本发明属于海洋生物深加工领域，具体涉及一种分级制备南极磷虾油的方法。
背景技术：
：南极大磷虾(euphausiasuperba)，通常称为南极磷虾，是生活在南大洋的一种重要海洋生物，其资源量约为3.79亿吨。南极磷虾鲜虾含蛋白约为11.9～15.4％，脂质0.5～3.6％，灰分3％，糖类2％，其余为水分。由南极磷虾中提取的脂质称为南极磷虾油，近年来，南极磷虾油因其独特的结构和功能而日益受到关注。常见食用油的主要成分是甘三酯(95％)，而南极磷虾油的组成则较为复杂。研究报道，南极磷虾脂质中的甘三酯仅含为22.1-38.4％，而极性脂质含量高达56.4-72.0％。极性脂质主要为磷脂，甘二酯及甘一酯等。南极磷虾摄食藻类为生，因此油中富含epa(10-20％)以及dha(8-18％)，且与磷脂结合存在。此外，磷虾油还含有丰富的微量成分，例如虾青素，生育酚，维生素a，甾醇等。目前提取技术，多为“一锅端”的粗放提取，但是这种“一锅端”的粗放提取技术仅关注了脂质的提取效率，而所提取磷虾油的组成却受限于磷虾原料，难以保持一致，尤其是虾油中的磷脂及微量成分含量存在较大差异。因此，亟需一种新的更加精细的提取技术，对磷虾脂质进行分级提取，制备不同磷脂含量及微量成分的磷虾油，既可丰富磷虾油的种类，制备不同功能特性的磷虾油，又可以根据需要调配出目标组成比例的磷虾油，恒定虾油终产品品质。技术实现要素：本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。鉴于上述和/或现有分级制备南极磷虾油的方法的技术空白，提出了本发明。因此，本发明目的是提供一种分级制备南极磷虾油的方法。为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种分级制备南极磷虾油的方法，包括，采用丙酮对南极磷虾粉进行第一级提取，获得一级提取南极磷虾油和一级提取南极磷虾粉；采用烷类溶剂对所述一级提取南极磷虾粉进行第二级提取，获得二级提取南极磷虾油和二级提取南极磷虾粉；采用醇类溶剂对所述二级提取南极磷虾粉进行第三级提取，获得三级提取南极磷虾油。作为本发明所述分级制备南极磷虾油的方法的一种优选方案，其中：所述采用丙酮对南极磷虾粉进行第一级提取，其是将南极磷虾粉与丙酮按质量体积比1：1～10混合均匀，搅拌反应，搅拌结束后立即过滤，滤液脱除溶剂后得到一级提取南极磷虾油，滤渣经真空干燥后得到一级提取南极磷虾粉。作为本发明所述分级制备南极磷虾油的方法的一种优选方案，其中：所述丙酮，其温度为-10～10℃。作为本发明所述分级制备南极磷虾油的方法的一种优选方案，其中：所述搅拌反应，其是在-10～10℃、100～1000rpm搅拌5～40min。作为本发明所述分级制备南极磷虾油的方法的一种优选方案，其中：所述采用烷类溶剂对所述一级提取南极磷虾粉进行第二级提取，其是将所述一级提取南极磷虾粉与烷类溶剂混合均匀，在20～40℃、100～1000rpm搅拌5～40min，搅拌结束后立即过滤，滤液脱除溶剂后得到二级提取南极磷虾油，滤渣经真空干燥后得到二级提取南极磷虾粉。作为本发明所述分级制备南极磷虾油的方法的一种优选方案，其中：所述将所述一级提取南极磷虾粉与烷类溶剂混合均匀，其是将所述一级提取南极磷虾粉与烷类溶剂按质量体积比1：1～10混合均匀。作为本发明所述分级制备南极磷虾油的方法的一种优选方案，其中：所述烷类溶剂包括正己烷或异己烷。作为本发明所述分级制备南极磷虾油的方法的一种优选方案，其中：所述采用醇类溶剂对所述二级提取南极磷虾粉进行第三级提取，其是将所述二级提取南极磷虾粉与醇类溶剂混合均匀，在30～50℃、100～1000rpm搅拌5～40min，搅拌结束后立即过滤，滤液脱除溶剂后得到三级提取南极磷虾油。作为本发明所述分级制备南极磷虾油的方法的一种优选方案，其中：所述将所述二级提取南极磷虾粉与醇类溶剂混合均匀，其是将所述二级提取南极磷虾粉与醇类溶剂按质量体积比1：1～10混合均匀。作为本发明所述分级制备南极磷虾油的方法的一种优选方案，其中：所述醇类溶剂包括乙醇或者异丙醇。本发明所具有的有益效果：(1)本发明采用三种不同极性的溶剂对磷虾粉进行三步萃取，不仅对脂质进行精细化的分级，同时也可最大化的提取虾粉中的脂质，并且制得的南极磷虾油具有优秀的抗氧化性。(2)利用本发明所制备的三种虾油，具有独特的组成特性，有利于开发不同功能的虾油产品。(3)利用本发明制得的三种虾油，可根据要求进行不同的调配，有利于恒定磷虾产品组成，满足不同的消费需求。附图说明为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：图1为实施例7中dpph清除自由基实验结果图。具体实施方式为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。实施例1(1)取100g南极磷虾粉，第一级提取：将磷虾粉与丙酮(4℃预冷6h)按照1:2(w/v)混合，在4℃下搅拌15min，搅拌速度为300r/min，搅拌结束后采用布氏漏斗过滤，滤液脱溶、干燥后得一级提取的南极磷虾油，称重后计算该油得率并测定化学组成。经过一级提取后滤出的南极磷虾粉在60℃，-0.1mpa的条件下下干燥脱溶后，称重备用；(2)第二级提取：将经(1)提取后获得的虾粉与正己烷按照1:2(w/v)混合，在30℃下搅拌15min，搅拌速度为300r/min，搅拌结束后采用布氏漏斗过滤，滤液脱溶、干燥后得二级提取的南极磷虾油，称重后计算该油得率并测定化学组成。经过二级提取后滤出的南极磷虾粉在60℃，-0.1mpa的条件下干燥脱溶后，称重备用；(3)第三级提取：将经(2)提取后获得的虾粉与乙醇按照1:3(w/v)混合，在40℃下搅拌15min，搅拌速度为300r/min，搅拌结束后采用布氏漏斗过滤，滤液脱溶、干燥后得三级提取的南极磷虾油，称重后计算该油得率并测定化学组成。实施例1分级制备所得磷虾油的得率、主要组成及各成分占总提取成分的百分比如下表所示。一级磷虾油二级磷虾油三级磷虾油提油率(％虾粉)5.084.809.11磷脂(g/100g虾油)2.3239.0059.52(g100g虾粉)0.121.885.42(％总提取磷脂)1.6225.3473.05虾青素(mg/kg虾油)505.0034.927.48(mg/kg虾粉)25.561.660.68(％总提取虾青素)91.615.952.44生育酚(mg/100g虾油)29.3912.983.65(mg/100g虾粉)1.480.620.33(％总提取生育酚)60.9125.5113.58维生素a(mg/100g虾油)34.3212.332.27(mg/100g虾粉)1.740.590.21(％总提取维生素a)68.5023.238.27甾醇(mg/g虾油)27.9517.729.97(mg/g虾粉)1.420.850.91(％总提取甾醇)44.6526.7328.62实施例2(1)取200g南极磷虾粉，第一级提取：将磷虾粉与丙酮(10℃预冷6h)按照1:3(w/v)混合，在10℃下搅拌10min，搅拌速度为200r/min，搅拌结束后采用布氏漏斗过滤，滤液脱溶、干燥后得一级提取的南极磷虾油，称重后计算该油得率并测定化学组成。经过一级提取后滤出的南极磷虾粉在60℃，-0.1mpa下的条件下干燥脱溶后，称重备用；(2)第二级提取：将经(1)提取后获得的虾粉与异己烷按照1:3(w/v)混合，在30℃下搅拌15min，搅拌速度为300r/min，搅拌结束后采用布氏漏斗过滤，滤液脱溶、干燥后得二级提取的南极磷虾油，称重后计算该油得率并测定化学组成。经过二级提取后滤出的南极磷虾粉在60℃，-0.1mpa下的条件下干燥脱溶后，称重备用；(3)第三级提取：将经(2)提取后获得的虾粉与乙醇按照1:4(w/v)混合，在35℃下搅拌25min，搅拌速度为300r/min，搅拌结束后采用布氏漏斗过滤，滤液脱溶、干燥后得三级提取的南极磷虾油，称重后计算该油得率并测定化学组成。实施例2分级制备所得磷虾油的得率、主要组成及各成分占总提取成分的百分比如下表所示。实施例3(1)取250g南极磷虾粉，第一级提取：将磷虾粉与丙酮(0℃预冷6h)按照1:3(w/v)混合，在0℃下搅拌20min，搅拌速度为100r/min，搅拌结束后采用布氏漏斗过滤，滤液脱溶、干燥后得一级提取的南极磷虾油，称重后计算该油得率并测定化学组成。经过一级提取后滤出的南极磷虾粉在60℃，-0.1mpa下的条件下干燥脱溶后，称重备用；(2)第二级提取：将经(1)提取后获得的虾粉与正己烷按照1:3(w/v)混合，在25℃下搅拌20min，搅拌速度为200r/min，搅拌结束后采用布氏漏斗过滤，滤液脱溶、干燥后得二级提取的南极磷虾油，称重后计算该油得率并测定化学组成。经过二级提取后滤出的南极磷虾粉在60℃，-0.1mpa下的条件下干燥脱溶后，称重备用；(3)第三级提取：将经(2)提取后获得的虾粉与异丙醇按照1:4(w/v)混合，在45℃下搅拌20min，搅拌速度为200r/min，搅拌结束后采用布氏漏斗过滤，滤液脱溶、干燥后得三级提取的南极磷虾油，称重后计算该油得率并测定化学组成。实施例3分级制备所得磷虾油的得率、主要组成及各成分占总提取成分的百分比如下表所示。一级磷虾油二级磷虾油三级磷虾油提油率(％虾粉)5.696.749.77磷脂(g/100g虾油)3.1831.2461.43(g100g虾粉0.182.116.00(％总提取磷脂)2.1825.4072.41虾青素(mg/kg虾油)568.1026.745.13(mg/kg虾粉)32.321.800.50(％总提取虾青素)93.355.201.45生育酚(mg/100g虾油)35.1310.634.92(mg/100g虾粉)2.000.720.48(％总提取生育酚)62.5422.4215.04维生素a(mg/100g虾油)40.1411.361.67(mg/100g虾粉)2.280.770.16实施例4为获取磷脂含量40％的磷虾油产品，对实施例1中的三种磷虾油进行不同比例的调配：一级提取磷虾油34％，三级提取磷虾油66％；或一级提取磷虾油22％，二级提取磷虾油35％，三级提取磷虾油43％。实施例5为获取磷脂含量35％，虾青素含量200ppm的磷虾油产品，对实施例1中的三种磷虾油进行不同比例的调配：一级提取磷虾油38％，二级提取磷虾油14％，三级提取磷虾油48％。实施例6为获取磷脂含量30％，生育酚含量18mg/100g的磷虾油产品，对实施例2中的三种虾油进行不同比例的调配：一级提取磷虾油40％，二级提取磷虾油20％，三级提取磷虾油40％。实施例7采用dpph清除自由基实验，通过将虾油的dpph的自由基清除抑制率与标准品水溶性生育酚(trolox)的自由基清除抑制率比较，以trolox当量抗氧化能力评价三种虾油的体外抗氧化能力。结果证明三种虾油在抗氧化方面存在显著差异。实验方法：取实施例1的虾油各0.5g，溶解于100ml乙酸乙酯中，将溶液2ml和浓度为0.15mmol/l的dpph溶液2ml混合均匀，暗处反应2h，于517nm波长下测定样品吸光度。先根据吸光度计算自由基清除率，然后根据抑制率抑制率的计算方法为：k％＝[1-(a1-a2)/a3]×100％其中，a1：2mldpph溶液+2ml待测品溶液的吸光度a2：2ml待测品溶液+2ml溶剂的吸光度，a3：2mldpph溶液+2ml溶剂的吸光度。同时，以trolox为标准品，绘制不同浓度下的trolox自由基清除率的标准曲线，将虾油的自由基清除率与标准曲线对比，计算虾油的trolox当量抗氧化能力。实验结果如说明书附图图1所示，结果显示，三种虾油均具有强大的抗氧化能力，而尤以三级提取虾油的抗氧化能力最强。由此可见，本发明采用三种不同极性的溶剂对磷虾粉进行三步萃取，不仅对脂质进行精细化的分级，同时也可最大化的提取虾粉中的脂质，并且制得的南极磷虾油具有优秀的抗氧化性；利用本发明所制备的三种虾油，具有独特的组成特性，有利于开发不同功能的虾油产品；利用本发明制得的三种虾油，可根据要求进行不同的调配，有利于恒定磷虾产品组成，满足不同的消费需求。应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。当前第1页12