一种用于细菌培养的致密培养基及其制备方法与流程

文档序号:12996075阅读:499来源:国知局

本发明涉及细菌培养基及其制备技术领域,具体涉及一种用于细菌培养的致密培养基及其制备方法。



背景技术:

益生菌是一类定植于人体肠道、生殖系统内,能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡,对人体健康有重要作用的活的微生物的总称,广泛应用于食品、保健品和药品生产中。一般来说,益生菌具有具有显著的平衡和改善肠道菌群、预防和治疗腹泻、提高机体免疫力、预防过敏、结合并排除毒素、预防龋齿等功能。研究发现,益生菌在人体肠道内的数量对益生菌发挥保健和治疗功效起到决定性作用。除了益生菌在体内增殖,在加工过程中和贮藏期间保证其存活和保持生物活性等因素外,足量的活菌数是益生菌补充剂产品发挥其有效性的必要前提。

当前提高益生菌活菌总数的研究方向主要集中在发酵工艺的优化和复合菌高密度发酵。向发酵培养基中添加有益物质不但能提高益生菌的活菌数,发酵乳还能兼具有益物质的功能。中国发明专利(申请号为200910038553.5)公开了一种提高益生菌活菌数的方法,是将北虫草提取物加入常规乳酸菌发酵培养基中,北虫草营养丰富,可以为益生菌的生长提供丰富的营养,能显著地提高发酵液中乳酸菌的活菌数,乳酸菌活菌数从1.5×108cfu/ml提高到1.3×109cfu/ml。徐海燕等研究低聚木糖对乳杆菌、双歧杆菌及肠道菌群生长的影响。结果1%的低聚木糖对植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、长双歧杆菌和青春双歧杆菌有明显的增殖作用。

当前益生菌增殖技术取得了一定成果,向发酵培养基中添加有益物质是一种高效、简便的提高益生菌的活菌数的方法。不但能降低发酵生产成本,在某些情况甚至能够缩短发酵周期。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种用于细菌培养的致密培养基。

为实现以上目的,本发明通过以下技术方案予以实现:

一种用于细菌培养的致密培养基,所述致密培养基由以下质量百分数的原料组成:胰蛋白胨1.7-1.9%、牛肉膏0.5-0.7%、酵母浸出粉0.1-0.2%、芦荟多糖1.7-1.9%、硫酸镁0.1-0.2%、谷氨酰胺0.5-0.6%、30%卵黄盐水4.8-5.1%、琼脂1.3-1.5%、硝酸钾0.2-0.3%、磷酸二氢钠0.2-0.3%、胱氨酸1.1-1.3%,余量为去离子水。

优选地,所述致密培养基由以下质量百分数的原料组成:胰蛋白胨1.85%、牛肉膏0.61%、酵母浸出粉0.12%、芦荟多糖1.82%、硫酸镁0.11%、谷氨酰胺0.57%、30%卵黄盐水5.00%、琼脂1.40%、硝酸钾0.21%、磷酸二氢钠0.25%、胱氨酸1.24%,余量为去离子水。

优选地,所述致密培养基用于双歧杆菌的培养。

优选地,所述致密培养基的ph为7.0-7.5。

优选地,所述30%卵黄盐水的制备方法如下:将鸡蛋浸泡在70-80%乙醇中3-4h,在无菌操作下取蛋黄,加入高压灭菌后冷却的生理盐水,配制成30%卵黄盐水。

用于细菌培养的致密培养基的制备方法,步骤如下:

s1:将胰蛋白胨、牛肉膏、酵母浸出粉、芦荟多糖、硫酸镁、谷氨酰胺、琼脂、硝酸钾、磷酸二氢钠、胱氨酸加入到去离子水中,加热煮沸至完全溶解,冷却,校正ph值,121℃高压蒸汽灭菌10-20min,得琼脂混合物;

s2:加热溶化琼脂混合物,冷却,加入30%卵黄盐水,摇匀,即得。

优选地,所述步骤s1中冷却至20-30℃。

优选地,所述步骤s2中冷却至45-55℃。

有益效果:本发明制备的致密培养基中营养物质丰富,能够提高细菌培养过程中菌种的生长和菌落总数,缩短培养周期,为制备微生态制剂提供大量活菌菌体,并且将细菌接种到该致密培养基上,能够有效观察到其运动。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。

实施例1:

一种用于细菌培养的致密培养基,由以下质量百分数的原料组成:胰蛋白胨1.85%、牛肉膏0.61%、酵母浸出粉0.12%、芦荟多糖1.82%、硫酸镁0.11%、谷氨酰胺0.57%、30%卵黄盐水5.00%、琼脂1.40%、硝酸钾0.21%、磷酸二氢钠0.25%、胱氨酸1.24%,余量为去离子水。其中,30%卵黄盐水的制备方法如下:将鸡蛋浸泡在75%乙醇中3.5h,在无菌操作下取蛋黄,加入高压灭菌后冷却的生理盐水,配制成30%卵黄盐水。

用于细菌培养的致密培养基的制备方法,步骤如下:

s1:将胰蛋白胨、牛肉膏、酵母浸出粉、芦荟多糖、硫酸镁、谷氨酰胺、琼脂、硝酸钾、磷酸二氢钠、胱氨酸加入到去离子水中,加热煮沸至完全溶解,冷却至25℃,校正ph值至7.0-7.5,121℃高压蒸汽灭菌15min,得琼脂混合物;

s2:加热溶化琼脂混合物,冷却至50℃,加入30%卵黄盐水,摇匀,即得。

实施例2:

一种用于细菌培养的致密培养基,由以下质量百分数的原料组成:胰蛋白胨1.80%、牛肉膏0.65%、酵母浸出粉0.15%、芦荟多糖1.78%、硫酸镁0.15%、谷氨酰胺0.52%、30%卵黄盐水4.90%、琼脂1.38%、硝酸钾0.23%、磷酸二氢钠0.20%、胱氨酸1.15%,余量为去离子水。其中,30%卵黄盐水的制备方法如下:将鸡蛋浸泡在75%乙醇中4h,在无菌操作下取蛋黄,加入高压灭菌后冷却的生理盐水,配制成30%卵黄盐水。

用于细菌培养的致密培养基的制备方法,步骤如下:

s1:将胰蛋白胨、牛肉膏、酵母浸出粉、芦荟多糖、硫酸镁、谷氨酰胺、琼脂、硝酸钾、磷酸二氢钠、胱氨酸加入到去离子水中,加热煮沸至完全溶解,冷却至30℃,校正ph值至7.0-7.5,121℃高压蒸汽灭菌15min,得琼脂混合物;

s2:加热溶化琼脂混合物,冷却至50℃,加入30%卵黄盐水,摇匀,即得。

制得的致密培养基用于双歧杆菌的培养。

实施例3:

一种用于细菌培养的致密培养基,由以下质量百分数的原料组成:胰蛋白胨1.76%、牛肉膏0.57%、酵母浸出粉0.18%、芦荟多糖1.85%、硫酸镁0.10%、谷氨酰胺0.50%、30%卵黄盐水5.05%、琼脂1.50%、硝酸钾0.25%、磷酸二氢钠0.22%、胱氨酸1.18%,余量为去离子水。其中,30%卵黄盐水的制备方法如下:将鸡蛋浸泡在75%乙醇中3h,在无菌操作下取蛋黄,加入高压灭菌后冷却的生理盐水,配制成30%卵黄盐水。

用于细菌培养的致密培养基的制备方法,步骤如下:

s1:将胰蛋白胨、牛肉膏、酵母浸出粉、芦荟多糖、硫酸镁、谷氨酰胺、琼脂、硝酸钾、磷酸二氢钠、胱氨酸加入到去离子水中,加热煮沸至完全溶解,冷却至25℃,校正ph值至7.0-7.5,121℃高压蒸汽灭菌20min,得琼脂混合物;

s2:加热溶化琼脂混合物,冷却至55℃,加入30%卵黄盐水,摇匀,即得。

制得的致密培养基用于双歧杆菌的培养。

实施例4:

一种用于细菌培养的致密培养基,由以下质量百分数的原料组成:胰蛋白胨1.70%、牛肉膏0.55%、酵母浸出粉0.10%、芦荟多糖1.80%、硫酸镁0.18%、谷氨酰胺0.55%、30%卵黄盐水4.95%、琼脂1.30%、硝酸钾0.20%、磷酸二氢钠0.20%、胱氨酸1.20%,余量为去离子水。其中,30%卵黄盐水的制备方法如下:将鸡蛋浸泡在70%乙醇中4h,在无菌操作下取蛋黄,加入高压灭菌后冷却的生理盐水,配制成30%卵黄盐水。

用于细菌培养的致密培养基的制备方法,步骤如下:

s1:将胰蛋白胨、牛肉膏、酵母浸出粉、芦荟多糖、硫酸镁、谷氨酰胺、琼脂、硝酸钾、磷酸二氢钠、胱氨酸加入到去离子水中,加热煮沸至完全溶解,冷却至30℃,校正ph值至7.0-7.5,121℃高压蒸汽灭菌15min,得琼脂混合物;

s2:加热溶化琼脂混合物,冷却至45℃,加入30%卵黄盐水,摇匀,即得。

实施例5:

一种用于细菌培养的致密培养基,由以下质量百分数的原料组成:胰蛋白胨1.7%、牛肉膏0.7%、酵母浸出粉0.1%、芦荟多糖1.9%、硫酸镁0.1%、谷氨酰胺0.6%、30%卵黄盐水4.8%、琼脂1.5%、硝酸钾0.2%、磷酸二氢钠0.3%、胱氨酸1.1%,余量为去离子水。其中,30%卵黄盐水的制备方法如下:将鸡蛋浸泡在80%乙醇中3h,在无菌操作下取蛋黄,加入高压灭菌后冷却的生理盐水,配制成30%卵黄盐水。

用于细菌培养的致密培养基的制备方法,步骤如下:

s1:将胰蛋白胨、牛肉膏、酵母浸出粉、芦荟多糖、硫酸镁、谷氨酰胺、琼脂、硝酸钾、磷酸二氢钠、胱氨酸加入到去离子水中,加热煮沸至完全溶解,冷却至20℃,校正ph值至7.0-7.5,121℃高压蒸汽灭菌10min,得琼脂混合物;

s2:加热溶化琼脂混合物,冷却至45℃,加入30%卵黄盐水,摇匀,即得。

制得的致密培养基用于双歧杆菌的培养。

实施例6:

一种用于细菌培养的致密培养基,由以下质量百分数的原料组成:胰蛋白胨1.9%、牛肉膏0.5%、酵母浸出粉0.2%、芦荟多糖1.7%、硫酸镁0.2%、谷氨酰胺0.5%、30%卵黄盐水5.1%、琼脂1.3%、硝酸钾0.3%、磷酸二氢钠0.2%、胱氨酸1.3%,余量为去离子水。其中,30%卵黄盐水的制备方法如下:将鸡蛋浸泡在70%乙醇中4h,在无菌操作下取蛋黄,加入高压灭菌后冷却的生理盐水,配制成30%卵黄盐水。

用于细菌培养的致密培养基的制备方法,步骤如下:

s1:将胰蛋白胨、牛肉膏、酵母浸出粉、芦荟多糖、硫酸镁、谷氨酰胺、琼脂、硝酸钾、磷酸二氢钠、胱氨酸加入到去离子水中,加热煮沸至完全溶解,冷却至30℃,校正ph值至7.0-7.5,121℃高压蒸汽灭菌20min,得琼脂混合物;

s2:加热溶化琼脂混合物,冷却至55℃,加入30%卵黄盐水,摇匀,即得。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

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