伊马替尼双氮氧化物、其制备方法和用途与流程

本发明属于药物领域，具体涉及伊马替尼双氮氧化物、其制备方法及其作为药物尤其是作为制备治疗和预防糖尿病肾病药物的用途。
背景技术：
：伊马替尼由诺华公司研发，于2001年5月在美国获批上市用于治疗晚期费城染色体阳性的慢性粒细胞白血病(cml)或α-干扰素治疗失败的慢性期患者。2002年2月，fda通过加速批准途径批准伊马替尼治疗晚期或转移胃肠道间质细胞肿瘤(gist)，同期也很快被欧盟专利药品审评委员会批准。2008年，fda又通过加速批准途径批准其用于有可能根治切除但复发危险增加的gist病人，2011年获得美国和欧盟批准其治疗急性淋巴细胞白血病儿科患者。由于其对cml革命性的治疗效果，可使cml患者的10年生存率达85％～90％，大大延长了患者的生命周期，且相对于干扰素疗法其副作用也大幅降低，因此，伊马替尼很快成为治疗白血病的重磅炸弹药物。在中国，伊马替尼于2002年获批上市，商品名格列卫，用于治疗cml和胃肠道间质瘤。伊马替尼的化学名称为：4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]-n-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]苯基]-苯甲酰胺，具有式(ii)所示结构：伊马替尼在光照条件下易被氧化，现报道的氧化产物有吡啶1-位氮氧化物式(iii)化合物和哌嗪4-位氮氧化物式(iv)化合物，其结构如下所示：迄今为止，未见有关伊马替尼吡啶1-位和嘧啶3-位双氮氧化物的分离、结构确认及其用途研究的相关报道。技术实现要素：本发明目的在于提供一种伊马替尼双氮氧化物或其药学上可接受的盐，具有式(i)所示结构：本发明还涉及式(i)化合物的方法，该方法包括以下步骤：(1)苯甲酰氯1a与二氯亚砜在催化剂作用下加热回流反应得到化合物1b；(2)化合物1c与1b在缚酸剂存在下发生酰化反应得到化合物1d；(3)化合物1d溶于二氯甲烷中，控温-20℃加入间氯过氧苯甲酸，升至室温发生氮氧化反应，柱层析洗脱得到化合物1e；(4)化合物1e在4mol/l的盐酸存在下，加热回流发生水解反应得到化合物1f；(5)化合物1g与二氯亚砜在催化剂作用下加热回流反应得到化合物1h；(6)化合物1f与化合物1h发生酰化反应得到式(i)化合物。本发明优选方案，步骤(1)和(5)所述的催化剂为n,n-二甲基甲酰胺，催化剂和二氯亚砜的体积比为1:100。本发明优选方案，步骤(2)所述的缚酸剂选自吡啶、三乙胺、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、氢氧化钠或氢氧化钾，优选缚酸剂为三乙胺。步骤(3)中，使用间氯过氧苯甲酸作氧化剂，首先参与反应的为吡啶1-位氮氧化反应，其次为嘧啶3-位氮氧化反应，再次为嘧啶1-位氮氧化反应。本发明优选方案，步骤(3)化合物1d与间氯过氧苯甲酸的摩尔比为1：2～3，进一步优选化合物1d与间氯过氧苯甲酸的摩尔比为1：2.4。本发明优选方案，所述的柱层析洗脱用的溶剂为体积比为1:20的甲醇和二氯甲烷的混合溶剂。本发明还涉及伊马替尼双氮氧化物或其药学上可接受的盐用作标准品或对照品的应用。本发明涉及一种药物组合物，所述的组合物包含伊马替尼双氮氧化物式(i)化合物或其药学上可接受的盐，和一种或者多种药学上可接受的载体和/或赋形剂。本发明涉及式(i)化合物或其药学上可接受的盐在制备预防或治疗糖尿病肾病药物中的用途。本发明还涉及式(i)所示化合物药学上可接受的盐，所述的盐包括，但不限于盐酸盐、磷酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、富马酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐或对甲苯磺酸盐；优选甲磺酸盐。附图说明图1为式(i)化合物的h1-nmr图谱。图2为式(i)化合物的ms图谱。图3为药效实验各组对糖尿病肾损伤大鼠体重的影响数据图。具体实施方式下面通过实施例对本发明作进一步说明。应该理解的是，本发明实施例仅仅是用于说明本发明，而不是对本发明的限制，在本发明的构思前提下对本发明的简单替换或改进都属于本发明要求保护的范围。化合物的结构是通过核磁共振(nmr)或(和)质谱(ms)来确定的。nmr位移(δ)以10-6(ppm)的单位给出。nmr的测定是用(bruker-500mhznmr)核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d6)，内标为四甲基硅烷(tms)；ms的测定用agilent6120b(esi)。实施例1苯甲酰氯(1b)的合成向100ml三口瓶中加入苯甲酸1a(5g，0.041mol，sigma-aldrich西格玛奥德里奇上海贸易有限公司)、二氯亚砜(30ml)和催化剂n,n-二甲基甲酰胺(0.3ml)，加热回流反应3小时，降至室温，减压蒸除二氯亚砜，得到淡黄色液体状的苯甲酰氯(1b)5.75g。实施例2n-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]苯基]苯甲酰胺(1d)的合成将1c(7.5g，0.027mol，苏州新凯生物医药技术有限公司)投入250ml三口瓶，加入四氢呋喃(135ml)和三乙胺(7.53ml)，搅拌降至内温0～3℃，滴加1b(5.75g，0.041mol)的四氢呋喃(57ml)溶液，内温控制在5℃以下，滴毕，升温至20～25℃，保温反应3小时，搅拌状态下加入纯化水(415ml)，降至室温，过滤，纯化水洗涤(30ml×2)，75～80℃真空干燥2小时，得到黄色固体状的n-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]苯基]苯甲酰胺(1d)10g，收率97％。实施例3n-[4-甲基-3-[[4-(1-氧-3-吡啶基)-3-氧-2-嘧啶基]氨基]苯基]苯甲酰胺(1e)的合成将1d(10g，0.027mol)投入500ml三口瓶，加入二氯甲烷(350ml)，-20℃条件下加入间氯过氧苯甲酸(11.2g，0.065mol，sigma-aldrich西格玛奥德里奇上海贸易有限公司)，升至室温，反应72小时，过滤，滤液减压浓缩至干，用硅胶柱色谱法纯化，洗脱剂为甲醇：二氯甲烷＝1:20(体积比，v/v)，得到黄色固体状的n-[4-甲基-3-[[4-(1-氧-3-吡啶基)-3-氧-2-嘧啶基]氨基]苯基]苯甲酰胺(1e)5.47g，收率49％。实施例44-甲基-3-[[4-(1-氧-3-吡啶基)-3-氧-2-嘧啶基]氨基]苯胺(1f)的合成将1e(5.47g，0.013mol)投入500ml三口瓶，加入正丁醇(115ml)和4mol/l的盐酸(115ml)，加热回流反应48小时，降至室温，加压浓缩至干，得棕色油状物，将油状物溶于纯化水(130ml)，过滤，滤液用4mol/l的氢氧化钠溶液将ph调至8～9，过滤，纯化水洗涤(30ml×2)，75～80℃真空干燥2小时，用硅胶柱色谱法纯化，洗脱剂为甲醇：二氯甲烷＝1:20(体积比，v/v)，得到黄色固体状的4-甲基-3-[[4-(1-氧-3-吡啶基)-3-氧-2-嘧啶基]氨基]苯胺(1f)1.83g，收率46％。实施例54-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]苯甲酰氯二盐酸盐(1h)的合成将伊马酸1g(5g，0.021mol，安耐吉化学)投入100ml三口瓶，加入二氯亚砜(35ml)和催化剂n,n-二甲基甲酰胺(0.3ml)，加热回流反应22小时，降至室温，抽滤，正己烷洗涤(10ml×2)，45～50℃真空干燥2小时，得白色固体状的4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]苯甲酰氯二盐酸盐(1h)5.1g，收率95％。实施例64-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]-n-[4-甲基-3-[[4-(1-氧-3-吡啶基)-3-氧-2-嘧啶基]氨基]苯基]苯甲酰胺式(i)的合成将1f(1.83g，0.006mol)投入100ml三口瓶，加入纯化水(31ml)，搅拌降至内温0～3℃，分批加入1h(3.9g，0.015mol)，室温搅拌2小时，过滤，滤液加入丙酮(16ml)，加热至45～50℃，滴加氨水，直至浊点出现，冷却至室温，搅拌析晶2小时，抽滤，用纯化水洗涤(10ml×2)，75～80℃真空干燥2小时，得到黄色固体状的4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]-n-[4-甲基-3-[[4-(1-氧-3-吡啶基)-3-氧-2-嘧啶基]氨基]苯基]苯甲酰胺式(i)2.29g，收率73％，hplc：99.2％。1hnmr(dmso-d6，500mhz)：δ2.17(s，3h)，δ2.30(s，3h)，δ2.35(m，8h)，δ3.55(s，2h)，δ7.31(d，1h)，δ7.50(m，4h)，δ7.66(d，1h)，δ8.00(d，2h)，δ8.18(d，1h)，δ8.28(d，1h)，δ8.63(s，1h)，δ8.75(d，1h)，δ8.89(s，1h)，δ9.75(s，1h)，δ10.26(s，1h)。msm/z(esi)：526.2[m+h]。实施例7药效试验(a)实验动物及模型采用单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素致糖尿病肾病大鼠动物模型。选取成年雄性sd大鼠50只，体重约260g，购于北京维通利华实验动物公司，随机分为正常组、模型组和给药组，每组10只。采用单次腹腔注射链脲佐菌素8周，建立实验性糖尿病肾病大鼠，在前4周形成糖尿病(血糖浓度不低于16.7mmol/l，最终达到25mmol/l)，后4周形成糖尿病肾病模型。(b)实验方案糖尿病模型复制成功后次日，给药组大鼠灌胃超纯水溶液制成的式i、式ii和式iii各200mg/kg，模型组和正常组给予等体积的超纯水。观察8周后，考察大鼠体重变化，收集标本，实验结束前一天用代谢笼准确收集24小时尿液，进行24小时尿蛋白检测；大鼠空腹8小时后，摘眼球取血2ml，离心后留取血清，作生化肾功能检查，结果见表1。(c)实验结果表1式(i)、式(ii)和式(iii)化合物对糖尿病肾损伤大鼠肾功能的影响组别血糖(mmol/l)血尿素氮(mmol/l)血肌酐(μmol/l)蛋白尿(g/l)正常组5.14±0.425.32±0.7322.33±1.5210.92±0.91模型组40.78±4.7719.24±2.8150.79±6.11118.63±10.24式(i)给药组5.97±2.136.03±0.5724.61±1.9217.18±2.69式(ii)给药组36.42±1.5815.36±1.0342.57±2.4189.34±1.16式(iii)给药组33.16±2.9412.85±0.9436.15±1.6857.29±4.21从表1可以看出，实验8周后，模型组较正常组血糖、血尿素氮、血肌酐和蛋白尿均明显升高，说明大鼠糖尿病肾功能损伤的形成；式(i)给药组与模型组相比能显著降低血糖、血尿素氮、血肌酐和尿蛋白，且效果优于式(ii)给药组和式(iii)给药组；上述结果表明式(i)化合物能有效改善糖尿病肾病大鼠的肾功能。从图3可以看出，实验8周后，模型组与正常组相比大鼠体重明显下降；式(i)给药组与模型组相比体重明显增加，且高于式(ii)给药组和式(iii)给药组，正常组与式(i)给药组之间没有显著性差异；上述结果表明式(i)化合物可有效减弱糖尿病肾病大鼠的体重下降。当前第1页12