本发明涉及药品微生物检验技术领域,具体为一种药品微生物检验方法。
背景技术:
随着科学技术的进步,医学水平也逐渐提高,医学总是与生物学分不开,生物上的实验结果为医学提供验证依据,药品微生物的检测作为药品的使用效果评定有重要的依据,现有的药品微生物检验方法直接检测菌株量,没有体现菌株的生活条件,这样检测结果较为片面,为此,我们提出了一种药品微生物检验方法。
技术实现要素:
本发明的目的在于提供一种药品微生物检验方法,以解决上述背景技术中提出的现有的药品微生物检验方法直接检测菌株量,没有体现菌株的生活条件,这样检测结果较为片面的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种药品微生物检验方法,该药品微生物检验方法的具体步骤如下:
S1:选取三组培养皿:培养皿选取直径为200mm、高为15mm的培养皿,三组培养皿规格相同;
S2:消毒处理:获取步骤S1中的三组培养皿,将三组培养皿置于干热灭菌箱中灭菌,加热温度为160-180摄氏度,加热时间为40-50分钟,实验室每隔两星期进行消毒一次,消毒剂每三个月更换两次,在细菌产生抗药性前更换消毒剂;
S3:加入琼脂培养基:琼脂培养基的PH值为7.2,向步骤S2中灭菌后的三组培养皿加入等量的琼脂培养基,加入琼脂培养基后的培养皿置于加热台上加热,使用实验夹具将加热后的培养皿夹取并放置在实验台上,待培养皿中的琼脂培养基冷却至熔融状态,使用消毒后的搅拌棒进行琼脂培养基搅拌,待琼脂培养基搅拌均匀后继续冷却;
S4:供试液稀释:获取待检测的药品微生物试剂,使用吸管吸取1ml的待检测的药品微生物试剂,并将1ml的待检测的药品微生物试剂至于容量瓶中,向容量瓶中加入无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至10ml,将供试液稀释为1:10的供试液;
S5:培养温度控制:将供试液均匀等量的分在三组加入琼脂培养基的培养皿中,将第一组培养皿置于20-25摄氏度恒温箱中培养12小时,将第二组培养皿置于25-30摄氏度恒温箱中培养12小时,将第三组培养皿置于30-35摄氏度恒温箱中培养12小时;
S6:检测结果:将步骤S5中培养后的三组培养皿置于实验台上,对三组培养皿菌落的数量进行计数,对三组培养皿中的菌落大小进行观察,并根据菌落的数量和菌落的大小进行检验评定。
优选的,所述步骤S3中琼脂培养基的加入量为培养皿容积的三分之二。
优选的,所述步骤S3中搅拌棒搅拌琼脂培养基的方式为:使用搅拌棒在培养基中顺时针搅拌20次,然后再逆时针搅拌20次,琼脂的颜色深浅程度分布均匀即可。
优选的,所述步骤S6中评定的方式为:将三组培养皿中菌落的数量分别乘以三再乘以十即为相对应条件下未稀释的供试液中微生物的含量,菌落的大小为该种微生物的适应温度检测标准,菌落大温度较为适当,菌落小则为温度不适应。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:该药品微生物检验方法,采用控制温度变量,其他条件不变,对于微生物的生存条件进行测定,测量结果更加准确,通过将供试液的稀释,使得菌落的特征更加明显,检测结果更加准确,通过对照组的对比使得实验的结果更加具有说服力。
附图说明
图1为本发明结工作流程图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例一
一种药品微生物检验方法,该药品微生物检验方法的具体步骤如下:
S1:选取三组培养皿:培养皿选取直径为200mm、高为15mm的培养皿,三组培养皿规格相同;
S2:消毒处理:获取步骤S1中的三组培养皿,将三组培养皿置于干热灭菌箱中灭菌,加热温度为160摄氏度,加热时间为40分钟,实验室每隔两星期进行消毒一次,消毒剂每三个月更换两次,在细菌产生抗药性前更换消毒剂;
S3:加入琼脂培养基:琼脂培养基的PH值为7.2,向步骤S2中灭菌后的三组培养皿加入等量的琼脂培养基,加入琼脂培养基后的培养皿置于加热台上加热,使用实验夹具将加热后的培养皿夹取并放置在实验台上,待培养皿中的琼脂培养基冷却至熔融状态,使用消毒后的搅拌棒进行琼脂培养基搅拌,使用搅拌棒在培养基中顺时针搅拌20次,然后再逆时针搅拌20次,琼脂的颜色深浅程度分布均匀即可,待琼脂培养基搅拌均匀后继续冷却,琼脂培养基的加入量为培养皿容积的三分之二;
S4:供试液稀释:获取待检测的药品微生物试剂,使用吸管吸取1ml的待检测的药品微生物试剂,并将1ml的待检测的药品微生物试剂至于容量瓶中,向容量瓶中加入无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至10ml,将供试液稀释为1:10的供试液;
S5:培养温度、时间控制:将供试液均匀等量的分在三组加入琼脂培养基的培养皿中,将第一组培养皿置于20摄氏度恒温箱中培养12小时,将第二组培养皿置于25摄氏度恒温箱中培养12小时,将第三组培养皿置于30摄氏度恒温箱中培养12小时;
S6:检测结果:将步骤S5中培养后的三组培养皿置于实验台上,对三组培养皿菌落的数量进行计数,对三组培养皿中的菌落大小进行观察,并根据菌落的数量和菌落的大小进行检验评定,将三组培养皿中菌落的数量分别乘以三再乘以十即为相对应条件下未稀释的供试液中微生物的含量,菌落的大小为该种微生物的适应温度检测标准,菌落大温度较为适当,菌落小则为温度不适应。
实施例二
一种药品微生物检验方法,该药品微生物检验方法的具体步骤如下:
S1:选取三组培养皿:培养皿选取直径为200mm、高为15mm的培养皿,三组培养皿规格相同;
S2:消毒处理:获取步骤S1中的三组培养皿,将三组培养皿置于干热灭菌箱中灭菌,加热温度为170摄氏度,加热时间为45分钟,实验室每隔两星期进行消毒一次,消毒剂每三个月更换两次,在细菌产生抗药性前更换消毒剂;
S3:加入琼脂培养基:琼脂培养基的PH值为7.2,向步骤S2中灭菌后的三组培养皿加入等量的琼脂培养基,加入琼脂培养基后的培养皿置于加热台上加热,使用实验夹具将加热后的培养皿夹取并放置在实验台上,待培养皿中的琼脂培养基冷却至熔融状态,使用消毒后的搅拌棒进行琼脂培养基搅拌,使用搅拌棒在培养基中顺时针搅拌20次,然后再逆时针搅拌20次,琼脂的颜色深浅程度分布均匀即可,待琼脂培养基搅拌均匀后继续冷却,琼脂培养基的加入量为培养皿容积的三分之二;
S4:供试液稀释:获取待检测的药品微生物试剂,使用吸管吸取1ml的待检测的药品微生物试剂,并将1ml的待检测的药品微生物试剂至于容量瓶中,向容量瓶中加入无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至10ml,将供试液稀释为1:10的供试液;
S5:培养温度、时间控制:将供试液均匀等量的分在三组加入琼脂培养基的培养皿中,将第一组培养皿置于22.5摄氏度恒温箱中培养12小时,将第二组培养皿置于27.5摄氏度恒温箱中培养12小时,将第三组培养皿置于32.5摄氏度恒温箱中培养12小时;
S6:检测结果:将步骤S5中培养后的三组培养皿置于实验台上,对三组培养皿菌落的数量进行计数,对三组培养皿中的菌落大小进行观察,并根据菌落的数量和菌落的大小进行检验评定,将三组培养皿中菌落的数量分别乘以三再乘以十即为相对应条件下未稀释的供试液中微生物的含量,菌落的大小为该种微生物的适应温度检测标准,菌落大温度较为适当,菌落小则为温度不适应。
实施例三
一种药品微生物检验方法,该药品微生物检验方法的具体步骤如下:
S1:选取三组培养皿:培养皿选取直径为200mm、高为15mm的培养皿,三组培养皿规格相同;
S2:消毒处理:获取步骤S1中的三组培养皿,将三组培养皿置于干热灭菌箱中灭菌,加热温度为180摄氏度,加热时间为50分钟,实验室每隔两星期进行消毒一次,消毒剂每三个月更换两次,在细菌产生抗药性前更换消毒剂;
S3:加入琼脂培养基:琼脂培养基的PH值为7.2,向步骤S2中灭菌后的三组培养皿加入等量的琼脂培养基,加入琼脂培养基后的培养皿置于加热台上加热,使用实验夹具将加热后的培养皿夹取并放置在实验台上,待培养皿中的琼脂培养基冷却至熔融状态,使用消毒后的搅拌棒进行琼脂培养基搅拌,使用搅拌棒在培养基中顺时针搅拌20次,然后再逆时针搅拌20次,琼脂的颜色深浅程度分布均匀即可,待琼脂培养基搅拌均匀后继续冷却,琼脂培养基的加入量为培养皿容积的三分之二;
S4:供试液稀释:获取待检测的药品微生物试剂,使用吸管吸取1ml的待检测的药品微生物试剂,并将1ml的待检测的药品微生物试剂至于容量瓶中,向容量瓶中加入无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至10ml,将供试液稀释为1:10的供试液;
S5:培养温度、时间控制:将供试液均匀等量的分在三组加入琼脂培养基的培养皿中,将第一组培养皿置于25摄氏度恒温箱中培养12小时,将第二组培养皿置于30摄氏度恒温箱中培养12小时,将第三组培养皿置于35摄氏度恒温箱中培养12小时;
S6:检测结果:将步骤S5中培养后的三组培养皿置于实验台上,对三组培养皿菌落的数量进行计数,对三组培养皿中的菌落大小进行观察,并根据菌落的数量和菌落的大小进行检验评定,将三组培养皿中菌落的数量分别乘以三再乘以十即为相对应条件下未稀释的供试液中微生物的含量,菌落的大小为该种微生物的适应温度检测标准,菌落大温度较为适当,菌落小则为温度不适应。
根据以上三组实施例的实验结果,三个实施例中均为第二组的培养皿中菌落最多,菌落最大,且实施例二的三组培养皿相对另外两个实施例中的三组培养皿产生的菌落最多,菌落最大,因此,得出最佳实现方案为实施例二。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。