中，z表示任意1个氨基酸，特别优选是选自由ala、tyr及gln组成的组中的1个氨基酸。另外，rep3中m优选为1～4，rep4中l优选为0～4，rep5中r优选为1～6。蜘蛛丝中，小吐丝管拖丝自蜘蛛巢的中心被绕成螺旋状，作为巢的补强材料使用，或作为包裹所捕获的猎物的丝使用。已知与大吐丝管拖丝相比，虽然抗拉强度差、但伸缩性更高。认为其原因在于，在小吐丝管拖丝中，由于多个结晶区域由甘氨酸和丙氨酸交替连接的区域形成，因此与仅由丙氨酸形成结晶区域的大吐丝管拖丝相比，结晶区域的氢键更易于变弱。作为所述横丝蛋白来源的基因重组蛛丝蛋白(多肽)，例如可举出含有式3：rep6(3)所示的氨基酸序列的基因重组蛛丝蛋白。所述式3中，rep6是指(u1)n或(u2)n所示的氨基酸序列。rep6中，u1是指gly-pro-gly-x-x(序列号12)所示的氨基酸序列、u2是指gly-pro-gly-gly-x(序列号13)所示的氨基酸序列。另外，u1及u2中，x是指任意一个氨基酸，但优选是选自由ala、ser、tyr、gln、val、leu及ile组成的组中的1个氨基酸，更优选是选自由ala、ser、tyr、gln及val组成的组中的1个氨基酸，多个x可相同也可不同。另外，rep6中，n表示至少为4以上的数字，优选为10以上、更优选为20以上。蜘蛛丝的一大特征在于，横丝不具有结晶区域而具有由无定形区域构成的反复区域。大吐丝管拖丝等中由于具有由结晶区域和无定形区域构成的反复区域，因此推测兼具高的应力和伸缩性。另一方面，对于横丝而言，虽然与大吐丝管拖丝相比、应力较差，但具有更高的伸缩性。认为其原因在于，横丝的大部分是由无定形区域构成的。所述基因重组蛛丝蛋白(多肽)可以使用利用含有对编码成为基因重组对象的天然型蛛丝蛋白的基因的表达载体进行转化而得到的宿主进行制造。基因的制造方法并无特别限定，由蜘蛛来源的细胞利用聚合酶链反应(pcr)等对编码天然型蛛丝蛋白的基因进行扩增形成克隆、或者化学地进行合成。基因的化学合成方法也无特别限定，例如可以根据自ncbi的网络数据库等获得的天然型蛛丝蛋白的氨基酸序列信息，利用pcr等对在aktaoligopilotplus10/100(gehealthcarejapan株式会社)等中自动合成的低聚核苷酸进行连接而合成。此时，为了容易地进行蛋白的纯化或确认，还可以合成对由在所述氨基酸序列的n末端附加有由起始密码子及his10标签构成的氨基酸序列的氨基酸序列所构成的蛋白进行编码的基因。作为所述表达载体，可以使用能够从dna序列表达蛋白的质粒、噬菌体、病毒等。作为所述质粒型表达载体，只要目标基因能够在宿主细胞内表达、且其本身能够进行扩增即可，并无特别限定。例如作为宿主使用大肠杆菌rosetta(de3)时，可以使用pet22b(+)质粒载体、pcold质粒载体等。其中，从蛋白的生产率的观点出发，优选使用pet22b(+)质粒载体。作为所述宿主，例如可以使用动物细胞、植物细胞、微生物等。实施例以下使用实施例更为具体地说明本发明。其中，本发明并不限定于下述实施例。＜各测定方法＞(1)粘度：使用京都电子工业株式会社制的ems粘度计(ems-01s)进行测定。(2)相对湿度：测定实验环境的温度和露点温度，使用公知的计算公式计算。(3)纺丝原液中的水分率：使用京都电子工业株式会社制的混合法卡氏水分测定仪(hybridkarlfischermoisturetitrator，mkh-700)进行测定。(实施例1～4、比较例1)1.蛛丝蛋白的准备＜基因合成＞(1)adf3kai的基因的合成自ncbi的网络数据库获得作为十字园蛛的2个主要拖丝蛋白之一的adf3(gi：1263287)的部分氨基酸序列，将对在该序列的n末端附加有由起始密码子、his10标签及hrv3c蛋白酶(人鼻病毒3c蛋白酶)识别位点构成的氨基酸序列(序列号4)的氨基酸序列(序列号2)进行编码的基因的合成委托给genscript公司。其结果，获得导入有由序列号5所示的碱基序列构成的adf3kai的基因的puc57载体(在基因的5’末端正上游具有ndei位点及在5’末端正下游具有xbai位点)。之后，利用ndei及ecori对该基因进行限制酶处理，重组至pet22b(+)表达载体中。(2)adf3kai-large的基因的合成以adf3kai为模板，使用t7启动子引物(序列号8)和repxbai引物(序列号9)进行pcr反应，对adf3kai的基因序列中的5’侧一半的序列(以下记为序列a)进行扩增，重组至使用mightycloningkit(takara-bio株式会社制)预先用ndei及xbai对所述片段进行了限制酶处理的puc118载体中。同样，以adf3kai为模板，使用xbairep引物(序列号10)和t7终止子引物(序列号11)进行pcr反应，对adf3kai的基因序列中的3’侧一半的序列(以下记为序列b)进行扩增，重组至使用mightycloningkit(takara-bio株式会社制)预先用xbai、ecori对所述片段进行了限制酶处理的puc118载体中。分别用ndei、xbai对导入有序列a的puc118载体进行限制酶处理，用xbai、ecori对导入有序列b的puc118载体进行限制酶处理，通过切出凝胶，对序列a及序列b的目标dna片段进行纯化。使dna片段a、b及预先用ndei及ecori进行了限制酶处理的pet22b(+)进行连接反应，转化到大肠杆菌dh5α中。通过使用了t7启动子引物及t7终止子引物的克隆pcr，确认目标dna片段的插入后，从获得了目标尺寸(3.6kbp)的条带的克隆中提取质粒，通过使用了3130xlgeneticanalyzer(appliedbiosystems)的测序反应确认全碱基序列。其结果，确认了序列号6所示的adf3kai-large的基因的构建。另外，adf3kai-large的氨基酸序列如序列号3所示。(3)adf3kai-large-nrsh1的基因的合成以导入有上述获得的adf3kai-large基因的pet22b(+)载体为模板，通过使用了primestarmutagenesisbasalkit(takara-bio株式会社制)的部位特异性突变导入，使adf3kai-large的氨基酸序列(序列号3)中的第1155个氨基酸残基甘氨酸(gly)所对应的密码子ggc突变成终止密码子taa，将序列号7所示的adf3kai-large-nrsh1的基因构建在pet22b(+)上。对于突变导入的准确性，通过使用了3130xlgeneticanalyzer(appliedbiosystems)的测序反应进行确认。其中，adf3kai-large-nrsh1的氨基酸序列如序列号1所示。＜蛋白的表达＞将含有上述获得的adf3kai-large-nrsh1的基因序列的pet22b(+)表达载体转化到大肠杆菌rosetta(de3)中。在含有氨苄青霉素的2ml的lb培养基中对所得单克隆培养15小时后，将该培养液1.4ml添加到含有氨苄青霉素的140ml的lb培养基中，在37℃、200rpm的条件下进行培养，至培养液的od600达到3.5。接着，将od600为3.5的培养液与50％葡萄糖140ml一起添加到含有氨苄青霉素的7l的2×yt培养基中，进一步培养至od600达到4.0。之后，在所得od600为4.0的培养液中添加异丙基-β-硫代半乳糖苷(iptg)至终浓度达到0.5mm，诱导蛋白表达。在iptg添加后经过2小时的时间点，对培养液进行离心分离，将菌体回收。使从iptg添加前和iptg添加后的培养液中制备的蛋白溶液在聚丙烯酰胺凝胶中泳动，结果观察到依赖于iptg添加的目标尺寸(约101.1kda)的条带，确认了目标蛋白表达。＜纯化＞(1)在离心管(1000ml)中添加表达adf3kai-large-nrsh1的蛋白的大肠杆菌的菌体约50g和缓冲液ai(20mmtris-hcl、ph为7.4)300ml，使用混合器(ika公司制“t18basicultra-turrax”、等级2)将菌体分散后，使用离心分离机(kubota制的“model7000”)进行离心分离(11000g、10分钟、室温)，将上清舍弃。(2)在通过离心分离获得的沉淀物(菌体)中添加300ml的缓冲液ai和3ml的0.1m的pmsf(用异丙醇进行溶解)，利用所述ika公司制的混合器(等级2)将其分散3分钟。之后，使用高压匀浆机(geanirosaovi公司制的“pandaplus2000”)将菌体反复粉碎3次。(3)在经粉碎的菌体中添加含有3w/v％sds的缓冲液b(50mmtris-hcl、100mmnacl、ph为7.0)300ml，利用所述ika公司制的混合器(等级2)良好地分散后，利用振动器(taitec公司制、200rpm、37℃)搅拌60分钟。之后，利用所述kubota制的离心分离机进行离心分离(11000g、30分钟、室温)，将上清舍弃，获得sds洗涤颗粒(沉淀物)。(4)按照达到100mg/ml浓度的方式，在含1m氯化锂的dmso溶液中混悬sds洗涤颗粒，在80℃下热处理1小时。之后，利用所述kubota制的离心分离机进行离心分离(11000g、30分钟、室温)，将上清回收。(5)准备相对于所回收的上清为3倍量的乙醇，在乙醇中添加已经回收的上清，在室温下静置1小时。之后，利用所述kubota制离心分离机进行离心分离(11000g、30分钟、室温)，对凝聚蛋白进行回收。接着，使用纯水对凝聚蛋白进行洗涤、利用离心分离将凝聚蛋白回收的工序反复进行3次之后，利用冷冻干燥机将水分除去，将冻干粉回收。所得冻干粉中的目标蛋白adf3kai-large-nrsh1(约56.1kda)的纯化度通过使用totallab(nonlineardynamicsltd.)对粉末的聚丙烯酰胺凝胶电泳(cbb染色)的结果进行图像分析来确认。其结果，adf3kai-large-nrsh1的纯化度约为85％。2.纺丝原液的制备和粘度测定对上述获得的蛛丝蛋白(粉体)进行真空干燥(全干)之后，将该全干状态的蛛丝蛋白分别以浓度为15质量％的比例溶解在分别预先准备了规定量的5个dmso溶剂中，之后，在这些添加有蛛丝蛋白的5个dmso溶剂中的4个中以互不相同的量添加纯水进行混合，制作水含量(水分率)为下述表1所示的值的5种纺丝原液。这5种纺丝原液中，水含量为0质量％、0.75质量％、1.5质量％、3质量％的情况分别是实施例1、实施例2、实施例3、实施例4，水含量为5质量％的情况是比较例1。另外，制作这些实施例1～4及比较例1这5种纺丝原液时，使用振动器用5小时的时间使蛛丝蛋白溶解，然后将杂质和气泡除去。该处理全部在相对湿度为1.3％rh以下的干燥室中进行。保存也在相对湿度为1.3％rh以下的干燥室中进行。进而，对这些实施例1～4的纺丝原液和比较例1的纺丝原液，分别研究改变温度时的粘度变化。将它们的结果示于下述表1和图1中。表1由表1及图1可知，纺丝原液中的水含量小于5质量％的实施例1～4与纺丝原液中的水含量为5质量％的比较例1相比，与温度无关地粘度增高，随着温度降低的粘度上升率也明显增大。另外，实施例1～4的纺丝原液中，水含量越低则粘度越高、水含量为0质量％的实施例1的粘度也达到最高。而且，在接近于室温的25℃的温度下，实施例1～4的粘度相对于比较例1的粘度，成为2.8～4.7倍的极大值。这些结果真实地显示通过使纺丝原液中的水含量小于5质量％，可以增大粘度。另外，使用实施例1～4的纺丝原液时，也可进行稳定的纺纱或流延。(实施例5～9)该实验研究了有无湿度管理及改变蛛丝蛋白浓度和温度时的粘度变化。首先，将如上获得的蛛丝蛋白(粉体)真空干燥(全干)后，在环境气体的相对湿度为1.3％rh以下的干燥室内，将全干状态(水含量为0％)的蛛丝蛋白(粉体)溶解在dmso中至达到下述表2所示的浓度，制造蛛丝蛋白浓度互不相同的4种纺丝原液(实施例5～8)，之后，将这些实施例5～8这4种纺丝原液在相对湿度为1.3％rh以下的干燥室内保存24小时。另外，在未进行湿度管理的通常实验室内(大气中)，将全干状态的蛛丝蛋白(粉体)溶解在dmso溶剂中至浓度达到22.0质量％，制造纺丝原液(实施例9)。该实施例9的纺丝原液在未进行湿度管理的通常实验室内保存24小时。各条件如下述的表2所示。进而，研究实施例5～9的纺丝原液的温度与粘度的关系。将其结果示于图2中。表2实施例5实施例6实施例7实施例8实施例9蛋白浓度(质量％)19.520.020.521.522.0有无在干燥室内制备有有有有无有无在干燥室内保管有有有有无如图2所示，实施例9(在未进行湿度管理的环境中制造、保存的蛋白浓度为22.0质量％)的纺丝原液的温度与粘度的关系和实施例7(在干燥室中制造、保存的蛋白浓度为20.5质量％)的纺丝原液的温度与粘度的关系大致相同。认为其原因在于，在对实施例9的纺丝原液进行制造、保存的期间，大气中的水分混入到实施例9的纺丝原液中。由这些结果确认了，在纺丝原液的制造时或保存时，通过降低环境气体的相对湿度、抑制纺丝原液的吸水，可以高度地维持纺丝原液的粘度。(参考试验1)对上述获得的蛛丝蛋白(粉体)进行真空干燥(全干)之后，将全干状态的蛛丝蛋白(粉体)暴露在温度为25℃、相对湿度为72％rh的大气中，研究含水率的变化。将其结果示于图3中。由图3可知，全干状态的蛛丝蛋白(粉体)约20分钟时水分率达到约13质量％(平衡水分率)。由此可知，对粉体的蛛丝蛋白进行真空干燥之后制成纺丝原液是重要的。在未进行真空干燥时，在室温或相对湿度高的环境下保存的蛛丝蛋白的粉体中所吸附的水分直接进入到纺丝原液中。(参考试验2)为了确认因水分混入到纺丝原液中所导致的纺丝原液的粘度降低是否是仅因纺丝原液的水分而发生稀释所导致的，进行以下的试验。首先，准备温度50℃下的粘度与实施例1的纺丝原液为同等程度的餐具用洗涤剂。接着，按照以所准备的餐具用洗涤剂为100质量％时的餐具用洗涤剂中的水含量达到3质量％的方式，在餐具用洗涤剂中添加水分，在温度50℃下测定粘度，研究水分添加前和添加后的粘度的变化率。其结果，添加水分前的餐具用洗涤剂在温度50℃下的粘度为143mpa·s、水分添加后的餐具用洗涤剂在温度50℃下的粘度为133mpa·s。餐具用洗涤剂因水分添加而导致温度50℃下的粘度的降低率达到7％。与此相对，实施例1的纺丝原液在温度50℃下的粘度为153mpa·s，通过水分添加而水含量达到3质量％的实施例4的纺丝原液在温度50℃下的粘度为89mpa·s。溶解有蛛丝蛋白的纺丝原液因水分添加导致的温度50℃下的粘度降低率为42％。由此清楚可知，在溶解蛛丝蛋白等多肽而成的极性溶剂溶液中因水分混入所导致的粘度降低并非是仅因水分而发生稀释所导致的。多肽的极性溶剂溶液的粘度因水分在溶液中的混入(含有)而极端地降低认为是由于以下的理由。构成蛋白(多肽)分子的氨基酸具有多种侧链。因此，水分子进入到蛋白的极性溶剂溶液中时，在蛋白分子的侧链之间形成氢键，蛋白分子发生凝聚。由此，认为蛋白的溶解性降低、蛋白的极性溶剂溶液的粘度降低。因而，相反若从蛋白的极性溶剂溶液中将水分子除去，则可以抑制蛋白分子的凝聚、提高蛋白在极性溶剂溶液中的溶解性，其结果可以提高极性溶剂溶液的粘度。产业上的可利用性本发明的极性溶剂溶液在湿式纺纱、膜流延、凝胶、颗粒、网状物、各种成型物中是有用的。序列表自由文本序列号1～4、12、13氨基酸序列序列号5～7碱基序列序列号8～11引物序列序列表<110>丝芭博株式会社<120>极性溶剂溶液及其制造方法<130>h4382<150>jp2015-80226<151>2015-04-09<160>13<170>patentinversion3.3<210>1<211>1154<212>prt<213>artificial<220><223>adf3kai-large-nrsh1<400>1methishishishishishishishishishisserserglyserser151015leugluvalleupheglnglyproalaargalaglyserglyglngln202530glyproglyglnglnglyproglyglnglnglyproglyglnglngly354045protyrglyproglyalaseralaalaalaalaalaalaglyglytyr505560glyproglyserglyglnglnglyproserglnglnglyproglygln65707580glnglyproglyglyglnglyprotyrglyproglyalaseralaala859095alaalaalaalaglyglytyrglyproglyserglyglnglnglypro100105110glyglyglnglyprotyrglyproglyserseralaalaalaalaala115120125alaglyglyasnglyproglyserglyglnglnglyalaglyglngln130135140glyproglyglnglnglyproglyalaseralaalaalaalaalaala145150155160glyglytyrglyproglyserglyglnglnglyproglyglnglngly165170175proglyglyglnglyprotyrglyproglyalaseralaalaalaala180185190alaalaglyglytyrglyproglyserglyglnglyproglyglngln195200205glyproglyglyglnglyprotyrglyproglyalaseralaalaala210215220alaalaalaglyglytyrglyproglyserglyglnglnglyprogly225230235240glnglnglyproglyglnglnglyproglyglyglnglyprotyrgly245250255proglyalaseralaalaalaalaalaalaglyglytyrglyprogly260265270tyrglyglnglnglyproglyglnglnglyproglyglyglnglypro275280285tyrglyproglyalaseralaalaseralaalaserglyglytyrgly290295300proglyserglyglnglnglyproglyglnglnglyproglyglygln305310315320glyprotyrglyproglyalaseralaalaalaalaalaalaglygly325330335tyrglyproglyserglyglnglnglyproglyglnglnglyprogly340345350glnglnglyproglyglnglnglyproglyglyglnglyprotyrgly355360365proglyalaseralaalaalaalaalaalaglyglytyrglyprogly370375380serglyglnglnglyproglyglnglnglyproglyglnglnglypro385390395400glyglnglnglyproglyglnglnglyproglyglnglnglyprogly405410415glnglnglyproglyglnglnglyproglyglnglnglyproglygly420425430glnglyalatyrglyproglyalaseralaalaalaglyalaalagly435440445glytyrglyproglyserglyglnglnglyproglyglnglnglypro450455460glyglnglnglyproglyglnglnglyproglyglnglnglyprogly465470475480glnglnglyproglyglnglnglyproglyglnglnglyprotyrgly485490495proglyalaseralaalaalaalaalaalaglyglytyrglyprogly500505510serglyglnglnglyproglyglnglnglyproglyglnglnglypro515520525glyglyglnglyprotyrglyproglyalaalaseralaalavalser530535540valserargalaargalaglyserglyglnglnglyproglyglngln545550555560glyproglyglnglnglyproglyglnglnglyprotyrglyprogly565570575alaseralaalaalaalaalaalaglyglytyrglyproglysergly580585590glnglnglyproserglnglnglyproglyglnglnglyproglygly595600605glnglyprotyrglyproglyalaseralaalaalaalaalaalagly610615620glytyrglyproglyserglyglnglnglyproglyglyglnglypro625630635640tyrglyproglyserseralaalaalaalaalaalaglyglyasngly645650655proglyserglyglnglnglyalaglyglnglnglyproglyglngln660665670glyproglyalaseralaalaalaalaalaalaglyglytyrglypro675680685glyserglyglnglnglyproglyglnglnglyproglyglyglngly690695700protyrglyproglyalaseralaalaalaalaalaalaglyglytyr705710715720glyproglyserglyglnglyproglyglnglnglyproglyglygln725730735glyprotyrglyproglyalaseralaalaalaalaalaalaglygly740745750tyrglyproglyserglyglnglnglyproglyglnglnglyprogly755760765glnglnglyproglyglyglnglyprotyrglyproglyalaserala770775780alaalaalaalaalaglyglytyrglyproglytyrglyglnglngly785790795800proglyglnglnglyproglyglyglnglyprotyrglyproglyala805810815seralaalaseralaalaserglyglytyrglyproglyserglygln820825830glnglyproglyglnglnglyproglyglyglnglyprotyrglypro835840845glyalaseralaalaalaalaalaalaglyglytyrglyproglyser850855860glyglnglnglyproglyglnglnglyproglyglnglnglyprogly865870875880glnglnglyproglyglyglngly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